Мед 54 ру: Дорожная клиническая больница Новосибирск | ДКБ

alexxlabМед

Содержание

Стоимость услуг

Название услугиОтделениеЦена, руб
Динамическое мониторное наблюдение, обеспечение потребности в воде, электролитах, антибактериальная терапия, гастропротекция у плановых больных (1 койко-день)Отделение анестезиологии и реанимации13700
Динамическое мониторное наблюдение, обеспечение потребности в воде, электролитах, антибактериальная терапия, гастропротекция у плановых больных (до 12 часов)Отделение анестезиологии и реанимации7700
Продленная ИВЛ (до 12 часов), восполнение патологических потерь, коррекция объема циркулирующей крови (1 койко-день)Отделение анестезиологии и реанимации14700
Сочетанная органная патология, отягощенный исходный статус, послеоперационный период, высокотравматичных вмешательств, требующих ИВЛ (1 койко-день)Отделение анестезиологии и реанимации16000
Вторичные органные повреждения, осложнения и сопутствующая патология, коррекция белкового обмена и объема циркулирующей крови (1 койко-день)Отделение анестезиологии и реанимации18200
Полиорганная недостаточность, шок с замещением витальных функций (1 койко-день)Отделение анестезиологии и реанимации23800
Установка диализного катетера (без стоимости расходных материалов)Отделение анестезиологии и реанимации1050
Установка эпидурального катетера (без стоимости расходных материалов)Отделение анестезиологии и реанимации1050
Непрерывная гемодиафильтрация (без стоимости расходных материалов)Отделение анестезиологии и реанимации25500
Высокообъемная гемофильтрация (без стоимости расходных материалов)Отделение анестезиологии и реанимации10600
Непрерывный гемодиализ (без стоимости расходных материалов)Отделение анестезиологии и реанимации25200
Непрерывная гемофильтрация (без стоимости расходных материалов)Отделение анестезиологии и реанимации25500
Мембранный плазмаферез (без стоимости расходных материалов)Отделение анестезиологии и реанимации19300
Катетеризация центральной вены (с использованием одноразового набора) (без стоимости расходных материалов)Отделение анестезиологии и реанимации1100
Комплекс услуг по оказанию продленного эпидурального обезболивания (без стоимости расходных материалов)Отделение анестезиологии и реанимации1050
Аппаратный плазмаферез (без стоимости расходных материалов)Отделение анестезиологии и реанимации2550
Обменный плазмаферез (без стоимости расходных материалов)		Отделение анестезиологии и реанимации4700
Наблюдение реаниматолога (30 минут)Отделение анестезиологии и реанимации580
Анестезиологическое пособие (общая анестезия) первый часОтделение анестезиологии и реанимации6000
Анестезиологическое пособие (медикаментозная седация) один часОтделение анестезиологии и реанимации5200
Анестезиологическое пособие (общая анестезия) второй и последующие часыОтделение анестезиологии и реанимации5000
Осмотр (консультация) врача-анестезиологаОтделение анестезиологии и реанимации580
«Анестезиологическое обеспечение компьютернй томографии (МРТ, КТ)Отделение анестезиологии и реанимации3900
Комплекс услуг по оказанию медицинской помощи в пути следования при медицинской эвакуации врачами-специалистами (реанимационная бригада) (за 1 час)Отделение анестезиологии и реанимации20800
Ингаляция терапевтической дозы медицинского ксенона (Ксенонотерапия) -1 сеанс (без учета стоимости медицинского ксенона)Отделение анестезиологии и реанимации2500
Ежедневный осмотр врачом-терапевтом с наблюдением и уходом среднего и младшего медицинского персонала в отделении стационараТерапевтическое отделение2600
Ежедневный осмотр врачом-терапевтом с наблюдением и уходом среднего и младшего медицинского персонала в отделении стационара (при тяжелом течении основного заболевания или с сопутствующей патологией)Терапевтическое отделение3350
Сопровождение медицинской сестрой пациента (1 час) (в том числе НДС)Терапевтическое отделение830
Ежедневный осмотр врачом-терапевтом с наблюдением и уходом среднего и младшего медицинского персонала в отделении стационара (при воспалительных заболеваниях, сочетанной патологии)Терапевтическое отделение
3650
Ежедневный осмотр врачом-пульмонологом с наблюдением и уходом среднего и младшего медицинского персонала в отделении стационараТерапевтическое отделение3100

Сайт первой республиканской больницы УР, Ижевск

Уважаемые жители Удмуртской Республики! С 1 марта 2021 года на базе БУЗ УР «1 РКБ МЗ УР» начинает работу Центр профессиональной патологии. Подробная информация по тел.: 46-23-95

 

Прием посетителей:

четверг с 14-00 час. до 16-00 час.

по предварительной записи по телефону

(3412) 46-32-70

Адрес: 426039, г.Ижевск, ул.Воткинское шоссе, 57 

Эл.адрес: Этот e-mail адрес защищен от спам-ботов, для его просмотра у Вас должен быть включен Javascript

Отдел документац. обеспечения: (3412) 45-46-29, 46-86-36 (факс)

Справочное бюро (стационар): (3412) 46-57-93

Приемное отделение: (3412) 46-54-82 

Диспетчер по ДТП: (3412) 46-56-82

Регистратура (гинекологи): (3412) 46-58-72

Регистратура (медико-генетич. консульт.): (3412) 46-87-71

Регистратура (поликлиника): (3412) 46-54-83, 46-55-74 

 

Поликлиника: понедельник-пятница с 7-00 до 16-18 час.

прием врачей: с 8-00 до 15-06 час. (по графику работы)

Стационар: круглосуточно

прием экстренных пациентов — круглосуточно. 

 

  • (3412) 20-47-00, 20-48-00, 20-55-77 — цены, порядок оказания платных услуг 
  • (3412) 20-47-00, 20-48-00, 20-55-77 — запись на консультации врачей 
  • (3412) 20-47-00, 20-48-00, 20-55-77 — запись на обследования (КТ, МРТ, УЗДГ сосудов, электромиография, дуплексное сканирование сосудов) 
     
  • (3412) 44-54-70 — кабинет ДМС 
  • (3412) 46-23-95 — вопросы проведения медицинских осмотров 

Эл.адрес: Этот e-mail адрес защищен от спам-ботов, для его просмотра у Вас должен быть включен Javascript

Реквизиты БУЗ УР «1 РКБ МЗ УР»: скачать 

  

Сведения об учредителе: Министерство здравоохранения Удмуртской Республики,

Адрес: 426008, г.Ижевск, пер.Интернациональный, д.15.

Телефон приемной: (3412) 22-00-66 (доб.202)

Управление лечебно-профилактической помощи населению: (3412) 22-00-66 (доб.236)

Управление медицинской помощи детям и родовспоможения: (3412) 22-00-66 (доб.248)

Отдел по работе с обращениями граждан: (3412) 22-00-66 (доб.241) 

Эл.адрес: Этот e-mail адрес защищен от спам-ботов, для его просмотра у Вас должен быть включен Javascript  

 

Результаты проведения независимой оценки качества

 

УВАЖАЕМЫЕ ПАЦИЕНТЫ! 

Интересующие Вас вопросы по эндопротезированию суставов и артроскопическим операциям на суставах можно задать главному специалисту МЗ УР по травматологии и ортопедии

Ежову Евгению Сергеевичу

по телефону 8-912-459-63-26 с 13-00 до 18-00 час. с понедельника по пятницу. 

Телефон «горячей линии» по вопросам формирования здорового образа жизни и «он-лайн кабинета врача» в БУЗ УР «1 РКБ МЗ УР»

Номер телефона

(3412) 45-11-75

Время приема звонков

с 9-00 до 12-00 часов

Ответственный за прием звонков и консультирование

Смирнова Галина Иннокентьевна

Электронный адрес «он-лайн кабинета врача»

Этот e-mail адрес защищен от спам-ботов, для его просмотра у Вас должен быть включен Javascript

Ответственный за прием вопросов и ответы в «он-лайн кабинете врача»

Смирнова Галина Иннокентьевна

 

Медицинский центр, платная клиника в Новосибирске — УЗИ, консультация врачей

Приветствуем Вас на сайте медицинского центра «Эдельвейс».

Приглашаем Вас посетить медицинский центр. Широкий спектр узких специалистов и всеобъемлющие диагностические возможности помогут Вам сохранить здоровье, продлить долголетие, избавиться от различных заболеваний. Удобное расположение, гибкие графики приемов специалистов и профессиональный подход к каждому пациенту обеспечат Вам комфортное посещение медицинского центра «Эдельвейс». Наша задача — сделать поход к врачу приятным, безопасным, быстрым и результативным! Чтобы записаться на прием или уточнить цены на услуги, просто позвоните нам.

На вопрос «Какое самое большое счастье?» 99,9% людей отвечает, что здоровье. А чтобы иметь крепкое здоровье, надо выбирать хороших врачей. В Новосибирске услуги по лечению, диагностике и профилактике болезней предоставляет медицинский центр «Эдельвейс». Именно здесь работают опытные врачи высшей категории. В клинике пациенты видят доброе отношение медицинских работников, лечатся в комфортных условиях. Благодаря положительным отзывам, сюда также приходят родные и близкие им люди.

Лечебный центр: что это такое

В многопрофильном медицинском центре ведётся амбулаторный приём. Это позволяет проводить проходить диагностику и лечение в одном месте. Не нужно ездить в разные концы города к узким специалистам, тратить на дорогу деньги и время.

«Эдельвейс» предоставляет услуги специалистов по направлениям:

  • Акушерство и гинекология.
  • Урология.
  • Онкология.
  • Хирургия.
  • Неврология.
  • Офтальмологии.
  • Психиатрия.
  • Кардиология.
  • Эндокринология.
  • Дерматовенерология.
  • Гастроэнтерология.
  • Терапия.
  • Организация здравоохранения и общественного здоровья.
  • Сестринское дело.
  • Оториноларингология (за исключением кохлеарной имплантации).
  • Психиатрия-наркология.
  • Сердечно-сосудистая хирургия.
  • Ультразвуковая диагностика.
  • Медицинское освидетельствование на наличие медицински противопоказаний к владению оружием.
  • Экспертиза качества медицинской помощи.
  • Экспертиза профессиональной пригодности.
  • Экспертиза временной нетрудоспособности.

Пациенты проходят такие исследования:

  • Спермограмму.
  • УЗИ.
  • ЭКГ.
  • Тонометрию.
  • Осмотр кольпоскопом.
  • Забор био-материалов (кровь, мочу и т.д.) с последующим иследованием в специализированных лабораториях, в том числе CITO.

Врачи, которые работают в центре, имеют опыт работы не меньше 10 лет. Среди них есть кандидаты наук.

Дополнительные услуги

Врач, при показаниях, выдает листок нетрудоспособности.

Врач оформляет медицинские документы для проведения плановых операций, санаторно-курортные карты.

Корпоративные клиенты каждый год проходят обязательные медицинские осмотры.

В Клинике есть услуга: медицинская сестра делает забор анализов, внутримышечные и внутривенные инъекции, электрокардиограмму.

Как попасть к узкопрофильному специалисту

Прием врача ведется после записи. Вам нужно позвонить либо заказать звонок, посетив официальный сайт и воспользовавшись формой. Для этого укажите данные: ФИО и номер телефона. Можно выбрать специалиста, указав к кому хотите попасть: мужчине или женщине.

Нашу клинику посещает много пациентов, поэтому записывайтесь на платный прием заранее. Это поможет потратить минимум времени на посещение специалиста и избежать очередей.

Преимущества многопрофильной лечебницы

В нашей клинике открыты более 10 направлений медицинского обслуживания. Она в полной мере оснащена современным инновационным оборудованием: диагностическим и лечебным. Кабинеты врачей – комфортабельные, с удобной новой мебелью.

Прием ведется по удобному графику с 8-00 до 20-00 часов в рабочие дни, а в субботу – с 9-00 до 15-00 часов. Очереди у нас отсутствуют. Сервис – один из лучших в Новосибирске.

Полученная информация не выходит за пределы частного центра. О болезнях знает только пациент и лечащий врач.

Адрес:

Новосибирск , Кропоткина, № 271, оф.510

Все отделения расположены в одном месте. Это сделано для удобства пациентов.

У нас регулярно проводятся акции, скидки на диагностику, лечение. Пациенты пользуются услугами врачей высокой квалификации по выгодным ценам.

Медцентр «Эдельвейс» и его главный врач желает всем пациентам здоровья. А персонал сделает все, чтобы это пожелание стало реальностью.

Для этого нужно лишь набрать номер телефона: 8-983-320-55-77

9 лечебно-диагностический центр Минобороны России

 

Контактная информация ФГБУ «9 ЛДЦ» Минобороны России

Лечебно-диагностический центр

Адрес: г. Москва, ул. Комсомольский проспект, д. 13а

Адрес электронной почты: [email protected]

Телефонные номера 9 ЛДЦ 

Диспетчерская неотложной помощи и помощи на дому

  • 8 (495) 609-53-10
  • 8 (495) 609-53-11
  • 8 (495) 609-53-12

Регистратура ДМС

  • 8 (495) 609-54-20
  • 8 (495) 609-54-21
  • 8 (495) 609-54-22

Регистратура прикреплённого контингента

  • 8 (495) 609-54-10
  • 8 (495) 609-54-11
  • 8 (495) 609-54-12

Часы работы:

Пн-Пт: с 8.00 до 20.00

Сб и Вс: Выходной

​

Адреса всех поликлиник ФГБУ «9 ЛДЦ» Минобороны России

Поликлиника «Б. Пироговская»

Адрес: г.Москва, ул.Б.Пироговская, д.15/18, стр.1 (м. Фрунзенская, Спортивная)

Адрес электронной почты: [email protected]

Телефонные номера поликлиники

Регистратура. Воспользуйтесь голосовым меню для записи на исследования или прием.

ФАКС

Часы работы:

Пн-Пт: с 8.00 до 20.00

Сб и Вс: Выходной

​

 

Поликлиника

Адрес: г. Москва, ул. Комсомольский проспект, д.22

Адрес электронной почты: [email protected]

Тел: 8(499) 790-90-70

Часы работы:

Пн-Пт: с 8.00 до 20.00

Сб-Вс: выходной

​ 

 

 

Детская поликлиника

Адрес: г. Москва, ул. Комсомольский проспект, д.22

Адрес электронной почты: [email protected]

Тел: 8(499) 790-90-60

Часы работы:

Пн-Пт: с 8.00 до 20.00

Сб и Вс: выходной

​

 

Стоматологическая поликлиника

Адрес: г. Москва, ул. Большая Пироговская, д.15/18, к.3

Адрес электронной почты: [email protected]

Поликлиника: 8-499-790-90-94

Стоматологическая поликлиника: 8-499-790-91-00

Хирургический стационар: 8-499-790-91-03

Часы работы:

Пн-Пт: с 8.00 до 20.00

Сб и Вс: выходной

​

 

Консультационно-диагностическая поликлиника

Адрес: г. Москва, ул. Большая Филёвская, д.28, 30, к.1

Адрес электронной почты: [email protected]

Тел: 8 (499) 144-32-76

         8 (499) 144-46-59 — Заместитель начальника поликлиники

Часы работы:

Пн-Пт: с 8.00 до 14.00

Сб-Вс: выходной

 

Медицинский центр «Сердолик» в Новосибирске

Уважаемые гости сайта!
Информация, размещенная на сайте, не является врачебной рекомендацией. Ко всем применяемым методикам имеются противопоказания. Обращайтесь к специалисту за консультацией.

Медицинский центр «Сердолик» более 20 лет оказывает медицинские услуги в области педиатрии, терапии, гинекологии и репродуктивного здоровья, неврологии и восстановительной медицины, делая ставку не на громкие имена медицинских светил, а на проверенный многолетний опыт специалистов с огромным опытом «выхоженной» работы в поликлиниках, консультациях, больницах.
Сегодня «Сердолик» – многопрофильное лечебное учреждение, имеющее в своем штате более 40 высококвалифицированных специалистов, обслуживающее, в том числе и корпоративных заказчиков и сотрудничающее со многими страховыми компаниями по программам ДМС, «АнтиКлещ», «АнтиГрипп».
Наша клиника имеет все необходимые разрешительные документы и Лицензии на осуществление медицинской деятельности, поэтому платежные документы можно предъявлять работодателю или негосударственной страховой компании для получения возмещения или материальной помощи, а также для получения налогового вычета на лечение (для граждан, являющихся налоговым резидентом, получающим доход, облагаемый по ставке 13%).
Лицензия № ЛО-54-01-005976 от 22 июля 2020 г.

