Мед фирма сиделка: Патронажная служба Москвы по уходу за больными

Патронажная служба в Москве “МедСервис Надежда” — подбор сиделок для больных

Болезнь, пусть даже тяжелая, не является причиной для отчаяния – так говорим мы всем пациентам, и в этих словах нет фальши. Наше агентство сиделок с проживанием и без за годы работы определило три составляющих для нормальной жизни в трудный период. Первая – качественный медицинский уход, при котором обеспечивается выполнение всех врачебных предписаний. Вторая – хорошие условия жизни, где организован комфортный быт и интересный досуг. Третья – психологическая поддержка, в которой нуждается каждый больной. Обеспечьте их своим близким с помощью «МедСервис Надежда» и время болезни для них станет лишь неприятным событием.

Наше агентство по уходу за лежачими больными, а также подопечными других категорий, предлагает вам профессиональный патронажный сервис с подбором сотрудников высокой квалификации. Специалисты службы имеют медобразование, умеют оказывать срочную доврачебную помощь, обеспечивать качественную реабилитацию и психологическую поддержку. Они квалифицированны, добросовестны, опытны и деликатны: с ними опека не будет навязчивой или нежелательной.

Какие услуги по уходу за больными можно заказать у нас?

Наша служба профессионального ухода за больными подберет вам персонал для заботы о близком любого возраста и состояния здоровья. Мы предложим все свои умения, чтобы обеспечить качественную опеку, поможем с ней на дому и не оставим вас в стационаре. Сотрудники «МедСервис Надежда»:

• обеспечат медобслуживание;
• проведут реабилитацию после получения травм различной тяжести;
• выполнят выхаживание пациента после инсульта, инфаркта миокарда и других тяжелых заболеваний;
• позаботятся о подопечном с онкопатологией;
• организуют уход за пожилой категорией пациентов;
• осуществят обслуживание после оперативных вмешательств, выполнят профилактику постоперационных осложнений и пролежней, позаботившись о здоровье кожи. Наша забота поможет стать здоровыми, бодрыми и иметь после болезни достойный вид.

«МедСервис Надежда» ─ качественная опека от профессионалов

Какие категории больных нуждаются в услугах агентства по подбору сиделок?

Мы знаем, что нужны тяжелобольным, лежачим, престарелым людям, людям с инвалидностью и после травм. Мы необходимы в период реабилитации, во время которой могут требоваться специальные процедуры, ЛФК и массаж. Мы полезны для тех, кто нуждается в помощи в быту, компаньоне, участии и заботе. И мы с радостью предлагаем свои услуги всем нуждающимся, гарантируя полную самоотдачу.

«МедСервис Надежда» предоставит сиделку в дом и семью

Если в вашей семье есть больной, требующий медпомощи или пожилой родственник, нуждающийся в заботе, обратитесь в нашу организацию. Мы предоставим квалифицированного специалиста, а также тепло, внимание и моральную поддержку. Подопечные, находящиеся под нашим наблюдением, не имеют недостатка во внимании, не чувствуют себя непонятыми или одинокими.

Мы предлагаем свою помощь пациентам:

• живущим одиноко и в семье;
• находящимся в больнице, пансионате;
• требующим круглосуточной опеки;
• нуждающимся в приходящем помощнике.

Сиделка от «МедСервис Надежда» может работать в любом режиме и выполнять любые функции, которые необходимы. Если подопечный находится в тяжелом состоянии и не может самостоятельно себя обслужить, она обеспечит проведение санитарно-гигиенических процедур, кормление, досуг. Осуществляя проживание с пациентом, сестра возьмет на себя работу по дому: уборку, приготовление еды, стирку и пр.

Медицинские процедуры – важный вид услуг патронажной службы

Наш патронажный центр предоставляет ухаживающий персонал с профильным образованием, наличие которого способствует обеспечению качественного медобслуживания. Наши сестры проследят за соблюдением всех рекомендаций к лечению, выполнят назначенные процедуры на должном уровне (прием медикаментов, инъекции, перевязки). Также они будут рядом в критические минуты, организовав неотложную доврачебную помощь.

Как мы контролируем качество патронажных услуг

Заключая договор на услуги, мы встречаемся с вами однократно или присылаем его с курьером, не заставляя посещать наш московский офис. Однако на этом внимание нашей компании к вам не заканчивается: мы строго контролируем деятельность наших сотрудников. Каждая сиделка регулярно отчитывается перед контролирующими специалистами «МедСервис Надежда», что позволяет нам обеспечивать грамотный и качественный патронаж.

Заказывайте наши услуги по номерам: +7 (495) 623-11-50, +7 (965) 402-35-33, осуществляйте онлайн подбор специалиста, нанесите нам визит в Москве, на Рождественке 5/7 (офис 17). Доверьтесь «МедСервис Надежда»: ухаживать за близкими с нами легко.

Агентство по подбору сиделок в СПб «Аломед»

 

Агентство по подбору сиделок «АЛОМЕД» в СПб предоставит в ваше распоряжение квалифицированный персонал по уходу за пожилыми людьми, лежачими больными, окажет незамедлительную помощь в трудной ситуации. Постоянно в режиме часовой готовности к выезду находится более 1000 опытных и заботливых сиделок. Общая база соискателей составляет на данный момент уже 8000 человек, ежедневно пополняясь лучшими представителями профессии.

Бывают в жизни обстоятельства, когда людям не обойтись без посторонней помощи, и они вынуждены прибегнуть к услугам патронажной службы. Но куда обратиться, если случилась беда? Подбором домашнего персонала – сиделок, нянь, домработниц, компаньонок – занимается множество компаний, интернет пестрит частными объявлениями подобных услуг. Создается впечатление, что найти в Петербурге сиделку – проще простого. Но где гарантии, что ваш близкий человек, будучи больным и беспомощным, действительно будет окружён заботой?

Утратившие возможность самостоятельно обслуживать себя в быту, страдающие тяжёлыми заболеваниями, реабилитирующиеся после травмы или инсульта – все эти пациенты особенно уязвимы и беззащитны. От сиделки требуется особые навыки, а также личностные качества – терпение и такт, особенно при уходе за лежачими больными и людьми преклонного возраста. Поэтому главный принцип компании «АЛОМЕД» — индивидуальный подход. Каждая ситуация уникальна, и мы предоставляем каждому заказчику персонального менеджера, чтобы изучить её и подобрать оптимальный пакет услуг, а также оперативно найти сиделку в СПб, хорошо зарекомендовавшую себя в случаях, аналогичных вашему.

Каждый месяц в агентстве сиделок в Петербурге «АЛОМЕД» получают работу свыше 500 сотрудников. Мы не гонимся за количеством представительств нашей службы, открывая множество номинальных филиалов в других городах – мы осуществляем подбор персонала в Санкт-Петербурге и стараемся трудиться с максимальной самоотдачей и качеством именно на благо петербуржцев!

Патронажная служба «Сиделки Петербурга» — Услуги сиделки на дому

Городская патронажная служба «Сиделки Санкт-Петербурга» предоставляет услуги квалифицированных сиделок по уходу за больными, пожилыми и людьми с ограниченными возможностями.

Когда с человеком случается беда и ему требуется помощь и профессиональный уход, самый правильный выход – нанять сиделку. Заботу о близком могли бы взять на себя родственники или друзья, однако часто такой вариант применить невозможно. У многих время занимает работа, семья, некоторые не могут ухаживать за родственником из-за дальнего расстояния и отсутствия возможности переехать. Нужно помнить и о том, что не всякий сможет найти с больным, пожилым или человеком с ограниченными возможностями общий язык, а главное – обеспечить ему профессиональный уход и оказать первую медицинскую помощь. Только сотрудники специализированных агентств – квалифицированные сиделки – способны справиться с поставленными задачами в полном объеме. … читать далее

Найти сиделку в СПб, которая соответствует всем требованиям, предъявляемым к этому персоналу, не так просто. Профессиональная сиделка – это квалифицированный работник, который обладает нужными медицинскими познаниями, навыками по уходу за пожилыми и больными людьми, а также важными человеческими качествами: ответственностью, доброжелательностью, сдержанностью, умением наладить психологический контакт с подопечным. Это человек, которому должны доверять пациенты и заказчики, обратившиеся к услугам сиделки.

Ваши поиски увенчались успехом! Наша патронажная служба сиделок в Санкт-Петербурге готова решить ваши проблемы по уходу за людьми с ограниченными возможностями. Мы предоставим профессиональную опытную сиделку сразу после подписания договора. Причин доверять нашей службе много, и первая из них: агентство «Сиделки Петербурга» – первое организованное в северной столице и единственное в Санкт-Петербурге, имеющее лицензию на осуществление медико-патронажной деятельности…. читать далее

• В штате – только квалифицированные опытные сиделки, с большим стажем работы. Дипломы и сертификаты подтверждают профильное образование в сфере патронажных услуг, сестринского и санитарного ухода. Есть работники с высшим медицинским образованием. Все наши сотрудники – психически устойчивы, доброжелательны, ответственны. Их задача – не простое формальное выполнение обязанностей, а и окружение подопечного заботой и вниманием. В штате есть женщины и мужчины – для некоторых заказчиков это принципиальный вопрос.

• Широкий спектр оказываемых услуг – почасовой патронаж, услуги сиделки на дому с проживанием, сиделка для больницы и другие…. читать далее

• Для вас будет составлен индивидуальный график от 1 часа до круглосуточного ухода. При оформлении договора и выборе персонала учитываются все пожелания заказчика, особенности состояния и потребности нуждающегося в патронаже человека.

• Стоимость услуг доступна, фиксирована и не зависит от дней недели и праздников.

С нами сотрудничают известные благотворительные фонды и страховые компании. А отзывы благодарных клиентов – лучшая для нас рекомендация. Звоните – и мы предоставим для вас недорого квалифицированную сиделку, которая окажет всю необходимую патронажную помощь и окружит подопечного вниманием и заботой.

Вакансий по указанному критерию не найдено. Попробуйте поменять настройки фильтра или начните поиск с вашего города или региона.

Array ( [0] => Array ( [post_title] => Что делать, если устал: 5 способов сделать свою работу приятнее [post_content] =>

На работе обычный человек, который не является ни родственником Рокфеллера, ни им самим, проводит большую часть своей жизни. И даже если работа эта не требует постоянного нахождения в офисе, рано или поздно наступает критическая точка, когда накатывает усталость, опускаются руки и очень остро встает вопрос: а в чем, собственно, заключается смысл моей деятельности и что она приносит лично для меня?

Это именно тот случай, когда избитая фраза «Не в деньгах счастье» обретает вполне реальные очертания. И пусть тот, с кем такого никогда не случалось, первым бросит в меня камень.

Так что же теперь делать? Бросить все и начать сначала? Или все-таки найти какое-то иное, менее радикальное решение? На мой взгляд, это вполне возможно, если только несколько изменить свой подход к означенному вопросу.

Я не есть моя работа

Итак, предположим, вы пишете статью (или выполняете какую-то иную работу) и предлагаете ее заказчику. Вы работали и день, и ночь, и еще день. А в перерывах вы размышляли над сутью проблемы, рылись в интернете и даже (только представьте!) в печатных изданиях. И вот наступил дедлайн. Нажата кнопка, письмо отправлено.

Но ответа нет. И день нет, и три нет. Вы пишете заказчику. И наконец, получаете короткую отписку: «Ваша работа не подходит». Что вы делаете? Скорей всего, первая мысль, которая приходит вам в голову: «Я плохой специалист».

Это не оно! Возможно, вы не идеальны. Но суть не в этом. У заказчика есть сотни других причин отказать вам: не тот стиль изложения, не та концепция или задание вообще утратило актуальность. Не каждый готов потратить свое время на то, чтобы все это вам объяснить.

Что делать?

Найти применение своей работе, если это возможно, и перестать клеймить себя. У всех есть куда развиваться. Но это вовсе не значит, что уже сейчас вы не представляете собой ценность.

Я ценю результаты своего труда

Вы нашли заказчика. Или вам поручили решение какой-то интересной задачи, в которой вы хорошо разбираетесь. И задают вполне резонный вопрос: «Сколько это стоит?».

Я знаю множество людей, которые пугаются этого вопроса так, как будто их попросили продемонстрировать личного скелета в шкафу. Почему? Да потому что большинство из нас склонно сомневаться в собственной компетентности. К сожалению, чаще это происходит именно с теми, кто действительно является спецом.

Что делать?

Никогда не должно быть стыдно оценить себя по достоинству. То есть назвать именно ту сумму, которой вы заслуживаете. Как это сделать? Изучить рынок и предложения от специалистов вашего уровня (ведь в глубине души вы его все равно знаете) и сложить цену.
Если в вас заинтересованы, никто никуда убегать не будет. Просто заказчик либо согласится на ваши условия, либо предложит более приемлемую для себя сумму. И тогда решение будете принимать вы.

Я имею право на отдых

Вы увлечены работой? Вы работаете быстро и со вкусом? Вы ответственны? Прекрасные качества! Ваш начальник или заказчик непременно оценит это и… нагрузит вас по максимуму.

В какой-то момент вы почувствуете, что в баке закончился бензин, и начнете снижать скорость. Либо вообще остановитесь. И, поверьте, никто вас толкать не будет. Вокруг достаточно желающих впрячься в вашу телегу. А вот вам потребуется отдых. И, возможно, выход из затяжной депрессии, которая обычно сопровождает хроническое переутомление.

Что делать?

Учиться тормозить вовремя. А лучше – планировать свой день, оставляя в нем, пусть небольшие, но приятные «карманы» для отдыха. Кофе или чай, музыка в наушниках, несколько минут с закрытыми глазами, а если это возможно – небольшая прогулка в обеденный перерыв… Усталость снимет, и мир вокруг станет намного добрее. Работа в таком настроении значительно продуктивнее.

Моя работа имеет смысл

Что я даю этому миру? Да, вопрос достаточно избитый, и в нем много патетики, но в той или иной форме он посещает очень многих. Деньги перестали радовать? Представляете, и такое возможно. Когда все, что ты делаешь, кажется мелким и незначительным.

Что делать?

Одна стилист всегда рекомендовала своим клиенткам отойти от зеркала на пять шагов. Хороший совет в любой ситуации.
Большое видится на расстоянии. Каждый из нас выполняет работу, которая часто является лишь пазлом в одной огромной мозаике. Отойдите на пять шагов и посмотрите, действительно ли эта мозаика будет цельной и законченной, если вашего кусочка в ней не будет? Вы увидите, что нет.

Я оставляю свой рюкзак

В какой-то театральной студии был принцип, который звучал так: «Всегда нужно оставлять рюкзак за порогом». Это действительно очень важно – оставить груз проблем там, где их предстоит решать. Дом должен быть вашим убежищем, местом, где позволительно отдохнуть и забыть о рабочих неурядицах.

И даже если вы работаете дома, постарайтесь, покидая свое рабочее место, оставить там ваши чертежи, заготовки для будущих статей и прочее, и прочее. Время пить чай, есть пирожные и дарить свое тепло и внимание близким.

Что делать?

Включайте воображение. Вполне можно визуализировать процесс. Закройте глаза и представьте портфель или рюкзак, в который вы складываете листы с вашими планами, рисунками, набросками, свой ежедневник, калькулятор, список дел и прочее. Закройте его поплотнее. И оставьте на своем рабочем месте. Идти домой без такого груза будет намного легче.

Ну а если ваше состояние стало хроническим, быть может, стоит подумать, действительно ли ваши сомнения вызваны усталостью и рутинной работой или вам пора менять род деятельности. Учиться не страшно и никогда не поздно. Быть может, работа вашей мечты уже ждет вас, и вам остается лишь сделать пару решительных шагов.

[guid] => https://jobius.com.ua/news/?p=88114 [photo] => https://jobius.com.ua/news/wp-content/uploads/2020/08/ja-ne-est-moja-rabota-1.jpg [post_name] => chto-delat-esli-ustal-5-sposobov-sdelat-svoju-rabotu-prijatnee ) [1] => Array ( [post_title] => Пассивный доход в сетевом бизнесе — это реальность? [post_content] =>

Сетевики зазывают новичков тем, что говорят о пассивном доходе, то есть не делаешь ничего, а денежки каждый день приваливают сами по себе. Именно так человек и слышит, когда говорят о пассивном доходе.

Пассивный — это же от слова «ничего не делать»?

• На самом деле не существует никакого пассивного дохода, если у человека не построена самостоятельная, самодостаточная структура, которая приносит ему ежемесячный стабильный доход.
• Но и сам человек при этом не сидит на месте, а делает хотя бы минимум, чтобы поддерживать достойный уровень.
• Ему все равно приходится привлекать новых людей, учить новичков, контролировать процесс.
• Не говоря уже о тех, кто еще не построил структуру, находится в самом начале пути.
• Тут пассивность вообще не приветствуется, ибо человек всего лишь месяц не поработал, а уже у него нет никакого дохода.

  Получается, что пассивный доход — это миф, так как простой ведет к обнулению или резкому падению доходов, о чем говорят практически все сетевики.

Как правильно работает сетевой маркетинг

Никто не видит, чтобы сетевик преспокойно сидел себе дома и ничем не занимался. И это реальность, в которую приходится поверить. Так что придется оставить вопрос о пассивном доходе, если не построена многоступенчатая, расширенная, разветвленная структура, которая работает без перебоев постоянно, регулярно, а не разваливается после того, как лидер этой структуры решил отдохнуть полгодика.

Поэтому, если лидер еще не имеет такой структуры, ему придется работать во сто раз больше и активнее, иначе придется распрощаться с теми доходами, что у него есть. Но об этом не говорят новичкам или же говорят неправильно, отчего новичок начинает просто ждать, когда деньги сами придут, поработал немного — и довольно. Вообще люди пассивны сами по себе, поэтому и хотят, чтобы текла вода под лежачий камень. И поражаются, почему такого не происходит.

Однако это не значит, что не надо пробовать, пытаться построить стабильную и приносящую действительно пассивный доход структуру, если есть запал, желание и возможности.

Но не надеяться, что после полугода интенсивной работы можно будет сложить ручки, так как ручки лидеры сложили поначалу, но когда все идет наперекосяк, приходится справляться с вызовами времени.

Кстати, есть и другие способы обрести пассивный доход, но это уже другая история, и она тоже не связана с ничегонеделанием и ожиданием, когда деньги с неба посыпятся. Так что дерзать, но не надеяться на безделье.

[guid] => https://jobius.com.ua/news/?p=88108 [photo] => https://jobius.com.ua/news/wp-content/uploads/2020/08/passivnyj-dohod-v-setevom-biznese-2.jpg [post_name] => passivnyj-dohod-v-setevom-biznese-jeto-realnost ) [2] => Array ( [post_title] => 5 ошибок новичка, приводящих к эксплуатации его на работе [post_content] =>

Первые дни и недели на новой работе – время волнительное. Особенно если это ваша первая работа. Вы отчаянно стараетесь показать себя в лучшем свете перед начальником, понравиться коллегам и заявить о себе как о квалифицированном специалисте.

И, конечно, не отказываетесь от всевозможных поручений, которые вам дают старшие товарищи или шеф. В результате через месяц-другой вы с ужасом обнаруживаете, что круг ваших обязанностей расширился неимоверно, а зарплата при этом больше не стала.

Пять классических ошибок новичка, которые приводят к подобному сценарию:

Мелкие поручения

Полить офисный кактус, сбегать в магазин за какой-нибудь мелочью, заменить воду в кулере – это несложно. Но безропотно брать на себя исполнение всех мелких поручений в офисе не стоит. Иначе вскоре окажется, что это – ваша обязанность. И при виде закончившейся в кулере воды ваш коллега не примет меры сам, а будет гневно требовать, чтобы вы немедленно отправились решать эту проблему, бросив все дела. Вам действительно хочется стать порученцем всего коллектива?

Что делать?

Убедитесь, что мелкие обязанности справедливо распределены между всеми сотрудниками. И время от времени отказывайтесь выполнять подобные поручения: пусть сегодня воду в кулере меняет кто-нибудь другой. Помните: вы не единственный сотрудник в офисе и вовсе не обязаны быть слугой для своих коллег.

Готовность брать на себя неприятные обязанности

Выйти в ночную смену, дежурить в выходные или праздники, отправиться добровольцем на скучное мероприятие. Эти дела нужны и важны для работы, но плохо, если их постоянно спихивают на вас. Безропотно соглашаясь с таким положением дел, вы вскоре не будете иметь ни одного спокойного выходного, а ваш рабочий день увеличится чуть ли ни вдвое. Зарплата при этом, разумеется, останется прежней. Так какой смысл стараться?

Что делать?

Установить очередь на дежурства, в том числе и в праздничные дни. Если нужно, распечатать график и повесить на стену. Главное, чтобы все сотрудники были вовлечены в систему дежурств на равных условиях. Тогда и сидеть на работе в праздник будет не так обидно.

Широкая помощь коллегам

Вы мастерски обращаетесь с принтером, а ваша пожилая коллега боится даже близко подойти к этому страшному агрегату. Вы легко и непринужденно рисуете реалистичные портреты в Adobe Photoshop, а ваш коллега еле-еле выцарапывает загогулины в Paint. Вы сделали отчет за два часа, а ваш сосед уже четвертый час умирает перед монитором, и понятно, что сидеть ему так до завтрашнего вечера.

Как не помочь коллеге? Тем более что ваша помощь сопровождается восторженным «Ой, как здорово у тебя получается!». Вы польщены и искренне уверены в том, что приобретаете любовь и уважение коллег. На самом деле вы просто бесплатно выполняете чужую работу. Восхищение коллег вскоре сойдет на нет, вашей помощи будут уже не просить, а требовать. И, разумеется, ваша зарплата не увеличится, даже если вы выполняете работу за весь офис. Так зачем вам это надо?

Что делать?

Подсказать коллеге, как решить задачу – это святое, но выполнять за него работу необязательно. Отговоритесь занятостью либо заключите взаимовыгодное соглашение с коллегой (например, вы быстро закончите за него отчет, а коллега подежурит вместо вас в выходные). Но ни в коем случае не позволяйте себя эксплуатировать.

Бескорыстие

Шеф просит вас выполнить несложную дополнительную работу за небольшое вознаграждение. Вы с блеском выполняете задачу, но от денег смущенно отказываетесь. Это же мелочь, ерунда, вам было несложно, за что тут платить?

Или ваша зарплата задерживается, потому что у фирмы сейчас трудные времена. Как не помочь? Такое бескорыстие, по вашему мнению. Демонстрирует ваше уважение к начальнику и преданность фирме. На самом деле вы просто соглашаетесь работать бесплатно. Отныне можете забыть о премиях, а вашу зарплату будут всячески урезать. Зачем платить вам больше, если вы уже согласились усердно трудиться за копейки?

Что делать?

Вы пришли на работу, чтобы зарабатывать деньги, и имеете полное право получать достойное вознаграждение за ваш труд. Конечно, не стоит требовать оплаты за каждую мелочь, но если «мелочей» становится слишком много – откажитесь либо поставьте вопрос о денежном вознаграждении.

Услуги друзьям шефа

Ваш начальник просит вас (неофициально, разумеется) помочь его старому другу. Бесплатно сделать визитки, вычитать текст или сделать еще что-то в том же духе. Несложно, да и отказать начальству трудно. Но если подобных просьб становится слишком много, задумайтесь: не работаете ли вы бесплатно на друзей шефа, ничего за это не получая?

Что делать?

Вежливо сообщите шефу, что трудиться на его друзей бесплатно вы не намерены. Либо он достойно оплачивает ваши труды, либо «золотая рыбка» в вашем лице прекращает исполнение желаний.

Достойно поставить себя на новой работе – сложная задача, но результат того стоит. Всегда защищайте свои интересы и требуйте справедливой оплаты за свой труд. И тогда пребывание в офисе станет для вас легким и комфортным.

Удачной работы!

[guid] => https://jobius.com.ua/news/?p=88101 [photo] => https://jobius.com.ua/news/wp-content/uploads/2020/08/neprijatnye-objazannosti.jpg [post_name] => 5-oshibok-novichka-privodjashhih-k-jekspluatacii-ego-na-rabote ) [3] => Array ( [post_title] => Опыт клиента в почтовом маркетинге: советы по каждому этапу воронки продаж [post_content] =>

Наиболее распространенная цель использования почтового маркетинга — не просто отправка контента, а перспектива продаж. Однако сегодня потребители гораздо более требовательны и осведомлены о рекламной деятельности. Поэтому уже недостаточно привлекать их скидками или промо-акциями, необходимо создать лучший опыт взаимодействия с вашим брендом.

Опыт клиента

Опыт клиента — ключевой элемент, который решает, останется ли клиент с вами в будущем. В него входит весь опыт контакта клиента с вашим брендом. Этот опыт состоит не только из рекламных сообщений, но и из всех возможных взаимодействий на разных уровнях и в разных точках контакта.

Вы должны знать, что всякий раз, когда клиент встречает упоминания о вашей компании, в нем рождаются эмоции. Это определяет его восприятие бренда. Одноразовый неудачный опыт может заставить покупателя негативно воспринимать весь бренд. Если вы хотите построить ценные отношения, позаботьтесь об этом на каждом этапе общения с клиентом.

Из каких этапов состоит общение с клиентом?

Существует четыре основных этапа, которые соответствуют классической воронке продаж, а именно:

— открытие бренда;
— обзор доступных опций, первый интерес к товару;
— решение о покупке;
— послепродажное обслуживание, удержание клиентов и повторная продажа.

Открытие

Представьте себе следующую ситуацию. У клиента есть явная потребность — он ищет хороший лазерный принтер, но не знает, какой выбрать. Прежде чем принять решение о покупке, он ищет информацию в Интернете.

Вы управляете магазином электроники. На данный момент вы можете повлиять на его решение.

Каким образом? Создавая контент, который отвечает его потребностям. В этом случае это могут быть обзоры лучших лазерных принтеров, подбор оборудования к конкретным потребностям (например, офисный или домашний принтер) или руководство о том, как работать с определенными типами принтеров, чтобы они работали как можно дольше.

Если получатель получает ценный и полезный контент, а также связывает их с вашим брендом — это огромный плюс.

Почтовый маркетинг

Помните, что реакция на бренд может быть хорошей, но короткой. Поэтому уже на этом этапе старайтесь держать читателя дольше. Вы можете сделать это с помощью рассылки.

Предложите подписку на вашу рассылку в обмен на любые преимущества — например, скидку в вашем магазине. Однако не заблуждайтесь, что после первого посещения вы получите волну заказов — не все готовы взаимодействовать с брендом сразу после знакомства. Поэтому используйте возможности объединения разных каналов.

Вы можете сделать это, применив ремаркетинг к людям, которые ранее посещали сайт. Можно использовать рекламу на Facebook, которая является еще одним методом привлечения клиентов. Что показывать в таких объявлениях? Например, сравнение различных моделей аналогичных товаров, информация о скидках или промокодах.

Первый интерес

После того, как клиент сделал первый шаг, стоит поддержать его интерес, отправив приветственное письмо.

• В рассылках удивляйте своих подписчиков и старайтесь их заинтересовать.
• Хорошим примером будет создать серию однодневных акций.
• Получатель с большей вероятностью будет открывать электронные письма, когда ему будет интересно, что бренд предложит ему на следующий день.

  Не забудьте подчеркнуть свою готовность помочь и поддержать на каждом этапе общения с клиентом, будь то по почте или на сайте.

• Чтобы превзойти ожидания и возможные вопросы будущих клиентов, заранее подготовьте ответы на распространенные вопросы и предложите с ними ознакомиться.
• Если вы предлагаете пользователю установить приложение — разместите подсказки на каждом этапе его использования.

Объединяйте разные каналы связи. Например, если клиент является членом вашего клуба лояльности, помимо отправки ему электронного письма с текущей рекламной акцией, также отправьте ему SMS, чтобы он не пропустил это сообщение.

Чем лучше ваш пользователь знает продукт, тем больше вероятность, что он совершит покупку. В своих решениях он руководствуется не только рекламой и ценой, но и мнениями, размещаемыми в сети. И в этой области у вас есть шанс оставить положительный опыт, активно отвечая на вопросы пользователей о вашем бренде, поддерживая его советами или просто принимая критику. Получатели ценят надежные компании.

Не переусердствуйте с «бомбардировкой» рекламы, потому что вы можете столкнуться с явлением «баннерной слепоты». Это означает, что получатели уже автоматически игнорируют элементы на странице, которые выглядят как объявления.

Решение о покупке

Момент, когда покупатель решает купить ваш продукт, чрезвычайно важен для формирования его положительного опыта работы с брендом. Любая недоработка может снизить его уверенность, и ее сложно восстановить позднее.

На этом этапе вы должны убедиться, что процесс покупки проходит гладко и что клиент чувствует себя в безопасности на каждом этапе транзакции. В этом вам помогут транзакционные электронные письма, содержащие самую необходимую информацию о заказе. Также полезно отправить благодарственное письмо за доверие и выбор вашей компании.

Хорошим примером является бренд Adidas. В транзакционном электронном письме, помимо информации о продукте и состоянии заказа, вы найдете наиболее часто задаваемые вопросы (предвидя любые сомнения клиентов), рекомендуемые дополнительные продукты или контактные данные, чтобы клиент мог получить поддержку в любое время.

Послепродажная деятельность

Чтобы дольше сохранять положительный опыт работы с клиентом, стоит поддерживать с ним связь даже после совершения покупок.

Каким образом? Например, через несколько дней после покупки отправьте электронное письмо клиенту с просьбой оценить покупку и сам опыт взаимодействия с магазином.

Чтобы дать клиенту еще больше положительных эмоций, вы можете дать ему некоторую награду в виде скидки или купона на небольшую сумму за заполнение опроса или оценку бренда.

[guid] => https://jobius.com.ua/news/?p=88093 [photo] => https://jobius.com.ua/news/wp-content/uploads/2020/08/opyt-klienta-v-pochtovom-marketinge.jpg [post_name] => opyt-klienta-v-pochtovom-marketinge-sovety-po-kazhdomu-jetapu-voronki-prodazh ) [4] => Array ( [post_title] => Какими будут технологии ближайшего десятилетия? [post_content] =>

Давайте попробуем пофантазировать о том, какие изменения   произойдут в нашей жизни в ближайшем десятилетии. Разумеется, определенные технологии прочно закрепятся в ней, а также появятся новые.

Попытаемся спрогнозировать наиболее вероятные варианты развития событий на этот год, а может и на грядущее десятилетие. Что ж, приступим.

Возможный прорыв в технологиях

Электромобили

Этот пункт самый очевидный из всех. Электромобили продолжат отвоевывать себе место под солнцем не только за счет растущего спроса среди пользователей, но и благодаря государственной поддержке. Распространение технологии и усиление конкуренции в отрасли приведет к удешевлению устройств.

Таким образом, можно с большой долей вероятности предположить, что ближайшее десятилетие пройдет под знаком повышения доступности электромобилей. Тем не менее, инфраструктура пока еще развита недостаточно: зарядные станции являются скорее диковинкой, нежели обыденностью, что негативно сказывается на уровне продаж. Решение этих проблем позволит ускорить развитие рынка электромобилей.

Повсеместное использование роботов, их совершенствование

Тут сразу на ум приходят печальные произведения различных писателей-фантастов, но давайте думать в более позитивном ключе. Роботы будут крайне полезны в быту и производстве, где могут спасти не одну сотню жизней или просто избавить людей от монотонного изматывающего труда. И этот процесс уже начался.

Но встает вопрос: что же будет с людьми, которые в результате повсеместного внедрения роботов лишатся своих рабочих мест? Решение может найтись в базовом доходе, который в качестве эксперимента практикуется в развитых странах. Те, кого не устроит такой пассивный доход, смогут попробовать себя в других областях деятельности.

С домашней работой будут помогать справляться роботы-помощники, которые станут логичным развитием роботов-пылесосов и прочей подобной техники. Все сферы нашей жизни станут автоматизированы.

Технологии умного дома

Техника с каждым годом умнеет, это факт. На сегодняшний день рынок представлен всевозможными датчиками температуры и влажности воздуха, термостатами, способными автоматически поддерживать необходимую температуру воздуха в помещении, умными замками, в том числе оснащенными сканерами отпечатка пальца.

На сегодняшний день есть лишь одна проблема ¬– совместимость всех этих устройств. В ближайшие годы не исключено создание единого стандарта для умных домов, который позволит сделать все эти гаджеты совместимыми друг с другом.

Нейронные сети

Пожалуй, самый главный прорыв прошлого десятилетия. Искусственный интеллект в дальнейшем только ускорит свое развитие. Разумеется, прогнозировать апокалипсис мы не хотим, надеемся, что люди будут достаточно благоразумны, чтобы не обратить эту перспективную технологию в зло. Что же мы получим от развития ИИ? Произойдет повышение качества и разнообразия контента, а также появятся новые направления в искусстве.

Уже сейчас нейронные сети делают первые шаги в написании музыки и создании картин. Здесь, кстати, возникает проблема авторских прав. Пока что неясно, кому же они принадлежат: машине или же написавшему код программисту?

Этот вопрос и предстоит решить в ближайшее время. Нейросети найдут свое применение и в более «приземленных» сферах жизни. Потенциальные экономические риски могут быть обнаружены с помощью технологий машинного обучения, а распознавание лиц даст возможность быстро находить преступников.

В то же время, человечество может столкнуться с полным отсутствием тайны личной жизни. Никому не захочется жить в атмосфере полного контроля, как в худших мирах-антиутопиях. В общем, тема интересная и захватывающая.

Беспилотные автомобили

Развитие ИИ приведет и к прорыву в этой сфере. Беспилотные автомобили можно встретить на дорогах уже сейчас. Для их правильной работы необходимо большое количество датчиков и соответствующее ПО. К сожалению, огрехов в работе этих автомобилей пока что предостаточно. Статистику ДТП не стоит анализировать, поскольку таких автомобилей на дорогах совсем мало, но что технология еще сыра и нуждается в доработке – очевидно.

В будущем может быть создана специальная инфраструктура: например, опасные участки дорог можно оснастить датчиками, с которыми беспилотники будут обмениваться данными точно так же, как и с другими автомобилями. В целом же, беспилотные автомобили обладают огромным потенциалом как в сфере грузовых, так и пассажирских перевозок, так что не сомневайтесь, в ближайшее время новостей из этой отрасли будет более чем достаточно.

Летательные беспилотники

Надо полагать, что дроны перейдут из категории игрушек и развлечений с сугубо профессиональную сферу. Уже сейчас запуск БПЛА сопряжен с множеством трудностей: от регистрации воздухоплавательного аппарата до получения разрешения на полет, что отбивает охоту у простых пользователей запускать дроны ради развлечения. Зато они найдут свое применение у журналистов, операторов, видоеблогеров. Кроме того, дроны – удобное средство доставки мелких грузов.

В последнее время возникла идея создания летающего такси на основе беспилотника. Если разработки в этой сфере продолжатся, вероятно, в ближайшие 10 лет мир увидит промышленные образцы таких девайсов.

Цифровые валюты

По большому счету, мы уже движемся к переходу на полностью цифровую валюту, оплачивая покупки в магазинах пластиковыми картами, а то и бесконтактно с помощью смартфонов с NFC. Тут как раз кстати пришелся blockchain, на основе которого в перспективе и будет строиться цифровая валюта. Разумеется, бумажные деньги не исчезнут в одночасье, но уменьшение наличности в наших кошельках с течением времени уже ни у кого не вызывает сомнений.

Редактирование генома

В середине 2010-х годов возникла технология CRISPR, дальнейшее развитие которой в теории поможет избавиться от заболеваний, передающихся по наследству. Наиболее упрощенно эту технологию можно представить так: из цепочки ДНК удаляется ген, способствующий развитию заболевания, а на его место внедряется здоровая копия из парной хромосомы. Проводить эту операцию необходимо на стадии эмбриона. Также данная технология может найти применение для борьбы с потенциально болезнетворными бактериями. Так что новое десятилетие готовит нам развитие геномной медицины, которая сейчас еще только зарождается.

Говорить о безопасности и надежности таких процедур можно будет только после многочисленных исследований и клинических испытаний, однако уже сейчас перед учеными встают вопросы этики, ведь в теории с помощью редактирования генома можно изменить, например, внешность. Ведутся споры о корректности вмешательства в задуманное природой, не говоря уже о безопасности подобных операций.

Интернет тела

Достаточно новое веяние в медицине, возникшее совсем недавно. Понятие аналогично Интернету вещей, которое уже прочно вошло в обиход. Подход подразумевает использование умных имплантантов, которые будут составлять единую экосистему в организме пациента.

Сделает ли это нас киборгами? В ближайшие годы такой вариант маловероятен, но что будет через 50 лет? Сейчас все это не более чем теория, поскольку отсутствует как соответствующая техническая база, так и юридическое регулирование подобных устройств. Будем ждать новостей.

Повседневная жизнь

Помимо проникновения роботов во все сферы жизни, о которой говорилось выше, произойдут еще несколько изменений:

• Стриминговые сервисы прочно войдут в нашу жизнь, а количество пиратского контента сократится;
• Носимые гаджеты наподобие смарт-часов прибавят в функциональности;
• Увеличится количество приложений, использующих нейронные сети. Это касается, в первую очередь, софта для обработки изображений и видео, создания медиаконтента.

[guid] => https://jobius.com.ua/news/?p=88084 [photo] => https://jobius.com.ua/news/wp-content/uploads/2020/08/kakimi-budut-tehnologii-blizhajshego-desjatiletija.jpg [post_name] => kakimi-budut-tehnologii-blizhajshego-desjatiletija ) )

Сиделка в Ростове на Дону ✔ Агентство сиделок Ростова на Дону «Добрые люди»

Если близкий человек слаб или серьезно болен, остальным членам семьи приходится посвящать время постоянному уходу, принося в жертву свободное время и личные интересы. К сожалению, постоянно находиться рядом работающие люди просто не имеют возможности. При этом у большинства нет необходимых для досмотра навыков. Правильный выход из сложной ситуации – услуги опытной сиделки. Агентство по уходу за престарелыми в Ростове-на-Дону «Добрые люди» — патронажная служба, которая предложит помощь ответственных, внимательных сотрудников с медицинским образованием.

Сиделка – помощник, в обязанности которого входит досмотр и уход за человеком в течение рабочей смены или на условиях круглосуточного найма с проживанием.  Агентство располагает резюме многих специалистов с медицинским образованием и внушительной практикой, способных помочь в наиболее сложный период или на постоянной основе. Патронаж в Ростове-на-Дону охватывает услуги в условиях стационарного лечения в условиях госпиталя, сопровождение в дороге и помощь на дому. Уход за пожилыми людьми включает:

• поддержание постоянного контакта с человеком и его родными;
• контроль над своевременностью режима сна и бодрствования, соблюдением рациона питания и выполнения врачебных предписаний;
• поддержание комфортных условий, а также постоянное проявление терпимости и милосердия;
• проявление инициативы по ситуации: информирование о состоянии пациента, а также вызов, при необходимости, врачей.

Плюсы сиделки из патронажной службы

Она не станет отвлекаться, болтать по телефону и небрежно относиться к «капризам» пациента. Специалисты, которых рекомендует центр, действуют строго в соответствии с корпоративной этикой и вашими рекомендациями по уходу. Дорогой человек окажется в надежных руках, если обратиться в агентство «Добрые люди» в Ростове-на-Дону.

Агентство по уходу за пожилыми людьми – своевременная поддержка в сложный миг, подбор сиделки в соответствии с навыками, стажем и особенностями предоставления услуги, а также адекватная стоимость. Доверяйте опытному персоналу и ответственному выполнению обязанностей по досмотру за пациентами и пожилыми людьми!

За пожилыми немцами все чаще ухаживают сиделки из Восточной Европы | Анализ событий в политической жизни и обществе Германии | DW

В доме пожилой супружеской пары из Бонна — время обеда. Обед подает 45-летняя венгерка Марта — домработница и сиделка в одном лице. Марта делает все: готовит, стирает, убирает, укладывает стариков в постель. Рабочий день не заканчивается никогда: минувшей ночью ей пришлось подниматься 12 раз, чтобы отвести старика в туалет. «Я надеялась, что смогу поспать хотя бы пару часов после обеда, но ничего не вышло», — сетует Марта.

Легально — слишком сложно и дорого

Вот уже год как Марта заботится о пожилых немцах. У нее нет специального образования — по профессии она педагог. С таким образованием она не имеет права выполнять всю работу по уходу за больными, поэтому в дом ежедневно приходит медицинская сестра, чтобы проверить у стариков уровень сахара в крови, вколоть инсулин, проследить за приемом других лекарств.

Далеко не всем пенсионерам удается обходиться без посторонней помощи

Сегодня за пожилыми немцами ухаживают около 150 тысяч женщин из восточноевропейских государств-членов ЕС: Польши, Венгрии, Болгарии и других. Легально — по немецким законам — работают лишь немногие из них, объясняет профессор Германского института прикладных исследований по уходу за больными и престарелыми Михаэль Исфорт (Michael Isfort). Такие женщины предлагают свои услуги самостоятельно или устраиваются на работу через германскую биржу труда. Семьи, нанимающие сиделок, выступают в качестве работодателей.

Немецкое трудовое законодательство обязывает работодателя платить за работника взносы в фонд социального страхования, рабочее время сиделки не должно превышать 38,5 часа в неделю. В договоре должны быть четко оговорены продолжительность отпуска, количество и длительность перерывов во время рабочего дня. «А что, если больному или старику понадобится помощь и ночью, как тогда высчитывать отработанные часы?» — вопрошает Михаэль Исфорт.

Кроме того, трудоустройство домработниц связано с большой бюрократической волокитой. Семьи, которые в них нуждаются, вынуждены выступать в роли фирм: обивать пороги различных инстанций, заполнять бесконечные бланки и формуляры, подавать налоговые декларации. Все это — крайне сложно и накладно.

Главное условие — знание немецкого языка

В ФРГ 1,5 миллиона человек нуждаются в домашнем уходе

Неудивительно, что многие семьи предпочитают более простую и доступную альтернативу. Сиделку присылает в Германию зарубежная фирма-посредник. Так попала в Бонн Марта. По ее словам, в Венгрии — немало фирм, которые предлагают работу в ФРГ, своего работодателя она нашла через интернет. На трудоустройство ушли считанные дни. Главным условием приема на работу было свободное владение немецким языком. «После короткого собеседования мне предложили отправиться в Германию», — вспоминает Марта.

Пожилая пара из Бонна как раз нуждалась в домработнице. Дочь Рут не могла ухаживать за родителями — у нее трое детей и работа. В дом престарелых родители Рут переезжать не хотели. Оплачивать услуги немецкой сиделки семья была не в состоянии. Тогда Рут обратилась в агентство по трудоустройству, которое сотрудничает с той самой венгерской фирмой-посредником. Десять дней спустя Марта уже работала в Бонне. Бюрократических барьеров практически не было, а все налоги и социальные взносы сиделка платит самостоятельно — у себя на родине.

Пока такая схема трудоустройства применима только в пределах Евросоюза. Однако на фоне ухудшающейся демографической ситуации в Германии серьезно подумывают над тем, чтобы разрешить въезд персонала по уходу за больными и престарелыми и из других стран Восточной Европы.

Зарплата в 900 евро и ненормированный рабочий день

Ежемесячно Рут — дочь клиентов Марты — перечисляет венгерской фирме-посреднику 1880 евро. Однако, по ее словам, на оплату труда сиделки остается только половина этой суммы. «Как точно распределяются эти деньги, мне неизвестно, — говорит Рут. — Часть суммы уходит на налоги, часть — в карман венгерской фирмы-посредника, часть — немецкому агентству по трудоустройству».

В Германии за стариками редко ухаживают члены семьи

Таким образом, немецкий закон о минимальной оплате труда сиделок, который распространяется и на иностранных сотрудников, не выполняется. Не оговорено в трудовом соглашении и рабочее время. «Согласно договору, сиделка имеет право на один выходной день в неделю», — уточняет Рут.

В то же время для многих людей, нуждающихся в уходе, сиделки из стран Восточной Европы — это спасательный круг. Профессор Михаэль Исфорт называет этих женщин главным подспорьем германской системы по уходу за больными и престарелыми. «Без них в Германии могла бы сложиться критическая ситуация», — убежден Исфорт.

Автор: Юстина Броньска / Виктор Вайц

Редактор: Татьяна Петренко

Сиделки в Иркутске – Агентство сиделок Иркутска «Добрые люди»

Человек преклонных лет, с ограниченными возможностями или в тяжелом состоянии нуждается в постоянном уходе и присмотре. Простейшие бытовые обязанности — замена постели, приготовление пищи, гигиенические процедуры — ложатся на плечи близких родственников и членов семьи. Как правило, именно близкие присматривают за таким человеком, но обеспечить полноценную заботу и медицинское обслуживание им не всегда просто. Без чужой помощи не получится ни выехать на отдых, ни полноценно работать или учиться.

Центр социального обслуживания «Добрые люди» предлагает альтернативу. Мы поможем с медобслуживанием и уходом, транспортировкой и размещением вашего родственника в частном пансионате. Наш центр предлагает весь спектр услуг для тех, кто нуждается в профессиональной помощи по уходу за лежачими больными.

 

Наши услуги

Основное направление нашей деятельности — помощь в подборе постоянной сиделки. В нашей базе вы сможете выбрать квалифицированную сиделку с опытом работы, медицинским образованием, хорошими коммуникативными навыками. Она освободит вас от необходимости проводить 24 часа в сутки рядом с больным человеком, подарит личное время, обеспечит вашего близкого хорошим уходом. В обязанности сиделки входит не только стандартный уход (кормление, мытье, замена белья и одежды), но и контроль физиологических показателей: температуры, давления, сахара в крови и т.д.

Наша задача — предложить выбор сиделок и позаботиться о том, чтобы уход осуществлял профессионал. Мы уладим все юридические вопросы, своевременно заменим специалиста, предоставим полную информацию о каждом сотруднике и финансовую отчетность.

 

Доп. услуги:

• Транспортировка лежачих больных. Если вашему близкому стало намного хуже, и ему требуется медицинская помощь или пребывание в хосписе, если вы хотите отправить его в пансионат, мы поможем. У нас есть автомобили, оборудованные под перевозку лежачих больных, и сотрудники, готовые помочь с носилками.
• Подбор частного пансионата. В нашей базе — только проверенные заведения, в которых заботятся о лежачих больных и пожилых людях.
• Школа ухода. Если вы хотите самостоятельно ухаживать за близким человеком, но не знаете, что делать, и как не упустить важное, посетите нашу школу — и вы узнаете об особенностях ухода, научитесь измерять давление и другие физиологические показатели, делать инъекции и ставить капельницы.
• Помощь семейного юриста. Юрист поможет при оформлении завещания, дарственной, ренты, расскажет о нюансах взаимоотношений между лежачим больным и его родственниками с точки зрения закона.

Медсестринское исследование, чтобы проверить, может ли мед помочь пациентам со стомой

Медсестры-исследователи из Великобритании проводят национальное исследование, чтобы выяснить, могут ли мешочки для стомы, изготовленные из новозеландского меда, уменьшить раздражение кожи.

Хотя большинство пакетов для стомы содержат гелеобразователь гидроколлоид, который действует как барьер для защиты кожи от жидкостей и веществ организма, некоторые пациенты становятся чувствительными к нему и на определенном этапе испытывают проблемы с кожей вокруг места отверстия.

«Считается, что мед помогает уменьшить воспаление»

Давид Вогели

Чтобы попытаться найти решение проблемы, исследователи из Университетской больницы Саутгемптона NHS Foundation Trust и Университета Саутгемптона исследуют, могут ли продукты для стомы, содержащие мед манука, предотвратить осложнения.

Команда, возглавляемая доктором Дэвидом Вогели, стремится привлечь 30 здоровых людей со стомами для участия в исследовании.

Участники будут испытывать как стандартную, так и медовую стомы в течение восьми недель после скринингового теста, чтобы определить соответствие критериям отбора.

«В настоящее время около 80% людей со стомой испытывают проблемы с кожей», — сказал д-р Вогели, доцент кафедры медсестер исследовательской группы по здоровью кожи.

Медсестринское исследование, чтобы проверить, может ли мед помочь пациентам со стомой

Давид Вогели

Он сказал: «Считается, что мед помогает уменьшить воспаление, которое может вызвать проблемы с кожей, и увлажняет кожу, что может обеспечить дополнительную защиту.

«Однако на данный момент нет никаких убедительных доказательств этого, поэтому мы надеемся, что это исследование докажет, так ли это, и поможет обеспечить пациентам доступ к наилучшему для них варианту», — добавил он.

Однако он отметил, что набор участников для исследования был «медленным», и команде нужно было больше пациентов, чтобы они могли начать работу и завершить свою оценку.

Любой, кто заинтересован в участии в исследовании или знает кого-либо, может узнать больше, позвонив по телефону 023 8120 4989 или отправив электронное письмо [email protected]

Кабельный техник | Вашингтон, округ Колумбия

Кабельный техник | Вашингтон, округ Колумбия | VERIGENT

Расположение:

Начать новый поиск:

кабельная разводка данныхбиксиструктурированная кабельная разводка кабельная техникаволоконная оптикабуммедкабельная связкапутьяконтроль доступаfiberavjacksdata centercatpanelcontrol systemsstaffing services в коммерческой среде.