Обращаем Ваше внимание, что данный интернет-сайт носит исключительно информационный характер и ни при каких условиях не является публичной офертой, определяемой положениями Гражданского кодекса Российской Федерации. Для получения подробной информации о предоставляемых услугах и их стоимости, пожалуйста, обращайтесь по контактным телефонам.

Текстовые материалы, размещенные на данном сайте, защищены законом об авторских и смежных правах и могут быть использованы третьими лицами в сети Интернет полностью или частично только при указании активной гиперссылки на первоисточник –  mcserdolik.ru

 

Иногородним пациентам — Кировская областная клиническая больница

   Гражданам РФ, не зарегистрированным в Кировской области  и получившим медицинский полис ОМС за пределами Кировской области, помощь в Кировской областной клинической больнице может быть оказана БЕСПЛАТНО при наличии паспорта гражданина РФ и действующего полиса ОМС в соответствии с частью 6 статьи 21 Федерального закона от 21 ноября 2011 г. N 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации»Приказом Министерства здравоохранения РФ от 21 декабря 2012 г. N 1342н «Об утверждении Порядка выбора гражданином медицинской организации (за исключением случаев оказания скорой медицинской помощи) за пределами территории субъекта Российской Федерации, в котором проживает гражданин, при оказании ему медицинской помощи в рамках программы государственных гарантий бесплатного оказания медицинской помощи».

   Кировская областная клиническая больница является крупнейшим многопрофильным лечебным учреждением в регионе и одной из старейших и больниц в России, отметила в 2017 году 215 — летний юбилей.  Ежегодно на 881 койках получают лечение более 23 тысяч пациентов, в 18 операционных выполняется более 18 тысяч операций, из них около 3000 высокотехнологичных.

  В больнице 32 клинических отделения. В офтальмологическом, неврологическом отделениях, отделениях челюстно-лицевой хирургии развернуты 16 коек дневного стационара. В хирургических отделениях широко используются малоинвазиные методы лечения. В урологии, гинекологии и общей хирургии эндоскопические операции составляют более 70%.   Кировская областная клиническая больница оказывает высокотехнологичную медицинскую помощь по специальностям: нейрохирургия, сердечно- сосудистая хирургия , офтальмология, отоларингология, ревматология, хирургия и челюстно-лицевая хирургия успешно осваивая выделенные квоты.

   Ежегодно на 881 койках получают лечение более 23 тысяч пациентов, в 18 операционных выполняется более 18 тысяч операций, из них около 3000 высокотехнологичных.

 Кировская областная больница имеет большой опыт лечения пациентов из других регионов Российской Федерации и других стран, что позволяет нам проводить необходимый  для  каждого пациента объем  консультаций и лечения в максимально короткие сроки, чтобы сократить время пребывания пациентов в Кирове.

  Подробную информацию Вы сможете получить по телефонам 89229376508, 89229684275, 89229332210.  Мы будем рады Вам помочь! 

Ломоносовская межрайонная больница им. И.Н.Юдченко

 Дорогие друзья!

Мы рады приветствовать Вас на официальном сайте Государственного бюджетного учреждения здравоохранения Ленинградской области «Ломоносовская межрайонная больница им. И.Н.Юдченко».
Наша больница оказывает высококвалифицированную медицинскую помощь уже более 140 лет.
В составе ГБУЗ ЛО «Ломоносовская МБ» 6 стационарных круглосуточных отделений, отделение скорой медицинской помощи диагностические подразделения, клинико-диагностическая лаборатория, стоматологическая поликлиника, больница сестринского ухода, 2 участковые больницы различного профиля, консультативная поликлиника, развитая сеть первичной медико-санитарной и специализированной медицинской помощи, обеспеченную высококвалифицированными кадрами.
В больнице работает коллектив со сложившимися традициями из 850 человек, из них более 160 врачей, 330 специалистов из числа среднего медицинского персонала.
На нашем сайте можно получить информацию об истории больницы, ее структуре, профиле работы, сотрудниках учреждения, оказываемых платных медицинских услугах и многом другом. Искренне надеемся, что наш сайт станет вашим надежным помощником!
Ждем от вас вопросов по организации работы нашей больницы. Вы также можете присылать свои замечания и предложения, которые, на ваш взгляд, будут способствовать улучшению лечебного процесса.

 

 

Наши телефоны: 

 

Консультативная поликлиника: (г.Ломоносов, ул.Александровская, д. 30 литА)

Регистратура поликлиники: 423-07-18, колл-центр: 339-60-77.
Касса платных услуг: 423-09-70.

Детское поликлиническое отделение — 8-991-02-72-953 (г. Ломоносов, Иликовский пр., д. 1/3 лит.А)

Стоматологическая поликлиника  — 8-953-372-84-14, колл-центр 339-60-77 (г.Ломоносов, ул.Еленинская, д.13 лит И)


Больница: (г.Ломоносов, ул.Еленинская, д. 13 / ул.Михайловская, д. 2)

Стол справок: +7 (812) 679-29-54, +7 (991) 027-29-69.
Регистратура стоматологической поликлиники: 8-953-372-84-14, колл-центр: 339-60-77.
Касса платных услуг больницы: 423-04-00.

Приёмное отделение — (812) 423-07-69

Гинекологическое отделение — номер 8-953-372-42-71
ФГДС 8-991-032-40-94

УЗИ 8-991-032-40-91


Горячая линия для обращения граждан: понедельник – пятница с 9.00 – 17.00 по номеру: 423-00-12 , 89533724388 (круглосуточно).

 

Для информации: 
 

Скорая помощь: 423-06-71, на территории Ломоносовского района : 03 

Телефон регистратуры консультативной поликлиники на ул. Александровской д. 30 : +7 (812) 423-07-18 

Родильное отделение — номер мобильный 8-953-372-44-57 

ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНЫЙ КАБИНЕТ: кабинет врача-фтизиатра взрослого — (812) 423-07-69, добавочный 2146 — г.Ломоносов, ул.Еленинская, д.13

 

 

TOP 54 Крупнейшие покупатели медового набора в Испании

  • Натуральный мед
  • Хлеб без добавления меда, яиц, сыра или фруктов, в сухом виде или без него

  • Angel Lopez Soto S.l.

    Хлеб, не содержащий добавок меда, яиц, сыра или фруктов и содержащий в сухом состоянии не более ?? сахаров и не более ?? жира

  • Дино Тео Атлантис M C S.l.

    Хлеб, не содержащий добавок меда, яиц, сыра или фруктов, в сухом виде или без него

  • Entrepot Naval S.л.

    Хлеб, не содержащий добавок меда, яиц, сыра или фруктов, в сухом виде или без него

  • Cash Carry Food Broker S.l.

    Хлеб, не содержащий добавок меда, яиц, сыра или фруктов и содержащий в сухом состоянии не более ?? сахаров и не более ?? жира

  • Comercial Cbg S.a.

    Хлеб, не содержащий добавок меда, яиц, сыра или фруктов, в сухом виде или без него

  • Нутрекспа С.а.

    Хлеб, не содержащий добавок меда, яиц, сыра или фруктов, в сухом виде или без него

  • Cash Barea S.a.

    Хлеб, не содержащий добавок меда, яиц, сыра или фруктов и содержащий в сухом состоянии не более ?? сахаров и не более ?? жира

  • Manufacturas Ceimar S.l.

    Хлеб, не содержащий добавок меда, яиц, сыра или фруктов, в сухом виде или без него

  • Nordfrost Canarias S.а.

    Хлеб, не содержащий добавок меда, яиц, сыра или фруктов и содержащий в сухом состоянии не более ?? сахаров и не более ?? жира

  • Clesa S.a.

    Хлеб, не содержащий добавок меда, яиц, сыра или фруктов, в сухом виде или без него

  • Productora Alimenticia General Espa 袿 la

    Хлеб, не содержащий добавок меда, яиц, сыра или фруктов, и содержащий по массе в сухом состоянии не более ?? сахаров и не более ?? жира

  • Век Фудс С.л.

    Хлеб, не содержащий добавок меда, яиц, сыра или фруктов и содержащий в сухом состоянии не более ?? сахаров и не более ?? жира

  • Alcruz Canarias S.l.

    Хлеб, не содержащий добавок меда, яиц, сыра или фруктов, в сухом виде или без него

  • Distribuciones Atecli S.l.

    Хлеб, не содержащий добавок меда, яиц, сыра или фруктов, в сухом виде или без него

  • Industrias Racionero S.а.

    Хлеб, не содержащий добавок меда, яиц, сыра или фруктов, в сухом виде или без него

  • Brioche Pasquier Recondo S.l.

    Хлеб, не содержащий добавок меда, яиц, сыра или фруктов и содержащий в сухом состоянии не более ?? сахаров и не более ?? жира

  • Avicu S.a.

    Хлеб, не содержащий добавок меда, яиц, сыра или фруктов и содержащий в сухом состоянии не более ?? сахаров и не более ?? жира

  • Гарсия Де Поу С.а.

    Очаровательное мыло: овсяное мыло с медом (30 г) (в картонной коробке) ([email protected] / ctn

  • Aliminter S.a.

    Мед натуральный

  • Primo Mendoza S.l.

    Мед натуральный индийский a.p.i

  • Angel Camacho Alimentacion S.l.

    Мед натуральный

  • Антонио Надаль S.a.

    Мед натуральный

  • Sanchis Mira S.a.

    Мед натуральный

  • Транснатур С.а.

    Мед натуральный — 72 tambos de miel de abeja hscode: 040

  • Ofistrade S.a.

    Мед натуральный

  • Juver Alimentacion

    Мед натуральный

  • Altadis S.a.

    Мед натуральный

    • Фенотипический и генетический анализ гигиенического признака, чувствительного к варроа, в колониях российской медоносной пчелы (Hymenoptera: Apidae)

    Abstract

    Varroa destructor продолжает угрожать колониям европейских медоносных пчел.Общая гигиена и более конкретная гигиена Varroa Sensitive Hygiene (VSH) обеспечивает устойчивость к клещу Varroa в ряде хозяйств. В этом исследовании 32 российских (RHB) и 14 итальянских семей медоносных пчел были оценены по признаку VSH с помощью двух различных анализов. Во-первых, колонии оценивали с помощью стандартного поведенческого анализа VSH изменения зараженности сильно зараженного донорского гребня после однонедельной экспозиции. Во-вторых, те же самые колонии оценивались с помощью «анализа фактического удаления расплода», который измерял удаление расплода в секции, созданной внутри донорских сот, в качестве потенциальной альтернативной меры гигиены по отношению к зараженному Varroa- расплоду.Затем все колонии анализировали на предмет недавно обнаруженного локуса количественного признака VSH (QTL), чтобы определить, были ли генетические механизмы схожими в разных популяциях. Основываясь на двух анализах, колонии RHB были стабильно более гигиеничными по отношению к зараженному Varroa расплоду, чем колонии итальянских медоносных пчел. Фактическое количество клеток расплода, удаленных в определенной секции, отрицательно коррелировало с заражением колоний Varroa (r 2 = 0,25). Только два из девяти фенотипических параметров (процент удаленных выводков и основательница воспроизводства Varroa ) показали значительную связь с распределением генотипов.Однако аллель, связанный с каждым параметром, был противоположен аллелю, определяемому картированием VSH. В этом исследовании колонии RHB показали высокий уровень гигиенического поведения по отношению к зараженному расплоду Varroa — . Генетические механизмы аналогичны таковым у запаса VSH, хотя противоположный аллель ассоциируется в RHB, что указывает на стабильное событие рекомбинации до выбора исходного материала VSH. Измерение удаления расплода — простой и надежный альтернативный метод измерения гигиенического поведения по отношению к клещам Varroa , по крайней мере, в поголовье RHB.

    Образец цитирования: Кирран М.Дж., де Гусман Л.И., Холлоуэй Б., Фрейк А.М., Риндерер Т.Е., Уилан П.М. (2015) Фенотипический и генетический анализ чувствительного гигиенического признака Varroa в колониях российской медоносной пчелы (Hymenoptera: Apidae). PLoS ONE 10 (4): e0116672. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0116672

    Академический редактор: Николас Чалин, Университет Сан-Паулу, БРАЗИЛИЯ

    Поступила: 16 июля 2014 г .; Одобрена: 11 декабря 2014 г .; Опубликовано: 24 апреля 2015 г.

    Это статья в открытом доступе, свободная от всех авторских прав, и ее можно свободно воспроизводить, распространять, передавать, модифицировать, надстраивать или иным образом использовать в любых законных целях.Работа сделана доступной по лицензии Creative Commons CC0, выделенная в общественное достояние

    Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в документе и его файлах с вспомогательной информацией.

    Финансирование: MJK финансируется Ирландским исследовательским советом, программой стипендий правительства Ирландии для аспирантов (www.research.ie). Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

    Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что конкурирующих интересов не существует.

    Введение

    Гигиеническое поведение медоносных пчел было впервые изучено Ротенбулером [1] в отношении расплода American Foulbrood (AFB). Гигиена включает три компонента, а именно: обнаружение, вскрытие и удаление больного или мертвого расплода из улья [2]. В дополнение к AFB, это средство защиты от ряда вредителей в ульях, включая восковую моль [3] и мелких жуков ульев [4].

    Инвазивный клещ Varroa destructor Андерсон и Труман (Mesostigmata: Varroidae) по-прежнему считается величайшей угрозой для медоносных пчел во всем мире [5].В естественном хозяине клеща, Apis cerana , Varroa , размножаются только в трутневом выводке, обеспечивая сохранение популяций на уровнях, не причиняющих значительного вреда (Rath, 1999). Кроме того, гигиеническое удаление зараженного Varroa расплода способствует устойчивости этой пчелы [6, 7]. Гигиеническое поведение широко изучено в документе A . mellifera , и было обнаружено, что это один из ряда признаков, способных привить устойчивость к клещу Varroa у его пораженного хозяина [2, 8].Гигиеническое поведение является наследуемой чертой [9, 10], а специфическая гигиена Varroa является основой устойчивости в запасе Varroa Sensitive Hygienic (VSH) из лаборатории USDA в Батон-Руж, штат Луизиана [11]. Общее гигиеническое поведение также придает некоторую устойчивость к клещу Varroa из линии гигиены Миннесоты [11, 12] и может способствовать устойчивости колоний Varroa , выживших во Франции [13].

    Большая часть клещей Varroa в колониях VSH проникает в клетки и либо умирает, либо не дает потомства, либо дает только мужское или только незрелое потомство [10].В 2006 году Ибрагим и Спивак [14] обнаружили, что отсутствие размножения клещей связано с гигиеническим поведением, и был придуман термин Varroa Sensitive Hygiene (VSH) [15]. Эти пчелы предпочтительно удаляют зараженных клещами куколок через 3-5 дней после укупорки [15]. Размножение клеща Varroa в значительной степени синхронизировано с репродуктивной программой пчелы-хозяина [16]. Клещи-основательницы должны производить по крайней мере зрелого мужского и женского клещей в натальной клетке, чтобы произвести жизнеспособное потомство [17].Клещи, удаленные из клеток в результате гигиенического поведения, могут быть вынуждены повторно проникнуть в новые клетки, чтобы завершить воспроизводство [15]. Ранее было показано, что нарушение синхронизации между репродуктивным циклом повторно вторгающегося клеща и развитием его хозяина отрицательно влияет на размножение клеща [18, 19]. Таким образом, поведение запаса VSH при удалении значительно снижает популяцию клещей Varroa в этих колониях.

    Еще одно поголовье, устойчивое к Varroa , которое поддерживается Министерством сельского хозяйства США, — это российская медоносная пчела (RHB) [20].Колонии RHB поддерживают стабильно более низкие уровни Varroa по сравнению с невыбранными стадами [21–23]. Механизма подавляющей резистентности выявлено не было [23]. Однако увеличенный форетический период Varroa у взрослых пчел приводит к тому, что клещи становятся более восприимчивыми к уходу пчелы [24]. Используя анализ замороженного расплода (FKB), [25] показал, что колонии RHB последовательно удаляли мертвый выводок на уровне, достаточно высоком, чтобы считаться гигиеничным (> 95% выводка удаляется в течение 48 часов за два анализа).Было обнаружено, что отсутствие репродукции основательниц Varroa также является фактором, способствующим устойчивости запасов RHB [26], [23]. Частично это происходит из-за сот, построенных RHB, но также может быть вызвано, частично, из-за того, что RHB стимулирует гигиеническое поведение взрослых пчел [23].

    Хотя первоначально считалось, что это контролируется простой менделевской генетикой [1], более поздние исследования определили, что гигиеническое поведение является более количественным признаком [27, 28], и фактически до семи локусов могут быть ответственны за его экспрессию [29, 30]. ].Количественное картирование локусов признаков (QTL) генотипов индивидуального запаса VSH, которое вскрывает и удаляет зараженные куколки, идентифицировало гены-кандидаты, связанные со зрением, обонянием, памятью и рецепцией дофамина [31]. Те пчелы, которые были гомозиготными по аллелям, идентифицированным как ассоциированные с этим признаком, с большей вероятностью проявляли такое поведение [31]. Дифференциальная повышающая и понижающая регуляция генов, связанных с нейронными проводниками, обонянием и передачей визуальных сигналов, была показана у VSH и не-VSH [32].Кроме того, геномные профили VSH и африканизированных пчел оказались схожими, что указывает на перекрытие генетических механизмов в разных стадах [32]. Похоже, что запах самого клеща не стимулирует соблюдение гигиены в отношении зараженного Varroa расплода [33]. Скорее, гигиенические пчелы предпочтительно обнаруживают и удаляют расплод, зараженный клещами, передающими DWV, которые запускаются «девиантными» летучими соединениями, выделяемыми поврежденными зараженными куколками [34].

    Гигиеническое поведение по отношению к зараженному расплодом Varroa является очень желательным признаком для пчеловодов и пчеловодов, которые они должны включить в свои программы разведения.Однако методы, используемые для измерения этого признака, могут потребовать много времени и быть недостаточно точными. Гигиеническое поведение измеряется с помощью теста на выколотый или замороженный выводок (FKB), в то время как активность VSH обычно измеряется путем расчета изменения (= снижения) зараженности сильно зараженного донорского расплода, помещенного в тестовый улей на одну неделю. Многие исследователи признали необходимость более простых методов измерения гигиены в отношении зараженного Varroa- расплода [28, 35, 36].Были предприняты попытки соотнести количество незащищенных клеток с активностью VSH, но они оказались ненадежными [35]. В Европе исследователи предпочитают использовать метод «убитого булавкой» расплода для измерения гигиенического поведения [13]. Однако удаление мертвого расплода не всегда хорошо коррелирует с удалением зараженного расплода Varroa- [37]. Лучшее понимание механизмов, лежащих в основе гигиенического поведения в отношении Varroa , а также улучшенные методы измерения могут привести к более успешным программам разведения во всем мире.

    Основная цель этого исследования состояла в том, чтобы определить, присутствует ли признак VSH в колониях RHB. Посредством генетического анализа мы исследовали ассоциацию QTL, идентифицированного [31], с VSH как в RHB, так и в итальянских популяциях. Мы также определили, было ли удаление расплода в небольшой части расплода связано как с активностью VSH, так и с заражением клещами, что могло обеспечить более простой и надежный метод скрининга для гигиенического удаления расплода.

    Материалы и методы

    Создание колонии

    экспериментов было проведено в лаборатории медоносных пчел, генетики и физиологии в Батон-Руж, штат Луизиана, в августе и сентябре 2013 года.Весной 2013 года было создано 46 семей (итальянских = 14, русских = 32). Итальянские королевы медоносных пчел были приобретены у коммерческого производителя маток в Калифорнии, который рекламирует итальянских медоносных пчел, в то время как линии маток RHB были получены от членов Российских пчеловодов. Ассоциация (RHBA). Все эксперименты проводились, по крайней мере, через два месяца после введения маток, и только с использованием семей, которые не были заменены, чтобы гарантировать, что все пчелы были от опытных маток.

    Фенотипическое определение активности VSH

    В августе 2013 г. во всех колониях измеряли процент удаленных зараженных Varroa выводков (в данном исследовании это называется активностью VSH) с использованием метода «изменения зараженности клещами» [37]. Вкратце, кадр зараженного Varroa расплода (запечатанные личинки, предкуколки или белоглазые куколки) брали из сильно зараженной донорской колонии и вводили в тестовую колонию. Перед введением уровень заражения испытательной рамки определяли путем исследования 200 ячеек с расплодом, по 100 с каждой стороны рамки.Затем тестовую рамку вставляли в центр выводкового гнезда тестовой колонии. Через 6–7 дней после введения рамку удаляли и определяли зараженность той же когорты расплода путем извлечения 200 клеток куколок с пурпурными глазами и телом с загаром. Изучение 200 клеток выводка на колонию было стандартной процедурой для определения зараженности выводком в наших более ранних исследованиях [24, 26, 28, 37] и было принято в качестве оптимального количества для определения зараженности колонии выводком [38] .Измеряя уровень зараженности одной и той же когорты закрытого расплода до и после введения в тестовую колонию, мы можем сделать вывод, что снижение зараженности связано с гигиеническим удалением зараженного расплода [37]. Рамки тестируемого расплода получали из 14 донорских колоний, отдельных от тестируемых колоний. В качестве донорских рамок использовались только рамки с расплодом 10–33% (в среднем 17,7% ± 5,6) и с площадью расплода ≥50%. Активность VSH колонии определяли по уравнению:

    Взаимосвязь между удалением расплода в небольшой тестовой секции и активностью VSH (= изменение зараженности) тестовой рамки

    Чтобы определить, связано ли удаление расплода с активностью VSH, небольшая секция закрытого расплода (в среднем = 162 ± 35 клеток) была ограничена на каждой донорской рамке (используемой в анализе VSH) путем удаления расплода, окружающего секцию. (Рисунок 1).Срез сфотографировали перед тем, как донорскую рамку поместили в исследуемую колонию, и снова через шесть-семь дней, когда также измеряли активность VSH и другие параметры заражения. Путем сравнения обеих фотографий было определено количество закрытых расплодов, которые были удалены пчелами, или ячеек, которые были открыты пчелами в течение периода испытания. Хотя большая часть выводка была полностью удалена, некоторые остались открытыми (возможно, в процессе удаления), а другие были закрыты. Количество удаленного и открытого расплода было объединено, что обеспечило общее измерение всех манипуляций с расплодом.Также измеряли начальную и конечную зараженность каждой секции расплода и определяли активность VSH с использованием приведенного выше уравнения.

    Оценка параметров, связанных с гигиеной постоянного выводка тестовых колоний

    Для каждой тестовой колонии также определяли уровень зараженности Varroa , размножения клещей и повторного заселения клеток резидентного расплода. Эти параметры были измерены путем исследования клеток расплода из 2–3 резидентных рамок, содержащих пурпурные куколки и старше.Введение зараженных рамок расплода для измерения активности VSH привело бы к увеличению заражения всех колоний. Измерение естественного заражения резидентных рамок расплода после интродукции клещей через донорские соты позволило дополнительно сравнить восприимчивость Varroa в двух стадах. Кроме того, сравнение естественного размножения клещей в необработанных резидентных рамках расплода позволило нам определить, снижает ли поведение VSH репродуктивную продукцию в естественно зараженных клетках, как предполагалось в нашем более раннем исследовании [18].Клетки выводка исследовали до получения 30 зараженных клеток или, для колоний с более низким уровнем заражения, исследовали не менее 1000 клеток. Основательница Варроа считалась не репродуктивной, если не производилось потомство. Семейства Варроа исследовали на основании наших предыдущих исследований [24, 26] и по стандартной методике [38]. Также определяли среднее количество потомства на фертильную основательницу и среднее количество клещей на зараженную клетку. Распространенность повторного заселения клеток, инфицированных естественным путем, определяли путем осторожного снятия защитного покрытия каждой клетки с резидентных рамок расплода; клетки расплода лишены шелкового кокона [39].Эта активность повторного улавливания показывает, что пчелы открыли зараженные клетки, но впоследствии эти клетки были повторно укупорены без удаления расплода. Шелковый кокон отсутствовал либо на всей (полное повторное покрытие), либо на части внутренней поверхности (частичное повторное покрытие).

    Генетическое определение активности VSH

    Из каждой из 46 колоний, оцененных по признаку VSH, 96 куколок были собраны и проанализированы на природу маркера однонуклеотидного полиморфизма (SNP), связанного с VSH.Выделение ДНК проводили по установленным протоколам [40]. Вкратце, каждую отдельную куколку измельчали ​​между стальными шариками в 6М NaCl, 1% SDS с помощью TissueLyser (Qiagen, LaJolla, CA USA), центрифугировали и собирали супернатант. ДНК осаждали из супернатанта изопропанолом и промывали 70% этанолом. ДНК ресуспендировали в деионизированной воде и подвергали генотипированию по SNP для оценки частоты аллелей на колонию. SNP 9–9224292 медоносной пчелы был ранее идентифицирован с помощью картирования локуса количественных признаков (QTL) как тесно связанный с распаковкой и удалением поведения, которые являются компонентами признака VSH [31].Высокопроизводительное генотипирование для этого конкретного SNP было достигнуто с помощью диагностического теста ПЦР / рестрикционного переваривания. Производный расщепленный амплифицированный полиморфизм (dCAPs; http://helix.wustl.edu/dcaps/dcaps) ПЦР-праймеры для -5’-CGCGTGTATGTGTGTATTTACAAAGTTCGG и Rev-5’-TACTTGCTCGTCCATCGTCCATA, связанный с амплифицированным фрагментом меда SNMP, содержащим амплифицированный фрагмент меда. Прямой праймер содержал сконструированную мутацию (цистиновое основание в положении 28 из 30), которая работала совместно с SNP медоносной пчелы (аденин или гуанин), создавая сайт рестрикции.После стандартной ПЦР-амплификации, переваривания продукта с помощью Hpy188i (New England Biolabs, Беверли, Массачусетс, США) и процедур гель-электрофореза, полосы из 207 п.н. (гуанин в SNP; гигиенический аллель, как определено с помощью картирования QTL) или 178 п.н. (аденин в SNP; негигиеничный, как определено картированием QTL). Процентное соотношение куколок, демонстрирующих гомозиготные аллели, было сведено в таблицу для каждой тестовой колонии. Для каждого из измеренных параметров фенотипы колоний были отсортированы, чтобы выделить крайние 25% квартили, исключая те фенотипы, которые лежат в пределах средних 50%.

    Статистический анализ

    Перед анализом все данные были проверены на нормальность. Данные в процентах не были нормальными и поэтому были преобразованы с использованием преобразования квадратного корня арксинуса для лучшего приближения нормальности. Данные о количестве потомства и количестве клещей были нормальными. Были представлены нетрансформированные средства. Данные были проанализированы на предмет выбросов, и один выброс был удален перед анализом. Для определения значимости крайних значений фенотипов и генотипов колоний использовали t-критерии Стьюдента.Различия между запасами для измерений, связанных с гигиеной, также определяли с помощью t-критерия Стьюдента. Корреляция момента продукта Пирсона была проведена для каждой из переменных, измеренных с активностью VSH, чтобы определить связь. Это было выполнено с использованием всего набора данных, а также отдельно по акциям RHB и Италии. Статистика проводилась с использованием пакета программ R [41].

    Результаты

    Фенотипическое определение активности VSH

    Колонии

    RHB были значительно более гигиеничными по отношению к зараженному Varroa выводку, чем итальянские колонии, и это было верно при использовании обоих донорских гребней ( t = 2.91, д.ф. = 42, P <0,01) и небольшой участок расплода, созданный в донорском соте ( t = 2,75, d.f. = 42, P < 0,01) (рис. 2). Как удаление расплода ( t = 2,15, df = 39, P <0,05), так и общее количество обработанного расплода ( t = 2,25, df = 39, P <0,05) также были значительно выше в RHB, чем в итальянские колонии (рис. 3). Эти два измерения были положительно коррелированы с уровнями активности VSH как при использовании всего соты, так и при использовании метода секции расплода (Таблица 1).В конце эксперимента репродуктивный успех основательницы Varroa (производство по крайней мере одного потомства) в донорских сотах был одинаковым для обоих поголовий медоносных пчел (итальянский = 79,23 ± 3,57%; RHB = 71,13 ± 3,3%) ( t = 1,68, df = 42, P = 0,102).

    Рис. 2. Сравнение процентного содержания зараженного Varroa расплода, удаленного итальянскими и российскими медоносными пчелами, с использованием анализа целых сот и расплода.

    Процент удаленного расплода, зараженного Varroa , был рассчитан как процентное изменение зараженности донорских сот Varroa .

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0116672.g002

    Таблица 1. Результаты регрессионного анализа, относящиеся к процентному соотношению Varroa -зараженного расплода, удаленного для всех сот и выводков донорских рамок, и удаления расплода. расплода на различные измерения, связанные с гигиеной.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0116672.t001

    Оценка параметров, связанных с гигиеной

    Varroa Показатели заражения постоянного расплода были значительно ниже в RHB, чем в итальянских колониях (Таблица 2).Об этом свидетельствует большее количество клеток (среднее = 644 против 348 клеток), которые были открыты для получения 30 зараженных клеток на колонию RHB. Что касается доли не репродуктивных (NR) основательниц (без потомства), колонии RHB поддерживали более высокий NR, чем итальянские колонии (итальянский = 4,36 ± 1,33, RHB = 13,11 ± 1,84, P <0,010) (Таблица 1). NR также коррелировал с фактическим удалением расплода в тестовой секции выводка (r 2 = 0,10, P <0,05), но не с активностью VSH с использованием измерения всего соты (r 2 = 0.06, P = 0,111) (таблица 1). Частота повторного появления зараженных клеток расплода была высокой для обоих стад, но значительно выше в колониях RHB (итальянский = 64,36 ± 6,46, RHB = 77,81 ± 3,79, P <0,001) (Таблица 2). Независимо от того, были ли повторно покрыты клетки расплода или нет, среднее количество потомства на одного основателя и количество клещей на зараженную клетку были выше в постоянных гнездовых сотах Италии по сравнению с колониями RHB (Таблица 2). Интересно, что среднее количество потомства и средняя нагрузка клещами были немного выше в повторно уложенных клетках по сравнению с непереработанными клетками для обоих поголовий. Varroa заражение колоний (постоянных сот) отрицательно коррелировало как с удалением расплода (r 2 = 0,25, P <0,01), так и со стандартной активностью VSH (r 2 = 0,18, P <0,05) . Показатели NR и повторного колпачка не были связаны с активностью VSH, но оба измерения положительно коррелировали с удалением расплода (NR: r 2 = 0,14, P <0,05, повторное считывание: r 2 = 0,12, P <0,05) (Таблица 1).

    Генетическое определение активности VSH

    Из девяти измеренных фенотипов колоний два параметра показали значительную связь с распределением генотипов: процент расплода, удаленного в выводковой части, и процент репродуктивных основательниц (давших по крайней мере одно потомство) постоянных сот (Таблица 3). Интересно, что аллель, связанный с каждым параметром, противоположен аллелю, определяемому картированием VSH [31], где полоса 207 п.н. отделена от гигиенического поведения.В этом исследовании полоса из 207 п.н. отделяется с пониженной скоростью удаления расплода и повышенным процентом клещей-основателей Varroa , давших потомство, оба из которых указывают на отсутствие гигиены. Остальные семь изученных параметров не показали статистически значимой связи с частотой аллелей (таблица 3).

    Обсуждение

    Это исследование подтвердило, что российские медоносные пчелы демонстрируют относительно высокий уровень гигиены по отношению к зараженному Varroa расплоду, аналогичный уровням, описанным для стада VSH [15, 37].Мы также заметили, что аллели, связанные с VSH [31], были связаны с двумя оценками (процент удаления выводка и процент репродуктивных основательниц). Однако эти аллели не показали какой-либо значительной связи с активностью VSH, измеренной с помощью стандартного анализа «изменение зараженности» [37]. Молекулярный маркер, идентифицированный [31] в VSH QTL, был определен путем наблюдения за отдельными медоносными пчелами из популяции картирования, выполняющих задачи вскрытия или удаления на тестовой арене.Эта связь опубликованного маркера VSH со стандартным уровнем активности VSH в колонии еще не доказана, а только продемонстрирована на искусственном картировании популяции. Следовательно, возможно, что признак не идентичен в стадах RHB, и поэтому упрощенное измерение VSH [37] может быть не самым подходящим методом фенотипирования пчел по признаку для всех стад. Вместо этого фактическое удаление зараженных клеток расплода, по-видимому, лучше связано с гигиеническим удалением зараженного Varroa выводка из колоний RHB.Мы предположили, что выводок, удаленный RHB, был заражен, поскольку удаление выводка сильно коррелировало (r 2 = 0,44) с заражением секций расплода внутри донорских сот.