Разъемы для подключения данных и патч-панели

Выполните тестирование и устранение неисправностей оборудования и кабелей

Установите лестничные стойки, сетевое оборудование и телефонное оборудование

Требуются ручные телекоммуникационные инструменты и средства индивидуальной защиты

Предыдущий опыт подключения кабеля Cat 5/6

Предыдущий опыт работы в коммерческой строительной среде на лестницах или подъемниках

Показать полное описание Истек 1 год назад Неактивная работа

Ссылки для VERIGENT

http: // js-staffing-14d213bd3c5.force.com/careers/ts2__JobSearchКарьера в VERIGENThttp: //verigent.com/looking-for-work/contactContact VERIGENT

Аналогичные вакансии:

Cable TechnicianInspired Technology and Communications (ITC) North Easton, MAPКвалификация по прокладке, заделке, тестированию и устранению неисправностей кабелей ТехникMetro SystemsДжонстаун, Огайо Должен уметь устанавливать оптоволокно в сетевое оборудование.Техник по кабельным технологиямWakelight Technologies Inc Перл-Харбор, HIbull. Установка структурированных кабельных систем Cat 5e6 в соответствии с отраслевыми стандартами, такими как EIATIA, BICSI, NEC.Bull Pull, Route и маркировка Cat6 и других видов сетевых кабелей. Постоянный специалист по кабельным технологиямRightechPhoenix, AZRIGHTECH — ведущий национальный поставщик услуг технического персонала, и в настоящее время мы ищем квалифицированных кандидатов на должность специалиста по кабельным технологиям в Фениксе, штат Аризона, начиная с 18 долларов США — 24 доллара в час Постоянный специалист по кабелям — (данные) Маркпоинте, Даллас, Техас, протягивание, перевязка, заделка, маркировка различных волоконно-оптических кабелей. Монтажник и техник низковольтных кабелей. проекты модернизации инфраструктуры в Нью-Мексико и прилегающих штатах.Штатный специалист по кабельным технологиям NSC Technologies Вирджиния-Бич, штат Вирджиния Обязанности специалиста по кабельному оборудованию: протягивание и прокладка кабелей CAT5, CAT6 и волоконно-оптических кабелей в коммерческой среде новой конструкции и существующей конструкции. удобная работа с ножничными / стреловыми подъемниками, если это необходимо. Вытягивание, маршрутизация, установка и отключение структурированной кабельной инфраструктуры в коммерческой среде. Кабельный техник (OH) Rightech Нью-Олбани, OHRIGHTECH является ведущим национальным поставщиком услуг технического персонала, и в настоящее время мы ищем квалифицированных кандидатов для кабельного техника из Нью-Олбани, штат Огайо, начиная с как можно скорее.Специалист по структурированному кабелю Внешний источникСан Антонио, штат Техас Знакомство со стандартами BICSI, EIA, TIA или NEC Постоянный съемник кабелей NSC Technologies Луисвилл, KYJob Обязанности: протягивание и прокладка кабелей CAT5, CAT6 и оптоволоконных кабелей в коммерческой среде новой конструкции и существующей структуры Разъемы для подключения данных Установка опорных конструкций ( лестницы, стойки, j-образные крюки) Должно быть комфортно работать с ножничными / стреловыми подъемниками, если это необходимо. Вытягивание, прокладка, установка и подключение структурированной кабельной инфраструктуры в коммерческой среде.Кабельный техник NSC TechnologiesColumbus, GAJob Обязанности: протягивание и прокладка кабелей CAT5, CAT6 и волоконно-оптических кабелей в коммерческой среде новой конструкции и существующей конструкции. при необходимости — прокладка, маршрутизация, установка и завершение структурированной кабельной инфраструктуры в коммерческой среде. Black Box — специалист по инфраструктуре / специалист по кабельному соединению. · Доказанная способность устанавливать, терминировать и тестировать кабели низкого напряжения, включая витую пару, коаксиальный кабель, кабель с ограничением мощности, многожильный и одножильный кабель низкого напряжения и оптоволоконный кабель.Штатный специалист по кабельным технологиям 36886Anistar Technologies Отдых для путешественников, специалист по кабельным системам Обязанности: протягивание и прокладка кабеля CAT5 или CAT6 в коммерческой среде нового строительства и существующей конструкции Подключение разъемов для передачи данных Установка опорных конструкций (лестниц, стоек, J-образных крюков) Строительство шкафов для кабелей (MDF / IDFs) Кабельный техник Базовый объем работ включает: протягивание, маршрутизация, установка и завершение структурированной кабельной инфраструктуры в коммерческой среде. Монтажник кабеля на уровне входаTradeSTARSan Антонио, специалист по монтажу кабеля на уровне TX. VoltageOutsource Сан-Диего, специалист по электроснабжению — специалист по низковольтному оборудованию Постоянно

каст-специфических различий в микробных сообществах кишечника медоносных пчел (Apis mellifera)

Abstract

Известно, что динамика симбионтов-хозяев влияет на фенотип хозяина, но их роль в социальном поведении еще предстоит исследовать.Различия в истории жизни разных каст медоносных пчел ( Apis mellifera ) могут влиять на состав сообщества кишечных симбионтов, что, в свою очередь, может влиять на кастовые фенотипы. Мы исследовали взаимосвязь между динамикой хозяина-симбионта и социальным поведением, охарактеризовав микробиом задней кишки среди различных каст медоносных пчел: маток, самцов и двух типов рабочих, медсестер и собирателей. Несмотря на общую среду улья и передачу пищи изо рта в рот среди сокамерников, мы обнаружили разделение микробиомов кишечника маток, рабочих и самцов.Микробиомы кишечника медсестер и собирателей были подобны ранее охарактеризованным микробиомам рабочих медоносных пчел и друг другу, несмотря на различия в диете, активности и воздействии внешней среды. Микробиомы королевы были обогащены бактериями, которые могут улучшить метаболическое преобразование энергии из пищи в производство яиц. Мы предполагаем, что два типа рабочих, которые имеют наибольшее разнообразие операционных таксономических единиц (OTU) бактерий, играют центральную роль в поддержании микробиома колонии.Собиратели могут заносить в колонию новые штаммы бактерий из окружающей среды и передавать их медсестрам, которые фильтруют и распространяют их по остальной части колонии. Наши результаты подтверждают идею о том, что динамика хозяина-симбионта влияет на состав микробиома и, соответственно, на социальное поведение хозяина.

Образец цитирования: Kapheim KM, Rao VD, Yeoman CJ, Wilson BA, White BA, Goldenfeld N, et al. (2015) Кастовые различия в микробных сообществах кишечника медоносных пчел ( Apis mellifera ).PLoS ONE 10 (4): e0123911. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0123911

Академический редактор: Эрвин Г. Зетендал, Университет Вагенингена, НИДЕРЛАНДЫ

Поступила: 16 октября 2014 г .; Одобрена в печать: 24 февраля 2015 г .; Опубликован: 15 апреля 2015 г.

Авторские права: © 2015 Kapheim et al. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника

Доступность данных: Доступность данных Последовательность данных депонирован в NCBI (BioProject PRJNA222391).Индивидуальные данные пчел и идентификаторы последовательностей находятся в таблице S1. Репрезентативные последовательности каждой OTU приведены в Приложении S1.

Финансирование: Пионерская награда директора NIH (http://commonfund.nih.gov/pioneer/index) # 1DP1OD006416 для GER, Стипендия Института геномной биологии UIUC для CJY (http: //www.igb. illinois.edu/content/postdoctoral-fellowships-genomic-biology), а также награду UIUC Sociogenomics Initiative Award для VDR. Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

Введение

Динамика «хозяин-симбионт» становится богатым источником фенотипического разнообразия среди людей [1,2]. Например, известно, что изменение состава кишечных бактерий влияет на усвоение питательных веществ хозяином [3,4], иммунную функцию [5,6] и предпочтение партнера [7]. Точно так же сообщества симбиотических кишечных бактерий отражают вариации фенотипа их хозяев, и на них влияют диета хозяина, активация иммунной системы и связанная с ними физиология [8,9].Таким образом, фенотипическое разнообразие среди людей может быть результатом взаимного обмена между хозяином и симбионтом, но мы только начинаем понимать динамику этих отношений.

Социальные виды насекомых предоставляют прекрасные возможности для изучения взаимосвязи между составом сообщества симбиотических бактерий и фенотипическими вариациями хозяина. У многих видов муравьев, пчел и ос особи в одной и той же колонии демонстрируют крайние различия в поведении, сопровождающиеся различиями в рационе, питательном статусе, физиологии и продолжительности жизни [10].Например, королевы медоносных пчел ( Apis mellifera ) спариваются в раннем возрасте, а затем остаются в улье, специализирующемся на производстве яиц. По сравнению с другой женской кастой, работницей, царица крупнее, с более развитыми репродуктивными органами и живет на порядок дольше. Рабочие специализируются на уходе за выводком в раннем возрасте в качестве медсестер и к концу своей 4–7-недельной взрослой жизни переходят к работе вне улья в качестве фуражиров, но не спариваются и редко размножаются. Самцы проводят большую часть своей ранней жизни, отдыхая или выпрашивая пищу у медсестер, и их поведение и физиология сосредоточены на спаривании.

Некоторые фенотипические различия среди маток, рабочих и самцов связаны с изменением рациона во время развития или во взрослом возрасте. Дифференциальный доступ к питательным веществам влияет на определение касты на стадии личинки, при этом будущие личинки матки получают больше маточного молочка, чем будущие рабочие [11]. Во взрослом возрасте королевы получают диету с высоким содержанием белка, в то время как качество рациона рабочих варьируется в зависимости от продолжительности их жизни [11,12]. Медсестры придерживаются диеты, богатой пыльцой, и кормят сородичей внутри улья [13]. Собиратели не едят пыльцу, и хотя они получают некоторое количество белков и липидов от медсестер, у них низкий уровень запасов питательных веществ и протеолитических ферментов кишечника [13,14].Потребление пыльцы, протеолитическая активность и переваривание пыльцы у мужчин ниже, чем у рабочих [15]. Эти связи между социальным поведением, диетой и физиологией кишечника предполагают, что также может быть связь между социальным поведением и микробиотой кишечника. Однако различия в динамике хозяин-симбионт между разными кастами в колониях эусоциальных насекомых еще не исследованы.

Связь между микробными симбионтами и социальностью пчел предполагалась ранее [16–18]. Внутри социальных видов тесные физические взаимодействия создают потенциал для передачи кишечной микробиоты в масштабах всей колонии, что позволяет предположить, что между отдельными членами колонии должно быть небольшое разнообразие микробиома [6,17,19–22].Поразительно похожие микробиомы кишечника наблюдались у рабочих из разных колоний, континентов и рас медоносных пчел [17,23–28]. Микробиомы кишечника также очень похожи между 9- и 30-дневными рабочими, которые, вероятно, представляют подклассы рабочих (например, медсестры и собиратели, соответственно) [20]. Однако вариации микробиома, связанные с работниками, занимающимися кормлением и кормлением, подробно не исследовались. Более того, микробиом маток и самцов не охарактеризован.

Мы исследовали связь между социальным поведением хозяина и микробиомом, исследуя изменчивость бактериального сообщества в колониях медоносных пчел. Мы предположили, что микробиомы кишечника в колонии медоносных пчел различаются в зависимости от социальной роли. Фенотипические вариации среди социальных каст насекомых могут возникать из-за вариаций в микробиоме, если кастовые черты связаны с метаболическими свойствами кишечных микробов. В свою очередь, кастовые различия в воздействии бактерий в окружающей среде, иммунитете, доступе к ресурсам и кишечной среде могут влиять на состав сообщества кишечных бактерий.Мы исследовали эти возможности, сравнив состав микробиома среди каст внутри и между семьями медоносных пчел.

Методы и материалы

Сбор проб

Мы собрали маток, самцов, медсестер и собирателей из пчелиных семей ( A . mellifera ) в Университете штата Иллинойс в Урбана-Шампейн. Для сбора с этих колоний не требовалось специальных разрешений, потому что они принадлежат университету и A . mellifera не является исчезающим или охраняемым видом. Одна матка, шесть самцов, шесть собирателей и шесть медсестер были собраны из каждой из трех типичных колоний, возглавляемых естественным образом спарившимися матками в сентябре 2011 года. Мы собрали семь дополнительных фуражиров из кормушки для пыльцы в крытой полетной камере, в которой в феврале находились две колонии. 2011. Мы объединили задние кишки четырех особей из этой коллекции в одну выборку и проанализировали трех особей отдельно. Мы также включили образцы семидневных девственных маток, которые были собраны летом 2003 г. после выращивания в «банке маток» (колонии, которая используется для хранения маток).Эти не репродуктивные королевы содержались в клетках внутри колонии, чтобы их могли кормить медсестры, но они еще не функционировали как королевы. Мы объединили задние кишки четырех особей из этой коллекции в один образец и проанализировали четырех особей отдельно. Отдельных пчел собирали живыми и хранили при -80 ° C. Мы удалили заднюю кишку и ее содержимое у каждой пчелы с помощью стерильного вскрытия и хранили в растворе для гранул PowerSoil-htp (Mo Bio, Карлсбад, Калифорния) при -20 ° C.

Выделение ДНК и секвенирование содержимого задней кишки

Мы экстрагировали ДНК из отдельных задних кишок с помощью набора для выделения ДНК PowerSoil (Mo Bio, Карлсбад, Калифорния), следуя инструкциям производителя с дополнительным этапом взбивания шариков (120 с при 6.5 метров / с). Гипервариабельная область V1 – V3 гена 16S рРНК была амплифицирована с помощью ПЦР с использованием меченых праймеров 27f и 534r, сконструированных с некоторыми вырожденными нуклеотидами [29]. Было продемонстрировано, что эта область гена 16S рРНК наиболее точно отражает полноразмерный ген 16S рРНК [30] и очень поддается таксономической реконструкции [31,32]. Ампликоны секвенировали с использованием технологии MiSeq (чтения 2 × 300 н.). Мы провели титрование 65 образцов, объединенных в соответствии с их концентрацией ДНК.Затем мы повторно нормализовали 60 образцов, которые дали> 1100 высококачественных пар считываний для полного массового прогона. Пять образцов, которые дали менее 1100 считываний парных концов, не прошли ПЦР-амплификацию (на что указывает отсутствие полосы на геле). Эти образцы дали небольшое количество считываний (24–325 парных концов) и поэтому служили в качестве отрицательного контроля: образцы, которые не смогли сформировать полосу на геле, также не смогли создать надежный профиль микробиома. Эти пять образцов были исключены из дальнейшего анализа.

Трубопровод биоинформатики

Общее количество считанных последовательностей составило 23 229 704 (11 614 852 пары).

Чтения были сгруппированы в OTU путем реализации шагов, используемых в конвейере метагеномики Tornado 2 [33]. Поскольку пары чтения перекрывались, сначала они были объединены с помощью USEARCH v7.0 [34]. Из 11 614 852 сырых пар чтения 9 242 697 (79,6%) были успешно объединены. Центры OTU (консенсусные последовательности) были сначала идентифицированы путем дерепликации объединенных чтений и кластеризации с помощью USEARCH с радиусом по умолчанию 3.0 (соответствует 97% идентичности последовательностей). В результате было создано 112 центров OTU; затем они были таксономически классифицированы с использованием mothur [35] (с classify.seqs, с использованием метода Ванга и базы данных Greengenes). Те центры OTU, которые не были классифицированы на уровне видов, были отброшены, в результате чего осталось 83 OTU. Наконец, мы использовали USEARCH (команда usearch_global с требованием 97% идентичности последовательности), чтобы попытаться назначить все объединенные чтения одному из центров OTU. Таким образом, 6 252 345 объединенных операций чтения были успешно назначены одному из 83 OTU.

Классификация ОТЕ

Мы классифицировали каждую последовательность на уровне семьи и использовали взрыв [36], чтобы идентифицировать те OTU, которые ранее были обнаружены у пчел (blastn, значение е <0,0001). Мы определили четыре OTU как принадлежащие эукариотам и удалили их из дальнейшего анализа. OTU, классифицируемые как бактерии, ранее обнаруженные у пчел, обозначаются названиями филотипов, впервые использованными Babendreier et al . [37]. Все OTU, принадлежащие к каждому филотипу пчелы, принадлежали к одним и тем же семействам: «альфа-1» — Bartonellaceae, «альфа-2».1 »-Acetobacteraceae,« альфа-2.2 »-Acetobacteraceae,« бифидо »-Bifidobacteriaceae,« твердый-4 »-Lactobacillaceae,« твердый-5 »-Lactobacillaceae,« гамма-1 »-Orbaceae,« гамма-2 »-Orbaceae , «Бета» — Neisseriaceae. С тех пор описания некоторых из них были опубликованы, и в этом случае название рода приводится после названия филотипа. «Бета» филотип — это Snodgrassella alvi . Филотипы «гамма» и некоторые неклассифицированные последовательности могут включать Gilliamella apicola (ранее «гамма-1») [38], Frischella perrera (ранее «гамма-2») [39], «гамма-3» и «Гамма-4» [24].Филотип «альфа-2.2» — это Parasaccharibacter apium [40].

Статистический анализ

Чтобы исследовать паттерны разнообразия OTU, частотная таблица OTU в каждой выборке была преобразована в матрицу несходства Брея-Кертиса с использованием программного обеспечения Primer 6 с дополнительным пакетом PERMANOVA + [41]. Все последующие статистические анализы были основаны на матрице несходства Брея-Кертиса, за исключением случаев, когда это указано. Мы оценили неконтролируемые отношения между отдельными микробиомами с кластеризацией по среднему сцеплению и неметрическим многомерным масштабированием (nMDS) в Primer 6.Чтобы описать вариацию, объясняемую ординацией nMDS, мы вычислили R ² Пирсона для корреляции расстояний между выборками в сокращенном пространстве nMDS с исходными различиями Брея-Кертиса [42]. Мы рассчитали дисперсию от центроида с помощью многомерного расширения теста Левена на однородность среди людей в каждой социальной касте с помощью функции PERMDISP в Primer 6. Мы рассчитали индекс разнообразия Шеннона для каждого человека с функцией «разнообразия» в веганском [ 43], и использовал их в ANOVA в Stata (v.9.2), за которым следуют попарные пост-тесты с поправкой на Бонферрони между кастами в GraphPad. Чтобы разделить дисперсию в матрице несходства Брея-Кертиса, мы использовали полупараметрическую функцию ПЕРМАНОВА в Primer 6 с кастой в качестве фиксированного эффекта, колонией в качестве случайного эффекта и взаимодействием между колонией и кастой с частичной суммой типа III. квадратов и выборки Монте-Карло, переставленной по остаткам в рамках сокращенной модели. За этим последовали попарные тесты между кастами с аналогичными параметрами, за исключением того, что перестановки Монте-Карло не ограничивались исходными данными.Этот тест считается полупараметрическим, поскольку он не основан на предполагаемом распределении, и поэтому для получения статистики теста используются методы перестановки [41]. Чтобы проверить влияние редких OTU, мы повторили матрицу несходства Брея-Кертиса и анализ PERMANOVA с логарифмически преобразованными частотными данными. Это снижает вклад очень распространенных OTU по сравнению с редкими OTU [41]. Мы оценили отличимость каждой группы с помощью контролируемого канонического анализа основных координат (CAP) в Primer 6 и перекрестной проверки с исключением по одному.Канонические оси были рассчитаны для максимального разграничения кастовых групп, и эти оси использовались для проверки предсказуемости частоты OTU на принадлежность к кастам. Мы также определили филотипы, численность которых в значительной степени предсказывалась принадлежностью к кастам с отрицательной биномиальной регрессией, используя общее количество считываний в качестве переменной воздействия. Мы проследили это с помощью ANOVA в Stata (v 9.2) и попарных пост-тестов с поправкой Бонферрони между кастами в GraphPad.

Результаты

Краткое описание последовательностей и классификации

После фильтрации мы сохранили 6 251 931 из всех последовательностей, что составляет 79 OTU.Эти последовательности были распределены по 60 образцам (4 матки, 16 самцов, 22 собирателя, 18 медсестер; 4 образца матки и 2 самца были исключены из анализа из-за низких результатов ПЦР) (распределение считываний см. На рис. S1). Количество последовательностей значительно различалось между кастами (т. Е. Медсестры, собиратели, самцы, матки) (Kruskal-Wallis χ ² = 17,78, p = 0,0005, n = 60), у медсестер было больше всего чтения, а у маток — наименее. Абсолютное количество бактерий в задних кишках пчел не рассматривалось в этом исследовании и требует дальнейшего изучения.Разница в количестве считываний не повлияла на количество OTU, обнаруженных в каждой группе. Ни концентрация ДНК, ни количество прочтений не были значимыми предикторами числа OTU в отрицательной биномиальной регрессии после удаления образца с выбросами с более чем в 3,8 раза большим количеством прочтений, чем все другие образцы (LR χ ² = 3,02, n = 59, p = 0,22; S1 рис). Мы обнаружили в среднем 26,4 ± 6,93 ОТЕ на человека. Количество обнаруженных OTU существенно не различается между кастами (Kruskal-Wallis χ ² = 4.85, p = 0,18, n = 60). OTU были разделены на 44 таксономические группы на уровне семьи. Более 99% всех последовательностей принадлежали OTU, которые ранее были классифицированы как филотипы медоносных пчел [37].

Микробиомы различаются между кастами

Разделение микробных сообществ кишечника между кастами было выявлено с помощью кластеризации по среднему сцеплению (Рис. 1A). Все медсестры и сборщики из открытых колоний, за исключением одной медсестры, сгруппированы вместе с более чем 40% сходством.Медсестра, которая не объединялась с другими работниками, была исключительной с небольшим количеством считываний (S1, рис.). Этот образец кластеризуется отдельно от всех других образцов. Хотя среди выборок самцов наблюдалось заметное разнообразие (т.е.они образовывали несколько клад с переменным сходством), было несколько кластеров самцов с высоким сходством, в которые не входили королевы, медсестры или собиратели. Эта закономерность подтверждается графиком неметрического многомерного масштабирования (nMDS), который показывает перекрытие между медсестрами и собирателями и разделение этих двух типов рабочих от большинства самцов и маток (S2 Рис).Ординация nMDS дала двумерное решение с конечным значением напряжения 0,13, что объяснило 91% вариации исходных данных. Собиратели из домашних и открытых колоний, а также молодые и старые королевы не образовывали отдельных групп, поэтому мы объединили домашних и уличных сборщиков, а также молодых и старых маток для дальнейшего анализа ниже по течению.

Рис. 1. Индивидуальные кластеры микробиомов по кастам-хозяевам у медоносных пчел.

Красные ромбы обозначают ферзей; зеленые треугольники самцов; пурпурные треугольники рабочие-фуражиры; светло-синие квадраты медсестры работника.(A) Дендрограмма кластеризации средней связи частоты OTU. Метки на листах соответствуют формату caste: colonyID: IndividualID. Q — матки из зрелых колоний, Q7—7d старые матки, M — самцы, F — фуражиры, N — медсестры; колония «i1or2» — комнатная колония; PL — объединенная проба из закрытой колонии. (B) Неметрический многомерный масштабный график частоты OTU после логарифмического преобразования, который снижает влияние наиболее распространенных OTU. Значение стресса: 0,13 (C) Резюме индекса разнообразия Шеннона на основе частот OTU в социальных кастах.Линии представляют собой медианное значение индекса, прямоугольники обозначают межквартильный диапазон, усы — соседние значения, а маркеры — внешние соседние значения. Статистическое сравнение было выполнено с помощью ANOVA; буквы представляют значимые попарные различия с p <0,05 в пост-тестах. (D) Канонический анализ главных координат на основе матрицы несходства Брея-Кертиса частот OTU (без преобразования). Отдельные пчелы нанесены на канонические оси (CAP) 1 и 2, которые рассчитаны для максимального разграничения каст.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0123911.g001

Каста, колония и взаимодействие касты и колонии были значимыми факторами в полупараметрическом анализе дисперсии (таблица S2). Попарные сравнения показали, что бактериальные сообщества самцов задней кишки значительно отличались от рабочих (медсестер и собирателей), но не от маток (Таблица 1). Бактериальные сообщества задней кишки медсестер и собирателей также значительно отличались друг от друга. Мы повторили анализ полного набора данных после логарифмического преобразования, которое уменьшило вклад очень распространенных OTU по сравнению с редкими OTU.Различия между медсестрами и собирателями больше не были статистически значимыми (рис. 1B, таблица 2), что указывает на то, что различия между этими группами были вызваны различиями в доле очень распространенных OTU (например, Lactobacillus видов Firm-4 и Firm-5). . Лог-трансформация также выявила незначительно значимые различия между матками и рабочими (как медсестрами, так и сборщиками), предполагая, что матки могут иметь уникальный редкий микробиом.

Таблица 2. Результаты попарного сравнения дисперсии OTU между кастами медоносных пчел со сниженным влиянием наиболее распространенных OTU (PERMANOVA на основе матрицы несходства Брея-Кертиса логарифмически преобразованных подсчетов считываний).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0123911.t002

Чтобы исследовать роль различий в однородности внутри групп, мы измерили многомерную дисперсию от людей в каждой касте до их соответствующих центроидов. Результаты выявили значительные различия в однородности в целом (F = 22,83, p = 0,001, n = 60) и значительные попарные различия в однородности между самцами и обоими типами рабочих, а также между матками и обоими типами рабочих, но не между самцами и матками или медсестры и фуражиры (таблица 3).Это указывает на то, что различия в дисперсии, вероятно, вносят вклад в общие различия в микробиоме кишечника мужчин и рабочих, маток и рабочих.

Индекс разнообразия Шеннона, который учитывает как численность, так и равномерность OTU в каждой выборке, значительно отличался между группами (ANOVA: F = 49,15, p <0,0001, n = 60; рис. 1C). У медсестер и собирателей был самый высокий индекс разнообразия, и оба имели значительно большее разнообразие, чем самцы или королевы (пост-тест: p <0.05), но существенно не отличались друг от друга.

Мы проверили силу связи между многомерными данными OTU и кастой с помощью канонического анализа главных координат. Было четкое разделение каст по каноническим осям 1 и 2, которые вместе объясняют 39% дисперсии (рис. 1D). Перекрестная проверка, которая использует дискриминантный анализ для классификации выборок на основе многомерных данных, показала, что частота OTU правильно предсказывала членство в группах для 47 из 60 (78.3%) физические лица. Данные микробиома были наиболее предсказуемы для принадлежности к кастам самцов (93,8% правильных), медсестер (72,2% правильных) или собирателей (77,3% правильных), но сила этой ассоциации была ниже для королев (50% правильных). Было предсказано, что пять ошибочно идентифицированных собирателей — это медсестры, а четыре из пяти ошибочно идентифицированных медсестер — фуражиры. Эти результаты подчеркивают сходство между двумя типами рабочих. Один самец был классифицирован как медсестра, а две королевы (одна молодая, одна старая) были классифицированы как самцы.

Относительная численность ранее охарактеризованных филотипов варьируется в зависимости от каст

Микробиомы медсестер и собирателей были очень похожи на те, которые наблюдались в предыдущих исследованиях микробиомов рабочих медоносных пчел. Из 4 402 282 последовательностей медсестер и собирателей 4 401 036 (99,97%) принадлежали к OTU, классифицированным как филотипы, ранее охарактеризованным у медоносных пчел, или принадлежали к семействам бактерий, ранее обнаруженных у медоносных пчел (например, других Lactobacillaceae) (рис.2).

Рис 2.Таксономический состав отдельных микробиомов задней кишки медоносных пчел на уровне семьи.

Доля каждого таксона в общем микробиоме представлена ​​долей окрашенной полосы. Каждая полоса представляет собой одного человека. Этикетки как на рис. 1.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0123911.g002

Микробиом кишечника самцов и маток ранее не охарактеризован. Наши результаты показывают, что самцы и королевы имеют большинство тех же бактерий в заднем кишечнике, что и рабочие (рис. 2).Более 99% и 98,87% от общего числа считываний от самцов и маток, соответственно, были классифицированы как бактерии, ранее обнаруженные у медоносных пчел. Несмотря на это сходство в общем составе, относительная доля определенных бактерий значительно различалась среди каст. Например, у кошек была более высокая относительная численность альфа-протеобактерий Parasaccharibacter apium , чем у других каст (ANOVA F = 17,89, p <0,0001, n = 60; результаты тестов p <0,05, рис. 3A). Принадлежность к касте была значимым предиктором P .Содержание апия (LR χ ² = 10,51, n = 60, p = 0,001). Только у трех (7,5%) рабочих было более десяти последовательностей P . apium ; все трое рабочих были из закрытых колоний. Большое количество P . Однако apium был характерен не для всех маток. У одной из молодых 7-дневных маток не было обнаружено P . apium , но две королевы, у которых было высокое значение P . apium (один старый, один молодой) имел более чем в 13 раз более высокую численность P . apium , чем любой другой человек.