    Признак удаления расплода, вероятно, будет повсеместным в стадах медоносных пчел, служа механизмом для поддержания здоровья выводка и колонии. Считается, что это мультигенный признак, но был идентифицирован только один сильный QTL [28]. Хотя функция гена, передающего признак, остается неизвестной, генетическая ответственность может быть одинаковой для всех стад медоносных пчел.Действительно, мы показали, что существует значимая взаимосвязь между QTL, идентифицированным в VSH-выбранном итальянском поголовье медоносных пчел [31] и в колониях RHB. Наиболее значимая связь была с удалением расплода, что снова указывает на то, что механизм поведения остается прежним. Ассоциация альтернативного аллеля с положительными фенотипами как в RHB, так и в коммерческих итальянских поголовьях указывает на то, что, возможно, в одном поголовье итальянских медоносных пчел произошло событие стабильной хромосомной рекомбинации до выбора признака VSH в начальной программе разведения [15, 42 ].Хотя событие рекомбинации не является неожиданным [40], оно указывает на то, что будущие программы селекции с помощью маркеров (MAS), использующие ассоциированные маркеры, а не причинные маркеры, потребуют анализа аллелей, чтобы быть уверенным, что выбирается соответствующая вариация признака.

    Считается, что подавление размножения клещей является признаком поголовья VSH [14, 42]. В этом исследовании мы обнаружили значительно более низкое размножение клещей в колониях RHB, чем в невыбранных итальянских колониях, и это было связано с ранее идентифицированным гигиеническим QTL.Было показано, что невоспроизводство клещей выше в колониях RHB, чем у невыбранных итальянцев, отчасти из-за эффекта гребня [23]. На репродуктивный цикл клещей Varroa можно повлиять путем гигиенического удаления и манипуляций с клетками, которые нарушают синхронность репродуктивного цикла клеща и его хозяина [18]. Высокая активность VSH и более низкий репродуктивный успех клещей в российском выводке указывают на то, что гигиеническое удаление зараженного расплода в колониях RHB также способствует более низкому размножению клещей у этих пчел.Однако гигиеническое удаление расплода, зараженного Varroa , не всегда приводит к снижению воспроизводства клещей. Например, не было обнаружено изменения плодовитости клещей в колониях гигиенических пчел MN, скрещенных с поголовьем VSH [43]. Поэтому утверждалось, что отбор на удаление зараженного расплода не обязательно означает отбор на подавление размножения клещей. Скорее соотношение яйцекладок (количество куколок с яйцекладущими клещами / количество куколок с неядущими клещами) может быть лучшим критерием для обеспечения как удаления зараженных клеток, так и подавления размножения клещей [36].Тот факт, что мы не обнаружили взаимосвязи между активностью VSH и NR, подтверждает этот аргумент. Тем не менее, мы обнаружили корреляцию между фактическим удалением расплода в секции тестовых выводков и NR в постоянном выводке колоний RHB. Это указывает на то, что удаление расплода может быть альтернативным надежным измерением активности VSH в этом поголовье. Тем не менее, поскольку коэффициент корреляции составляет только около одной пятой вариации, лучше всего проверить надежность этого анализа удаления расплода, используя большее количество семей и большее количество пчелиных поголовий.

    Не было обнаружено различий между стадами по количеству клещей, давших потомство после недельного воздействия на донорскую основу расплода. Тем не менее, значительные различия между стадами были обнаружены в постоянном выводке с RHB, поддерживающим более высокий NR, чем у итальянских медоносных пчел. Это наблюдение контрастирует с выводами [35, 36, 42], которые обнаружили более низкое размножение клещей в тестовой гребенке после одной недели воздействия VSH. Высокий NR Varroa в постоянном выводке предполагает, что эффект удаления расплода на воспроизводство клещей является отложенным.Этот отсроченный эффект указывает на то, что удаление зараженного расплода из донорских сот повлияло на воспроизводство клещей, нарушив синхронность репродуктивного цикла выставленного клеща при повторном вторжении постоянного выводка [18]. К сожалению, у нас не было возможности сравнить репродуктивную способность клещей в повторных и неперекрытых клетках, поскольку количество неперекрытых клеток было низким, особенно в колониях RHB. Однако из-за небольшого количества неповрежденных клеток, которые мы наблюдали в колониях RHB, репродукция в неперекрытых клетках была ниже, чем в повторно покрытых клетках.Более высокая нагрузка клещей в повторно покрытых клетках может также указывать на вторжение клещей при вскрытии клеток.

    Настоящее исследование подтверждает наши более ранние результаты, указывающие на то, что гигиеническое поведение по отношению к зараженному клещами выводку снижает репродуктивный успех Varroa [18]. Этот признак может быть идентифицирован путем подсчета количества удаленных выводков, что дополнительно подтверждается ассоциацией VSH QTL с нашей мерой удаления и NR. Кроме того, удаление выводка имело более сильную отрицательную связь с заражением постоянного расплода, чем стандартное измерение VSH.Этот анализ удаления расплода по-прежнему требует наличия зараженного донорского гребня, но устраняет необходимость в окончательной оценке заражения или воспроизводства.

    Наибольшая положительная корреляция в этом исследовании была обнаружена между начальным заражением тестовой секции расплода и процентом выводка, удаленного из секции. Это открытие указывает на то, что пчелы реагировали на порог заражения до того, как они проявили свое поведение в какой-либо значимой степени. Существует внутренняя стоимость приспособленности, связанная с удалением молодого расплода из колонии, так что количество зараженных клеток, возможно, должно достигнуть критического порога, прежде чем пчелы начнут выполнять гигиеническое поведение [44].Другими словами, должен быть момент, когда затраты на приспособленность, связанные с уровнем заражения, превышают затраты, связанные с удалением молодых пчел из популяции. В этот момент колония переходит от терпимости к клещу к активному сопротивлению ему [44]. Чувствительность колонии к этому уровню может быть важным фактором сопротивления. Ранее было показано, что обнаружение и удаление инфицированных Varroa клеток увеличивается по мере роста зараженности колониями RHB, запаса VSH и невыбранных «выживших» колоний [3].Колонии, выведенные для гигиенического поведения по отношению к FKB, являются продуктивными на коммерческих пасеках [12, 21], и их пороговая реакция может быть фактором, способствующим этому. Было обнаружено, что «стоимость» гигиенического удаления инфицированных Varroa клеток одинакова для устойчивых и восприимчивых популяций, так что разница в фактическом удалении, вероятно, связана с различиями в способности обнаружения [44]. Действительно, посредством кондиционирования рефлекса вытягивания хоботка [45] было показано, что, по сравнению с восприимчивыми пчелами, гигиеническим пчелам, устойчивым к болезни Хелкбруда, требовался более низкий стимул для обнаружения больного расплода.В качестве альтернативы, две стада могут различаться по уровню переносимости клещей в колонии; устойчивые виды, такие как VSH и RHB, имеющие более низкий поведенческий порог плотности клещей [15].

    Показатели повторного заселения были высокими как для RHB, так и для итальянских популяций, хотя значительно выше в колониях RHB. Сочетание высокой инвазии, низкой активности VSH и высоких уровней повторного засорения у итальянских медоносных пчел предполагает низкую экспрессию генов, связанных с удалением. В 40-часовом тесте активности VSH [15] не было обнаружено различий в количестве незащищенных инфицированных клеток между невыбранными и выбранными запасами VSH.Однако наблюдалась значительная разница в снижении зараженности между двумя группами пчел. Опять же, это наблюдение указывает на то, что невыбранные итальянские пчелы открывали зараженные клетки, но закрывали клетки, а не удаляли расплод. Повторение яиц не было связано с активностью VSH в этом исследовании, но показало корреляцию с удалением расплода. Однако эта корреляция не соблюдалась при анализе отдельных акций, что указывает на то, что это может быть слабая корреляция. Этот результат подтверждает вывод [35] о том, что пересчет не является полезным измерением для VSH.Высокие уровни повторного заселения зараженного расплода при низких уровнях заражения, как это было замечено в постоянных гребнях RHB, также можно объяснить ответами пороговых значений задачи. Индивидуальные рабочие в колонии различаются по своим поведенческим порогам с точки зрения гигиены по отношению к куколкам, инфицированным Varroa , так что наиболее чувствительные рабочие обнаруживают зараженные клетки при более низком заражении [27]. Возможно, что менее чувствительные рабочие могут затем повторно собрать эти клетки до того, как выводок будет удален [39]. Только при более высоком заражении большее количество пчел может обнаружить и удалить зараженных куколок [27].

    Существовала значительная степень вариации в измерениях каждой переменной, что, вероятно, повлияло на силу корреляций. Ошибка выборки приписывалась явному увеличению зараженности клещами, наблюдаемому в тестировании VSH, где авторы сообщили, что 15 из 61 тестируемых колоний показали явный прирост клещей после однонедельного воздействия [37]. Используя все измерения гребня, только 2 из 45 колоний показали увеличение зараженности в настоящем исследовании. Однако прирост клещей был зарегистрирован в 8 из 45 колоний при использовании метода расплода.Тем не менее, учитывая значительную взаимосвязь между удалением расплода в секции и общим заражением постоянно проживающего расплода, мы предлагаем этот метод в качестве быстрого скрининга гигиенического поведения. Этот метод не требует использования агрессивных химикатов, необходимых для анализа FKB, но тем не менее дает лучшее представление о специфической гигиене Varroa . [15] обнаружили значительную разницу между удалением куколок, зараженных клещами, через один-пять дней после укупорки между невыбранными и выбранными VSH, в то время как удаление более старых куколок было одинаковым между двумя группами.Последующее исследование для сравнения фактического удаления ячеек расплода в зараженной секции в течение 5 дней после укупорки с заражением может предоставить еще лучший метод скрининга гигиенического поведения.

    В заключение, колонии RHB проявляют гигиеническое поведение по отношению к зараженному расплодом Varroa- со скоростью, аналогичной таковой у отобранного VSH стада. Поведение, похоже, находится под контролем того же QTL, что и акции VSH. Интересно, что противоположные аллели связаны с удалением выводка в колониях RHB, что указывает на стабильное событие рекомбинации.Это означает, что будущие программы отбора с помощью маркеров потребуют использования причинных маркеров или анализа аллелей, чтобы быть эффективными. Наблюдения за удалением расплода в секции зараженного донорского гребня после одной недели воздействия могут обеспечить быстрый и надежный метод скрининга этого поведения. Этот метод следует протестировать на других стадах, чтобы определить его полезность в будущих программах разведения.

    Благодарности

    Мы благодарим Т. Стельцера, Дж. Уэльса, С. О’Брайена, Б.Коксу и А. Пруденте за техническую помощь.

    Вклад авторов

    Задумал и спроектировал эксперименты: MJK LIG AMF BH TER PMW. Проведены эксперименты: MJK LIG AMF BH. Проанализированы данные: MJK LIG AMF BH. Предоставленные реагенты / материалы / инструменты для анализа: MJK LIG AMF BH TER PMW. Написал статью: MJK LIG AMF BH TER PMW.