Рис. 3. Кастовые различия конкретных бактериальных филотипов.

(А) П . апиум , (Б) фирма-5. Статистические различия были проверены с помощью ANOVA с последующими пост-тестами на парные различия. Буквы указывают на достоверные попарные различия (p <0,05).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0123911.g003

Фирма-5 вида Lactobacillus была наиболее распространенным филотипом у самцов, собирателей и медсестер (75 особей).7%, 30,4% и 49,4% от общего числа последовательностей из этих каст, соответственно. Фирма-5 была четвертой по численности бактерий, обнаруженной у маток, с P . apium , альфа-2.1 и фирма-4 опережают фирму-5 (рис. 2). Принадлежность к кастам была значимым предиктором численности фирмы-5 (LR χ ² = 6,97, n = 60, p = 0,0083). Самцы имели значительно более высокую относительную численность твердого-5, чем любая другая группа (ANOVA F = 18,20, n = 60, p <0,0001, пост-тесты p <0,05, рис. 3B).У медсестер доля фирм-5 была значительно выше, чем у собирателей (рис. 3В).

Обсуждение

Работа с приматами показала, что общие социальные сообщества и общая среда вносят вклад в общий микробиом кишечника [29,44,45]. Напротив, микробиом кишечника сильно варьирует внутри и между популяциями и видами одиночной плодовой мухи, Drosophila [46]. Ранее была выдвинута гипотеза, что социальность может способствовать сохранению верности симбионта и хозяина в общем микробиоме среди хозяев [16–18].В подтверждение этой гипотезы микробиомы, взятые у некоторых социальных видов пчел, таких как медоносные пчелы и шмели, имеют тенденцию быть специфическими для хозяина [17,21,47], но см. [48] для исключений для других социальных видов. Кроме того, удивительно стабильный микробиом был обнаружен у рабочих медоносных пчел из разных ульев, штатов, стран и подвидов [17,23–28].

Наши результаты подтверждают гипотезу о том, что социальность способствует развитию общего микробиома. Мы определили основной набор микробных таксонов, обнаруженных как минимум среди одной пчелы каждой касты, состоящий из ранее охарактеризованных филотипов, обнаруженных у рабочих медоносных пчел.Кроме того, микробиомы рабочих медоносных пчел в этом исследовании аналогичны результатам предыдущих исследований, в которых также анализировались рабочие (например, сравните медсестер и собирателей на рис. 2 с Мораном и др. 2012 г. [24] рис. 1 и Сабри и др. 2012 г. [25] Рис. 1).

Сходство между микробиомами медсестер и собирателей удивительно, потому что вариации микробиома обычно связаны с диетой, поведением и физиологией хозяина [49,50], все из которых различаются между этими двумя группами специализированных пчел.Изменения в диете и физиологии кишечника сопровождают возрастной переход от работы медсестер в улье к добыванию пищи вне улья [11]. Изменения численности бактерий у рабочих медоносных пчел соответствуют пику потребления пыльцы [47]. У медсестер в нашем исследовании было значительно больше Lactobacillus видов (фирма-5), чем у собирателей. Эта группа бактерий участвует в метаболизме и транспорте углеводов [16]. Таким образом, различия в относительной численности этих бактерий могут отражать различия в окружающей среде заднего кишечника из-за различий в рационах медсестер и собирателей.Девять различных OTU были классифицированы как твердые-5, указывая на то, что существует большое разнообразие штаммов внутри этого филотипа, как было описано для Gilliamella apicola и Snodgrassella alvi [51]. Когда эффект этих и других очень распространенных OTU был уменьшен, микробиомы медсестер и собирателей в нашем исследовании существенно не отличались друг от друга (рис. 1B, таблица 2). Это согласуется с предыдущим отбором микробиомов кишечника медоносных пчел на протяжении их взрослой жизни [20] и недавним отбором микробиомов кишечника собирателей [52].Точно так же активация иммунной системы паразитами, изменения в питании и изменение размера тела (которое коррелирует с возрастом) не повлияли на микробиом отдельных рабочих шмелей ( Bombus terrestris ) [19]. Эти результаты предполагают, что состав сообщества кишечных бактерий среди рабочих социальных пчел является стабильным.

Стабильность микробиома рабочего может быть связана с частой повторной инокуляцией взаимодействующими товарищами по гнезду. Медсестры обмениваются большей частью еды с собирателями, что может объяснить, почему у них такие похожие микробиомы, несмотря на резкие различия в поведении, возрасте и физиологии.Пища обменивается возле входа в улей, где возвращающиеся фуражиры, нагруженные нектаром, выгружаются пчелами-получателями, а фуражиры кормятся медсестрами перед каждым полетом за кормом [53]. Например, в течение четырех часов после того, как шесть собирателей дали помеченную сахаром воду, 62% собирателей и 20% всего рабочего населения получили часть этого корма [54]. Другое исследование показало, что из общего количества еды, произведенной и распределенной 100 медсестрами за одну ночь, королевы получили 0,15%, дроны — 5,36%, но большинство (52.28%) перешли к другим работникам [55]. Этот относительно высокий обмен пищей между медсестрами и собирателями может усилить сходство микробиома между двумя группами.

Эта центральная роль медсестер и собирателей в фильтрации поступающей из внешней среды может также объяснить различия в микробных сообществах задней кишки между кастами. Мы обнаружили большие различия в микробиомах задней кишки между самцами и рабочими (рис. 2, таблица 1) и незначительные различия между матками и рабочими, когда влияние наиболее распространенных OTU было снижено (таблица 2).Рабочие задние кишки также имеют значительно более высокое микробное разнообразие, чем матки и самцы (рис. 1C). Мы предполагаем, что это может отражать центральную роль этих людей в поддержании микробиома колонии. Повышенное разнообразие штаммов может быть результатом регулярного обмена экологически чистыми источниками между возвращающимися собирателями и принимающими медсестрами. Сборщики, вероятно, несут ответственность за занесение новых штаммов бактерий из окружающей среды в колонию, которые затем могут быть отфильтрованы и распределены среди членов колонии медсестрами.Рабочие пчелы не имеют микробиома кишечника, когда они впервые вылупляются, и не разовьют микробиом, если их держать изолированными от колонии [56]. Медсестры кормят всех членов колонии пищей, произведенной в специализированных железах в голове (гипофарингеальных железах), и, таким образом, питательные вещества всей колонии и, возможно, микробы проходят через медсестер. Например, мы не обнаружили P . apium в задних кишках медсестер, но в большом количестве он был у маток. Предыдущие исследования обнаружили эту бактерию в посевах фуражиров [52], а также в зернах и подглоточных железах медсестер, а также в маточном молочке, которым они скармливают маток [40].Другие бактерии (например, S . alvi , G . apicola и F . perrara ) могут передаваться только при прямом контакте с медсестрами или их фекалиями [56]. Все люди в колонии, вероятно, получают от медсестер разнообразный набор бактерий, но большинство бактерий либо не сохраняются, либо чрезвычайно редки во всех членах колонии.

Некоторые кастовые различия в составе микробиома могут быть связаны с различиями в репродуктивной активности. P . apium был значительно больше у маток, чем у всех других каст, и почти отсутствовал у большинства рабочих, которые не размножаются (рис. 3A). Гены, экспрессируемые в штаммах этих бактерий, обнаруженные у рабочих, связаны с ферродоксинами и оксидоредуктазами, связанными с метаболизмом, а также биогенезом мембраны / оболочки [16,57], которые являются важными компонентами оогенеза. Этот филотип также был обнаружен у одиночных видов пчел [17], пойманные самки которых, вероятно, также будут репродуктивными.Следовательно, эти бактерии могут быть полезны для преобразования большого количества диетического белка в производство яиц.

Наши меры разнообразия обязательно относительны, поскольку мы не измеряли абсолютное количество бактерий в каждом образце. Тем не менее, наши результаты показывают значительные различия в относительной доле бактерий. Например, филотип, который чаще всего встречается у рабочих, снижен по сравнению с альфа-протеобактериями у маток. Наши результаты согласуются с накоплением доказательств роли микробов, опосредующих поведение хозяина, и поведения хозяина, влияющего на сообщество микробных симбионтов [2,58,59].

На химическую коммуникацию внутри улья может особенно повлиять фильтрация симбиотических микробов через рабочих [2,60]. Lactobacillus plantarum влияет на предпочтения спаривания у Drosophila melanogaster , возможно, через изменения кутикулярных углеводородных половых феромонов [7]. Феромоны также играют большую роль в социальном поведении медоносных пчел. Распределяя основной микробиом по всей колонии, медсестры могут облегчить распознавание сородичей. Проверка этой и других потенциальных функций микробиома в социальном поведении хозяина требует дальнейшего изучения.Наше исследование предоставляет доказательства того, что динамика хозяина-симбионта может быть дополнительным уровнем биологической организации, на которой регулируется социальное поведение.

Вспомогательная информация

S1 Рис. Гистограммы, показывающие распределение количества считываний по выборкам.

Бункеры имеют ширину 10 000 чтений. В целом, образцы медсестры имеют наибольшее количество считываний, а образцы матки — наименьшее. Самцы — зеленые полоски, Фуражиры — фиолетовые полоски, Медсестры — бирюзовые полоски, 7d старые королевы — розовые полоски, Королевы — оранжевые полоски.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0123911.s002

(TIFF)

Благодарности

Мы благодарим К. Най за помощь в выращивании пчел и сбор образцов, И. Ньютона за предоставление файлов последовательности и таксономии пчел, пользовательских скриптов на Perl и советы по анализу, М. Сипоса, П. Джеральдо и М. Миллера за протокол и анализ. совет, и Э. Хэдли за создание цифр. Секвенирование было выполнено в UIUC W.M. Центр сравнительной и функциональной геномики Кека.Мы благодарим Н. Морана и сотрудников лаборатории Робинсона за полезные комментарии к предыдущей версии этой рукописи.

Вклад авторов

Задумал и спроектировал эксперименты: GER B. White B. Wilson CJY KMK. Проведены эксперименты: KMK CJY. Проанализированы данные: KMK VDR CJY NG. Предоставленные реагенты / материалы / инструменты анализа: KMK VDR CJY NG B. White GER. Написал бумагу: КМК. Обсуждаемые результаты: KMK VDR CJY B. White B. Wilson NG GER. Отредактировал статью: KMK VDR CJY B. White B.Wilson NG GER.

Список литературы

1. 1. Моран Н.А. Симбиоз как адаптивный процесс и источник фенотипической сложности. Труды Национальной академии наук. 2007; 104: 8627–8633.
2. 2. Эзенва В.О., Херардо Н.М., Иноуе Д.В., Медина М., Ксавье Дж.Б. Поведение животных и микробиом. Наука. 2012; 338: 198–199. pmid: 23066064
3. 3. Дуглас Э. Микробный аспект в питательной экологии насекомых. Функциональная экология.2009; 23: 38–47.
4. 4. Turnbaugh PJ, Ley RE, Mahowald MA, Magrini V, Mardis ER, Gordon JI. Микробиом кишечника, связанный с ожирением, с повышенной способностью собирать энергию. Природа. 2006; 444: 1027–1031. pmid: 17183312
5. 5. Schachtschneider KM, Yeoman CJ, Isaacson RE, White BA, Schook LB, Pieters M. Модуляция системных иммунных ответов посредством комменсальной желудочно-кишечной микробиоты. PLoS One. 2013; 8: e53969. pmid: 23326551
6. 6. Кох Х., Шмид-Хемпель П.Социально передаваемая кишечная микробиота защищает шмелей от кишечных паразитов. Труды Национальной академии наук. 2011; 108: 19288–19292. pmid: 22084077
7. 7. Sharon G, Segal D, Ringo JM, Hefetz A, Zilber-Rosenberg I, Rosenberg E. Комменсальные бактерии играют роль в предпочтении спаривания Drosophila melanogaster . Труды Национальной академии наук. 2010; 107: 20051–20056. pmid: 21041648
8. 8. Санто-Доминго Дж. В., Кауфман М. Дж., Клуг М. Дж., Холбен В. Е., Харрис Д., Тидье Дж. М..Влияние диеты на структуру и функцию бактериального кишечного сообщества сверчков. Молекулярная экология. 1998; 7: 761–767.
9. 9. Чандлер Дж. А., Ланг Дж. М., Бхатнагар С., Эйзен Дж. А., Копп А. Бактериальные сообщества различных видов дрозофилы : экологический контекст модельной системы хозяин-микроб. PLoS Genetics. 2011; 7: e1002272. pmid: 21966276
10. 10. Уилсон Е.О. Общества насекомых. Кембридж, Массачусетс: издательство Гарвардского университета; 1971 г.
11. 11. Уинстон М.Л. Биология медоносной пчелы. Кембридж, Массачусетс: Издательство Гарвардского университета; 1987
12. 12. Крайльсхайм К. Белковый баланс пчеловода. Apidologie. 1990; 21: 417–429.
13. 13. Crailsheim K, Schneider LHW, Hrassnigg N, Bühlmann G, Brosch U, Gmeinbauer B и др. Потребление и использование пыльцы у рабочих медоносных пчел ( Apis mellifera carnica ): зависимость от индивидуального возраста и функций. Журнал физиологии насекомых.1992; 38: 409–419.
14. 14. Мориц Б., Крайльсхайм К. Физиология переваривания белков в средней кишке медоносной пчелы ( Apis mellifera L .). Журнал физиологии насекомых. 1987; 33: 923–931.
15. 15. Сольдериц М.Дж., Крайльсхайм К. Сравнение потребления и переваривания пыльцы у трутней и рабочих медоносной пчелы ( Apis mellifera carnica ). Журнал физиологии насекомых. 1993; 39: 877–881.
16. 16. Энгель П., Мартинсон В.Г., Моран Н.А.Функциональное разнообразие простой кишечной микробиоты медоносной пчелы. Труды Национальной академии наук. 2012; 109: 11002–11007. pmid: 22711827
17. 17. Мартинсон В.Г., Данфорт Б.Н., Минкли Р.Л., Рюппелл О., Тингек С., Моран Н. Простая и характерная микробиота, связанная с медоносными пчелами и шмелями. Молекулярная экология. 2011; 20: 619–628. pmid: 21175905
18. 18. Энгель П., Моран Н.А. Микробиота кишечника насекомых — разнообразие по строению и функциям.FEMS Microbiology Reviews. 2013; 37: 699–735. pmid: 236

19. 19. Кох Х., Цисаровский Г., Шмид-Хемпель П. Экологические воздействия на кишечные бактериальные сообщества в колониях диких шмелей. Журнал экологии животных. 2012; 81: 1202–1210. pmid: 22708631
20. 20. Мартинсон В.Г., Мой Дж., Моран Н.А. Установление характерных кишечных бактерий во время развития пчелы. Прикладная и экологическая микробиология. 2012; 78: 2830–2840. pmid: 22307297
21. 21.Кох Х., Аброл Д.П., Ли Дж., Шмид-Хемпель П. Разнообразие и эволюционные паттерны бактериальных кишечных ассоциатов корбикулатных пчел. Молекулярная экология. 2013; 22: 2028–2044. pmid: 23347062
22. 22. Колман Д.Р., Toolson EC, Takacs-Vesbach CD. Влияют ли диета и систематика на бактериальные сообщества насекомых в кишечнике? Молекулярная экология. 2012; 21: 5124–5137. pmid: 22978555
23. 23. Кокс-Фостер Д.Л., Конлан С., Холмс Е.С., Паласиос Г., Эванс Д.Д., Моран Н. и др. Метагеномное исследование микробов при разрушении колонии медоносных пчел.Наука. 2007; 318: 283–287. pmid: 17823314
24. 24. Моран Н.А., Хансен А.К., Пауэлл Дж.Э., Сабри З.Л. Отличительная микробиота кишечника медоносных пчел оценивалась с помощью глубокого отбора проб у отдельных рабочих пчел. PLoS One. 2012; 7: e36393. pmid: 22558460
25. 25. Сабри З.Л., Хансен А.К., Моран Н.А. Независимые исследования с использованием глубокого секвенирования позволили выявить тот же набор основных видов бактерий, доминирующих в кишечных сообществах медоносных пчел. PLoS One. 2012; 7: e41250. pmid: 22829932
26. 26.Маттила Х.Р., Риос Д., Уокер-Сперлинг В.Е., Роэзлерс Г., Ньютон ИЛГ. Характеристика активных микробиот, связанных с медоносными пчелами, выявляет более здоровые и широкие сообщества, когда колонии генетически разнообразны. PLoS One. 2012; 7: e32962. pmid: 22427917
27. 27. Jeyaprakash A, Hoy MA, Allsopp MH. Бактериальное разнообразие взрослых особей рабочих Apis mellifera capensis и Apis mellifera scutellata (Insecta: Hymenoptera) оценивалось с использованием последовательностей 16S рРНК.Журнал патологии беспозвоночных. 2003; 84: 96–103. pmid: 14615218
28. 28. Мор К.И., Теббе СС. Разнообразие и филотипическая консистенция бактерий в кишечнике трех видов пчел (Apoidea) на поле масличного рапса. Экологическая микробиология. 2006; 8: 258–272. pmid: 16423014
29. 29. Амато К.Р., Йоман С.Дж., Кент А., Ригини Н., Карбонеро Ф., Эстрада А. и др. Ухудшение среды обитания влияет на микробиомы желудочно-кишечного тракта черной обезьяны-ревуна ( Alouatta pigra ).Журнал ISME. 2013; 7: 1344–1353. pmid: 23486247
30. 30. Джеральдо П., Чиа Н., Голденфельд Н. О пригодности коротких прочтений 16S рРНК для филогенетического анализа в экологических исследованиях. Экологическая микробиология. 2011; 13: 3000–3009. pmid: 21

    2

31. 31. Вило С., Донг К. Оценка точности классификатора RDP с использованием вариабельных областей гена 16S рРНК. Метагеномика. 2012; 1: 1–5.
32. 32. Чакраворти С., Хельб Д., Бурдей М., Коннелл Н., Алланд Д.Подробный анализ сегментов гена 16S рибосомной РНК для диагностики патогенных бактерий. Журнал методов микробиологии. 2007; 69: 330–339.
33. 33. Джеральдо П., Калари К., Чен Х, Бхавсар Дж., Мангалам А., Уайт Б.А. IM-TORNADO: инструмент для сравнения чтения 16S из парных библиотек. PLoS ONE. 2014; 9: e114804. pmid: 25506826
34. 34. Эдгар RC. Поиск и кластеризация на порядки быстрее, чем BLAST. Биоинформатика. 2010; 26: 2460–2461. pmid: 20709691
35. 35.Schloss PD, Westcott SL, Ryabin T, Hall JR, Hartmann M, Hollister EB, et al. Представляем mothur: программное обеспечение с открытым исходным кодом, независимое от платформы, поддерживаемое сообществом, для описания и сравнения сообществ микробов. Прикладная и экологическая микробиология. 2009; 75: 7537–7541. pmid: 19801464
36. 36. Альтшул С.Ф., Мэдден Т.Л., Шеффер А.А., Чжан Дж., Чжан З., Миллер В. и др. Gapped BLAST и PSI-BLAST: новое поколение программ поиска по базам данных белков. Исследования нуклеиновых кислот.1997; 25: 3389–3402. pmid: 9254694
37. 37. Бабендрайер Д., Джоллер Д., Ромейс Дж., Биглер Ф., Видмер Ф. Структуры бактериальных сообществ в кишечнике медоносных пчел и их реакция на два инсектицидных белка. FEMS Microbiology Ecology. 2007; 59: 600–610. pmid: 17381517
38. 38. Квонг В.К., Моран Н.А. Выращивание и характеристика кишечных симбионтов медоносных пчел и шмелей: Snodgrassella alvi gen. nov., sp. nov., член семейства Neisseriaceae Betaproteobacteria; и Gilliamella apicola gen.nov., sp. nov., член Orbaceae fam. nov., Orbales ord. nov., сестринский таксон отряда Enterobacteriales Gammaproteobacteria. Международный журнал систематической и эволюционной микробиологии. 2012; 63: 2008–2018. pmid: 23041637
39. 39. Энгель П., Квонг В.К., Моран Н.А. Frischella perrara gen. nov., sp. nov., гаммапротеобактерия, выделенная из кишечника медоносной пчелы, Apis mellifera . Int J Syst Evol Microbiol. 2013; 63: 3646–3651. pmid: 23606484
40. 40.Корби-Харрис В., Снайдер Л.А., Шван М.Р., Маес П., Макфредерик К.С., Андерсон К.Э. Происхождение и действие Alpha 2.2 Acetobacteraceae в личинках медоносных пчел и описание Parasaccharibacter apium gen. nov., sp. ноя Прикладная и экологическая микробиология. 2014; 80: 7460–7472. pmid: 25239902
41. 41. Андерсон MJ, Горли RN, Кларк KR. PERMANOVA + for Primer: руководство по программному обеспечению и статистическим методам. Плимут, Великобритания: PRIMER-E; 2008.
42. 42.Хансен А.К., Ортега Ю.К., Шесть DL. Сравнение сообществ жужелиц (coleoptera: Carabidae) в скалистых горных саваннах, в которые вторгся и не вторгся экзотический разнотравный василек пятнистый. Северо-западная наука. 2009; 83: 348–360.
43. 43. Оксанен Дж., Бланше Ф.Г., Киндт Р., Лежандр П., Минчин П.Р., О’Хара РБ. Веган: экологический пакет для сообщества. Пакет R версии 2.0–8 изд .; 2013.
44. 44. Дегнан PH, Пьюзи А.Э., Лонсдорф Е.В., Гудалл Дж., Вроблевски Е.Е., Уилсон М.Л. и др.Факторы, связанные с диверсификацией микробных сообществ кишечника шимпанзе из национального парка Гомбе. Труды Национальной академии наук. 2012; 109: 13034–13039. pmid: 22826227
45. 45. Мёллер А., Пеэтерс М., Нджанго Дж.Б., Ли Й., Хан Б., Охман Х. Симпатичные шимпанзе и гориллы имеют конвергентные кишечные микробные сообщества. Геномные исследования. 2013; 23: 1715–1720. pmid: 23804402
46. 46. Wong ACN, Chaston JM, Douglas AE. Непостоянная микробиота кишечника Drosophila видов, выявленная с помощью анализа гена 16S рРНК.Журнал ISME. 2013; 7: 1922–1932. pmid: 23719154
47. 47. Гиллиам М. Идентификация и роль непатогенной микрофлоры, связанной с медоносными пчелами. Письма по микробиологии Fems. 1997; 155: 1–10.
48. 48. Макфредерик К.С., Кэнноне Дж.Дж., Гутелл Р.Р., Келлнер К., Плаус Р.М., Мюллер Ю.Г. Специфичность между Lactobacilli и перепончатокрылыми хозяевами является скорее исключением, чем правилом. Прикладная и экологическая микробиология. 2013; 79: 1803–1812. pmid: 232
    • 49.Диллон Р.Дж., Вебстер Дж., Уэйтман А.Дж., Чарнли А.К. Разнообразие кишечной микробиоты увеличивается с возрастом и голоданием пустынной саранчи. Антони Ван Левенгук Международный журнал общей и молекулярной микробиологии. 2010; 97: 69–77.
    • 50. Ван И, Гилбрит ТМИ, Кукутла П., Ян Дж., Сюй Дж. Динамический микробиом кишечника на протяжении всей истории жизни малярийного комара Anopheles gambiae в Кении. PLoS ONE. 2011; 6: e24767. pmid: 21957459
    • 51. Энгель П., Степанаускас Р., Моран Н.А.Скрытое разнообразие симбионтов кишечника медоносных пчел обнаружено одноклеточной геномикой. PLoS Genetics. 2014; 10: e1004596. pmid: 25210772
    • 52. Корби-Харрис В., Мэйс П., Андерсон К. Бактериальные сообщества, ассоциированные с пчелами-медоносными пчелами Apis mellifera -фуражиры. PLoS ONE. 2014; 9: e95056. pmid: 24740297
    • 53. Крайльсхейм К. Трофаллактические взаимодействия у взрослых пчел ( Apis mellifera L .). Apidologie. 1998; 29: 97–112.
    • 54.Nixon HL, Ribbands CR. Пищевая передача в сообществе медоносных пчел. Труды Лондонского королевского общества, серия B. 1952; 140: 43–50. pmid: 13003910
    • 55. Крайльсхайм К. Поток студня в пчелиной колонии. Журнал сравнительной физиологии Б. 1992; 162: 681–689.
    • 56. Пауэлл Дж. Э., Мартинсон В. Г., Урбан-Мид К., Моран Н. А.. Пути получения микробиоты кишечника медоносной пчелы Apis mellifera . Прикладная и экологическая микробиология.2014; 80: 7378–7387.
    • 57. Энгель П., Моран Н.А. Функциональное и эволюционное понимание простой, но специфической микробиоты кишечника медоносной пчелы на основе метагеномного анализа. Кишечные микробы. 2013; 4: 60–65. pmid: 23060052
    • 58. Арчи EA, Тайс KR. Поведение животных соответствует микробной экологии. Поведение животных. 2011; 82: 425–436.
    • 59. Коллинз С.М., Сюретт М., Берчик П. Взаимодействие между кишечной микробиотой и мозгом. Обзоры природы микробиологии.2012; 10: 735–742. pmid: 23000955
    • 60. Тайс К.Р., Шмидт Т.М., Холекамп К.Е. Доказательства бактериального механизма групповых социальных запахов среди гиен. Научные отчеты. 2012; 2: 615

Структура микробиоты кишечника пчел зимой и летом различается.

Abstract

Медоносные пчелы обладают относительно простой и хорошо сохраненной микробиотой кишечника. Тем не менее, мало что известно о динамике микробиоты кишечника пчел в разные сезоны, особенно зимой, когда взрослые рабочие пчелы живут намного дольше и имеют решающее значение для выживания колонии.Мы количественно определили основных представителей микробиоты кишечника пчел в одной колонии в течение двух лет и наблюдали за 14 дополнительными колониями летом и зимой. Наши данные показывают, что общая численность кишечной микробиоты у собирателей, питающихся нектаром / медом, была значительно ниже по сравнению с медсестрами, питающимися пыльцой, и зимними пчелами. Поразительно, что у зимних пчел-долгожителей была самая высокая бактериальная нагрузка с характерным сдвигом в сторону преобладания Lactobacillus Firm-5 и Bartonella apis. Поселяя истощенных микробиотой пчел сообществом, восстановленным из бактериальных изолятов, мы предоставляем экспериментальные доказательства того, что диета является основным фактором наблюдаемых различий в бактериальной нагрузке между зимними пчелами, медсестрами и собирателями.В целом, наше исследование показывает, что микробиота кишечника зимних пчел заметно отличается по сравнению с фуражирами и медсестрами. Учитывая важность зимних пчел для выживания колонии, будущая работа должна быть сосредоточена на роли кишечной микробиоты в здоровье и болезнях зимних пчел.

Введение

Европейская медоносная пчела, Apis mellifera, , является важным видом опылителей для природных экосистем и сельскохозяйственного производства [1]. Состояние его здоровья находится под угрозой из-за множества факторов, включая потерю среды обитания, воздействие пестицидов и высокую нагрузку паразитов и патогенов [2–4].Накапливающиеся данные указывают на то, что микробиота кишечника взрослых медоносных пчел играет решающую роль для здоровья пчел [5]. Он преобразует пищевые соединения [6, 7] и продуцирует короткоцепочечные жирные кислоты [8] в кишечнике, повышает чувствительность организма к сахарозе [8] и стимулирует иммунную систему [9, 10]. Более того, нарушение состава микробиоты кишечника в результате лечения антибиотиками, воздействия пестицидов или диетических манипуляций было связано с увеличением нагрузки патогенными микроорганизмами, что приводило к увеличению смертности [11–14].

Отличительной чертой кишечной микробиоты медоносных пчел является ее низкая таксономическая сложность. У рабочих пчел в сообществе преобладают от семи до десяти филотипов (т. Е. Кластеры штаммов, имеющих ≥97% идентичности последовательностей в гене 16S рРНК), которые обычно составляют> 95% бактериальных клеток в кишечнике [5, 15 –18]. Эти филотипы постоянно обнаруживаются у медоносных пчел, независимо от географического положения, стадии жизни или сезона отбора проб [16, 19, 20], и приобретаются горизонтально при контакте с товарищами по гнезду и компонентами улья [21].Они включают пять основных филотипов ( Gilliamella, Snodgrassella alvi, Lactobacillus Firm-4 и Firm-5 и Bifidobacterium ), которые присутствуют у всех пчел, и два неосновных филотипа, то есть Frischella perrara и Bartonella. apis, , которые широко распространены в семьях, но не у всех пчел [22]. С другой стороны, филотипы, такие как Alpha 2.1, Alpha 2.2 или Lactobacillus kunkeii , составляют относительно небольшую часть кишечного сообщества [23].

Хотя эти филотипы постоянно присутствуют у взрослых рабочих пчел, их численность может меняться у разных пчел, влияя на их влияние на хозяина. Например, тип и количество питательных веществ (например, пыльцы и нектара), доступных в сезон кормодобывания, могут влиять на метаболическую активность микробиоты кишечника и, следовательно, влиять на ее состав и функции [24]. Точно так же различные пищевые привычки или различия в продолжительности жизни рабочих пчел летом и зимой могут влиять на состав микробиоты кишечника.С весны до осени молодые рабочие пчелы (медсестры) остаются внутри улья, чтобы заботиться о личинках и питаться пыльцой, богатой питательными веществами, в то время как более старые рабочие пчелы становятся собирателями, которые питаются нектаром и медом для подпитки своих дорогостоящих по энергии полетов [25 ]. Поздней осенью недавно появившиеся взрослые рабочие пчелы становятся зимними пчелами (также называемыми «diutinus»), которые имеют увеличенную продолжительность жизни (~ 6 месяцев) и обеспечивают выживание колонии в холодное зимнее время года при отсутствии расплода [26]. Эти пчелы образуют плотный кластер для терморегуляции внутри улья, питаются исключительно продуктами питания (пыльца пчелиного хлеба и мед) и сохраняют свои фекалии всю зиму [27], что, вероятно, повлияет на экологию микробиоты их кишечника.

В ряде исследований изучали состав кишечной микробиоты разных типов рабочих пчел или в разные сезоны, с общим выводом, что состав сообщества относительно стабилен [19, 28–31]. Однако предыдущие исследования были в основном основаны на сравнительном анализе относительной численности членов сообщества с использованием секвенирования ампликона 16S рРНК. Такой анализ не может дать представление о степени или направленности изменений в численности таксонов, особенно если микробная нагрузка существенно различается между образцами [32].Фактически, изменение общей численности микробиоты само по себе может быть важной характеристикой различных типов пчел, сезона или воздействия окружающей среды. Ярким примером является экспериментальное воздействие антибиотиков на пчел, которое привело не к сильному сдвигу в относительном составе, а к общему снижению бактериальной нагрузки, что сделало пчел более восприимчивыми к инвазии патогенов [11].

В дополнение к ограничениям текущих исследований с использованием данных об относительной численности, почти ничего не известно о кишечной микробиоте зимних пчел по сравнению с фуражирами или медсестрами.Это удивительно, поскольку зимние пчелы имеют решающее значение для здоровья и выживания колонии в холодное время года, когда ресурсы ограничены и происходит большая часть потерь колонии [33, 34].

Характеристика структуры кишечной микробиоты озимых пчел и определение факторов, формирующих кишечные сообщества, может помочь нам понять физиологические адаптации, необходимые для выживания в холодное время года в регионах с умеренным климатом. В этом исследовании мы отслеживали микробиоту кишечника 566 отдельных рабочих пчел из одного улья в течение двух лет с использованием подхода на основе количественной ПЦР.Мы подтвердили наши первоначальные результаты, проанализировав микробиоту медсестер, собирателей и зимних пчел из 14 ульев в течение двух последующих лет, и провели эксперименты с гнотобиотическими пчелами, чтобы проверить влияние диеты на нагрузку микробиоты кишечника.

Материалы и методы

Отбор проб медоносных пчел

Для мониторинга микробиоты кишечника рабочих пчел в течение двух лет ежемесячно собирали около 24 пчел из одного улья, расположенного на пасеке Университета Лозанны, Швейцария.Во время сезона кормодобывания мы отбирали пробы фуражиров, возвращающихся к входу в улей с пыльцой на ногах, а в холодные зимние месяцы мы отбирали пробы «зимних пчел» на верхней части рамок изнутри улья. Каждая временная точка отбора проб имела место в середине каждого месяца (+/- 3 дня) в период с апреля 2015 года по апрель 2017 года. Образцы с июля 2017 года не были включены в анализ из-за ошибки манипуляции во время экстракции ДНК.

Чтобы сравнить микробиоту кишечника трех разных типов рабочих пчел (медсестер, собирателей и зимние пчелы) в разных семьях, мы взяли пробы пчел из 14 ульев.Одиннадцать ульев были расположены в кампусе Дориньи Лозаннского университета, а три улья были расположены в деревне Йенс, примерно в 17 км. Сборы и медсестры были отобраны в июле 2017 года и августе 2018 года, а зимние пчелы — в январе 2018 года и январе 2019 года. «Медсестры» и зимние пчелы были собраны в улье в центре колонии. Сборщиков собирали вне улья одновременно с медсестрами. Образцы пчел, отобранные в июле 2017 г. и январе 2018 г., использовались для визуализации содержимого кишечника и корреляции веса кишечника и количества копий 16S рРНК.Кишки пчел, отобранные в августе 2018 г. и январе 2019 г., были объединены (20 кишок на каждый тип пчел на улей) и использованы для мониторинга численности отдельных членов сообщества.

Для вскрытия кишечника пчел подвергали анестезии CO ₂ в течение 10 с, и кишки, включая зоб, среднюю и заднюю кишку, а также мальпигиевы канальцы, осторожно удаляли с помощью стерильных щипцов. Для ежемесячного отбора проб из одного пчелиного улья каждый образец кишечника помещали в каплю PBS, оценивали фенотип парши [35] и помещали в трубку для взбивания шариков, содержащую прибл.150 мг стеклянных шариков (0,75-1 мм в диаметре, Carl Roth) и 750 мкл буфера для лизиса CTAB (0,2 M трис-HCl, pH 8; 1,4 M NaCl; 0,02 M EDTA, pH 8; 2% CTAB, w / v, растворенный при 56 ° C в течение ночи; 0,25% β-меркаптоэтанол, об. / об.). Для отбора проб из 14 семей в августе 2018 г. и январе 2019 г. вскрытые кишки были объединены в одну пробирку Falcon (14 ульев x 3 типа пчел = 42 объединенных образца). Пробирки мгновенно замораживали в жидком азоте и хранили при -80 ° C до экстракции ДНК.

Экспериментальная колонизация медоносных пчел

Пчелы с обедненной микробиотой были созданы и колонизированы, как описано в Kešnerová et al.[6]. Группа обработки пчел, которых кормили пыльцой и сахарной водой, была такой же, как и в этом предыдущем исследовании. Другая группа обработки (пчелы, которых кормили только сахарной водой) проводилась параллельно с той же партией пчел. Пчел кормили ad libitum стерилизованной пчелиной пыльцой и стерилизованной сахарной водой (50% сахароза, вес / объем) (обработка SW + P) или только стерилизованной сахарной водой (обработка SW). У пчел брали пробы через 10 дней после колонизации, и кишки вскрывали, как описано выше.

Экстракция ДНК из ткани кишечника медоносной пчелы

Ранее установленный протокол экстракции на основе CTAB / фенола [6] был использован для извлечения ДНК / РНК из отдельных кишечников.В конце протокола осажденный высушенный осадок ресуспендировали в 200 мкл и разделяли на два образца по 100 мкл. Один образец обрабатывали с помощью набора Nucleospin PCR Clean-up (Macherey-Nagel, Германия) в соответствии с инструкциями производителя, и полученную ДНК использовали для количественной ПЦР. Для объединенных образцов, содержащих 20 кишок, в каждую пробирку Falcon добавляли 2 мл стеклянных шариков и 15 мл буфера для лизиса CTAB. Затем образцы гомогенизировали в гомогенизаторе Fast-Prep24 ^TM 5G со скоростью 6 м / с в течение 40 секунд, кратковременно центрифугировали и аликвоту 750 мкл, соответствующую объему образца одной кишки пчелы, переносили в новый 2-миллилитровый взбиватель. пробирку со стеклянными шариками и снова гомогенизируют.Все дальнейшие этапы экстракции ДНК выполнялись, как описано ранее [6].

Количественная ПЦР (КПЦР) для определения абсолютной численности членов сообщества

Мы использовали те же методы количественной ПЦР и анализ данных, как описано у Kešnerová et al. [6]. Короче говоря, для определения абсолютного числа копий (то есть количества) каждой мишени в каждом образце мы выполнили стандартные кривые для серийных разведений плазмид, содержащих целевую последовательность. Количество копий плазмиды в этих разведениях составляло 10 ¹ –10 ⁷ копий на мкл.Число копий плазмиды рассчитывали из молекулярной массы плазмиды и концентрации ДНК очищенной плазмиды, измеренной с помощью NanoDrop. Наклон и пересечение стандартных кривых рассчитывали на основе значений Cq (цикл количественной оценки [36]), полученных из разведений с 10 ² — 10 ⁷ копиями. Для большинства пар праймеров не было получено амплификации для максимального разведения или амплификация достигла значения Cq, аналогичного отрицательному водному контролю. В качестве предела обнаружения (LOD) данной пары праймеров мы рассматриваем определяемое значение Cq наивысшего разведения плазмиды.Мишень считалась отсутствующей в образце, когда значение Cq было выше, чем LOD Cq. Эффективность праймеров (E) оценивали по наклону в соответствии с уравнением: E = 10 ^{(-1 / наклон)} [37]. Характеристики грунтовки и их рабочие характеристики приведены в Табл. S1 .

Все образцы, для которых значение Cq актина было> 24, были исключены из анализа, поскольку экстрагированная ДНК считалась недостаточно качественной.Для каждого образца ДНК, прошедшего первоначальную проверку качества, мы определили количество бактериальных клеток в кишечнике следующим образом: сначала мы вычислили количество «сырых» копий ( n ) каждой мишени в 1 мкл образца ДНК по значению Cq. и стандартная кривая с использованием формулы n = E ^{(точка пересечения — Cq)} [38]. Затем мы нормализовали копии бактериального гена 16S рРНК до среднего числа копий гена актина в данном наборе данных и скорректировали это число с учетом общего объема образцов (200 мкл), чтобы получить нормализованное количество копий на кишечник ( Normn, ): Normn = n _цель / n _актин x Медиана (n _(актин) ) x 200. Нормализация геном актина была проведена для уменьшения влияния вариации размера кишечника и эффективности экстракции. Чтобы вывести количество микробных клеток из нормализованного числа копий гена 16S рРНК, мы дополнительно разделили его на количество локусов 16S рРНК, присутствующих в геноме данного вида (как указано в таблице S1 ).

Статистика и анализ разнообразия состава кишечной микробиоты

Все статистические анализы были выполнены с использованием R (версия 3.5.1). Мы измерили альфа-разнообразие на основе абсолютной количественной оценки семи доминирующих филотипов кишечной микробиоты с использованием эффективного числа видов [39], которое рассчитывается путем взятия экспоненты индекса разнообразия Шеннона («функция разнообразия» из пакета «Vegan» в R [40] ].

Мы выполнили анализ основных компонентов (PCA) с помощью функции prcomp пакета R «stats», чтобы определить сходство бактериальных сообществ между собирателями и зимними пчелами в ежемесячной выборке за два года с использованием показателей абсолютной численности. из семи филотипов кишечной микробиоты.

Мы проверили влияние типа пчелы на бактериальную нагрузку, индексы разнообразия и массу влажного кишечника с помощью t-критерия Стьюдента (в случае двух групповых сравнений) или общих линейных моделей (в случае трех групповых сравнений). Поскольку остатки, полученные для определенных моделей, показали гетероскедастичность, мы использовали подход перестановок для проверки значимости эффектов, как описано ранее [41]. Вкратце, мы рандомизировали значения переменной ответа 10 000 раз и вычислили F-значения / t-значения для протестированного эффекта для каждого рандомизированного набора данных.Значения p, соответствующие эффектам, были рассчитаны по доле 10 000 значений F, которые были равны или превышали наблюдаемое. Парные сравнения между различными факторами были выполнены HSD Тьюки с использованием пакета «multcomp» [42] с использованием функции glht в модели. P-значения были скорректированы с использованием метода Бонферрони.

Результаты

Бактериальные нагрузки и состав сообщества различаются в зависимости от сезона кормления и зимнего сезона в колонии медоносных пчел, мониторинг которой проводился в течение двух лет

Чтобы охарактеризовать микробиоту кишечника рабочих пчел в разные сезоны, мы отслеживали общую численность пяти основных пчел ( Gilliamella , с.alvi, Bifidobacterium , Lactobacillus Firm4 и Lactobacillus Firm5) и два неосновных члена ( F. perrara и B. apis ; Таблица S1 ) у взрослых рабочих пчел из одного улья более двух годы. Наш анализ включал 566 индивидуальных проб пчел.

Основные члены Gilliamella , S. alvi , Lactobacillus Firm-5 и Bifidobacterium присутствовали у всех проанализированных пчел, а основной член Lactobacillus Firm-4 был обнаружен в 98.4% всех пчел ( дополнительный рисунок S1A ). Примечательно, что два обозначенных неосновных члена B. apis и F. perrara также присутствовали с относительно высокой распространенностью — 94,7% и 73,1% соответственно ( дополнительный рисунок S1B и C ). В соответствии с нашими предыдущими результатами, распространенность F. perrara сильно коррелировала с наличием фенотипа парши (дополнительный рисунок S2 ), локальной реакции меланизации, которая вызывается F.perrara после колонизации [35].

Абсолютная численность наблюдаемых филотипов мало варьировалась среди пчел, отобранных в один и тот же момент времени, за исключением неосновных членов F. perrara и B. apis ( Дополнительный рисунок S3 ). Однако наблюдались явные различия в численности бактерий между месяцами (перестановочный дисперсионный анализ P = 1e-4) для всех членов микробиоты. В частности, мы наблюдали заметные различия в бактериальной нагрузке между пчелами, взятыми во время кормодобывания и зимой в оба года.Это стало очевидным из обилия отдельных филотипов и из общей бактериальной нагрузки, основанной на суммированной численности всех семи филотипов ( дополнительный рисунок S3 , рисунок 1A ). В частности, мы обнаружили 10-100-кратное увеличение уровней основных членов Firm-4, Firm-5 и Bifidobacterium , а также неосновных членов B. apis при сравнении за всю зиму. пчелы относительно собирателей ( Рисунок 1B , T-тест перестановки P = 1e-4).Мы также наблюдали небольшое повышение уровня S. alvi у озимых пчел ( Рисунок 1B, , Т-тест перестановки P = 6e-4), но никаких различий в уровнях Gilliamella ( Рисунок 1B , Перестановка Т-тест P = 0,7). F. perrara был единственным членом сообщества, который продемонстрировал противоположную тенденцию, то есть более низкую численность зимних пчел (, рисунок 1B, , T-тест перестановки P = 1e-4). Общая бактериальная нагрузка была примерно в 10 раз выше у зимних пчел, чем у собирателей, что было основано как на суммированной численности всех семи филотипов (, рис. 1B, , Т-тест пермутации P = 1e-4), так и на количестве универсальных 16S рРНК. копий гена, который был определен для подмножества образцов (, рисунок 1C, , T-тест перестановки, P = 1e-4).

Рис. 1. Сообщества кишечных бактерий различаются в зависимости от сезона кормления и зимнего сезона в одной колонии, мониторинг которой осуществляется в течение двух лет.

(A) Ежемесячные изменения абсолютной численности семи филотипов, отслеживаемых в течение двух лет, представлены как средние значения (± SE) проанализированных пчел. Указано количество пчел в месяц. Звездочка указывает на недостающие данные за июль 2015 года из-за сбоя при извлечении. (B) Количество клеток в отдельном кишечнике медоносной пчелы у собирателей (F) и зимних пчел (W) для каждого бактериального филотипа и их сумма.Средние значения показаны черными горизонтальными линиями. Были нанесены на график только пчелы с обнаруживаемыми уровнями (количество пчел указано в нижней части графика; распространенность см. На дополнительном рисунке S1 ). (C) Число копий гена 16S рРНК в пробах кишечника в подгруппе анализируемых месяцев (апрель 2015 г., август 2015 г., октябрь 2015 г., январь 2016 г., апрель 2016 г., июль 2016 г., октябрь 2016 г., январь 2017 г., апрель 2017 г.) . (D) Относительный состав микробиоты кишечника пчел, взятых каждый месяц.Состав сообщества основан на численности семи наблюдаемых филотипов (E) Индекс разнообразия Шеннона, рассчитанный на основе количества клеток различных бактериальных филотипов у собирателей (F) и зимних пчел (W). (F) Проекция численности наблюдаемых филотипов на первый и второй основные компоненты у всех проанализированных пчел, вместе с векторами корреляции, представляющими переменные, определяющие разделение по обеим осям. Перестановочный T-тест использовался для попарных сравнений.нс, незначительно; ***, P <0,001.

Учитывая, что наблюдаемые филотипы составляют большинство обнаруженных видов в микробиоте кишечника медоносных пчел, мы проанализировали разнообразие микробных сообществ на основе нашего набора данных, пренебрегая присутствием других (вероятно, очень малочисленных) неосновных членов. В оба года в сообществах озимых пчел преобладали филотипы Firm-5 и B. apis. Напротив, пчелы-фуражиры, кажется, имеют более равномерный состав сообщества (, рис. 1D, ).Доминирование Firm-5 и B. apis у озимых пчел было отражено более низким эффективным числом видов (рассчитанным по индексу разнообразия Шеннона) у озимых пчел по сравнению с собирателями ( Рисунок 1E , T-тест перестановки, P = 1e-4). Более того, PCA выявил четкое разделение между собирателями и зимними пчелами ( Рисунок 1F , MANOVA Wilks = 0,6 F _{(7, 392)} = 39,4, P <2,2e-4) вдоль главного компонента 1 (PC1). . Это разделение было инициировано Фирмой-4, Фирмой-5, Б.apis и Bifidobacterium , четыре филотипа с наибольшими различиями в численности между двумя типами пчел (, рис. 1B, ).

В совокупности эти результаты предполагают, что микробиота кишечника озимых пчел и собирателей заметно отличается друг от друга в наблюдаемом улье как по абсолютной численности бактерий, так и по относительному составу сообщества, при этом несколько филотипов доминируют в сообществе зимой. пчелы.

Стабильная разница в бактериальной нагрузке и составе сообщества между сборщиками, медсестрами и озимыми пчелами в колониях

Наблюдаемые различия в бактериальной нагрузке между сборщиками и озимыми пчелами побудили нас проверить аналогичные закономерности в 14 разных ульях в течение двух последующих лет.Помимо фуражиров и зимних пчел, мы также отслеживали бактериальную нагрузку у медсестер, потому что это помогло бы нам понять, связаны ли различия между фуражирами и зимними пчелами с разными сезонами или с различиями в поведении или питании.

Поразительно, но мы обнаружили, что объединенные образцы кишечника из четырнадцати различных ульев показали такую ​​же картину, как и отдельные образцы улья, за которыми наблюдали в течение двух лет. Зимние пчелы имели более высокую бактериальную нагрузку, чем пчелы-фуражиры, исходя из суммарной численности семи отслеживаемых филотипов (, рис. 2А, , пермутационный дисперсионный анализ ANOVA, за которым следует критерий Тьюки, P = 3.782-10) и общий бактериальный количественный анализ с универсальными праймерами 16S рРНК ( Рисунок 2B , пермутационный дисперсионный анализ ANOVA с последующим анализом Тьюки, P = 5,1e-9). Что касается ранее отслеживаемого улья, Bifidobacterium , Lactobacillus Firm4, Lactobacillus Firm5 и B. apis имели повышенные уровни (Permutation ANOVA, за которым следует Tukey, P = 1e-4), а F.perrara имели более низкие уровни у зимних пчел по сравнению с собирателями (, рис. 2А, , перестановочный дисперсионный анализ, за ​​которым следует Тьюки, P = 3.36e10-3). Единственными двумя филотипами, у которых были обнаружены образцы численности, несовместимые с результатами, полученными в предыдущем улье, были S. alvi и Gilliamella . S. alvi не испытал каких-либо различий в численности (, рис. 2A, , дисперсионный анализ ANOVA P = 5.52e-1), в то время как Gilliamella имел повышенные уровни у озимых пчел по сравнению с фуражирами (, рис. 2A, , пермутационный дисперсионный анализ ANOVA). за которым следует Тьюки P = 4.33e-08). Интересно, что мы также обнаружили, что пчелы-кормилицы имели повышенную бактериальную нагрузку по сравнению с собирателями (, рис. 2A, , P = 1.33e-5; и Рисунок 2B (). Уровни Gilliamella и Firm4 у пчел-кормилиц были такими же высокими, как и у озимых пчел, в то время как уровни Bifidobacterium, Lactobacillus Firm5 и B. apis находились на промежуточном уровне между фуражирами и озимыми пчелами (см. Дополнительную таблицу ). S2 для статистики).

Рис. 2. Размер и структура кишечного сообщества различаются у собирателей, медсестер и зимних пчел в 14 семьях.

Данные из 20 объединенных кишок, взятых у собирателей (F), медсестер (N) и зимних пчел (W) из нескольких ульев (n = 14). (A) Нормализованное количество клеток (см. Методы) семи отслеживаемых филотипов и их суммарная численность. ( B ) Число копий гена 16S рРНК на образец. ( C ) Относительный состав сообщества кишечной микробиоты на основе численности семи отслеживаемых филотипов (левая ось y). Черные ромбы показывают сумму общих численностей семи наблюдаемых филотипов (правая ось ординат). Заглавные буквы под рядами столбцов указывают на улей происхождения. (D) Проекция численности наблюдаемых филотипов на основные и вторые основные компоненты в объединенных выборках.Каждая точка представляет отдельный улей. Векторы корреляции представляют собой разные переменные, определяющие разделение по обеим осям. Черные линии показывают средние значения. Разные буквы обозначают группы, которые значительно отличаются друг от друга на основе апостериорных тестов Тьюки после перестановочного дисперсионного анализа. См. Дополнительную таблицу S2 для получения полных результатов статистики.

Различия в микробиоте кишечника собирателей, медсестер и озимых пчел также были очевидны из анализа относительной численности на уровне сообществ. B. apis и Lactobacillus Firm5 были более доминирующими у зимних пчел по сравнению с фуражирами, в то время как у собирателей филотипы F. perrara и S. alvi составляли большую долю сообщества ( Рисунок 2C). , статистику см. В дополнительной таблице S2 ). В PCA собиратели и озимые пчелы группировались отдельно вдоль PC1, что объясняет 57,3% вариации данных (, рис. 2D, ). В сообществах большинства выборок медсестер доминировали в меньшей степени B.apis , чем у озимых пчел (, рис. 2C, ). Однако они по-прежнему группировались более тесно с зимними пчелами, чем с собирателями ( Рис. 2D , MANOVA Wilks = 0,1, F _{(14,66) =} 7,9, P = 1,7e-9).