    Список литературы

    1. 1. Rothenbuhler WC (1964) Поведенческая генетика очистки гнезда у медоносных пчел. IV. Ответы поколений F1 и обратного скрещивания на выводок, убитый болезнями.Am Zool 4 (2): 111–123.
    2. 2. Спивак М. (1996) Гигиеническое поведение медоносных пчел и защита от них Varroa jacobsoni . Apidologie 27 (4): 245–260. pmid: 8665869
    3. 3. Villegas A, Villa JD (2006) Вскрытие куколочных клеток европейскими пчелами в США в ответ на Varroa destructor и Galleria mellonella . J Apic Res 45 (3): 203–206.
    4. 4. Де Гусман Л.И., Фраке А.М., Риндерер Т.Е. (2008) Обнаружение и удаление расплода, зараженного яйцами и личинками мелких жуков-ульев ( Aethina tumida Murray), российскими медоносными пчелами.J Apic Res 47 (3) 216–221.
    5. 5. Le Conte Y, Ellis M, Ritter W (2010) Varroa клещи и здоровье медоносных пчел: может ли Varroa частично объяснить потери колоний? Apidologie 41 (3) 353–363.
    6. 6. Peng YS, Fang Y, Xu S, Ge L (1987) Механизм устойчивости азиатской медоносной пчелы, Apis cerana Fabr., К эктопаразитарному клещу, Varroa jacobsoni Oudemans. J Invertebr Pathol 49 (1): 54–60.
    7. 7. Рат В., Дрешер В. (1990) Ответ Apis cerana Fabr на выводок, зараженный Varroa jacobsoni Oud, и степень заражения колоний в Таиланде.Apidologie 21 (4): 311–321.
    8. 8. Boecking O, Drescher W (1991) Ответ колоний Apis mellifera L, зараженных Varroa jacobsoni Oud. Apidologie 22 (3) 237–241.
    9. 9. Harbo JR, Harris JW (2001) Устойчивость к Varroa destructor (Mesostigmata: Varroidae), когда устойчивые к клещам матки медоносных пчел (Hymenoptera: Apidae) спаривались с невыбранными трутнями. J Econ Entomol 94 (6): 1319–1323. pmid: 11777031
    10. 10.Harbo JR, Harris JW (1999) Наследственность у медоносных пчел (Hymenoptera: Apidae) характеристик, связанных с устойчивостью к Varroa jacobsoni (Mesostigmata: Varroidae). J Econ Entomol 92 (2): 261–265.
    11. 11. Данка Р.Г., Риндерер Т.Е., Спивак М., Кефусс Дж. (2012) Комментарии на: « Varroa destructor : исследовательские пути к устойчивому контролю. J Apic Res 52 (2): 69–71.
    12. 12. Спивак М., Рейтер GS (2001) Varroa destructor заражение необработанных семей медоносных пчел (Hymenoptera: Apidae), отобранных для соблюдения гигиены.J Econ Entomol 94 (2): 326–331. pmid: 11332821
    13. 13. Büchler R, Berg S, Le Conte Y (2010) Селекция на устойчивость к Varroa destructor в Европе. Apidologie 41: 393–408.
    14. 14. Ибрагим А., Спивак М. (2006) Взаимосвязь между гигиеническим поведением и подавлением размножения клещей в качестве механизмов устойчивости медоносной пчелы ( Apis mellifera ) к Varroa destructor . Apidologie 37 (1) 31.
    15. 15. Harris JW (2007) Пчелы с Varroa Sensitive Hygiene предпочтительно удаляют зараженных клещами куколок в возрасте <= пяти дней после укупорки.J Apic Res 46: 134–139.
    16. 16. Steiner J, Dittman F, Rosenkranz P, Engels W (1994) Первый гоноцикл паразитического клеща ( Varroa jacobsoni ) в связи с преимагинальным развитием его хозяина, медоносной пчелы ( Apis mellifera carnica ). Invertebr Reprod Dev 25: 175–183.
    17. 17. Donzé G, Herrmann M, Bachofen B, Guerin PM (1996) Влияние частоты спариваний и зараженности расплодными клетками на репродуктивный успех паразита медоносной пчелы Varroa jacobsoni .Эколэнтомол 21: 17–26.
    18. 18. Кирран М.Дж., де Гусман Л.И., Риндерер Т.Э., Фраке А.М., Вагниц Дж. И др. (2011) Асинхронное развитие хозяина медоносной пчелы и Varroa destructor (Mesostigmata: Varroidae) влияет на репродуктивный потенциал клещей. J Econ Entomol 104 (4): 1146–1152. pmid: 21882676
    19. 19. Frey E, Odemer R, Blum T, Rosenkranz P (2013) Активация и прерывание воспроизводства Varroa destructor запускается сигналами хозяина ( Apis mellifera ).J Invertebr Pathol 113 (1): 56–62. pmid: 23376006
    20. 20. Риндерер Т.Е., де Гусман Л.И., Харрис Дж. В., Кузнецов В., Делатте Г. Т. и др. (2000) Выпуск ARS Русские медоносные пчелы. Am Bee J 140 (4): 305–310.
    21. 21. Уорд К., Данка Р., Уорд Р. (2008) Сравнительные характеристики двух устойчивых к клещам популяций медоносных пчел (Hymenoptera: Apidae) в пчеловодческих операциях в Алабаме. J Econ Entomol 101 (3): 654–659. pmid: 18613562
    22. 22. Tarpy DR, Summers J, Keller JJ (2007) Сравнение паразитических клещей в колониях российских гибридных и итальянских медоносных пчел (Hymenoptera: Apidae) в трех разных местах в Северной Каролине.J Econ Entomol 100 (2): 258–266. pmid: 17461045
    23. 23. де Гусман Л.И., Риндерер Т.Е., Фраке А.М. (2008) Сравнительное воспроизведение Varroa destructor в различных типах российских и итальянских пчелиных сот. Exp Appl Acarol 44 (3): 227–238. pmid: 18392942
    24. 24. Риндерер Т.Э., де Гусман Л.И., Делатте Г.Т., Стельцер Дж.А., Ланкастер В.А. и др. (2001) Устойчивость к паразитическому клещу Varroa destructor у медоносных пчел с Дальнего Востока России. Apidologie 32 (4): 381–394.pmid: 11746979
    25. 25. Кавинсексан Б., Вонгсири С., Риндерер Т.Э., де Гусман Л.И. (2004) Сравнение гигиенического поведения российских медоносных пчел с ARS и коммерческих медоносных пчел в Таиланде. Am Bee J 144 (11): 870–872.
    26. 26. de Guzman LI, Rinderer TE, Frake AM (2007) Рост популяций Varroa destructor (Acari: Varroidae) в колониях российских медоносных пчел (Hymenoptera: Apidae). Ann Entomol Soc Am 100 (2): 187–195.
    27. 27. Грамачо К., Спивак М. (2003) Различия в обонятельной чувствительности и поведенческих реакциях среди медоносных пчел, разводимых для гигиенического поведения.Behav Ecol Sociobiol 54 (5): 472–479.
    28. 28. Данка Р.Г., Харрис Дж. В., Вилла Дж. Д. (2011) Экспрессия Varroa Sensitive Hygiene (VSH) в коммерческих VSH медоносных пчелах (Hymenoptera: Apidae). J Econ Entomol 104 (3): 745–749. pmid: 21735889
    29. 29. Лапидж К., Олдройд Б., Спивак М. (2002) Семь предполагающих локусов количественных признаков влияют на гигиеническое поведение медоносных пчел. Naturwissenschaften 89 (12): 565–568. pmid: 12536279
    30. 30. Оксли П.Р., Спивак М., Олдройд Б.П. (2010) Шесть локусов количественных признаков влияют на пороги задач по гигиеническому поведению медоносных пчел (Apis mellifera).Мол Экол 19 (7): 1452–1461. pmid: 20298472
    31. 31. Цуруда Дж. М., Харрис Дж. В., Буржуа Л., Данка Р., Хант Г. Дж. (2012) Анализ сцепления с высоким разрешением для выявления генов, которые влияют на чувствительное гигиеническое поведение медоносных пчел Varroa . PloS One 7 (11): E48276. pmid: 23133626
    32. 32. Le Conte Y, Alaux C, Martin JF, Harbo JR, Harris JW и др. (2011) Социальный иммунитет медоносных пчел (Apis mellifera): анализ транскриптома varroa — гигиеническое поведение.Насекомое Mol Biol 20 (3): 399–408. pmid: 21435061
    33. 33. Aumeier P, Rosenkranz P (2001) Запах или движение клещей Varroa destructor не вызывает гигиенического поведения африканизированных и карниоланских медоносных пчел. Apidologie 32 (3): 253–263. pmid: 11480895
    34. 34. Шёнинг С., Гисдер С., Гейзельхардт С., Кречманн И., Бинефельд К. и др. (2012) Доказательства зависимого от повреждений гигиенического поведения в отношении Varroa destructor- паразитирующего расплода западной медоносной пчелы, Apis mellifera .J Exp Biol 215 (2): 264–271.
    35. 35. Villa JD, Danka RG, Harris JW (2009) Упрощенные методы оценки колоний на уровни Varroa Sensitive Hygiene (VSH). J Apic Res 48 (3): 162.
    36. 36. Харбо Дж. Р., Харрис Дж. В. (2009). Ответы медоносных пчел на варроа с различными уровнями чувствительной гигиены Варроа. J Apic Res 48: 156.
    37. 37. Данка Дж. Р., Харрис Дж. В. (2009). Ответы на Варроа медоносными пчелами с разными уровнями Варроа Чувствительная гигиена.J Apic Res 48 (3): 156.
    38. 38. Дитеманн В., Нацци Ф., Мартин С.Дж., Андерсон Д.А., Лок Б. и др. (2013) Стандартные методы исследования varroa . В Dietemann V; Эллис Дж. Д; Нойман П. (Редакторы) ЦВЕТНАЯ ПЧЕЛОВОДКА, Том I. J Apic Res 52: 1–54.
    39. 39. Harris JW, Danka RG, Villa JD (2012) Изменения в зараженности, состоянии клеточной шапочки и репродуктивном статусе Varroa destructor (Mesostigmata: Varroidae) в расплоде, подвергающемся воздействию медоносных пчел с соблюдением чувствительной гигиены Varroa .Ann Entomol Soc Am 105 (3): 512–518.
    40. 40. Холлоуэй Б., Тарвер М.Р., Риндерер Т.Е. (2013) Точное картирование выявляет в значительной степени ассоциирующие маркеры устойчивости к грибковому заболеванию расплода медоносных пчел, Chalkbrood. J Apic Res 52: 134–140.
    41. 41. R Core Team, (2013) Язык и среда для статистических вычислений. Фонд R для статистических вычислений, Вена, Австрия., In Фонд R для статистических вычислений, Вена, Австрия. https://doi.org/10.3758/s13428-013-0330-5 pmid: 23519455
    42. 42.Харбо Дж. Р., Харрис Дж. В. (2005) Подавление размножения клещей объясняется поведением взрослых пчел. J Apic Res 44: 21–23.
    43. 43. Ибрагим А., Рейтер Г.С., Спивак М. (2007) Полевые испытания колоний медоносных пчел, выведенных на предмет механизмов устойчивости против Varroa destructor . Apidologie 38 (1): 67–76.
    44. 44. Vandame R, Morand S, Colin ME, Belzunces LP (2002) Паразитизм у социальной пчелы Apis mellifera : количественная оценка затрат и преимуществ поведенческой устойчивости к клещам Varroa destructor .Apidologie 33 (5): 433–445.
    45. 45. Мастерман Р., Росс Р., Месце К., Спивак М. (2001) Пороги обонятельной и поведенческой реакции на запахи больного расплода различаются между гигиеническими и негигиеничными медоносными пчелами ( Apis mellifera L. vifijr
      Mil Aik * * ftotlMM W
      f« v Aiks Billlgl’…… ftO
      • / ft »Черная засуха _____. 15
      25, <'алтарь Утиль * Печень
      Таблетка * .21
      1. 6o 1. <привет Оруй Криилтли ...... HO
      1,25 Creomulsion_______ 1,19
      75c Doan ‘* Kidney Pills _ .60
      JKk Mentholatum …… .25
      Ifc Mentholatum _______ .r * 0
      25 * Phillips Milk
      Magnesia______________ .21
      5CV ‘Phillips Milk
      Magnolia ——— .99
      | 0c Sal Hepatica ——-. 40
      | 0c Sal llepatioa —— -.25
      85c Vickis Salve _______. 30
      CLARK’S
      ЛЕКАРСТВЕННЫЙ МАГАЗИН
      Рецептная служба
      Фонтанная служба
      Миссис К. Д. Хендерсон провела
      вторник в Далласе.
      Мисс Марта Джейн Смит
      ушла на выходные в Мин-
      в гости к друзьям.
      Заделайте фары дальнего света
      и комплекты для замены. Bat-
      teries. — Pearce Auto Supply.
      Миссис А.Т. Фуллер
      привезли домой из-за гриппа.
      Hh »i» AMifnni,
      tor «4 IVttMM A» ii * »Поставка,
      Pvt« w! Мистер».t srwon
      VV Al’O Ml ‘hi ll * Mil a I t’twlsu
      увольняется с rdativta.
      Внутренняя трубка *, насосы tiiv,
      nutii bnc? »« Mho wntfn — »*» rislr.
      fkwirr ** Am ft Supply
      Mr. ami, Mrs. K. Coalite
      • провел несколько дней в Сан
      Антонио и другие южные районы
      городов Техаса.
      —- o— ~ —
      Мистер и Мм. Джеймс Хол-
      мужчина и дочь переехали во вторник
      в дом Шарпа <
      на улице Ист-Хикори. Нелли Донс и Гей
      Хлопковые платья Gibson.- Магазин тщеславия
      .
      Миссис Минни Гибсон повторно
      повернулась из Вернона, где
      она навещала своего зятя
      и дочь мистера и миссис
      A. \ V. Виннингем.
      Я буду готов через несколько
      дней, чтобы вы подписали
      на свой шкафчик. L. Mc-
      Burnett. Это *
      Берт Уильямсон, служивший
      в квартирмейстере De-
      в Фойл-Уэрте,
      провел здесь выходные с
      родственниками.
      клиентов Avon! Ваш представитель
      — Mrs.Au-
      Брей Бейтс. Спасибо за ваши заказы
      за последние три года.
      — Миссис. Дж. Э. Томсон. 1 *
      Миссис Т. Дж. Уоттс и
      дочь. Мэри Тодд, перевернувшаяся в понедельник из 1 эвиа-
      виль, штат Арканзас, снова
      , где у них было
      денег на праздник с Рождества.
      ■ выставка. У тебя будет
      4kn as sho ‘as yo’ go. —
      Вспомогательный американский легион.
      Джо Вилкерсон, у которого
      * кен заболел в больнице Паркленд,
      Даллас, уже почти месяц,
      вернулся домой.
      Джеймс Ходж и Джек
      Коллиер из Петти покинули форт
      в четвертую пятницу, где они должны были работать.
      Приглашаем вас на
      ВОСКРЕСЕНЬЕ
      УЖИН
      Меню
      ВЫБОР МЯСА
      Запеченная курица, заправка
      Подливка с потрохами
      Жареный стейк из курицы
      Подливка со сливками
      Пончик Kfvf
      Подливка со сливками
      Горячее печенье
      Снежный салат
      Домашний салат с горохом -приготовленный Devil’s
      Food Cake
      Coffee Milk Tea
      CZY INN CAFE
      Мисс К.Б. Ли Уилберн, бывшая сотрудница Государственного театра
      ,
      была доставлена ​​в парижский сан-
      -тариум в понедельник для лечения-
      .
      —— fy —
      Сельский магазин мебели Лема Титтсворта
      , Бонэм,
      , имеет диваны-студии $ 39,50;
      Матрасы Morning Glory
      39,50 долларов и 29,50 долларов.
      Миссис Т. Л. Хьюстон, дочь
      г-на и миссис О. Г.
      Гловер, перенесшая операцию
      в госпитале Lamar Gen-
      в Париже, вновь переведена на нормальный уровень. Ее. Пар-
      энтов обновляют ее «Сигнал-
      Гражданин» на ее
      день рождения.
      Хани Гроув в январе
      квота на десять подарков ко дню рождения
      для больницы Кэмп Макси,
      га были предоставлены за счет
      пожертвований от одного из W.
      IV f 1 * T r * »v /» Lio nf a Ronf iol
      v / t v * «v» »v # m, v« v * ’» »* — *
      церковь.
      подарков доставили миссис Ома Бэгли,
      миссис Эдгар Фулчер, миссис Г.
      Уилсон, миссис Нил Уит-
      лей, миссис П.О. Рутвен, миссис
      В.Дж. Шелтон, миссис Дж. Франк
      . Пэрриш и миссис Леонард
      Уитлок. Миссис Оно. Конин является
      генеральным председателем
      кружков.
      kbfctsm anaonM
      UtmsSk a ** »a., M ,, Frank
      WvMh,» M | H> rmt »ad» tit.
      Itaroiat * w *.r * bii »li
      »> Xlt> w «M |> i: tO | <« n
      «r« Hr * s »ttfi t: AH n’rinrt
      A. H Ijfwi, fntur.
      HWI .’ui.uej wtHMM w; #. I 4. m
      CuUMnuntMi nervtec Ml tie a. N ,.
      T **« Woman wi oum il «f Wsn
      d «Mi and H» »m \ iJmva wtP mrr *
      в этой пристройке Honda) по адресу
      7: НЕТ часов.
      Джек Гольф, суперинтендант.
      l’Kk.HHYTKK5 AN
      9 4i> a. м. .Воскресная школа.
      11 а. м. Проповедуя Mrvtw.
      5:00 с. м. \ enper nmcc.
      7:30 с.дюйм. Среда, Библия
      изучение.
      В утренний час воскресенья
      пастор будет проповедовать «
      Ободряющий свет». В связи с этим служением
      , он соблюдал Вечерю Господню
      согласно завещанию. На судне
      в час темой будет «Искать источник». Пастор будет
      отсутствовать в середине недели, поэтому
      изучение Библии будет опущено
      на следующей неделе.
      Дж. Томпсон Бейкер, пастор.
      КРЕСТИТЕЛЬ Проповедь
      : Молитва означает,
      , что, хотя мы можем быть «окружены стеной,
      мы не покрыты кровлей».”
      Воскресная школа 9:45 а. м.
      Training Union 6:30 стр. м.
      Богослужение в 10:50 а. м.
      и 7:30 с. м.
      WitS встретится в Кругах по адресу
      3 p. м. Понедельник’.
      Молитвенное собрание 7 30 с. м.
      Среда.
      Sunbeams, R. A .. G. A. и
      Y. W. A. ​​встретятся в обычное время
      .
      T. J. WATTS, пастор.
      МВт * о ** кв. форма*? город ♦ * »* (
      fttttM *, I *« * »» et Hirer Amet
      temp «WffcM * r * eh« M * ft h $ r tb *
      f.4 * r «l gwvemmrM of V« ne-
      cat «a in pftniat le rtMtftlMK |
      lion, rehaMPfat * m Md« * f * rj
      MtHHi или йот.nt a yenr Ir.
      UiMli и «Ml VimiiNS t f> * l 4o
      plrlinp building airp« ru.
      Mr * Bmticke, th * fotwn r
      Mia * Leah Norwood из Hon-
      ey Grow, и дочь и сын
      , мисс Бетти и Nor-
      Wood, присоединятся к мистеру Bronek
      позже в Wmxurla.
      Карточка
      ЧЕЛОВЕК ХРИСТА
      9:45 а. м. Библейский урок.
      11 а. м. Хвала и проповедь.
      11:40 а. м. Причастие nnd
      вклад.
      7 т. М. Класс молодежи.
      7:30 с. м. Проповедь.
      3 стр. м. Вторник, Женская Библия
      Класс.
      7:80 с. м. Среда, молитвенное собрание
      . 4
      Назначение служителя утренней службы
      : «Миссия
      и работа церкви». «
      даров Божиих» будет предметом
      вечернего богослужения.
      вас по телефону приглашают на все службы
      пороков Церкви Христовой. Вас ждет радушный прием
      .
      Чарльз Элледж Хилл, министр.
      Уведомление
      Я купил заправочную станцию ​​Mag-
      nolia в Win-
      dom и приглашаю друзей Honey Grove
      остановиться и навестить меня
      , когда я буду проезжать мимо.Также
      направляет приглашение людям
      Виндома и общине
      позвонить.
      51-2 * J. B. Holland.
      Джесси Макивер был деловым посетителем в Далласе, вторник,
      день.
      J ~ l
      СКИДКИ НА BLDROOM
      UT77T7TT
      Iff t
      СКИДКИ НА СКИДКУ ДЛЯ ЖИВОЙ BOOM
      СКИДКИ НА СТОЛОВУЮ
      MJT8 С ODD PIKGK СКИДКИ
      kMRO-DHL GAS NAMMOTOP 90 658 KMRO-DH’K8 TAMMOTOP KF 90 HF-GAS NAMMOTOP ЭТИ ПОКУПКИ
      wtc m> t Am mj. am и
      A. T. WVMil *
      tummm
      Beanbe, наушники и
      чарцинаторы, очень
      зимней одежды собственного производства.- Edwards
      Millinery.
      -——— o ——
      Р. Д. Лейн был доставлен в больницу
      Уилсона Н. Джонса в
      Шерман вторник, где он,
      , останется на несколько дней для
      осмотра и отдыха.
      Миссис Джон Барретт вновь стала
      хуну »после двух
      -недельного визита в Кэмерон,
      Хьюстон, Бомонт, Оранж,
      и Навасота.
      D, W. # маленький сын мистера
      и миссис Вудро Барнетт,
      вернулся домой из 8т.
      Больница Джозефа, Провиденс,
      Р. 1., где они делают
      ифертра домой после того, как ему переместили
      миндалин и аденоидов.p * S-‘WW Wf *
      W * «v lil iog Uom,
      Мы хотим выразить нашу благодарность
      за добрые
      выражения сочувствия, которые
      наши друзья оказали нам
      во время нашей великой скорби.
      Семья Карлок.
      Дж. Б. Литтл смог
      вернуться в магазин на короткое время
      в среду после того, как провел
      в своей постели
      в течение нескольких дней из-за
      болезни.
      Wt tun * thmm r »adv f t y a
      let« m w4 »Me tliefr w avaikatilt.
      «t- Hrt’d by, Natural» r Но
      cliML и IT idtiaki i
      AIJ, KfNffH fir RRCWTDKR mil *
      BABY RIFMIK pm N1F
      BABY CMC * FCTMSRR
      WIRE Hm MAkiku HuNft
      HINFT
      DIALARD • Госпиталь Cappleman Maternity
      сообщает о следующих —
      родов:
      Сын у г.и миссис Берл,
      О’Бэннон из Директа, 4 января 9065 года. Его зовут Берл Рэй.
      Сын г-на А. Миссис
      Ральф Джонсон в понедельник.
      Его звали Джеймс
      Брокс.
      Дочь мистеру аад.
      миссис Джон Д. Кинер,
      , среда. Ее зовут
      Альта Луиза.
      RESH
      АПЕЛЬСИНЫ
      ЯБЛОКИ
      ГРЕЙПФРУТ
      КАРТОФЕЛЬ
      IRISH and SWEET
      nice: ltne или
      ветхий
      принесите
      ire авторизирую! В
      и Hie баланс Sa ten равняется
      процентов и привилегии
      Per Sale — 2000 тюков сена,
      north’Haney Grove, P
      Study Club of
      Christian Church
      Джеймс Эйвери Янг повторно
      повернулся к Нью-Мексико
      A.Последняя встреча
      сына на Люке была проведена в год, когда члены спрашивают
      миссис Эдди Шварцрок. Корм-! мы будем присутствовать.
      Миссис Г. М. Ор, старший, сообщается о том, что
      улучшаются после
      недель болезни, вызванной пневмонией.
      Мисс Мэри Элизабет’Дхр повторно
      обратилась к школьной работе в
      Маршалл понедельник после того, как была
      здесь со своей матерью.
      Миссис Дэн Б. Харли, младше
      , перенесла серьезную операцию в прошлую субботу
      в * больницу Ш.а.ннон
      в Сан-Анджело. Отчет
      гласит, что
      у нее идет хорошо.Миссис Харли
      была бывшей мисс Клео
      Фрэнсис Смит.
      Преподобный А. Х. Лаган, мистер и
      миссис Дж. К. ФладКер и от шести до
      членов Молодежного Товарищества
      местной церкви Мет-
      одист приняли участие в митинге Молодежного братства
      в
      Бонэм во вторник вечером. Мисс
      Вирджиния Лейн была избрана президентом
      организации
      западного отделения.
      Ховард Роджерс из Колума —
      bia, штат Миссисипи, старший сын мистера
      и миссис А. Дж. Рнвпра из города
      , попал в автомобильную аварию в день Нового
      года.У него было сломано несколько
      ребер и сильно ушиблена почка
      . Мистер Роджерс
      находится в баптистской больнице в
      Джексоне, штат Миссисипи, и в последний раз он сообщил, что
      портировали от него, чтобы попасть в пар-
      , что он делал
      штрафов.
      НА ПРОДАЖУ:
      37 V-8 Fordor
      84 V-8 Coins *
      84 Chevrolet Tudor
      Bi Chevrolet Coupe
      36 Chevrolet Coupe
      30 Tudor
      29 Tudor
      29 Fordor
      80 Chevrolet Fordor
      80 Chevrolet Tudor
      Заплачу потолок цены за
      хороших машин с хорошими тиросами.
      Вы купите любую из
      машин, и мы закончим * бумагу
      . Вы можете заплатить по сожженной
      шлюхе, которую вы купите.
      …… * # ‘■ »
      Wo win abut fMf eaafe far
      ваше весло с ppai tfr« * M
      aay inotM, Turnio in Ml got
      Eta ao ** h mi bo ia »your way
      tmurn мм * у уо.
      Во время заключительной молитвы,
      хозяйка подала вкуснейшие
      закуски десяти участникам.
      — Это <носильщик.
      Методистский WSCS
      Женское Общество христианского служения