Таким образом, наш анализ по 14 ульям показывает, что различия в бактериальной нагрузке и структуре сообщества между зимними пчелами, фуражирами и медсестрами являются общей закономерностью, и что микробиота зимних пчел больше похожа на микробиоту медсестер с точки зрения абсолютное бактериальное обилие.

Пыльцевая диета увеличивает размер кишечного сообщества гнотобиотических пчел

Одной из движущих сил наблюдаемых различий в бактериальной нагрузке и структуре сообщества между зимними пчелами, фуражирами и медсестрами может быть диета. Диетические различия между тремя типами пчел были четко видны из рассеченных кишок (, рис. 3A-C, ). Прямая кишка зимних пчел и медсестер казалась желтой, что указывало на присутствие пыльцы, в то время как прямая кишка пчел-сборщиков казалась полупрозрачной, что указывало на отсутствие пыльцы.Более того, влажный вес кишок значительно различается между тремя типами пчел (ANOVA F _(2,68) = 24,13, P = 1,205e-8), при этом у собирателей в среднем кишечник в два раза легче, чем у медсестер ( Tukey P = 1.14e-6) и озимых пчел (Tukey P = 6.81e-8) ( Рисунок 3D ). При построении графика нормализованного числа копий гена 16S рРНК как функции веса кишечника мы обнаружили, что вес кишечника положительно коррелировал с общей численностью микробиоты у трех типов пчел (, рис. 3E, ).

Рис. 3. Диета — главный фактор, формирующий кишечные сообщества медоносных пчел.

(AC) Расщепленные кишки собирателей (A) , медсестер (B) и озимых пчел (C) , состоящие из урожая (c) (отсутствует в некоторых образцах), средней кишки (m ), подвздошная кишка (i) и прямая кишка (r) с прилегающим жалом и последним тергитом брюшка. (D) Вес влажного кишечника отдельных собирателей (F), медсестер (N) и озимых пчел (W). (E) Корреляция Спирмена между массой кишечника и бактериальной нагрузкой (оценена с помощью универсальных бактериальных праймеров 16S рРНК) у всех типов пчел.Серая область указывает доверительный интервал 95%. (F) Масса влажного кишечника экспериментально колонизированных пчел, которых кормили либо сахарной водой (SW), либо сахарной водой и пыльцой (SW + P). (G) Корреляция Спирмена между массой кишечника и бактериальной нагрузкой (оцененной с помощью универсальных бактериальных праймеров 16S рРНК) в двух группах лечения колонизированных пчел. (H) Общая численность семи отслеживаемых филотипов в двух экспериментальных группах колонизированных пчел. Пчелы с нагрузкой ниже предела обнаружения метода количественной ПЦР показаны под пунктирной линией.Разные буквы обозначают группы, которые значительно отличаются друг от друга на основе апостериорных тестов Тьюки после перестановочного дисперсионного анализа. Сравнение двух групп проводилось с помощью T-критерия перестановки. нс, незначительно; ***, P <0,001.

Чтобы продемонстрировать, что пыльцевый рацион напрямую связан с увеличением бактериальной нагрузки у медоносных пчел, мы экспериментально заселили недавно появившихся пчел сообществом из 11 бактериальных штаммов, представляющих семь основных бактериальных филотипов микробиоты кишечника пчел [6].Колонизированных пчел держали в лаборатории в течение десяти дней и кормили ad libitum либо стерильной сахарной водой и пыльцой (обработка SW + P), либо только сахарной водой (обработка SW). Мы обнаружили значительную разницу в весе кишечника между двумя видами лечения (, рис. 3F, , T-тест Велча, t = 9,433, P = 1,452e-11). В то время как масса кишечника пчел, получавших лечение SW, была сопоставима с массой кишечника пчел-собирателей, масса кишечника пчел, получавших лечение SW + P, была заметно выше, превышая даже таковые у озимых пчел ( Рисунок 3D и 3F ).Поразительно, но мы наблюдали положительную корреляцию между массой кишечника и численностью микробиоты как у колонизированных пчел в лаборатории (, рис. 3G, ), так и у рабочих пчел, взятых из улья (, рис. 3E, ). Более того, различия в бактериальной нагрузке отдельных членов сообщества между двумя экспериментальными обработками в значительной степени отражали разницу, обнаруженную между озимыми пчелами, медсестрами и собирателями: большинство филотипов было больше у пчел, питавшихся пыльцой, по сравнению с пчелами, питавшимися сахаром. только вода (, рис. 3H, , статистику см. в дополнительной таблице S2 ).Двумя исключениями были B. apis и F. perrara. В то время как B. apis имел сходные уровни между двумя экспериментальными обработками (Рисунок 3H) , его численность была выше у озимых пчел и медсестер по сравнению с собирателями (Рисунок 2A) . Интересно, что B. apis смог колонизировать только 75% всех пчел при отсутствии пыльцы. Зависимость от пыльцы для колонизации кишечника была еще более выраженной для F. perrara. Менее 50% экспериментально колонизированных пчел, подвергшихся обработке SW, имели определяемые уровни F.perrara, , а количество колонизированных пчел было относительно низким. Напротив, все пчелы, получавшие лечение SW + P, были колонизированы и имели относительно высокие и постоянные нагрузки F. perrara (Рисунок 3H) .

Взятые вместе, эти результаты показывают, что пыльцевый рацион приводит к увеличению веса кишечника и общей бактериальной нагрузки, обеспечивая правдоподобное объяснение некоторых различий в нагрузках, наблюдаемых между собирателями, медсестрами и зимними пчелами.

Обсуждение

В отличие от секвенирования ампликона 16S рРНК, кПЦР предоставляет информацию об абсолютной численности бактерий и, следовательно, позволяет определить, увеличиваются ли отдельные члены сообщества, уменьшаются или остаются неизменными с точки зрения количества бактериальных клеток в образцах.Например, в нашем исследовании относительная численность S. alvi снизилась у зимних пчел по сравнению с фуражирами и медсестрами (, рис. 2C, ). Однако этот эффект был обусловлен не уменьшением общего числа клеток S. alvi , а скорее увеличением числа других членов сообщества, как определено с помощью количественной ПЦР. Фактически, общая численность S. alvi осталась прежней у фуражиров, медсестер и озимых пчел (рис. 2A) . Такие подходы к количественному составлению профилей микробиома могут выявить важные ассоциации между бактериальными симбионтами и хозяином, как ранее было продемонстрировано для микробиоты человека [32] или микробиоты гусениц [43].Мы утверждаем, что при анализе микробных сообществ следует регулярно оценивать абсолютную численность, поскольку абсолютное количество клеток бактерии, а не ее относительная численность, может определять ее влияние на процессы в экосистеме.

Следует отметить, что количественная ПЦР является целевым подходом, т. Е. Мы можем количественно определять только те члены, для которых были разработаны конкретные наборы праймеров. Это ограничение для очень разнообразных микробных сообществ. Однако в текущем исследовании мы воспользовались тем фактом, что микробиота кишечника медоносных пчел состоит из относительно простого сообщества, в котором обычно доминируют семь проанализированных филотипов [5, 22, 23, 44–46].Следовательно, хотя наш подход не охватывал некоторых из неосновных членов, которые время от времени присутствуют в кишечнике пчелы, мы уверены, что большая часть разнообразия микробиоты кишечника пчелы была определена количественно. Это подтверждается тем фактом, что профили сообществ, полученные из данных кПЦР, выглядели очень похожими на профили, полученные в предыдущих исследованиях, основанных на секвенировании ампликона гена 16S рРНК [21, 28, 47–49].

Практически все представители кишечной микробиоты имели повышенные уровни у озимых пчел по сравнению с фуражирами, и многие также показали повышенные уровни по сравнению с медсестрами.Наиболее выраженные различия были обнаружены для Lactobacillus Firm-5 и B. apis, , что привело к заметному сдвигу сообщества в сторону этих двух филотипов. Поразительно, что этот сдвиг наблюдался в четырнадцати разных колониях в три разных года. Следовательно, «реконфигурация» микробиоты у озимых пчел, по-видимому, сохраняется в семьях Западной Швейцарии. Однако региональные различия в разнообразии цветков [24] или климата могут влиять на эти изменения.Следовательно, необходимы дополнительные обследования озимых пчел в других географических регионах, чтобы проверить сохранение этой модели. Интересно, что недавнее исследование, проведенное в Германии по воздействию зимних подкормок, также показало, что относительная численность Lactobacillus Firm-5 (а в одной экспериментальной группе также относительная численность B. apis ) заметно увеличивалась зимой. пчелы по сравнению с собирателями [19], что приводит к смене сообщества. Результаты этого исследования также согласуются с нашими выводами в том, что уровни F.perrara были значительно ниже у зимних пчел по сравнению с пчелами-фуражирами.

Что движет изменениями в бактериальной нагрузке и составе сообщества у озимых пчел? Возможным объяснением могут быть диетические различия между проанализированными типами пчел. Хорошо известно, что собиратели в основном питаются нектаром и медом, а медсестры и зимние пчелы также потребляют пыльцу [50]. Эти диетические различия также были очевидны для трех типов пчел, отобранных в нашем исследовании, на основании постоянных изменений внешнего вида и веса кишечника (, рис. 3A-C, ).Поразительно, но наш эксперимент по колонизации пчел с определенным бактериальным сообществом показал, что присутствие пыльцы в рационе значительно увеличивало вес кишечника и бактериальную нагрузку до уровней, сопоставимых с уровнями у зимних пчел, в то время как у пчел, питавшихся сахарной водой, эти уровни были более похожи на эти. фуражиров ( Рисунок 3F-H ). Таким образом, мы пришли к выводу, что диета является важным фактором, который может объяснить многие различия, наблюдаемые между типами рабочих пчел. Также было обнаружено, что сезонные изменения в составе микробиоты кишечника у популяций диких грызунов [51] и людей [52, 53] совпадают с диетическими сдвигами, что согласуется с общим представлением о том, что предпочтения в питании являются основным фактором, определяющим различия между сообществами в разных странах. широкий круг животных [54–56].

В случае медоносных пчел большее количество пищи в кишечнике может увеличить пропускную способность кишечной микробиоты. Кроме того, пыльца — это более богатая питательными веществами диета, чем нектар, мед или сахароза, предлагая большее разнообразие различных метаболических ниш для кишечных бактерий. Оба фактора, вероятно, способствуют увеличению бактериальной нагрузки у пчел, питающихся пыльцой, по сравнению с пчелами, питающимися только сахарной водой. Роль пыльцы как основной движущей силы наблюдаемых различий также подтверждается тем фактом, что бактерии с наибольшим увеличением общей численности ( Lactobacillus , Bifidobacteria , B.apis ) расположены в прямой кишке, которая является последней частью задней кишки, где пыльца накапливается до тех пор, пока пчелы не испражняются. В соответствии с этим предыдущий отчет показал, что численность бактерий в целом, а также некоторых отдельных филотипов ( Lactobacillus Firm-5, Bifidobacterium ) увеличивается в прямой кишке при потреблении пыльцы [57]. Однако это увеличение зависело от возрастного фактора и не было значительным, когда стерильная пыльца (аналогичная нашей обработке пыльцы) использовалась вместо хранимой пыльцы [57].В отличие от нашего исследования, экспериментальные пчелы не были заражены бактериями [57], что может сильно повлиять на рост и динамику сообщества. В целом, несмотря на определенные экспериментальные различия, наши результаты в целом согласуются с данными, которые были опубликованы ранее.

Однако не все изменения, наблюдаемые у озимых пчел, можно было повторить в нашем эксперименте по колонизации. Например, наблюдаемые различия в уровнях B. apis между собирателями, медсестрами и озимыми пчелами не наблюдались у экспериментальных пчел, которых кормили с пыльцой или без нее.Другой пример — F. perrara . Хотя эта бактерия была менее многочисленна у озимых пчел, чем у фуражиров и медсестер, успех колонизации F. perrara во многом зависел от наличия пыльцы у экспериментальных пчел. Это говорит о том, что другие факторы могут способствовать различиям в сообществе зимних пчел по сравнению с фуражирами или медсестрами. Во-первых, зимние пчелы имеют увеличенную продолжительность жизни со средней продолжительностью жизни ~ 6 месяцев по сравнению с ~ 4 неделями в случае летних пчел (т.е.е. медсестры и фуражиры) [58]. Напротив, пчелы в эксперименте по колонизации были сопоставлены по возрасту и взяты образцы через десять дней после появления всходов. Хорошо известно, что физико-химическое состояние кишечника изменяется с возрастом животных, модулируя их микробиоту кишечника [59–61]. Во-вторых, зимние пчелы питаются пыльцой, хранившейся в улье от нескольких недель до месяцев. Ранее было показано, что употребление в пищу пожилых людей с пыльцой влияет на состав микробиоты кишечника медсестер, вызывая дисбактериоз и более высокую смертность [12].В-третьих, зимние пчелы сохраняют свои фекалии в кишечнике в течение длительных периодов времени, что, вероятно, влияет на физико-химические условия и доступность питательных веществ в кишечнике. В-четвертых, температура тела пчел составляет около 21 ° C зимой и около 35 ° C летом [62]. Это может повлиять на скорость роста бактерий. Действительно, в недавнем метагеномном исследовании было показано, что кишечные бактерии имеют более низкую среднюю репликацию популяции у старых зимних пчел по сравнению с молодыми пчелами-кормилицами, что указывает на снижение скорости репликации [18].В-пятых, зимние пчелы демонстрируют сниженную экспрессию иммунных генов [63–66] и измененный метаболизм белков [67].

Как различные факторы влияют на динамику конкретных членов микробиоты кишечника, должно стать предметом будущих исследований. В случае F. perrara возникает соблазн предположить, что снижение уровня колонизации у старых озимых пчел может быть следствием специфического иммунного ответа, вызванного хозяином по отношению к этой бактерии [10], устраняя ее из кишечника. по мере старения пчелы.Еще одно интересное открытие заключается в том, что уровни S. alvi практически не менялись в зависимости от типа рабочей пчелы или двух диетических обработок в эксперименте. Это говорит о том, что колонизация S. alvi не зависит от состояния питания, физико-химических условий в кишечнике или численности других членов сообщества. Возможное объяснение может заключаться в том, что ниша S. alvi зависит от хозяина, а не от диеты, потому что она избирательно колонизирует эпителиальную выстилку подвздошной кишки, и было предложено полагаться на присутствие кислорода для роста, выделяемого хозяином. эпителий [8, 44, 68].

Два филотипа, преобладающие у озимых пчел, Lactobacillus Firm5 и B. apis , по-видимому, получают выгоду от специфических условий кишечника зимних пчел. Первичный метаболизм Lactobacillus Firm5 — это ферментация сахаров или производных сахаров до органических кислот [22, 69]. Геномный анализ показал, что эти бактерии обладают большим разнообразием гликозидгидролаз и транспортеров фосфотрансфераз для расщепления и транспорта сахаров. Более того, недавнее исследование метаболомики показало, что флавоноиды, вторичные метаболиты растений, которых много в пыльце, являются заметными субстратами этих бактерий.В отличие от Lactobacillus Firm5, B. apis кодирует полный цикл TCA и несет в себе дыхательную цепь. Некоторые штаммы B. apis также обладают генами деградации ароматических соединений. Возможно, что метаболические взаимодействия между этими двумя конкретными филотипами или увеличенное время удержания пыльцы в кишечнике (что приводит к доступности дополнительных питательных веществ) способствует увеличению их численности у озимых пчел.

Большинство недавних потерь колоний происходит в зимние месяцы [33, 34].Следовательно, зимние пчелы очень важны для выживания колонии, и необходимо лучшее понимание факторов, влияющих на их состояние здоровья, включая микробиоту кишечника. Таким образом, наш анализ показал, что микробиота кишечника озимых пчел претерпевает характерные изменения. Эти изменения могут иметь важные последствия для хоста. Например, они могут влиять на физиологию или метаболическое состояние хозяина за счет оптимизации потребления энергии [70] или повышать устойчивость к колонизации против патогенов.Поэтому в будущих исследованиях следует уделять особое внимание функциональной роли кишечной микробиоты зимних пчел и здоровью их колоний.

Конкурирующие интересы

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Дополнительные материалы

Дополнительные рисунки: содержат рисунки S1-S3

Дополнительная таблица S1: содержит информацию о праймерах, которые использовались в этом исследовании.

Дополнительная таблица S2: Содержит результаты статистических тестов, использованных в этом исследовании.

Дополнительные материалы

Дополнительные рисунки

Рисунок S1. Распространенность филотипов, которые не были обнаружены у каждой медоносной пчелы в колонии, отобранной за два года.

Месячная распространенность (т. Е. Доля пчел, у которых бактериальный филотип был обнаружен в конкретный месяц) (A) Lactobacillus Firm-4, (B) B. apis и (C) F. perrara . Целевая бактерия считалась отсутствующей, когда сигнал qPCR был ниже предела обнаружения набора праймеров (см. дополнительную таблицу S1 ).Цифры в верхней и нижней части столбиков указывают количество пчел, у которых цель отсутствует и присутствует, соответственно. Звездочкой указаны недостающие данные за июль 2015 года из-за ошибки выборки / извлечения.

Рисунок S2. F. perrara Нагрузки коррелируют с наличием парши.

F. perrara нормализованное количество клеток (см. Методы) в кишечнике собирателей (F) и озимых пчел (W) с фенотипом парши или без фенотипа в области привратника. Точки данных под черной пунктирной линией соответствуют образцам без детектируемого уровня F.perrara на основе предела обнаружения нашего метода количественной ПЦР. Статистика: перестановочный T-тест.

Рис. S3 Ежемесячные тенденции численности специфических бактерий медоносных пчел.

Абсолютная численность семи исследуемых филотипов у отдельных фуражиров и зимних пчел, отобранных в течение двух лет: Gilliamella, S. alvi , Bifidobacterium, Lactobacillus Firm-5, Lactobacillus Firm-4, B. apis и F. perrara . Последний график показывает суммарную численность каждой пчелы.Учитывались только пчелы с обнаруживаемыми уровнями. Пчелы с нагрузкой ниже предела обнаружения метода количественной ПЦР показаны под пунктирной линией. Звездочкой указаны недостающие данные за июль 2015 года из-за ошибки выборки / извлечения.

Дополнительные таблицы

Таблица S1. Праймеры, использованные в этом исследовании, и характеристики стандартной кривой.

^a Температуры плавления были рассчитаны с помощью онлайн-инструмента, описанного в [5]. ^b Количество локусов гена-мишени на геном соответствующего организма оценивали на основе аннотаций базы данных JGI. ^c LOD относится к пределу обнаружения наборов праймеров, выраженному здесь как наименьшее количество копий плазмиды, надежно обнаруживаемых с помощью кПЦР при выполнении стандартных кривых.

Благодарности

Мы хотели бы поблагодарить Пола Реймонда, Клемента Эттера, Кэтрин Лейн за их помощь во время отбора проб медоносных пчел. Мы также благодарны Эндрю Куинну и Фабьен Вихманн за комментарии к рукописи. Это исследование было поддержано Европейским исследовательским советом (ERC-StG «MicroBeeOme») и Швейцарским национальным научным фондом (номер гранта 31003A_160345 и 31003A_179487), полученным PE.Спонсор не имел никакого отношения к дизайну исследования, сбору и анализу данных, принятию решения о публикации или подготовке рукописи.

Дополнительные ссылки

1. 1.
2. 2.
3. 3.
4. 4.
5. 5.

Как стать медсестрой

Итак, вы хотите «Настоящий чай» по сестринскому делу в 2021 году. Я все это проливаю здесь для тебя! Я говорю о степенях, сертификатах, перспективах современного медсестринского дела, здесь нет фильтров!

Начну с начала.Меня зовут Тори Мескин BSN RNC-NIC. Я работаю медсестрой у постели больного с 2013 года. С тех пор я увидел большие сдвиги в здравоохранении в целом. Я работал у постели больного (полный рабочий день, неполный рабочий день, дни / ночи, персонал и поездки RN, в качестве отделения интенсивной терапии, педиатрического CC Float RN CVICU, онкологии, PICU, NICU RN) и т. Д. Я встречал много медсестер, MD, DO, NPs , PA, RT, RD, OT и т. Д. На этом пути и накопили так много знаний на этом пути. И я хочу поделиться этим с ВАМИ !!

Но я не хотел делать это в одиночку, я хотел взять с собой еще одного специалиста в этой области.Кто-то, кто видел мир медсестер, как я, но по-разному.

Поэтому я нанял своего соведущего / гостя шоу Cellfie Podcast Show и дорогого друга Саманту MSN RNC C-NPT, или более известного в Instagram как @heysamanthaa! Мы сотрудничали, чтобы предоставить вам только самое лучшее, что есть в Nursing 101!

Она медсестра, профессор и блогер! В 2011 году она получила степень бакалавра медсестер (BSN) и начала работать в отделении интенсивной терапии уровня IV. Коллективно мы решили познакомить вас с последними новинками.«Настоящий чай» и взгляд с высоты птичьего полета на мир медсестер в современной перспективе 2020 года !!

Сырое, Настоящее, Нефильтрованное! Мы обслуживаем это по-настоящему! Ко мне присоединилась коллега-медсестра, профессор, блогер (детская летная медсестра), куратор инстаграмма Саманта Манассеро. Мы даем полную информацию о текущем состоянии медсестер, перспективах настоящей чайной медсестры на 2020 год, степенях, сертификатах, мировоззрении, ресурсах, советах и ​​приемах для получения этой работы и многом другом!

Сегодня мы обсуждаем, кто, что, как и почему медсестринское дело с высоты птичьего полета.

20 Что нужно знать о сестринском деле в 2020 году

# 1. 2020 Дракончик, который был дерьмовым шоу ….

«Год медсестры и акушерки». Не уверен, что мы имели в виду именно это! Доказательство нашей любви к медсестре с помощью World Pandemic. Честно говоря, ребята, прошедший год был сумасшедшим. ЛЮБОЙ, работающий в сфере здравоохранения, может подтвердить это. По сей день, когда я пишу это, все меняется.(Август, 2020 г.) (Политика, исследования, основанные на фактах, стандарты, приоритеты и т. Д.). И, честно говоря, это не остановится в ближайшее время. Мы будем продолжать учиться, менять, менять планы. Таким образом, здравоохранение. Никакой ерунды, моя семья «Типстеров», здравоохранение — ЗВЕРЬ! И, очевидно, потребовалась пандемия, чтобы раскрыть его истинный размер дракона.

# 2 Хорошие вещи на самом деле случаются, да, я это сказал.

В это трудно поверить. Я несколько раз говорил об этом в подкасте, но хорошие вещи происходят.Эта пандемия действительно заставила мир объединиться. Для теплой осторожности выставить себя напоказ. Одной из величайших вещей, которую я смог стать свидетелем, было ежедневное обновление от поставщиков медицинских услуг со всего мира, вносящих свой вклад в частную группу FB. MD, NP, PA, DO, внутренние медики, хирурги, RN, RT — все сотрудничают, чтобы победить этот вирус. Короче говоря, это что-то зажгло. Давай продолжим. Здесь нужны ваши инновации.

# 3 Очень сложно выбрать медсестру по специальности

Поверьте мне, современные медсестры огромны !!! И никто из медсестер не знает (точно), что они хотят делать! Даже медсестры, которые в начале своей карьеры являются «крепкими орешками» для отделения, могут испытать выгорание.Сестринское дело — одна из немногих профессий, которая предлагает БОЛЬШОЕ количество вариантов. Ничего страшного, глубокие вдохи. Усердно спешите, двигайтесь вперед, и ваша карьера развернется. Поверьте, у меня были возможности, о которых я никогда не думал, когда начал свою карьеру 8 лет назад. Кроме того, тоже нормально передумать! Если вы попробуете что-то и ненавидите, то передумать — это нормально.

# 4 Мне не нравится уход, что еще я могу сделать ?!

Слава Богу! Есть так много разных путей, которые нужно учитывать.Вы, ребята, медсестры, буквально захватили мир. В прямом и переносном смысле. В мире медсестер очень много блюд на выбор.

Где вы можете найти работу медсестры вдали от постели?

Вот несколько мест, где можно найти альтернативную сестринскую карьеру, а также работу медсестры, не связанную с прикроватным уходом, которую вы можете найти:

• Кабинеты врача, , если вы ищете административную роль с ограниченными обязанностями по уходу за пациентами

• Исследовательские лаборатории, , если вы хотите изучать болезни, тестировать новые лекарства и тесно сотрудничать с учеными, врачами и пациентами

• Медицинские учреждения, больницы и клиники с открытыми административными и руководящими должностями

• Фармацевтические компании , , если вы ищете для обучения пациентов или должности торгового представителя

• Частные и государственные учебные заведения, , если вы хотите стать медсестрой-педагогом

• Государственный, общественный и правительственные учреждения , если вы ищете роли в области общественного здравоохранения, такие как в качестве школьной медсестры, где вы работаете для обучения целых сообществ

• Страховые и юридические фирмы, , если вы хотите специализироваться на медицинских законах и помогать в судебных исках, связанных с злоупотреблениями, несчастными случаями и компенсациями рабочим

• Частный компаний, для профессиональных сестринских должностей

Варианты работы медсестер без прикроватной работы

В настоящее время у медсестер есть больше возможностей оставить традиционную среду ухода за пациентами и работать в качестве информатиков, аналитиков и консультантов , а также для управления проектами , реализация, продажи и руководящие роли .

Медсестра-тренер по здоровью

Медсестры-консультанты работают с клиентами один на один, чтобы помочь им в достижении целей оздоровления, поддержании здорового образа жизни и профилактике заболеваний в будущем. Работая в медицинских учреждениях, страховых компаниях и агентствах социальных услуг, в их обязанности входит разработка планов питания, установление безопасных режимов упражнений, а также мониторинг и мотивация своих клиентов. В зависимости от работодателя, медсестры могут работать в этой сфере со степенью младшего специалиста, хотя для получения наиболее высокооплачиваемых должностей требуется степень бакалавра наук по медсестринскому делу (BSN) и / или сертификат по питанию.

Средняя зарплата : 47 000 долларов США

Юридический консультант медсестры

Сфера юридических консультаций медсестер предлагает хорошо оплачиваемую альтернативную карьеру для зарегистрированных медсестер. Эти специализированные медсестры изучают случаи заболевания и инвалидности, трудовые книжки и другие соответствующие документы, готовят резюме и дают рекомендации, которые используются в судебных разбирательствах, расследованиях правоохранительных органов и страховых случаях. .Возможности трудоустройства увеличиваются для медсестер, имеющих BSN и имеющих опыт работы в клинической практике и ведении дел, параюридическое обучение или специализированную юридическую сертификацию.

Средняя зарплата : 78 000 долларов США

Медицинская сестра

Медсестры, работающие в основном на предприятиях, работают с руководителями и менеджерами для обеспечения здоровья и безопасности сотрудников. Они расследуют и лечат производственные травмы и заболевания, а также выявляют опасные факторы на рабочем месте. Медсестры помогают руководству разработать политику безопасности и проводят семинары для сотрудников по вопросам здравоохранения и профилактики.Лицензированные медсестры, прошедшие BSN, получают самую конкурентоспособную заработную плату за эту должность, одну из лучших медсестер за пределами больницы. Работодатели обычно предпочитают нанимать профессионалов, имеющих специализированные сертификаты Американской ассоциации медсестер по охране труда.

Средняя зарплата : 69 000 долларов США

Медсестра-акушерка

Зарегистрированные медсестры передового опыта, которые ищут уникальные медсестринские должности со специализированным фокусом, находят возможности для вознаграждения и высокие зарплаты на должностях медсестер-акушерок.Медсестры-акушерки, работающие в больницах, акушерских клиниках и все чаще занимающиеся частной практикой, специализируются на дородовом уходе, репродуктивном здоровье родов и родов, а также на гинекологической помощи. степень магистра с концентрацией медсестры-акушерки и сертификат Американского совета по сертификации акушерок.

Средняя зарплата : 97 000 долларов США

Медсестра-педагог

Спрос на медсестер-преподавателей увеличился по мере того, как все больше студентов поступают в медицинские школы, а работающие медсестры ищут кредиты на повышение квалификации для выполнения требований к продлению лицензий.Работая в академических учреждениях и учебных больницах, медсестры-преподаватели разрабатывают и преподают учебные программы для программ получения диплома, младшего специалиста, бакалавриата, магистратуры и непрерывного образования. Карьера в медсестринском образовании обычно требует наличия ученой степени, все чаще на уровне докторантуры. Помимо клинического опыта и повышения квалификации, кандидаты на должности медсестер должны получить диплом сертифицированного медсестры-педагога.

Средняя зарплата : 76 000 долларов США

# 5 У вас есть БЕЗОПАСНОСТЬ РАБОТЫ (точно)

Прогнозируемая потребность в медсестрах продолжает расти.Наши пациенты становятся все хуже и хуже. Всегда есть потребность в медсестрах, и практически везде, куда бы вы ни посмотрели (действительно, Monster, Linkdin), вы увидите работу медсестер. Мк, ну ты же знаешь, я не даю здесь ничего, кроме настоящего чая. За свою 8-летнюю карьеру я дважды испытал это падение живота, когда я знал, что моя работа будет на кону. Первый раз был через 6 месяцев моей карьеры. Моя больница была полностью уволена из-за сокращения бюджета. Второй раз был фактически во время этой пандемии.В начале пандемии педиатрическое население не было поражено этим вирусом. В то время как наши друзья из взрослого мира носились, как цыплята с отрезанными головами, в педиатрическом мире было МЕДЛЕННО. Так медленно, что некоторые из нас (в том числе медсестры с суточными) рисковали потерять работу! К счастью, все наладилось, и все изменилось к нашим сменам. НО я считаю глупым говорить, что мы неприкасаемые. Кто угодно может потерять работу!

# 6 Используйте LinkedIn в своих интересах!

Я лично считаю, что это один из самых недооцененных инструментов, которые у вас есть.Приведите в порядок этот аккаунт Linkdin! Linkdin действует не только как платформа, но и как поисковая система. Я думаю, что всегда полезно обновлять эту вещь! Вы никогда не знаете, какие возможности рекрутер хочет вам предложить. После года или двух опыта мир — ваша устрица. Зайдите, чтобы проверить вакансии и пообщаться с людьми!

# 7 Медсестры зарабатывают деньги!

Ага, делаем! Даже гуна не лжет об этом. Имейте в виду, что ставки и зарплаты варьируются от штата к штату и даже от региона.Каждая больничная организация индивидуальна. Например, я работал в двух суточных отделениях интенсивной терапии одновременно, и одна работа приносила на 16 долларов больше, чем другая. Кроме того, я должен сказать это. Как у прикроватной медсестры, можно увеличить зарплату «боковыми» переездами. Это означает, что я оставил свою работу клинической медсестры II и устроился на другую работу клинической медсестры II, зарабатывая на 10 долларов больше в час. Та же позиция, но организация учитывала мой опыт, и поэтому моя стартовая зарплата ценилась выше. Вот почему в наши дни так много медсестер меняют работу.(Для тех, кто ищет возможности для повышения заработной платы).

2020 Самые высокооплачиваемые рабочие места медсестры

1. Сертифицированный дипломированный медсестра-анестезиолог — 167 950 долларов США

2. Практикующая медсестра

Практикующая медсестра –107 030 930 9107 030 9000 9107 030 9000 Специалист — 106028 долларов США

Практикующая психиатрическая медсестра — 105 658 долларов США

97074 Медсестра интенсивной терапии — 102 487 долларов США

Медсестра по обезболиванию — 101 916 долларов США

Администратор медсестры — долларов США 1075

Семейная практикующая медсестра — 98 408 долларов США

Зарегистрированная медсестра Первая помощница — 96418 долларов США

4 9000 — 89 637 долларов США

Медсестра-педагог — 81350 долларов США

Медсестра по информатике — 79 014 долларов США

74 588 долларов США

Медсестра, занимающаяся политикой здравоохранения — 71 703 доллара США

# 8 COVID — это не ВЕСЕЛЫЕ!

ПОЛНЫЙ ТЕНЬ здесь.Ребята, это сложно. Не лги. Независимо от условий, в которых мы работаем, работать во время этой пандемии ТРУДНО. Здесь нет лжи, это самое трудное время, которое многие медсестры (и скрестив пальцы) когда-либо увидят в нашей медсестринской карьере. Медсестер попросили подойти к тарелке, о которой мы никогда не просили … Я не уклоняюсь от этого разговора. Медсестры уволились. Да, это случилось. Честно говоря, я их не виню. Мне повезло, я никогда не чувствовал, что моя забота о пациенте или семье может угрожать моему здоровью.Однако так много медсестер по всей стране не чувствовали поддержки в защите своего здоровья. Здесь я предупреждаю вас … убедитесь, что вы чувствуете себя в безопасности и получаете поддержку в вашей рабочей среде! Это включает СИЗ, соотношение пациентов, заработную плату и общую рабочую среду. COVID пройдет … убедитесь, что ваша работа всячески поддерживает вас. Поверьте мне, если это не так, есть много мест, где можно попробовать !!!

# 9 Стать медсестрой = обучение на протяжении всей жизни

По какой-то причине я никогда не осознавал этого, пока глубоко учился в U of A, #beardown! Думаю, я никогда не осознавал этот аспект ухода за больными.Мы занимаемся человеческим бизнесом. С тех пор, как я начала работать медсестрой 8 лет назад, ситуация кардинально изменилась. Новые практики, исследования, основанные на фактах, оборудование, приоритеты ухода и т. Д. Не говоря уже о том, что вы должны получать 30 CEU каждые 3 года для сохранения лицензии. Поверьте, это не так плохо, как вы думаете. (Помимо COVID), пойти на конференцию с друзьями на выходные вдали от больницы — это на самом деле весело. Часто в больницах требуются занятия по специальностям (кардиология, хирургия, ЭКМО, обновленная практика и т. Д.), Где вы также можете заработать CEU.

# 10 Вы идете на битву «ВЫГАР»

По некоторым причинам современная медсестра чувствует это все больше и больше. Будь то давление у постели больного, соотношение пациентов, человеческий энергетический обмен, физический труд, длительные поездки на работу, требования со стороны руководства, работа с людьми в их лучших и худших проявлениях, требования со стороны семей, работа во время пандемии, хорошо, вы понимаете. Это то, с чем вы столкнетесь. И поверьте мне, это трудно преодолеть.

Работать медсестрой, честно говоря, довольно славно.Вроде все хорошо и плохо. Да, мы можем работать 3 дня в неделю, но, скорее всего, каждая медсестра скажет вам, что хотя бы 1 или 2 из этих дней — это выздоровление. Да, мы зарабатываем хорошие / приличные деньги, но есть смены, которые нельзя даже прервать, чтобы пописать, присесть или попить воды. Да, у нас есть дар помогать кому-то каждый день, но есть пациенты / семьи, которые ругаются, плюются, пинают, кричат, кусают (да кусают). Да, у нас есть много возможностей в мире медсестер, но ожидания также растут (сертификаты, удовлетворенность пациентов, результаты, удовлетворяющее руководство).Да, нам доверяют больше всего, но часто нас меньше всего уважают / ценят.

Но нам это все еще нравится. Мы все еще здесь для наших пациентов и их семей. Мы по-прежнему выступаем за эти приказы, планы по уходу, дополнительное одеяло, тайком чашку кофе, объясняем это еще раз, звоним этому доктору из-за этого «внутреннего ощущения», говорим от лица родителя, который не понимает, еще раз позвонить в лабораторию, поймать неправильную дозу до того, как она повлияет на пациента, побежать, чтобы предоставить еще раз для XYZ, снова вызвать врача-консультанта, чтобы обновить данные у постели пациента, утешить беспомощного члена семьи, подготовить новое поколение медсестер , консультирование нового поколения MD и др.Вы уловили суть.

# 11 Лечить себя. Уход за собой необходим!

Действительно трудно объяснить глубокое истощение ядра, которое вы чувствуете, возвращаясь домой. Будь то больница или ваше сумасшедшее отделение, я действительно могу говорить о чистой усталости, которую вы чувствуете, идя за дверью. Сердце колотится, снимай туфли, глубоко вздыхай, входя в дверь. Дай мне пива для душа, когда ты пытаешься поднять ногу над ванной в душе от усталости. Ребята, я живу этим.Я понял. Вот почему я твердо верю в то, что нужно наполнить эту чашу. Я понимаю, у всех нас есть этапы жизни. Может быть, вы мама, и у вас нет выбора для моего любимого (массажа до COVID или ухода за лицом), может быть, это поездка к цели (без детей!), Маникюр, гамбургер, который вы так жаждали, поход , пикник, выпивка с другом и т. д. В итоге убедитесь, что вы чувствуете себя человеком.

Потому что поверьте мне! Нет ничего хуже, чем резкая медсестра, ухаживающая за пациентами.

Не все так хорошо.

# 12 Если вы ненавидите свою работу медсестры, измените ее!

Я все время говорю об этом через Instagram ( @ nur.tori_ ) и подкаст ( Медсестра Тори Селлфи Шоу ) Если вы ненавидите свою работу, смени ее! Слишком много работы медсестер и возможностей жаловаться, сука, стонать о работе. Если вы недовольны, найдите способ изменить это для себя. Я очень сторонник « Гэри Ви «, наполненный возможностями и идеей, что У ВАС ЕСТЬ ОДНА ЖИЗНЬ! КАК ВЫ ХОТИТЕ ПОТРАТИТЬСЯ ?!

# 13 Будьте любопытны !!!

Спросите окружающих…. Ребята, я не думаю, что это поколение достаточно ценит это! Окружающие полны советов, жизненных приключений, кусочков мудрости. Я не могу объяснить вам, сколько раз я чему-то учился у кого-то, просто спрашивая: «Как проходит твой день?», «У тебя есть дети?», «Ты всегда здесь работал?» … в разговоре меня всегда удивляют !!!!

# 14 Веселая работа медсестры!

Сгорел? Хорошая новость для тебя! Есть много вакансий, на которые стоит обратить внимание.Я провел небольшое исследование и обнаружил эти вакансии в поиске. Просто нужно было показать вам, что есть что-то для каждой медсестры! Начнем ……..

Медсестра лагеря

• Ассоциация медсестер лагеря ( ACN ) считает, что лагерь найдется для всех. Как медсестра, определите, какой тип лагеря больше всего выиграет от вашего опыта и опыта. Некоторые лагеря ориентированы на молодых людей с онкологическими заболеваниями, взрослых с психическими расстройствами или другие особые группы населения.

• Лагеря могут также специализироваться на каком-либо виде деятельности (например, верховая езда, походы в поход), предлагать насыщенные приключенческие программы (например, гребля на каноэ по бурной воде) или предоставлять широкую общую программу с мероприятиями на набережной, стрельбой из лука, ремеслами, палатками. , и / или различные виды спорта. Лагеря управляются церквями, агентствами (такими как девушки / бойскауты или YMCA / YWCA) и даже частными корпорациями или отдельными лицами.

Медсестра NASCAR

• Для участия в гонках NASCAR требуется много людей, включая медицинский персонал.В качестве старшего директора медицинского отдела NASCAR Лори Шеппард, RN управляет повседневными операциями своего отдела и уделяет особое внимание медицинским потребностям гоночной серии.

«Наша команда обеспечивает постоянную связь с гоночными командами, следит за их прогрессом посредством последующего ухода и их возвращения к соревнованиям. Мы также работаем с группой исследований и разработок NASCAR в постоянных усилиях по повышению безопасности », — говорит она .

• Она работает с несколькими другими штатными медсестрами в штаб-квартире NASCAR в Дейтона-Бич, Флорида.В течение сезона в ее обязанности также входит посещение почти 30 гоночных трасс в 25 штатах и ​​в Канаде.

Медсестра-медсестра

• Вы видели, сколько новых медицинских телешоу транслируется на сетевых и кабельных станциях? И подумайте обо всех фильмах, которые вы смотрели, в которых есть драматические сцены в больницах.

• Чтобы они выглядели и чувствовали себя аутентичными, медсестры и другие медицинские работники часто консультируются, чтобы убедиться, что они используют медицинское оборудование, словарный запас и процедуры правильно.

• Хотя эта работа, безусловно, гламурная, как и большинство голливудских работ, дело в том, кого вы знаете. Грег Споттисвуд, создатель и исполнительный продюсер канадской драмы Remedy объясняет .

• «Вы встречаетесь с этим человеком, говорите о шоу и измеряете его температуру с точки зрения его заинтересованности в такой работе. Это не похоже на то, как в газету помещают объявление ».

• Это отличная карьера, если вы можете продолжать работать, но, вероятно, вам будет разумно сохранить и свою обычную работу.

Медсестра Диснея

• Можете ли вы вспомнить какой-либо другой тип медсестры, где вы можете вызвать Микки Мауса или принцессу, чтобы помочь пациенту почувствовать себя лучше? Шерил Таламантес, RN, BSN, работает менеджером по обслуживанию гостей курорта Диснейленд. Она проработала медсестрой 34 года и описывает, каково это работать в тематическом парке:

• «Гости приезжают со всей страны и со всего мира, и бывают ситуации, когда мы также преодолеваем языковой барьер. как культурные традиции », — говорит она. «Помимо пунктов оказания первой помощи в каждом из наших парков, у нас есть пункты оказания первой помощи для гостей отеля».

• Работая медсестрой Disney , вы можете спуститься в подводную лодку или подняться по лестнице в домик на дереве, чтобы кого-то побаловать.

• «Мы работаем над развлечениями, а также поддерживаем четыре марафона в год. У нас на курорте всегда много людей, а это значит, что мы можем увидеть и отреагировать практически на все.Таким образом, наши медсестры должны обладать хорошими навыками оценки и чувствовать себя комфортно при работе со всеми возрастными группами », — добавляет Таламантес.

Медсестра на яхте

• Персонал зафрахтованных роскошных яхт должен предоставлять первоклассный сервис всем своим гостям. Одна из таких услуг — медицинское обслуживание по запросу. Экипаж на яхте, как правило, небольшой, требующий навыков медсестры в ограниченном объеме, поэтому медсестры, выбирающие эту карьеру, должны быть готовы также действовать в качестве тушеного мяса или матроса.

• Большинство медсестер экипажа живут в очень тесных помещениях во время чартера, но деньги, которые они зарабатывают, и опыт, который они получают в выходные дни, с лихвой компенсируют это. Похожая специальность — , медсестра круизного лайнера .

• Программы медсестер Show Me

Беговая медсестра

• Медсестры сопровождают пациентов во время их перевозки самолетом. Большинству этих пациентов требуется расширенная интенсивная терапия, и летные медсестры несут полную ответственность за весь непосредственный уход за пациентами во время транспортировки.

• Они часто работают с фельдшерами для оказания базовой и расширенной поддержки жизни и лечения острых травм. Из-за уникальной обстановки (вертолеты и самолеты) летные медсестры также должны пройти курс авиационной медицины Департамента транспорта. Также введены ограничения по весу для безопасного размещения остальной части экипажа и медицинского оборудования.

• Дополнительную информацию о сертификации в качестве летной медсестры см. На веб-сайте Совета по сертификации медсестер (BCEN) .

Молодежная медсестра-трансгендер

• С ростом осведомленности и признания трансгендерного населения все больше и больше пациентов обращаются за медицинской помощью в более молодом возрасте.

• Центр здоровья и развития молодежи при детской больнице Лос-Анджелеса принимает многих из этих маленьких пациентов. Бьянка Сальветти, практикующая медсестра, говорит: «»: «Сейчас у нас в листе ожидания 100 человек, и мы добавляем 5-6 пациентов в неделю.

• «Многие молодые люди испытывали эти чувства в течение долгого времени и просто не знали, как их сформулировать».

• Больница предлагает гормональное лечение, пубертатные блокаторы, грудную кладку и амбулаторную хирургию.

• «Лучшая часть этой работы — помочь кому-то стать самим собой. Обычно они не видят счастья в конце туннеля. Мне нравится быть частью команды, которая помогает им стать такими, какие они есть на самом деле », — говорит она.

• Она помогает обучать своих пациентов, следя за тем, чтобы они понимали, как делать себе инъекции гормонов, применять связующие для груди или просто решать свои повседневные проблемы.

Медсестра, отвечающая за политику в области здравоохранения,

• Поскольку система здравоохранения становится все более сложной и дорогой, некоторые медсестры выступают за изменения, чтобы сделать ее более доступной и доступной.

• Медсестры, занимающиеся политикой здравоохранения, не работают с пациентами на клиническом уровне.Скорее, они работают, чтобы влиять и создавать государственную политику, которая в конечном итоге приведет к более здоровому населению. Вы можете найти их в исследовательских фирмах, государственных учреждениях и медицинских организациях.

• При таком большом разнообразии условий работы трудно определить среднюю зарплату медсестры, занимающейся политикой здравоохранения. Тем не менее, по оценке одного веб-сайта , эта средняя сумма составляет около 95 000 долларов в год.

• Кроме того, поскольку глобальная политика в области здравоохранения требует более широкого взгляда на систему здравоохранения, медсестры, занимающиеся политикой здравоохранения, должны иметь ученые степени.

Медсестра-тренер по здоровью

• Персональные тренеры становятся все более востребованными. От питания и фитнеса до карьеры и бизнеса, и даже отношений и любви, тренеров можно найти практически в любом аспекте нашей жизни.

• Персональные тренеры по здоровью, уделяя больше внимания индивидууму, могут способствовать здоровью, устойчивости и качеству жизни, направляя своих пациентов к стратегиям более здорового образа жизни. Они служат для преодоления разрыва между посещениями врача и повседневной жизнью.

• Эти медсестры-инструкторы по здоровью работают в самых разных условиях, включая страховые компании, корпорации, консалтинговые фирмы, и многие из них работают не по найму и имеют собственную практику.

• Начинающие тренеры должны получить медицинскую или медицинскую степень в той или иной форме. После этого им следует запросить дополнительную сертификацию в таких организациях, как Национальное общество тренеров по здоровью или пройти программу коучинга в аккредитованном колледже

Медсестра по каннабису

• По мере того, как все больше штатов осознают преимущества медицинской марихуаны и сделайте это законным, отчаявшимся пациентам потребуется руководство о том, как правильно использовать эти вещества для лечения их заболеваний и состояний, зачастую ограничивающих их жизнь.Вот где на помощь приходит медсестра Cannabis Nurse .

• Из-за уникального статуса марихуаны как незаконного на федеральном уровне медсестры, работающие с каннабисом, также должны помогать своим пациентам ориентироваться в этих серых зонах и предоставлять своим пациентам информацию для обсуждения с остальной частью своей медицинской бригады и близких.

• Любая лицензированная медсестра может стать медсестрой по каннабису, и Американская ассоциация медсестер по каннабису предлагает тщательное обучение по этой развивающейся специальности.

# 15 Существует МНОГО ВИДОВ дипломов медсестер! Давайте разберемся в деталях

Когда дело доходит до степени медсестры, существует множество различных вариантов, соответствующих вашей карьере и доходам, временным рамкам, образу жизни и бюджету. Есть так много способов стать медсестрой. От образования, продолжающегося от нескольких месяцев до нескольких лет и включающего фундаментальные навыки медсестры, до продвинутой специализированной практики, есть несколько профессий, которые предлагают более разнообразные возможности, чем медсестра.

CNA

LVN

ADN

BSN

ABSN

MSN

Докторантура (DNP)

PhD

1.Сертифицированный помощник медсестры

Общие должности на этом уровне включают: сертифицированный помощник медсестры (CNA), зарегистрированный помощник медсестры (RNA), лицензированный помощник медсестры (LNA), непосредственный работник по уходу, помощник по уходу, помощник по дому или помощник по личному уходу.

• Срок до завершения: от нескольких недель до нескольких месяцев, при условии сочетания школьного образования и практического клинического опыта. После завершения студенты должны сдать государственный тест, чтобы получить сертификат; требования широко варьируются от штата к штату.

2. Лицензированный практический сестринский уход (LPN) или лицензированный профессиональный медсестер (LVN) Степень

Из всех сертификаций медсестер программы LPN или LVN являются наиболее быстрыми и удобными вариантами. Поскольку обучение можно пройти в больнице, профессионально-техническом училище, общественном колледже и даже в Интернете, программы LPN / LVN идеально подходят для студентов, которые работают или имеют другие обязанности.

• Срок до завершения: около года.

• Карьерный путь: Эта гибкая, динамичная программа дает учащимся самые базовые навыки для того, чтобы стать медсестрой.Завершение программы LPN / LVN дает выпускникам право на получение лицензии после сдачи государственного медсестринского экзамена NCLEX-PN.

3. Ассоциированный научный сотрудник по сестринскому делу (ASN) Диплом младшего специалиста по медсестринскому делу (ADN)

Ассоциированный научный сотрудник по программе сестринского дела (ASN) дает выпускникам больше технических навыков и для 30% выпускников служит в качестве ступенька к получению степени бакалавра сестринского дела (BSN). Этот вариант степени идеально подходит для тех, кто хочет начать карьеру в качестве RN, но в настоящее время не работает в LPN или LVN.

4. Бакалавр наук в области сестринского дела (BSN) (наиболее распространенный сегодня)

При рассмотрении различных типов медсестер важно понимать, что большинство поставщиков медицинских услуг предпочитают степень бакалавра наук в области сестринского дела (BSN). предлагает более широкий спектр возможностей карьерного роста в современной сфере здравоохранения.

• Срок до завершения: четыре года. Программа BSN включает в себя большое количество курсовых и лабораторных работ. В то время как некоторые программы получения степени BSN включают в себя сочетание уроков на территории кампуса и онлайн-классов, клинический опыт всегда завершается на месте в кампусе колледжа или больнице.

5. Бакалавр второй степени в области сестринского дела (BSN) или ускоренный бакалавр наук в области сестринского дела

BSN второй степени, иногда называемый ABSN, предназначен для взрослых со степенью бакалавра без медсестер, которые хотят перейти их карьера в области медсестер.

• Время до завершения: BSN второй степени обычно занимает два года или меньше, поскольку в этих программах учитываются ранее выполненные требования по гуманитарным наукам. Онлайн-программы доступны для учащихся, которым требуется большая гибкость, а некоторые школы предлагают программы ускоренного обучения BSN (ABSN), которые можно пройти за 12–20 месяцев.Помимо сложной курсовой работы, студенты должны учитывать время, потраченное на выполнение клинических ротаций.

6. Магистр сестринского дела (MSN)

Программа «Магистр сестринского дела» (MSN) позволяет медсестре специализироваться на различных типах сестринского дела посредством углубленного клинического обучения и исследований.

Многие работодатели предлагают медсестрам компенсацию за их обучение.

Срок до завершения:

Обычно 18-24 месяца.Программы MSN, предлагаемые онлайн или в более традиционном формате на территории кампуса, очень строгие, поскольку студенты изучают специальность продвинутого уровня.

Большинство программ требуют, чтобы студенты завершили выпускную диссертацию или проект.

7. Программы докторантуры для медсестер

В то время как ожидается, что медсестры всех уровней будут быстро расти, медсестры с докторскими степенями, по прогнозам, будут иметь огромный спрос на вакансии в течение следующего десятилетия. Эти программы готовят медсестер к карьере в области управления здравоохранением, клинических исследований и передовой клинической практики.

• Срок до завершения: от трех до пяти лет, полный рабочий день, включая лето.

• Карьера:

• Программа докторантуры по медсестринскому образованию развивает передовые профессиональные навыки медсестер.

• Программа докторантуры по сестринской практике (DNP) делает упор на развитие лидерства, ориентированного на клиническую практику.

8. Доктор философии (PhD)

Программы доктора философии (PhD) готовят медсестер-ученых и исследователей, чтобы они могли существенно повлиять на теоретические основы сестринской практики и оказания медицинской помощи в целом.