      собралось в приложении в понедельник в час дня
      для своей программы «День Обета
      ».Обед состоял из
      , подаваемых двадцати девяти членам и двум гостям, миссис С.,
      Ф. Хэнкок и преподобному А. Х.
      Логану. Миссис Б.С., Фьюэлл
      , представила вдохновляющую программу —
      грамм. Миссис Хэнкок, которая
      га * провела несколько лет
      • Чирм как миссионер,
      выступила с речью о молитве. Rev.
      Логан провел установку
      офицеров сообщества So *
      . Каждый участник подписал
      залоговых карт.
      Общество встретится с ней nrxt
      Понедельник В церковной пристройке
      в три часа дня.- Репортер.
      Business Chances
      Если вы не беспокоитесь, напишите
      Box 858, Juliaette, Idaho, Bond
      . 11
      Звуковые сигналы Itaffulatlnn gales На складе
      в офисе Slarnal-CItisan. Купите любое количество
      , которое вы хотите-
      Бесплатное обучение на специализированных
      uuiiihm uwcniimb Размещение на
      постоянных должностях, необходимых для
      военных усилий и отличных возможностей после войны
      . Предпочитаю половники
      от 17 до 30
      со средним образованием.Напишите
      Графа 800, указав возраст, последнюю школу, которую посещал
      , адрес и номер телефона
      . 60-8t *
      ► s
      Для продажи — R. C. трактор Case
      и двухрядное оборудование; пять дисков
      в одну сторону. Р. Даваом.
      Route 1, Honey Grove
      Для трактора Sak — t1940 Модель OOvtr
      70, установленного на Nk-
      ber с ftorter, light * и двухрядным оборудованием
      — три
      Mden imho term См. Опциональный плуг
      reeooMble
      , Cell Ashler
      at Аптека Хосе, Бауэр,
      Гроув, Техас,
      Для 8ele — место Трумэна Провтна.
      Состоит из 106 акров ix.ir.ulnail фермы
      ; 817 ареей пастбищ. Достаточно
      воды. —Г. К. MeOaugkey.
      Для продажи — Зарегистрированы следующие два
      -летних Херефорд Булла, Домино
      Тревога, 4-е разведение от таких
      производителей, как Шеф Домино Возвращение,
      Мастерс Домино 0-й, 16-й и
      10-й. Эти погремушки в хорошем состоянии
      | будет весить около
      тысяч фунтов. Машина. ha sasr, в
      мой бам в одной миле к северо-востоку Hon-
      / i — ~ n ti — »ji_ aj
      vy M * V? W» «V« «|« MWWIUllli M
      Hitraal-Citlsen
      I Man
      Hallroad
      9e
      • ise SVtxll,
      ilia
      желтый
      Листов
      на продажу it Me за 500 листов
      УСТАНОВИМ ВАШ
      ЗАВТРАК
      ВАШЕ НАЗВАНИЕ
      Мы будем рады выполнить заказ, насколько
      R находится в наших силах.
      ГЛАВНОЕ КАФЕ
      План для более ЗДОРОВЫХ ДЕТСКИХ ПУЛЬТОВ
      • • •
      Обращайтесь к нам, чтобы узнать о рецепте доктора ЛеГира по приготовлению птицы до
      . Также есть Dr. LeGeaPs Lice
      и Stock Powder.
      !. * Р. Umf Stork Tonic
      me Wk £
      THK PHARM
      НА ПРОДАЖУ
      AK- • ‘»
      :’ ‘T-fl
      ‘ if: »,;.
      3 довоенных ушных обогревателя *
      JaekaonSH
      iJt. ■
      платит highheat market
      за ahclkd com. — Tom
      Still
      цена за
      Blair, It *
      WWVmWWSSSSWVVWVMMWSWWW
      Для продажи — Выбор участка земли
      сена прерии.H utto * и

      Мед манука повышает чувствительность клеток гепатоцеллюлярной карциномы HepG2 к доксорубицину и индуцирует апоптоз за счет ингибирования Wnt / β-катенина и ERK1 / 2 | Биологические исследования

      Настоящее исследование выдвинуло гипотезу о том, что ЗГ может быть потенциальным кандидатом и перспективным вариантом лечения клеточных линий ГЦК. Наши результаты продемонстрировали, что лечение ЗГ и особенно его синергетический эффект с помощью DOX-индуцированной значительной цитотоксичности и индукции апоптоза в линиях клеток HCC, HepG2 и Hep3B, соответственно, в зависимости от концентрации.Стоит отметить, что клетки Hep2G значительно более чувствительны к ингибированию жизнеспособности клеток MH или комбинированной обработкой, чем линия клеток Hep3B. И HepG2, и Hep3B произошли от разного происхождения печеночных предшественников и разных стадий дифференцировки гепатоцитов, что, в свою очередь, может объяснить различия в цитотоксичности и апоптозе, вызванной ЗГ или комбинированной обработкой, между клетками Hep3B и HepG2. Кроме того, MH не оказывал значительного цитотоксического действия на нормальные неонатальные клетки печени человека.В настоящем исследовании мы сосредоточились на клетках HepG2, которые показали высокую чувствительность к ЗГ или комбинированному лечению с помощью DOX.

      В последнее время все больше внимания уделяется идентификации и характеристике новых натуральных продуктов, таких как полифенолы и мед, богатый флавоноидами [40]. Кроме того, новые подходы к комбинированной химиотерапии с использованием полифенолов или продуктов, содержащих полифенолы, такие как мед, также необходимы для повышения эффективности химиотерапии; таким образом можно преодолеть резистентность раковых клеток и минимизировать вредную токсичность.Кроме того, смесь полифенолов, содержащихся в цельной пище, легко потребляется и более эффективна по сравнению с одиночной или очищенной молекулой в профилактике рака за счет синергетического и аддитивного эффектов [41, 42].

      По сравнению с другими видами меда, MH набирает обороты в исследовательском секторе, поскольку он очень богат биологически активными соединениями, такими как фенольные и флавоноидные соединения [27, 30, 31]. Африн и др. сообщил, что MH обогащен повышенными уровнями антиоксидантных соединений, при этом наиболее распространенными соединениями являются флавонолы, например, кверцетин представляет собой 11.81%, лютеолин (8,30%) и кемпферол (3,70%) от общего содержания фенолов [31], и эти три соединения были идентифицированы в MH Alvarez-Suarez et al. [30]. и Маршалл и др. [43] тоже. Кроме того, фенольные соединения, такие как галловая кислота и сиринговая кислота, были основными компонентами MH, что составляет 36,57% и 32,55%, соответственно, от общего содержания фенолов, в то время как другие фенольные кислоты, такие как.

      4-гидроксибензойная кислота, апигенин, изорамментин и кофейная кислота были представлены в ЗГ в небольшом количестве [31].MH был идентифицирован с его потенциальной противораковой активностью [24] . Настоящее исследование сосредоточено в основном на изучении проапоптотических и антипролиферативных эффектов MH в клеточных линиях HepG2 и Hep3B. Более того, наша работа проводилась с учетом ранее проведенного исследования, которое продемонстрировало безопасность ЗГ, продемонстрировав неизменные гематологические и клинические химические профили мышей, получавших ЗГ [26]. Следовательно, противоопухолевый эффект MH потенциально может быть специфическим для клеток HepG2 и Hep3B, поскольку отсутствует цитотоксический эффект на нормальные неонатальные клетки печени человека, в отличие от химиотерапевтического препарата доксорубицина, который оказался токсичным для нормальных здоровых клеток. клетки.

      Наши результаты МТТ доказали цитотоксическое действие MH и комбинированного лечения DOX на клетки HepG2 и Hep3B после обработки различными концентрациями MH (1,25–20%) в течение 48 часов, что позволяет предположить, что MH эффективен в ингибировании пролиферации клеток HepG2 и Hep3B. . Фернандес и др. . сообщил о значениях MH IC 50 для трех различных линий раковых клеток. Во-первых, клетки меланомы мыши (B16.F1) после 24 ч, 48 ч и 72 ч воздействия MH (UMF10 +) показали значения IC 50 , равные 2%, 1.3% и 0,8% соответственно. Аналогичным образом, для клеток колоректальной карциномы (CT26) значения IC 50 , зарегистрированные через 24 и 72 часа, составили 2% и 1% соответственно. В то время как значения IC 50 для клеток рака груди человека (MCF-7) составляли более 5% и 4% через 24 и 72 часа соответственно [26]. Более того, предыдущее исследование также продемонстрировало, что антипролиферативный эффект MH был связан с активацией каспазо-9-зависимого апоптотического пути [26]. Портокалакис и др. сообщили, что MH проявляет цитотоксичность по отношению к клеткам MCF-7 после 24-часовой обработки дозозависимым образом, а концентрация MH, которая дает значения IC 50 , равна 2.2% для UMF 18 + мед и 4,7% для UMF 5 + мед [44]. В свете этих открытий было отмечено, что значения MH IC 50 варьируются среди различных типов тестируемых клеточных линий в соответствии с их молекулярными, генетическими характеристиками и происхождением предшественников . Однако различия также могут быть связаны с вариациями в содержании меда, особенно флавоноидов и фенольных кислот, которые отвечают за противоопухолевую активность [26, 45]. Согласно предыдущим исследованиям, фенольные соединения, такие как кверцетин, лютеолин, кемпферол, галловая кислота и кофейная кислота, которые являются основными компонентами ЗГ, играют важную роль в подавлении пролиферации раковых клеток [26, 41, 45, 46] .С другой стороны, согласно предыдущему исследованию, значение IC 50 адриамицина (доксорубицина) для клеток HepG2 составляло 1,12 мкг / мл, что эквивалентно 2 мкМ [47]. Ранее сообщалось, что апигенин, биофлавоноид, присутствующий в меде, значительно изменил чувствительность к доксорубицину в клеточной линии доксорубицин-резистентной гепатоцеллюлярной карциномы BEL-7402 / ADM и индуцировал каспазозависимый апоптоз [48].

      Индукция апоптоза, наряду с воздействием на пути, которые регулируют и координируют клеточную пролиферацию и дифференцировку, рассматривается как важный подход таргетной терапии для лечения рака.Морфологические изменения клеток являются признаком апоптоза и, следовательно, микроскопический анализ необходим для наблюдения этих изменений [11]. Наши результаты показали, что обработка клеток HepG2 МН приводит к морфологическим особенностям апоптоза. Наиболее выраженные морфологические изменения произошли при концентрациях (1/2 IC 50 MH + 1/2 IC 50 DOX) при комбинированном лечении по сравнению как с необработанными клетками, так и с одним положительным контролем, что подтверждает синергетический эффект комбинированного лечения.Взятые вместе с данными анализов жизнеспособности, это намекает на возможность потенциального участия опосредованного апоптозом механизма ингибирования клеточной пролиферации. Следовательно, для исследования ингибирующих эффектов MH или комбинированного лечения анализ аннексина V сочетали с проточной цитометрией для количественной оценки обработанных MH и DOX клеток HepG2, подвергающихся раннему и позднему апоптозу. Анализ на аннексин V использует характерное для апоптоза раннее разрушение плазматической мембраны и последующую транслокацию мембранного фосфолипида, фосфатидилсерина на внешнюю поверхность мембраны.Это изменение локали облегчает связывание фосфолипид-связывающего белка, Аннексина V, с фосфатидилсерином и, таким образом, позволяет обнаруживать клетки, претерпевающие ранний апоптоз. Принимая во внимание, что контркрашивание PI может проникать в клетки только после того, как целостность их плазматических мембран значительно снижена, что проявляется в клетках, подвергающихся апоптозу на поздней стадии. В настоящем исследовании клетки HepG2 или Hep3B обрабатывали MH, DOX, отдельно или в сочетании с MH и DOX в течение 48 часов.MH не оказывал значительного воздействия на нормальные неонатальные клетки печени человека, тогда как в клетках HepG2 и Hep3B комбинированное лечение синергетически снижало жизнеспособность клеток, как видно на (рис. 1). Кроме того, комбинированная гибель клеток, вызванная лечением, выявила признаки апоптоза. Процент клеток с аннексин-V-позитивным окрашиванием и популяция клеток sub-G1, представляющих индукцию апоптоза, также увеличивались в HepG2 и Hep3B, соответственно (фиг. 3). Наши данные показали, что процент клеток HepG2, подвергшихся раннему апоптозу, заметно увеличился до 21%, 27% и 54% после обработки MH, DOX и / или комбинированной обработки, соответственно, по сравнению с необработанными клетками или однократной обработкой MH или DOX.Более того, процент клеток HepG2 на поздней стадии апоптоза увеличивался до 48%, 55% и 81% после 48-часовой обработки MH, DOX или комбинированной обработки, соответственно, по сравнению с необработанными клетками. Наши данные согласуются с предыдущими исследованиями, в которых клетки меланомы мыши, клетки B16.F1 и рака толстой кишки человека, HCT-116 и LoVo, проявляли дозозависимую индукцию апоптоза при лечении MH [47].

      Синергетический проапоптотический эффект, достигаемый при использовании комбинации MH и DOX, был очевиден с помощью иммуноферментного анализа апоптоза на клетках HepG2, который выявил значительную индукцию апоптоза.Поэтому мы решили продолжить изучение этого влияния на активность основных триггеров апоптоза. Члены семейства Bcl-2 и каспазы-3 имеют решающее значение для регуляции апоптоза. Более того, наблюдаемые морфологические особенности могут быть вызваны активацией каспазы-3, которая важна для характерных морфологических изменений, связанных с апоптозом [49]. Таким образом, мы изучили влияние MH на клетки HepG2 и сосредоточили внимание на каспазе-3, ключевом посреднике событий митохондриального апоптоза [50]. После протеолитической активации активной инициаторной каспазой (каспаза-9) каспаза-3 продолжает расщеплять различные субстраты, такие как поли (АДФ-рибоза) полимераза (PARP).Вышеупомянутое расщепление этих субстратов определяет характерные морфологические и биохимические особенности, очевидные при апоптозе [51]. Чтобы выяснить, сможет ли MH или комбинированное лечение активировать каспазу-3 в обработанных клетках HepG2 и Hep3B, была проанализирована активность каспазы-3. В соответствии с нашими более ранними результатами, MH или комбинированное лечение показало значительное увеличение активности каспазы-3 в обработанных клетках HepG2 и Hep3B по сравнению с необработанными клетками через 48 часов. В то время как наибольшее увеличение активности каспазы-3 происходило при концентрациях (1/2 IC50 MH + 1/2 IC50 DOX) комбинированной обработки по сравнению с однократной обработкой MH или DOX.Данные клеток HepG2 по индукции каспазы-3 и апоптоза были выше, чем у клеток Hep3B. Более того, вестерн-блоттинг подтвердил расщепление PARP и указал на индукцию апоптоза после MH или комбинированного лечения. В целом, наши результаты свидетельствуют о том, что MH или комбинированное лечение индуцировали апоптоз клеток HepG2 и Hep3B через внешний или внутренний путь апоптоза. Таким образом, мы оценили, может ли ЗГ или комбинированное лечение индуцировать апоптоз в клетках HepG2 посредством внешнего пути апоптоза, опосредованного передачей сигналов, или внутреннего пути апоптоза, опосредованного клеточным стрессом.В этом исследовании снижение экспрессии Bcl-2 и увеличение экспрессии Bax наблюдались в клетках HepG2 после обработки MH или комбинированного лечения, и самая высокая индукция была обнаружена при комбинированном лечении. Вестерн-блоттинг проапоптотического белка Bax оказался мишенью для транскрипции р53, важнейшего белка-супрессора опухоли [52]. Более того, было обнаружено, что р53, активатор транскрипции, играет роль в индукции транскрипции многих генов, в том числе генов, связанных с апоптозом.Следовательно, активация Bax может запускаться через сигнальный каскад p53 [52]. Кроме того, Bax играет важную роль в контроле гибели клеток, опосредованной разрушением митохондрий, которая отмечается высвобождением цитохрома с в цитозоль [12]. Повышение регуляции Bax совпало с увеличением активности каспазы-3, что приводит к активации расщепления PARP и, как следствие, гибели клеток, что позволяет предположить, что MH или комбинированное лечение индуцировали апоптоз в клетках HepG2 через активацию внутреннего (митохондриального) пути апоптоза.В соответствии с нашими результатами предыдущий отчет также показал, что MH запускает апоптоз в клетках мышиной меланомы (B16.F1) через активацию внутреннего пути апоптоза [26]. Кроме того, сообщалось, что антипролиферативный эффект MH был вызван активацией каспазо-9-зависимого апоптотического пути, что, в свою очередь, привело к активации каспазы-3, снижению экспрессии Bcl-2, фрагментации ДНК и, наконец, гибели клеток. [26]. Более того, другое исследование продемонстрировало, что хризин, обычный флавоноид MH, индуцирует апоптоз через активацию пути p53 / Bcl-2 / каспаза-9 в клетках HCC (HepG2) [53].Кроме того, Im et al. сообщили, что лютеолин (основное фенольное соединение MH) активирует каспазу-8, -9 и -3 и расщепляет PARP в клетках гепатоцеллюлярной карциномы человека SK-Hep-1 [54]. Кроме того, сообщалось, что кверцетин (обычный флавоноид MH) заметно ингибировал пролиферацию клеток HCC (HepG2 и SMCC-7721) и индуцировал апоптоз, повышая экспрессию Bad и Bax и подавляя экспрессию Bcl-2 in vitro [55].

      Сигнальный путь RAF / MAPK / ERK активируется при ГЦК, и было обнаружено, что он коррелирует с поздней стадией заболевания [39].Таким образом, мы оценили потенциальное влияние MH на путь RAS / ERK, изучая экспрессию белка общей ERK1 / 2 и их фосфорилирование с помощью вестерн-блоттинга. Фосфорилирование ERK1 / 2 необходимо для их активации, и, следовательно, изучение их фосфорилирования и соотнесение его с общим содержанием белка проливает свет на потенциальное влияние MH или комбинированного лечения на активность ERK1 / 2. Обработка клеток HepG2 MH или комбинированная обработка в течение 48 часов вызвала значительное снижение p-ERK1 / 2, несмотря на то, что общая численность ERK1 / 2 не показала заметных изменений.Кроме того, наиболее глубокое снижение p-ERK1 / 2 было зарегистрировано при комбинированной обработке (1/2 IC 50 MH + 1 мкМ DOX), которая показала снижение p-ERK1 / 2 на 73%, что подтверждает синергетический эффект используемой комбинации, предполагающий, что противоопухолевый и антипролиферативный эффект MH может быть опосредован сигнальным путем RAS / ERK. В дополнение к нашим данным ранее проведенное исследование показало, что геламовый мед сам по себе и / или в сочетании с имбирем индуцировал ранний апоптоз, частично через путь RAS / ERK, в клетках колоректального рака [56].Кроме того, Ding et al. продемонстрировали, что кверцетин снижает жизнеспособность клеток, индуцирует апоптоз, расщепляет каспазу-3, расщепляет PARP, повышает экспрессию белка Bax и снижает уровень белка p-ERK1 / 2 в клетках HepG2 [57]. Shao et al. продемонстрировали, что фитохимические вещества, такие как апигенин (один из флавоноидов, присутствующих в MH), подавляют активацию ERK и Akt в клетках рака толстой кишки человека [58]. Более того, ERK1 / 2 ранее был вовлечен с β-catenin, mTOR и cyclin D1 в клеточную пролиферацию [39, 59].Следовательно, изучение изобилия этих белков после обработки клеток HepG2 ЗГ должно помочь лучше понять основные молекулярные механизмы, связанные с антипролиферативным и проапоптотическим действием меда.

      mTOR и его последующий эффектор, S6K, являются важными регуляторами трансляции белка. Более того, было обнаружено, что сигнальный путь mTOR активируется в нескольких карциномах, включая HCC, где сверхэкспрессия S6K была зарегистрирована почти в половине изученных HCC [60].Более того, путь Wnt / β-catenin (каноническая передача сигналов Wnt), как было обнаружено, усиливает модуляцию S6K, опосредованную m-TOR [61]. Перекрестные помехи между сигнальными путями RAS / ERK и mTOR для положительной и отрицательной регуляции друг друга хорошо задокументированы, в то время как одновременное ингибирование обоих путей индуцировало антипролиферативный эффект на разные раковые клетки [62]. Экспрессия белка как mTOR, так и S6K в клетках HepG2 после обработки MH, DOX или комбинациями MH и Dox показала ингибирование пролиферации клеток, при этом оба белка проявляли значительное подавление, причем наиболее заметное ингибирование было очевидно в клетках, обработанных комбинации MH и DOX.Полученные результаты можно отнести к кверцетину (одному из основных фенольных соединений МН). Wu et al. сообщили, что кверцетин ингибирует пролиферацию клеток HCC за счет подавления уровня белка гексокиназы-2 (HK2) и подавления пути AKT / mTOR [63]. Кроме того, Ji et al. продемонстрировали, что кверцетин индуцирует аутофагию посредством ингибирования пути AKT / mTOR при ГЦК [64]. Другое исследование показало, что лютеолин снижает жизнеспособность клеток и индуцирует апоптоз в клетках рака простаты, кроме того, он подавляет AKT, ERK, mTOR и P70S6K [65].Лютеолин подавлял уровни экспрессии белков фосфорилированных Akt, mTOR, p70S6K и MAPK, а также индуцировал расщепление каспазы и PARP в клетках глиобластомы и способствовал остановке клеточного цикла [66].

      Кроме того, мы дополнительно изучили влияние MH на экспрессию онкогенного β-катенина, фактора транскрипции, который играет критическую роль в прогрессировании HCC. β-catenin является многогранным белком, так как он играет неотъемлемую роль в поддержании комплекса адгезии клеток E-cadherin-catenin в клеточных соединениях, опосредуя связывание кадгеринов с актиновым цитоскелетом [67].Кроме того, β-catenin также является ключевым белком в каноническом пути передачи сигналов Wnt [68]. Активация этого пути индуцирует накопление в цитоплазме β-catenin и его последующую транслокацию в ядро, тем самым запуская транскрипцию нижестоящих генов-мишеней [69]. Аномальная повышающая регуляция сигнального пути Wnt / β-catenin является отличительной чертой многих опухолей, включая рак печени, где повышенная регуляция β-catenin играет важную роль в развитии и прогрессировании HCC [68].Следовательно, в течение последних лет были разработаны и реализованы различные подходы для нацеливания на путь Wnt / β-catenin, как средства для разработки новых методов лечения HCC [70]. Обработка клеток HepG2 MH или комбинированная обработка приводила к значительному снижению содержания β-катенина, причем наиболее сильное снижение было зарегистрировано при комбинированном лечении, включающем как MH, так и DOX.

      В свете результатов вестерн-блоттинга мы предположили, что существует связь между снижением p-ERK1 / 2 и снижением экспрессии β-катенина.Этот паттерн ингибирования экспрессии β-катенина коррелирует со снижением p-ERK1 / 2, подразумевая, что MH может подавлять β-катенин посредством пути передачи сигналов Ras / ERK. Benn et al. выявили, что примерно у 50–70% пациентов с ГЦК наблюдается повышенная p-ERK из-за активированного пути RAS / ERK. Активация этого пути связана с ингибирующим фосфорилированием киназы гликоген-синтазы 3 бета (GSK-3β), которая действует как негативный регулятор канонической передачи сигналов Wnt, что приводит к инактивации GSK-3β и накоплению β-катенина. [71].Комбинированная обработка (1/2 IC 50 MH плюс 1 мкМ DOX) заметно снижала уровни экспрессии белка β-катенина в клетках HepG2 через 48 часов, эффективно подтверждая синергетический эффект комбинированной обработки MH и DOX. В соответствии с нашими результатами было обнаружено, что MH обладает такими компонентами, как полифенолы и флавоноиды кверцетина, которые, как было обнаружено, способствуют его антипролиферативным свойствам за счет снижения транскрипционной активности β-катенина / Tcf и подавления канонического пути передачи сигналов Wnt в толстой кишке. раковые клетки [63].Более того, было обнаружено, что биофлавоноид MH галангин снижает транскрипцию β-катенинового ответа (CRT), которая аномально повышена при колоректальном раке и раке печени [72]. Этот биофлавоноид действует, усиливая деградацию внутриклеточного β-катенина, а также сдерживая экспрессию генов, зависимых от β-катенина / Т-клеточного фактора, таких как циклин D1 и c-myc. Таким образом, он, следовательно, оказывает антипролиферативный эффект на CRT-положительные раковые клетки [72]. В заключение, фитохимические вещества, присутствующие в MH, подавляли β-катенин в клетках HepG2, тем самым внося свой вклад в противораковый эффект MH [73].

      Предыдущие исследования продемонстрировали, что избыточная экспрессия cyclin D1 может быть связана с активацией β-catenin и сигнальным путем RAS / ERK [74, 75]. Циклин D, важный регулятор прогрессирования клеточного цикла, сверхэкспрессируется при различных формах рака, особенно при ГЦК [76]. Более того, это нижестоящая мишень для β-катенина и сигнального пути RAS / ERK при ГЦК, где увеличение p-ERK1 / 2 приводит к повышенной экспрессии циклина D1 и ингибирующему фосфорилированию белка-супрессора опухолей, pRb [77] .Кроме того, было обнаружено, что сверхэкспрессия циклина D1 участвует в дифференцировке опухолевых клеток HCC, поэтому нацеливание на циклин D1 рассматривается как альтернативный подход в терапии рака [78]. В настоящем исследовании экспрессия циклина D1 в клетках HepG2, обработанных MH, выявила значительное подавление, причем наиболее значимое снижение проявлялось в клетках, обработанных комбинированной обработкой. Наши данные продемонстрировали, что циклин D1 может быть одной из нижестоящих мишеней β-катенина и ERK1 / 2 в HepG2.В соответствии с нашими результатами, MH содержит большое количество кверцетина, который может глубоко ингибировать рост и пролиферацию клеток HepG2 за счет снижения экспрессии циклина D1 [79].

      BELLAMI Silk Seam 240g 22 «Медовые гребешки для наращивания мелированных волос — Волосы BELLAMI

      Общий вес: 240 г / 8,47 унций
      Всего штук: 7
      Длина: 22 дюйма

      Шелковый шов 22 «240 г Диапазон Содержит:
      • Уток с 4 зажимами, 1 шт. (8 дюймов)
      • Уток с 4 зажимами, 1 шт. (7 дюймов)
      • Уток с 2 х 3 зажимами
      • Уток с зажимом 3 x 2
      ШАГ 1. ОТДЕЛЕНИЕ ВОЛОС

      Начиная с нижней части головы, расческой для хвоста или указательным пальцем разделите (разделите по горизонтали) волосы в нижней части головы i.е. чуть ниже одного уха ко второму уху.

      * Кроме того, вы можете начать разделку еще ниже, настолько низко, насколько вы хотите разместить первую пряжу *

      ШАГ 2. РАЗРЕЗАТЬ ВОЛОСЫ

      BELLAMI Silk Seam TM Зажим для наращивания волос должен крепиться снизу вверх. Начиная с самой нижней точки на линии роста волос, с помощью гребня для хвоста или указательных пальцев создайте часть, на которой вы хотите отделить волосы.

      ШАГ 3 — ЗАСТРИЖИТЕ ВОЛОСЫ

      Закрепите оставшиеся волосы на макушке, чтобы они не мешали при укладке пряжи.

      ШАГ 4 — ПОДГОТОВЬТЕ ПЕРВЫЙ WEFT

      Возьмите первую пряжу из упаковки BELLAMI Silk Seam TM Заколка для наращивания волос. Первая пряжа должна быть достаточно длинной, чтобы она была достаточно широкой, чтобы проходить вдоль задней части линии роста волос. Затем откройте все зажимы, чтобы их можно было вставить в волосы.

      ШАГ 5 — РАЗМЕЩЕНИЕ ПЕРВОГО WEFT

      Затем возьмите один из более широких прядей волос и вставьте открытый центральный зажим чуть ниже пробора.Наденьте зажим на волосы, а не на сырую кожу головы. Закройте зажим, чтобы он захватил ваши волосы. Повторите то же самое с оставшимися зажимами.

      ШАГ 6. СОЗДАЙТЕ НОВУЮ РАЗДЕЛКУ

      Уберите волосы, которые вы держали, и сделайте новый пробор. Для этого зачешите слой волос примерно на полдюйма или около того между каждым слоем утка. Каждый раз закрепляйте лишние волосы на макушке.

      ШАГ 7 — РАЗМЕЩЕНИЕ ОСТАВШИХСЯ ВЕФТОВ

      Теперь вставьте оставшиеся утки, как описано выше.Повторите процесс с новым пробором над каждым удлинением утка.

      ШАГ 8 — ПРОВЕРЬТЕ ЗАЗОРЫ

      Теперь, когда ваша заколка BELLAMI Silk Seam TM для наращивания волос прикреплена, проведите пальцами по утку, чтобы убедиться, что он плотно прилегает к голове по всей ширине. Если есть какие-либо зазоры, исправьте это, щелкнув зажимом, приподняв его с волос и переставив так, чтобы уток лежал ровно.

      ШАГ 9 — РАЗМЕЩЕНИЕ БОКОВЫХ ДЕТАЛЕЙ

      Вставьте и расположите 4 боковые части так, чтобы они обрамляли лицо и смешивались с вашими собственными волосами.