• Срок до завершения: от четырех до пяти лет полный рабочий день, с возможностью неполного рабочего дня. Хотя студенты не будут проходить клинические часы, они должны будут завершить обширное исследование и написать заключительную диссертацию. В общем, программы докторантуры не подходят для совмещения курсовой работы с работой. Медсестры с докторской степенью подходят для многих аспектов профессиональных и научных ролей, от исследований до формирования государственной политики и лидерства в сфере здравоохранения и образования.

# 16 Ученые степени медсестры

Что такое медсестра повышенной практики?

Итак, по какой-то причине.Это понятие меня действительно сбило с толку. По сути, это сводится к следующему … НЕ ВСЕ СТЕПЕНИ MSN СДЕЛАНЫ РАВНЫМИ. Это означает, что одни степени MSN ориентированы на лидерство / образование / менеджмент, а другие — на ПОВЫШЕНИЕ ВАШЕЙ ПРАКТИКИ.

APN Degrees, УВЕЛИЧИВАЮЩИЕ ВАШ ОБЪЕМ ПРАКТИКИ в качестве МЕДСЕСТРЫ.

А как стать медсестрой повышенного уровня? Медсестра со степенью магистра называется продвинутой практикующей медсестрой (APN), и они бывают четырех видов:

Практикующая медсестра (NP) — Практикующая медсестра обеспечивает базовую помощь, ориентированную на конкретную группу населения или потребности в здоровье, с возможность выписывать рецепты.Примером этого являются практикующие семейные медсестры. Сертифицированный медсестра-анестезиолог (CRNA) — Сертифицированный медсестра-анестезиолог проводит анестезию для всех типов хирургических вмешательств. Клиническая медсестра-специалист (CNS) — Клиническая медсестра-специалист предоставляет специализированную помощь в ряде областей: кардиология, онкология, неонатология, акушерство и гинекология, педиатрия, неврология и психическое здоровье. Сертифицированная медсестра-акушерка (CNM) — Медсестры-акушерки обеспечивают дородовой уход, роды и послеродовой уход за нормальными здоровыми женщинами.

Медсестринский уход с передовой практикой процветает в современной отрасли здравоохранения, учитывая нехватку медсестер. APN предоставляют услуги, которые ранее предоставлялись врачами. Законы о медсестринской практике сильно различаются в разных штатах, и они определяют, что именно могут делать продвинутые медсестры.

# 17 Знайте свое намерение повысить степень медсестры

Для тех из вас, кто не знаком, очень «в моде» повышать степень медсестры.

(НП, CRNA, акушерка и т. Д.).Больничные организации поощряют повышение ученой степени, роль в образовании / руководстве и т. Д. Требует более высоких степеней. «Анти» продолжает расти. Прежде чем вы вернетесь в школу или примете решение повысить эту степень, я хочу получить вам на ухо. Я здесь, чтобы побудить вас делать то, что правильно для ВАС! (Ни ваш работодатель, ни ваши друзья или семья, ни голоса посторонних).

Вот что я хочу от вас сделать:

Отключитесь! Чего ты хочешь? Вот вещи, которые, я думаю, очень важно учитывать, когда вы думаете о повышении своей степени.

1. Какие условия вам нужны

2. Клиника, больница, амбулаторное отделение, отделение неотложной помощи

3. Какова ваша финансовая прибыль в долларах $$

4. Рассмотрение ссуд на учебу и долгосрочных выплат .

5. Будет ли ваш работодатель заниматься образованием?

6. ГОСУДАРСТВО, в котором вы живете

7. CA vs TX (очень разная динамика)

8. Независимо ли вы или находитесь под контролем MD / DO

9. Сколько долларов вы заработаете на этой должности ты желаешь?

10. Время вашей жизни

11. AKA Family Planning

12. Время учебы / в школе

13. Образ жизни, который вы хотите

14. 3 смены в неделю

15. 5 дней a неделя, 40 часов.

16. Суточные по сравнению с полной занятостью

17. Условия, в которых вы хотите работать

18. Офис или больница

19. Телездравоохранение и домашнее здравоохранение

20. Частная практика и профсоюзная организация

21. Изменение роли медсестры

22. Назначение, диагностика, проверка лабораторий

23. Процедуры (грудные трубки, интубация, центральные линии и т. Д.).

24. Роль терапевта

25. Роль амбулаторного пациента

26. Требования к поступлению в аспирантуру

27. Срок действия оценок истекает через 5-7 лет.

28. Чтобы подать заявление в школу, возможно, придется пересдать уроки

# 18 Оставьте возможности открытыми — будьте открыты для новых возможностей!

Моя основная идея — быть открытыми для идей! Думаю, я думаю, никогда не говори никогда, и я не из тех, кто отвергает возможности.Если что-то приземлилось вам на колени, дерзайте! Никогда не знаешь, к чему что-то может привести. У меня было несколько возможностей, исходящих от искомых ролей, а также другие возможности, представленные руководством или сторонними поставщиками / компаниями. Мне нравится этот мир здравоохранения и то, куда мы идем … больший доступ к людям, которые в этом нуждаются, больше образования для людей, которые в этом нуждаются, в тех местах (Интернет, телефон, приложения), в которых они нуждаются. Наши роли медсестер постоянно меняются и развиваются. Будьте открыты для перемен и возможностей впереди.

# 19 Социальные сети 101

У меня очень много мнений по этой теме.Намного больше, чем этот блог. Настолько, что я решил пригласить со мной эксперта в области социальных сетей !! Октябрь 2020 г. Я приглашаю медсестру, сенсацию Youtube, куратора Instagram и эксперта по социальным сетям, чтобы помочь мне рассказать ВСЕ о социальных сетях / здравоохранении 101.

# 20 You Do You Boo!

Суть в том, что вам нужно делать то, что подходит именно вам! Большой мир сестринского дела может быть очень пугающим и подавляющим. Я надеюсь, что этот блог, мой подкаст и инстаграмм могут дать вам небольшое представление о мире медсестер! У меня есть несколько эпизодов, в которых рассказывается о многих аспектах ухода за больными (у постели больного, NP, NICU, CVICU, CRNA, NNP, Flight Nursing, Cosmetic Nursing и т. Д.) Зайдите сюда, чтобы узнать больше ….

# 21 БОНУС Посетите PICMONIC, если вы учитесь медсестер, NP, PA, Med School!

Это был мой инструмент для учебы в течение прошлого года, и ЖЕЛАЕМ, что у меня было это во время школы медсестер (в свое время это не было вариантом).

Компания Picmonic была основана в 2011 году двумя студентами-медиками, чтобы помочь студентам запомнить и вспомнить большое количество фактов, изучаемых в медицинской школе. Название Picmonic — это сочетание Изображений и мнемоник.По состоянию на 2017 год на сайте более 1000 аудиовизуальных пикмоник.

Лучше, чем карточки, Picmonic — это предпочтительный инструмент для изучения тысяч самых трудных для запоминания и наиболее часто тестируемых тем, подготовки к экзаменам на доске и многого другого.

Наша проверенная методология включает в себя лучшие методы изучения:

• Превращение забытых фактов в памятные истории и персонажей

• Охват обширной библиотеки исследований Вспомогательные средства с фактами, которые необходимо знать

• Предоставление исчерпывающего обучающего обзора-викторины Система учебных приложений

Не позволяйте никому влиять на ваши решения.Это ваша жизнь

Тори Мескин BSN RNC-NIC. Медсестра. Блогер. Подкастер. Тори работает врачом с 2012 года, работает в отделении неотложной помощи / стационарного отделения интенсивной терапии и педиатрии в южной Калифорнии. Она — блоггер, подкастер, отделение интенсивной терапии и педиатрическая реанимация RN, S , спонсируемая студентом MSN Университета Капеллы , послом Barco Uniforms и послом Brave Starts. Она получила национальный сертификат медсестры отделения интенсивной терапии (RNC-NIC) и ранее работала медсестрой в поездках, работая у постели больного в нескольких учреждениях отделения интенсивной терапии.Следуйте за ней, пока она рассказывает о своем семейном путешествии в отделении интенсивной терапии, совмещает работу, учебу, создание контента и по пути дает вам первоклассные советы и рекомендации. Найдите ее по телефону www.tipsfromtori.com или [email protected]

Детские пчелы — где они?

Разве вам не нравится видеть детенышей пчел , летающих снаружи? Нет? Вы не можете вспомнить, когда видели его в последний раз? В пчелином мире недавно появившиеся пчелы на самом деле являются взрослыми особями в натуральную величину.Но внутри улья развивающиеся детеныши пчел готовятся взять на себя все обязанности улья. На этих молодых людях лежит большая ответственность.

Детеныши медоносных пчел — их роль в улье

Семейство медоносных пчел нуждается в тысячах особей для выполнения повседневных функций. И эта большая рабочая сила необходима для того, чтобы запасать пищу для выживания Winter.

Может содержать партнерские ссылки. Прочтите мою политику конфиденциальности и раскрытия информации о партнерах для получения дополнительной информации.

В отличие от некоторых насекомых, пчелиные семьи зимуют большой семьей внутри улья. До наступления холодов необходимо посетить миллионы цветов, чтобы собрать нектар и пыльцу.

Вся эта тяжелая работа изнашивает часть тела пчелы. А, изношенные части кузова не заменяются. Летом рабочие пчелы живут всего 6 недель.

Это означает, что новая популяция детенышей пчел всегда должна быть в работе в течение летних месяцев. пчелиная матка отвечает за откладывание яиц, из которых разовьются новые пчелы.Но она требует ухода и правильного кормления от своих рабочих пчел.

Как называют детенышей пчел?

Несмотря на то, что пчелы — насекомые, мы склонны описывать их терминами, связанными с млекопитающими. Детенышей пчел называют расплодом.

Под выводком (или личинками) чаще всего понимаются маленькие белые личинки. Эти личинки находятся на стадии роста медоносной пчелы.

Для ясности я собираюсь включить в это обсуждение пчелиные яйца. Но некоторые пчеловоды относятся к пчелиным яйцам отдельно.

Жизненный цикл медоносной пчелы включает 4 стадии

1. яйцо
2. личинка
3. куколка
4. взрослый

Каждая взрослая пчела проходит через эти стадии. Количество времени, затрачиваемого на каждый этап, зависит от того, какой вид медоносной пчелы (или касты) задействован.

Пчелиная матка становится взрослой за 16 дней, рабочей пчеле требуется 21 день, а пчелам-самцам или Drone Bee требуется 24 дня, чтобы достичь зрелости.

Где водятся детеныши пчел?

«Племенным гнездом» пчеловоды называют участок улья, где развиваются молодые пчелы.

В зоне расплода улья пчелы-кормилицы кормят личинок пчел и согревают их. Эти детенышей пчел должны содержаться при постоянной температуре и влажности. Поэтому имеет смысл разместить весь выводок на одном участке.

Как рождаются детеныши пчел

На самом деле детеныши медоносных пчел не рождаются — посмотрите, это снова тот термин млекопитающих. Они появляются.

Сначала спарившаяся матка откладывает яйца в соты. Если она оплодотворяет яйцо, оно превратится в рабочих пчел.Неоплодотворенные яйца развиваются в трутней.

Через несколько дней из яиц вылупятся яйца. Собственно, они и не вылупляются — наружная оболочка яйца растворяется. Теперь у нас есть крошечная белая личинка.

Личинки пчелы едят и растут с удивительной скоростью. Эти развивающиеся личинки — то, что пчеловоды обычно называют детенышами пчел.

Как питаются детеныши пчелин?

Беззащитные личинки пчел лежат в своих ячейках, потребляя корм для расплода, предоставляемый пчелами-кормилицами.Эти взрослые люди могут производить эту особую пищу благодаря своему собственному рациону.

Пчелы-медсестры потребляют большое количество пыльцы, богатой белком. Вот почему колония должна собирать пыльцу . Это позволяет им производить маточное молочко и другие виды корма для расплода. Пчелы-кормилицы совершают много поездок к каждой ячейке с расплодом.

Едят ли пчелы мед?

Нет, детеныши пчел не могут покинуть камеру. Они полагаются на пчел-нянек, которые приносят им особую пищу. Молодые пчелы или личинки пчел не могут переваривать мед.

Как выглядят детеныши пчел?

Личинки пчел выглядят как крошечные белые личинки. Пчеловоды называют личинок — расплод или «молочный выводок».

Термин «молочный выводок» относится к корму для расплода, который обеспечивают пчелы-кормилицы. Вы можете увидеть крошечную личинку пчелы, плавающую в луже с едой.

В течение следующих нескольких дней личинки вырастут и заполнят дно клетки. После того, как личинка заполнит дно клетки, ей будет около 6 дней.

По окончании личиночной стадии или стадии кормления детенышей пчел. Личинка перестает есть и начинает плести шелковистый кокон. Начинается стадия куколки.

Снаружи соты рабочие пчелы закрывают верх соты. Развивающаяся куколка внутри не потребует еды.

Воск, используемый для запечатывания ячеек расплода, выглядит иначе, чем закрытые ячейки меда. Это связано с тем, что рабочая пчела повторно использует старый воск для улавливания расплода.

После того, как часть расплода закрыта и запечатана, она называется «закрытый выводок». Мы не можем видеть, что происходит внутри, но личинка пчелы превращается в куколку пчелы, а затем во взрослую пчелу.

Жало детенышей медоносных пчел

Могут ли детеныши пчел ужалить? У всех самок медоносных пчел есть жало, но они должны созреть за несколько дней до того, как сработает жало. Итак, у вас нет причин опасаться укуса очень молодой пчелы.

Когда ей исполняется несколько дней, все меняется, и она готова приступить к работе и может защищать улей.Пчелы-самцы, конечно, не имеют жала и поэтому не могут ужалить в любом возрасте.

Пчелы рождаются взрослыми?

Да, пчелы рождаются взрослыми и готовы начать свою роль в колонии медоносных пчел. Взрослая пчела вылезает из своей закрытой клетки.

Эта новорожденная пчела полностью сформирована и очень похожа на тысячи других пчел в колонии.

Через несколько дней кутикула (снаружи) пчелы затвердеет, крылья пчелы станут твердыми.И пчела станет полноценным членом колонии.

Последние мысли о детенышах пчел в колонии

Медоносные пчелы выходят из клетки в виде взрослых пчел в натуральную величину. Вот почему вы никогда не увидите настоящих медоносных пчел, которые выглядят как миниатюрные взрослые. Низкорослые пчелы часто являются результатом плохой генетики или недостаточного питания. Пчеловоды стремятся изучить как можно больше биологии пчел, чтобы помочь нам понять, как работает колония. Чем больше мы знаем обо всех этапах жизни пчел, включая детенышей пчел, , тем лучше мы подготовлены для управления ульями.

Ингредиенты для ухода за кожей, которых следует избегать при кормлении грудью

Доброе утро, доктор —

Я начну кормить грудью на следующей неделе. Можете ли вы просмотреть эти 11 продуктов для ухода за больными? Большое спасибо! Плюс — Могу ли я использовать духи?

МАРОККАНОЙЛ
Чистое аргановое масло
-Аргановое масло: чрезвычайно богатое токоферолами (витамином Е), незаменимыми жирными кислотами и антиоксидантами, это натуральное масло помогает увлажнять и питать, улучшая текстуру и тон кожи.

Argania Spinosa (Аргана) Масло ядра.

KIEHL’S SINCE 1851
Midnight Recovery Concentrate
Каприловый / каприновый триглицерид, дикаприлилкарбонат, сквалан, масло плодов Rosa Canina, масло Oenothera Biennis / масло примулы вечерней, масло Simmondsia Chinensis Cortex / масло семян жожоба, масло семян жожоба, кориандр, кориандр Масло Lavandula Angustifolia / масло лаванды, масло цветов пеларгонии Graveolens, линалоол, масло листьев Rosmarinus Officinalis / масло листьев розмарина, цитронеллол, гераниол, масло лаванды гибридной, экстракт Cucumis Sativus / экстракт плодов огурца, экстракт куркумы длинной / экстракт корня куркумы , Sclareolide Rosa Spp / масло цветков розы, экстракт жасмина лекарственного / экстракт жасмина, масло семян Helianthus Annuus / масло семян подсолнечника.

TATCHA
Luminous Dewy Skin Sheet Mask
Вода, Saccharomyces / Camellia Sinensis Leaf / Cladosiphon Okamuranus / Фильтрат рисовых ферментов *, пропандиол, глицерин, пентаэритилтетраизостеарат, сирилэтилтетраизостеарат, дифенилсифенилсифенилс, дифенилсифенилс ) Масло зародышей, экстракт Chondrus Crispus, экстракт корня Glycyrrhiza Glabra (солодки), экстракт корня женьшеня обыкновенного, экстракт маточного молочка, экстракт тимуса серпиллума, экстракт плодов Ziziphus Jujuba, экстракт корня Scutellaria Baicalensis, гиалуронат натрия, аммоний-акриолиполимерметилметилметакрилат, аммоний-акриолитрил -10 Лаурат, этилгексилглицерин, динатрий Edta, ароматизатор, спирт, феноксиэтанол.

* Хадасей-3.

TATCHA
Очищающее отшелушивающее средство Deep Cleanse
-Японское отшелушивающее средство с фруктами люффы: увлажняет, очищает и успокаивает поврежденную кожу, придавая ей более здоровый вид.
-Японская шиповник: балансирует кожу и сужает поры, обеспечивая при этом антиоксиданты.
-Tatcha’s Signature Hadasei-3 (триединство антивозрастных японских суперпродуктов, созданных из питательного зеленого чая, риса и водорослей): восстанавливает здоровый вид и сияние молодости.

Вода, кокоилглутамат натрия, пропандиол, глицерин, сополимер акрилатов, коко-бетаин, Saccharomyces / Camellia Sinensis Leaf / Cladosiphonokamuranus / рисовый фермент Filtrate *, экстракт Luffa Cylindrica Fruit / Leaf / Sylindrica, Sylindrica Fruit / Leaf / Sylindrica Экстракт плодов Rosa Multiflora, экстракт корня Belamcanda Chinensis, гидроксид калия, хлорид натрия, полиглицерил-10 диолеат, полиглицерил-2-сесквикаприлат, бутиленгликоль, этилгексилглицерин, тетранатрий Edta, ароматизатор, спирт, феноксиэтанол.

* Hadasei-3

LANCÔME
Advanced Génifique Youth Activating Serum
Вода, лизат фермента бифида, глицерин, денатный спирт, диметикон, гидроксиэтилпиперазин, этансульфоновая кислота, гидроксиэтилпиперазин, этансульфоновая кислота, натрия гидроксиалозид, натрия гликозид натрия, натрия гидроксид, натрия , Экстракт Faex / дрожжевой экстракт / Extrait De Levure, сесквестеарат метилглюкозы Peg-20, гидрогенизированное касторовое масло Peg-60, салицилоилфитосфингозин, полиакрилдиметилтаурамид аммония / полиакрилоилдиметилтаурат аммония, лимонен, ксантановая камедь, октановая смола Аромат.

CAUDALIE
Виноградная вода
-Виноградная вода 98%: снижает чувствительность.
-Сок винограда 2%: увлажняет и смягчает; богат полисахаридами и минеральными солями.

Vitis Vinifera (виноград) Фруктовая вода *, сок Vitis Vinifera (виноград) *, азот. * Растительное происхождение.

TATCHA
Gold Camellia Beauty Oil
— Японское масло камелии (Tsubaki): сохраняет влагу и питает витаминами A, B, D и E, а также питательными Омега 3, 6 и 9; это легкое растительное масло более богато олеиновой кислотой, чем оливковое масло.
-Масло рисовых отрубей, масло ореха макадамии и сквалан: обеспечивают антиоксидантную защиту и смешаны с маслом камелии, что делает его идеальным для всех типов кожи.

Триглицерид каприловой / каприновой кислоты, этилгексилпальмитат, сквалан (оливковое происхождение), масло семян камелии японской, ароматизатор (натуральный), полиглицерил-10 пентазостеарат, димер дилинолеилдимер дилинолеат, фитостерил макадамиат (макадамиат) Вода, токоферол, стеарилглицирретинат (экстракт солодки), оризанол (экстракт рисовых отрубей), инозитол (экстракт риса), экстракт листьев камелии китайской (зеленый чай), алкоголь, глицерин, экстракт водорослей, золото, феноксиэтанол.

ПЕРВАЯ ПОМОЩЬ
Ultra Repair® Cream Intense Hydration
-Коллоидная овсянка (OTC): назначенное FDA средство для защиты кожи, снимающее зуд и незначительное раздражение, вызванное экземой, сыпью и другими кожными заболеваниями.
-Масло ши: увлажняет и защищает кожный барьер с помощью витаминов, минералов и незаменимых жирных кислот.
-Аллантоин: Успокаивает и успокаивает кожу.
-Керамиды: укрепляют кожный барьер и увлажняют кожу.

Вода, стеариновая кислота, глицерин, C12-15 алкилбензоат, триглицерид каприловой / каприновой кислоты, глицерилстеарат Se, глицерилстеарат, цетеариловый спирт, масло Butyrospermum Parkii, диметикон, сквалан, экстракт аллантоина каприла, камелия синенсис церемия 3 , Экстракт хризантемы партения, коллоидная овсянка, динатрий EDTA, масло листьев эвкалипта шаровидного, экстракт корня Glycyrrhiza Glabra, гидроксид натрия, ксантановая камедь, феноксиэтанол.

ПЬЯНЫЙ СЛОН
T.L.C. Гликолевая восстанавливающая ночная сыворотка Framboos ™
-T.L.C. Framboos ™ AHA Blend 12%: Отшелушивает омертвевшие клетки кожи, обновляя тусклую, неровную кожу, делая ее более гладкой, яркой и ровной.
-Салициловая кислота (BHA) 1%: разжижает кожный жир, очищает поры и успокаивает кожу.
-Экстракт плодов малины: увлажняет и успокаивает поврежденную кожу.
— Кроссполимер гиалуроната натрия: увлажняет и уменьшает появление тонких линий и морщин, одновременно повышая упругость.

Вода, гликолевая кислота, бутиленгликоль, глицерин, гидроксид натрия, салициловая кислота, молочная кислота, лимонная кислота, экстракт сока Vitis Vinifera (виноград), сок листьев алоэ барбаденсиса, экстракт семян опунции, фикуса и семян опунции, конского каштана (Aesculus Hippocastanum) Экстракт, экстракт листьев Camellia Sinensis, экстракт плодов Rubus Idaeus (малина), экстракт Saccharomyces Cerevisiae, культура клеток Buddleja Davidii Meristem, масло семян Sclerocarya Birrea, кроссполимер гиалуроната натрия, аллантоин, гидроксиэтилцеллюлоза, гелактоедарабинТА, гексиэтилцеллюлоза, галактоедарана , Феноксиэтанол, каприлилгликоль, этилгексилглицерин, нитрат натрия, сорбат калия, пентиленгликоль, бензоат натрия.

Это веганский продукт без глютена.

DRUNK ELEPHANT
C-Firma ™ Дневная сыворотка с витамином C
-Хроноциклин: имитирует антиоксидантные свойства витамина D для более молодой кожи.
— Тыквенный фермент и экстракт граната: работают вместе, чтобы ферментативно растворять мертвые поверхностные клетки кожи, сводя к минимуму появление пор.
— Кроссполимер гиалуроната натрия: увлажняет, уменьшает появление тонких линий и морщин и повышает упругость.

Вода, диметилизосорбид, аскорбиновая кислота, лаурет-23, глицерин, лактобациллы / экстракт тыквенных ферментов, масло семян склерокарии бирреи, глицирризат дикалия, экстракт сока Glycyrrhiza Glabra (экстракт плодов солодки, экстракт корня солодки), экстракт корня винограда , экстракт камелии Sinensis Leaf, токоферол, Lactobacillus / Punica граната Фруктовый Фермент экстракт, натрия гиалуронат кроссполимер, гидролизованный Лебеда, фитостеролы, Glutamylamidoethyl имидазола, гидролизованный белок пшеницы, Ferulic кислота, ацетилглюкозамина, гиалуронат натрия, Tetrahydrobisdemethoxydiferuloylmethane, Tetrahydrodemethoxydiferuloylmethane, Tetrahydrodiferuloylmethane, глицин, Leuconostoc / Фильтрат фермента корня редиса, сахароза, мальтодекстрин, экстракт Chondrus Crispus, сополимер гидроксиэтилакрилата и акрилоилдиметилтаурата натрия, изогексадекан, феноксиэтанол, каприлгидроксамовая кислота, каприлилгликоль, сортебитан, гексангликоль, гексангликоль, пантанол, гексанолгидроксиэтиленгликоль, сортебитан, гексанол-гистанол-натрий оксид, хлорфенезин, полисорбат 60, дегидроацетат натрия, сорбат калия, сорбиновая кислота, этилгексилглицерин.

CLINIQUE
Ежедневный бустер со свежим прессованием с чистым витамином C 10%
Вода, аскорбиновая кислота, глицерин, диметикон, сквалан, бутиленгликоль, дипропиленгликоль, ацетил глюкозамин, экстракт плодов Cucumis Sativus (огурца), экстракт плодов ячменя (ячменя) Extrait D’Orge, экстракт корня Morus Nigra (шелковицы), экстракт мелассы / Saccharum Officinarum / Extrait De Melasse, экстракт ламинарии Digitata, экстракт корня Scutellaria Baicalensis, ацетилгексапептид-8, экстракт плодов Vitis Vinifera (виноград), экстракт водорослей, пальмитоилгексапептид -12, пальмитоил трипептид-1, пальмитоил тетрапептид-7, полисахариды алкалигенов, кофеин, сахароза, сывороточный протеин / молочнокислый протеин / протеин Du Petit-Lait, бетаин, салициловая кислота, протеин глицин сои (соевые бобы), гиалуронат натрия, гиалуронат натрия, Sigesbeckia Orientalis (св.Paul’S Wort), метиловый эфир бис-Peg-18, диметилсилан, пропиленгликольдикапрат, жмых из подсолнечника, кроссполимер аллилметакрилатов, карбомер, глицерилполиметакрилат, трометамин, ксантановая камедь 20, пегилированная камедь Цитрат натрия, динатрий Edta, феноксиэтанол

.