      ШАГ 10 — УДАЛЕНИЕ НАКЛЕЙ ВОЛОС

      Чтобы удалить зажим BELLAMI Silk Seam TM в наращивании волос, откройте все зажимы и осторожно приподнимите их и снимите с волос. Никогда не пытайтесь удалить уток, не открыв предварительно все зажимы.

      1. В чем разница между 220 г, 160 г и 120 г?
      2. Сколько времени занимает доставка?
      3. Как отследить посылку?
      4. Что такое диапазон двойной вытяжки?
      5. Мой BELLAMIS не того цвета, и я не вскрыл основную часть упаковки, как мне вернуть / обменять?
      6. Откуда вы отправляете?
      7. Мой платеж не проходит?
      8. Как мне узнать, какой цвет выбрать?
      9. Мой цвет находится в обратном заказе, могу ли я его приобрести?
      10. Как закрепить BELLAMI?
      11. Какой длины должны быть мои волосы, чтобы носить BELLAMI’s?
      12. Можно ли покрасить мой БЕЛЛАМИС?
      13. Могу ли я использовать инструменты для укладки на моем BELLAMIS?
      14. Могу ли я постирать белье BELLAMI?
      15. Как часто я мою свои BELLAMI?
      16. Как долго обычно длится наращивание волос BELLAMI?
      17. Мои БЕЛЛАМИС теряют! Что мне делать?
      18. Что это значит, когда товар находится в Бэк-заказе?
      19. В чем разница между хвостиками с запахом и зажимом?

      1. В чем разница между 220 г, 160 г и 120 г?

        Пикколина

        120 г 18 «

        Бамбина

        160 г 20 «

        Bellissima

        220 г 22 «

        100% человеческие волосы Remy
        Двойной тягой
        Общий вес 120 грамм Общий вес 160 грамм Общий вес 220 грамм
        Общая длина 18 дюймов Общая длина 20 дюймов Общая длина 22 дюйма
        Всего штук 7 Всего штук 10 Всего штук 10
        Количество утков Размер утка Количество утков Размер утка Количество утков Размер утка
        2 Уток с 4 зажимами 1 Уток 8 дюймов 1 Уток 8 дюймов
        3 Уток с 3 зажимами 1 Уток 7 дюймов 1 Уток 7 дюймов
        2 2 утка с зажимом 2 Уток 6 дюймов 2 Уток 6 дюймов
        2 Уток 4 « 2 Уток 4 «
        4 1.5 «Уток 4 Уток 1,5 «

      2. Сколько времени занимает доставка?

        Канада: 7-12 рабочих дней

        США: 5-7 рабочих дней

        Международный: 10-15 рабочих дней (может быть больше для стран с медленной доставкой)

      3. Как отследить посылку?

        Вам будет отправлено электронное письмо с подтверждением отправки вместе с номером для отслеживания доставки вашей посылки.В некоторых случаях этот номер для отслеживания не является пошаговым отслеживанием, а является подтверждением доставки.

      4. Что такое диапазон двойной вытяжки?

        Наш ассортимент двойной вытяжки означает густые и пышные волосы сверху вниз. Это контрастирует с естественными концами, такими как наши собственные волосы, которые могут быть тоньше к низу.

      5. Мой BELLAMIS не того цвета, и я не вскрыл основную часть упаковки, как мне вернуть / обменять?

        Если вы хотите отправить их обратно для обмена или возврата, вы можете сделать это до тех пор, пока защитная пломба не была сломана, и они не были открыты или изношены, пожалуйста, свяжитесь с нами перед отправкой вашего BELLAMIS обратно для получения полной информации. & информация об адресе.

        Пожалуйста, напишите на внешней стороне упаковки маркером « ВОЗВРАТ — БЕЗ ОБЯЗАННОСТЕЙ », чтобы они не задерживались на таможне. Пожалуйста, также укажите номер вашего заказа внутри упаковки. Пожалуйста, не используйте ИБП, так как они могут взимать очень высокие ставки по эту сторону границы. Не стесняйтесь использовать обычную доставку USPS. Мы рекомендуем отправлять его обратно с номером отслеживания, так как мы не несем ответственности за утерю или неизвестное местонахождение возврата или обмена.


        * Примечание. Вы можете вернуть или обменять любые профессиональные инструменты для укладки BELLAMI, только если они были приобретены по полной цене.Если использовался промо-код или код скидки, мы не можем предложить возврат или обмен. *

      6. Откуда вы отправляете?

        В настоящее время наша транспортная компания находится в Лос-Анджелесе, штат Калифорния, США.

      7. Мой платеж не проходит?

        Попробуйте использовать другой браузер, это обычно решение. Если у вас по-прежнему возникают проблемы, напишите нам по адресу [email protected] 🙂

      8. Как мне узнать, какой цвет выбрать?

        Если вы не уверены, какой цвет вам подойдет, напишите нам по адресу info @ bellami.com ваших волос, снятых на улице при естественном освещении, и мы хотели бы подобрать вам цвет 🙂

      9. Мой цвет находится в обратном заказе, могу ли я его приобрести?

        Да, конечно, можете! При размещении заказа для вас будет зарезервирован набор, поэтому, как только мы вернемся в запас, мы сразу же отправим вам ваш BELLAMIS!

      10. Как закрепить БЕЛЛАМИС?

      11. Какой длины должны быть мои волосы, чтобы носить BELLAMIS?

        Мы рекомендуем минимум 6 дюймов, но если вы думаете, что сможете заставить его работать, тогда добро пожаловать, чтобы попробовать 🙂

      12. Можно ли покрасить мой БЕЛЛАМИС?

        Наши нарощенные волосы на 100% состоят из человеческих волос, прошедших собственный процесс окрашивания, и, хотя они были сконструированы так, чтобы принимать цвет, мы все же рекомендуем получить профессиональное мнение опытного колориста.Окрашивание может привести к сокращению срока службы ваших BELLAMI и, возможно, вызвать повреждение, если все сделано неправильно. Мы также рекомендуем не осветлять волосы и не использовать какие-либо отбеливающие средства.
        Мы не рекомендуем красить наши наборы Balayage или Ombre, так как они были обработаны несколько раз. Из-за пройденной ими обработки они плохо умирают.
        Пожалуйста, имейте в виду, что выбор окрашивания BELLAMIS остается на усмотрение клиента и на ваш страх и риск.
        У одной из наших модниц и потрясающих гуру красоты на YouTube есть видео о том, как их умирать, демонстрирующее, насколько это просто, которое можно посмотреть здесь: http: // www.youtube.com/

      13. Могу ли я использовать инструменты для укладки на моем BELLAMIS?

        Да, ты можешь! Мы всегда рекомендуем использовать термозащитный спрей, а некоторые дамы сначала моют их, чтобы снять обогащенное витаминами покрытие.

      14. Могу ли я постирать БЕЛЛАМИС?

        Безусловно, старайтесь держаться подальше от шампуней с сульфатом в них и используйте увлажняющие кондиционеры! Несмываемые кондиционеры и теплозащитные средства продлят срок службы вашего BELLAMIS.

      15. Как часто я мою свой БЕЛЛАМИС?

        Мойте наращенные волосы BELLAMI ТОЛЬКО, когда они выглядят так, как будто они им абсолютно необходимы! Поскольку они не прикрепляются к коже головы, они не получают натуральных масел, как наши собственные волосы! Таким образом, нет необходимости мыть их так же часто, как вы моете собственные волосы.

      16. Как долго обычно длится наращивание волос BELLAMI?

        Срок службы BELLAMIS составляет от 3 до 6 месяцев, в зависимости от их использования, а также от того, как за ними ухаживают и обслуживают.

      17. Мои БЕЛЛАМИС теряют, что мне делать?

        Некоторое выпадение является нормальным явлением в пределах первой пары носков, как и ваши собственные волосы! Но если вы чувствуете, что ваш BELLAMIS сильно линяет, пожалуйста, свяжитесь с нами.

      18. Что означает, когда товар находится в Бэк-заказе?

        Популярные товары могут быть распроданы быстро и временно не могут быть заказаны.Это означает, что товаров в настоящее время нет на складе, но есть поставки для пополнения запасов на наших складах. Заказ товара, который в настоящее время находится в обратном заказе, — это беспроблемный способ убедиться, что вы будете первым в очереди на новый инвентарь и что заказанный вами товар будет отправлен вам, как только мы его получим!

        • Товары с невыполненным заказом в любом порядке будут автоматически отправлены, как только мы получим товары.
        • Вы получите уведомление по электронной почте с подтверждением отгрузки (и номер для отслеживания), как только ваши заказанные обратно товары будут отправлены.Вам не нужно будет связываться со службой поддержки или предпринимать какие-либо действия по поводу обратно заказанного товара. С этого момента мы позаботимся об этом за вас!
        • Мы сделаем все возможное, чтобы оценить, когда ожидается отправка обратно заказанных товаров, и разместим эту информацию на веб-сайте, а также будем информировать всех клиентов, которые приобрели обратно заказанные товары.

      19. В чем разница между хвостиками с запахом и зажимом?

        Наш хвостик с запахом — более естественный способ получить большую длину и объем! Вы могли бы просто собрать свои натуральные волосы в хвост, а затем закрепить шпильку для бобби в верхней части хвоста.Затем оберните одну прядь волос вокруг, пока она не соединится на липучке! Некоторым людям также нравится использовать заколки для волос, чтобы сделать их более безопасными.

        Наш конский хвост с зажимом — лучший вариант для более высоких пони. Вы могли бы собрать свои натуральные волосы в хвост, а затем снова завязать их резинкой для волос, прикрепленной к зажиму. После этого вы будете использовать зажим для когтей, чтобы закрепить конский хвост на ваших натуральных волосах.


      Поприветствуйте свои лучшие волосы с наращиванием волос BELLAMI Silk Seam ™!
      • Изготовлено из человеческих волос высочайшего качества
      • До 30% * тоньше и практически не обнаруживается с технологией Invisi-Weft®
      • Более удобный, стойкий и менее линяющий, чем при традиционном наращивании волос
      • 100% человеческие волосы Remy

      * До 30% тоньше, чем стандартные закрепляемые утки BELLAMI с технологией Invisi-Weft®.Из-за естественной разницы в человеческих волосах точный вес может незначительно отличаться.

      Как ухаживать за вашим BELLAMI Silk Seam
      TM Наращивание волос
      • Осторожно расчешите щеткой до и после использования щетку со щетиной, чтобы избавиться от путаницы.
      • При необходимости промыть теплой водой с использованием шампуня без сульфатов и кондиционера.
      • Глубокое состояние при необходимости для дополнительной ТСХ.
      • Никогда не расчесывайте насадки влажными и используйте только горячие инструменты, когда они высохнут.
      • Всегда наносите термозащитный спрей перед использованием горячих инструментов.
      • Храните удлинители в сухом, ровном месте, когда они не используются.
      • Самое главное, ухаживайте за наращенными волосами, как за собственными волосами.

      Подлинность меда: аналитические методы, современное состояние и проблемы

      Мед — это дорогостоящий, потребляемый во всем мире пищевой продукт с высокой рыночной ценой, строго зависящей от его происхождения. Более того, происхождение меда должно быть четко указано на этикетке, а схемы качества должны быть прописаны в зависимости от его географического и ботанического происхождения.Поэтому для повышения качества пищевых продуктов крайне важно разработать аналитические методы, позволяющие точно и точно определять происхождение меда. В этом исследовании впервые предоставляется постоянно действующая наукометрическая оценка месторождения с использованием структурированного ключевого слова в базе данных Scopus. Библиометрический анализ указывает на то, что дискриминация по ботаническому происхождению была наиболее изученной проблемой аутентичности, а хроматографические методы использовались наиболее часто для ее оценки. Основываясь на этих результатах, мы всесторонне проанализировали аналитические методы, которые использовались в исследованиях подлинности меда.Представлены аналитические прорывы и узкие места в методологиях оценки параметров качества меда с использованием методов разделения, биоаналитических, спектроскопических, элементных и изотопных методов. Особое внимание уделяется маркерам подлинности и необходимости применения хемометрических инструментов для их выявления. В целом, аутентичность меда — это постоянно развивающаяся область, и ожидается дальнейший прогресс, который еще больше повысит качество меда.

      Эта статья в открытом доступе

      Подождите, пока мы загрузим ваш контент… Что-то пошло не так. Попробуй еще раз?

      Rustic Wood Box Tutorial — Honeybear Lane

      Это довольно распространено, и я уверен, что вы видели дюжину руководств. Но деревянные ящики невероятно удобны для украшения, поэтому я научу вас, как их собрать, чтобы вернуться к ним позже.Также я научу вас, как сделать его старым и деревенским с помощью специальных техник. Но если вы хотите попробовать сделать это, пожалуйста, прочтите весь учебник перед началом, потому что впереди есть подготовительные дни, которые необходимо выполнить.

      Припасы:

      • 1 1 × 6, разрез 24 ″ (купите 1 плату 1x6x6)
      • 2 1 × 4, разрез 5,5 ″ (купите 1 плату 1x4x6)
      • 2 1 × 4 резка на 25,5 ″
      • Пистолет для гвоздя или винты 1 1/4 ″
      • Клей для дерева

      Вот что нужно для окрашивания:

      • # 1 стальная вата
      • белый уксус
      • черный чай
      • классическая серая морилка от Minwax

      Вы должны иметь возможность купить эту пилу по дереву в вашем большом хозяйственном магазине, но если у вас есть торцовочная пила, я рекомендую вам попробовать ее самостоятельно.На самом деле это очень просто.

      Шаг 1:

      С помощью столярного клея и гвоздевого пистолета (или шурупов) прикрепите две концевые детали к 1 × 6.

      Шаг 2:

      Переверните коробку на бок и приклейте и прибейте (или прикрутите) детали размером 25,5 дюймов с каждой стороны. Вы можете дважды проверить длину доски, чтобы убедиться, что она не нуждается в обрезке или удлинении. Но если ваш 1 × 6 имеет размер 24 дюйма, а ширина 1×4 — 3/4 дюйма, это должно быть довольно близко.

      Теперь у вас есть деревянный ящик! Нет ничего проще. Теперь самое интересное.

      Чтобы коробка выглядела в деревенском стиле, ее нужно стукнуть и поцарапать. Используйте молоток, отвертку, гаечный ключ, что угодно, чтобы разбить его. Я также использую тыльную сторону молотка, чтобы втиснуть в него лески, чтобы имитировать стропы пилы.

      Для процесса окисления вам необходимо замачивать стальную вату в уксусе в течение нескольких дней. Заварите черный чай и настаивайте в горячей воде примерно 15 минут, чем дольше, тем лучше.

      Сначала вы берете кисть и рисуете на черном чае. Это помогает выделить дубильные вещества в древесине, а также добавляет морилке темно-черный элемент. Оставьте на несколько минут и дайте высохнуть. Затем используйте другую кисть и нанесите кистью на смесь стальной ваты. Теперь установите таймер примерно на 5 минут. Если вы не установите таймер, вы, вероятно, забудете вовремя стереть его, и тогда он высохнет и будет выглядеть неправильно. Поверьте — я говорю на собственном опыте. И PS воняет.

      Через 5 минут протрите, и дерево должно выглядеть так:

      Выглядит неплохо, правда? Старые и прочее? Эта комбинация была разной на разных кусках дерева.Так что, хотя на этом 2х4 он выглядел великолепно, на моем ящике он не выглядел таким серым. Здесь я добавляю классическое серое пятно и добавляю последний серый элемент.

      Вы можете получить деревенский вид по-разному, как вы можете видеть на всех этих различных тестах, которые я проводил, используя Minwax Classic Grey, Minwax Weasted Oak и комбинацию Black tea / Steel Wool. И почему-то на этом 2 × 4 он получился намного темнее, чем на моем 1 × 4. Наверное, это другая древесина. По-разному относится к разным породам дерева.

      Но мой любимый метод — это черный чай / стальная вата и уксус / классический серый вместе. Кроме того, мне нравится, что комбинация чая и стальной ваты относительно безопасна и не оставляет грязи, поэтому мои дети могут «рисовать», если хотят мне помочь. У него нет дыма, но у него есть странный неприятный запах. Также, если вы хотите сохранить черный чай, положите его в холодильник, иначе он заплесневеет.

      Дайте коробке высохнуть в течение нескольких часов, а затем заклейте ее полиуретаном или просто оставьте.Поли придаст ему более блестящий вид (за исключением случаев, когда вы используете атласную отделку, на самом деле это не так), и он может выделить желтые тона, делая его менее серым.

      Вот и все! Это ваша деревенская деревянная шкатулка. И такой серый новичок в проекте деревянного строительства, вы будете чувствовать себя более уверенно, переходя к более важным вещам.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *