Мед с маточным: Мед с маточным молочком и его полезные свойства — Добрый пасечник

Мед с маточным молочком и его полезные свойства — Добрый пасечник

Мед с маточным молочком в последнее время стал обращать на себя внимание не только любителей народной медицины, но и представителей медицинских кругов. Проведенные исследования подтвердили эффективность этого натурального природного лекарства. Что же представляет собой это уникальный продукт? Готовится он на основе меда с цветов разнотравья, эспарцетового, горного и других (как правило, это светлые сорта меда). К меду добавляется натуральное или, как его принято еще называть, «нативное» маточное молочко (около 1,5 % от общей массы), которое благодаря консервирующим способностям меда в смеси сохраняет все свои полезные свойства. Само маточное молочко, как известно, вне улья хранится только в морозильных камерах. Поэтому сочетание меда с маточным молочком представляется наиболее оптимальным для ежедневного употребления этого продукта.

Маточное молочко – это продукт, вырабатываемый пчелами при помощи специальных желез для выкармливания матки и пчелиного расплода. Содержит вещества, способствующие быстрому и здоровому развитию живого организма. В составе этого продукта много белков, жиров и углеводов, микро и макроэлементы.

Мед с маточным молочком имеет высокую пищевую и лечебную ценность. В нем содержатся витамины среди которых можно выделить: С, РР, В, В1, В2; минералы: калий, марганец, железо, натрий; ферменты; органические кислоты: муравьиная, янтарная, лимонная, яблочная и аминокислоты: лизин, валин, метионин и многие другие. Энергетическая ценность на 100 грамм продукта примерно 284 ккал.

Мед с маточным молочком по праву считается одним из самых сбалансированных природных биостимуляторов. Сочетание микроэлементов в этом продукте оказывает регенеративное действие, тем самым увеличивая продолжительность жизни. Современные исследования показали, что входящая в состав маточного молочка оксидециновая кислота способна оказывать противораковый эффект. Постоянное применение меда с маточным молочком способствует улучшению физического состояния и тонуса организма, снижает нервное переутомление, лечит стрессы и депрессии. Применение маточного молочка целесообразно и при различных вирусных инфекциях, поскольку этот продукт обладает бактерицидными и противомикробными свойствами. Маточное молочко действует угнетающе на палочки туберкулеза, стрептококки, стафилококки и других.

Мед с маточным молочком рекомендуется применять при снижении иммунитета, нарушении памяти, бессоннице, при различных вирусных инфекциях для поддержания организма, при туберкулезе, атеросклерозе. Мед с маточным молочком является отличным средством профилактики онкопроцессов и других заболеваний.

Установлено, что мед с маточным молочком помогает стабилизировать давление, кроме того оно благотворно влияет на стенки сосудов, что особенно полезно для больных гипертонией. Этот продукт оказывает положительный эффект при восстановлении после инфарктов и инсультов. Отмечен позитивный результат и в процессе кроветворения, поэтому его рекомендуют больным анемией (как взрослым, так и детям).

Самым крупным потребителем маточного молочка на сегодняшний день является Япония. Там, на базе проведенных исследований, было выяснено, что мед с маточным молочком способствует восстановлению нации от последствий ядерных взрывов, поэтому во всех детски и школьных учреждениях употребление маточного молочка стало общепринятой практикой.

Рекомендуемый объем потребления для взрослых составляет примерно 20 грамм (или одна чайная ложка) четыре раза в день во время приема пищи. Длительность курса составляет как минимум три-четыре недели.

Стоит отметить, что у меда с маточным молочком есть и противопоказания. С осторожностью это продукт стоит употреблять беременным и кормящим мамам, кроме того лицам, имеющим аллергию на пчелопродукты и мед и больным сахарным диабетом.

Польза и вред маточного молока для женщин и мужчин

В процессе своей жизнедеятельности, пчелиный рой создает три уникальных пищевых продукта: пергу, мед и маточное молоко. В период цветения различных растений пчелы собирают с них пыльцу и нектар. Из пыльцы, сразу после ее сбора, насекомое изготавливает пергу, добавляя в нее смесь из нектара и своей слюны. В дальнейшем из перги строятся соты для хранения меда.

А вот нектар пчела копит до возвращения в улей, где в дальнейшем его выпаривает. Там они снижаю количество воды в нектаре, и концентрируют его в будущий мед. Медом весь улей кормится в зимнее время и межсезонье, когда растения не цветут, и добыть свежей пищи негде.

Самым дефицитным и совершенным блюдом в традиционной пчелиной кулинарии является маточное молоко. В прошлом оно было настолько дорогим, что позволить себе его могли только очень богатые люди, от чего ему дали название «Королевское жиле». По своему составу это аналог молока млекопитающих, наподобие коровьему, но в более концентрированном виде. Только матка (или личинка матки) всю жизнь питаются исключительно королевским желе. С этим связывают их уникальную плодовитость и долгожительство.

Личинок трутней и рабочих пчел кормят королевским желе всего пару первых дней жизни. Еще дня четыре их кормят смесью из меда и перги. Через шесть дней личинка становится молодой пчелой. Первое время насекомое питается пергой и с помощью специальных желез вырабатывает немного маточного молока.

Стоит подметить, что хотя все рабочие пчелы и женского пола (трутней мало и они нужны только для оплодотворения матки), королевского желе собирается не так много.

На сегодняшний день на рынке товаров пчеловодства выделяются частные и коммерческие производства пчелиного эликсира. Частные фермерские хозяйства добывают королевское желе из ульев и хранят его либо в смеси с медом, либо в замороженном виде. Если в относительной близости от вас находятся представители такого хозяйства, лучше всего приобретать продукт у них.

Если вы не нашли частного производителя в относительной близости от своей локации, либо не имеете возможность приобрести напрямую у такого производителя, то лучше купить желе в гранулах или в капсулах. Оно проходит минимальную обработку для увеличения срока его хранения и для перевозки на длительные расстояния.

Гранулированное королевское желе это продукт коммерческого производства. При гранулировании из него выпаривается лишняя жидкость и в сухом виде оно сохраняет свои целебные свойства в течение длительного периода времени.

У препарата в гранулах имеется своя специфика подсчета рекомендуемой суточной доза (все подробности должны быть указаны в инструкции к применению) – обычно это три гранулы в сутки для взрослых и две для детей.

Заморозка помогает на протяжении долгого времени хранить пчелиный эликсир в чистом виде. В замороженном состоянии он не теряет своих лечебных свойств, если не подвергать его разморозки и повторной заморозки. А так же хранить в герметичной упаковке для предотвращения его контакта с воздухом.

Самый простой способ хранения и употребления королевского желе – это размешать его в меде при соотношении 1 к 100. То есть, содержание вещества в меде не должно превышать 1,5%. Мед является хорошим консервантом и длительно сохраняет полезные качества продукта. Обычно для смеси используют мед, полученный на разноцветии, либо другие светлые его сорта.

Капсулы

Изготовление пчелиного молочка в капсулах, как и при гранулировании, было изобретено для увеличения длительности его хранения. Жидкое желе размешивают с глюкозой и лактозой в соотношении 1 к 4, полученную смесь высушивают и упаковывают в съедобные капсулы. Производители утверждают, что полученный таким путем препарат сохраняет первоначальные лечебные свойства продукта.

Сбор и методы хранения

Сразу с наступлением у пчел периода роения, в ульи начинают появляться небольшие коробочки с сотами для личинок будущих маток. В этих коробочках и хранится маточное молочко. Собрать его не трудно – надо лишь очистить медовые рамки от этих сот и извлечь из них готовый продукт. На все операции с фасовкой желе должно уходить не более полутора часов – от длительном контакте с воздухом вещество начинает утрачивать свои полезные свойства.

Для специализированного сбора королевского желе изготавливают специальные рамки с перегородками, на которых установлены небольшие стеклянные бочонки (матки). Пчелы заливают в такой бочонок около 0,3 мг вещества, укладывают в него личинку и закрывают матку восковой пробкой. Когда все бочонки заполнены, маточные рамки достаются из улья и вещество из них фасуется в стерильные шприцы.

Хранить его можно либо в виде спиртовой настойки, размешав в меде, или в чистом виде в стеклянной посуде при температуре не выше -18. В замороженном состоянии королевское желе может сохранять свои полезные качества до двух лет.

Виды маточного продукта

Сами пчелы изготавливают желе всего в двух видах. Один вид предназначен для кормления личинок трутней и рабочих пчел. А второй вид предназначен для кормления самой матки. Желе для кормления матки является более концентрированным и богатым на полезные вещества. В пчеловодстве эти оба вида ни как не разделяются при сборе, и на продажу поступает усредненный продукт. По существу, нет ни какого смысла пытаться собрать желе, предназначенное для кормления матки, отдельно от всего остального. Оно ничем не отличается по своему составу кроме повышенной концентрации полезных веществ.

Состав пчелиного молочка

При всем богатстве меда на витамины и микроэлементы, состав пчелиного молока превосходит его во всем. А содержит оно:

•  гормоны: прогестерон, эстрадиол и тестостерон;
•  витамины: В1, В2, В3, В6, В12, В15, А, Е, Н, С, РР и D;
•  минеральные соли;
•  микроэлементы: натрий, алюминий, цинк, марганец, железо, кобальт, мышьяк, фосфор, хлор, калий, висмут и т.д;
•  молочная и пировиноградная кислоты;
•  углеводы: фруктоза, глюкоза, рибоза, сахароза и мальтоза;
•  особые белки маточного молока: во многом схожи с белками сыворотки крови;
•  липиды;
•  ацетилхолин: основной проводник нервных импульсов, содержание в 1000 раз выше чем в меде;
•  стерины;
•  жирные кислоты: стеариновая, янтарная, деценовая и пальмитиновая;
• альбумины и глобулины.

Лечебные свойства маточного молочка

Из всех даров матушки природы, пчелиное изобретение является самым непревзойденным по своим лечебным свойствам. В первую очередь прием молочка активирует и ускоряет процессы регенерации и омоложения всех клеток в организме. Во вторых оно обладает антисептическими, антивирусными и антибактериальными свойствами при минимуме побочных эффектов и противопоказаний.

Королевское желе укрепляет иммунитет, насыщает организм всеми необходимыми ему витаминами, кислотами и микроэлементами, хорошо справляется с авитаминозом, восстанавливает гормональный фон у мужчин и женщин, помогает детям в физическом и умственном развитии, улучшает память и работу коры головного мозга и т.д.

Вред маточного молочка

Как такового вреда от маточного молочка для организма человека нет. Необходимо следить за суточной дозой его употребления – поскольку оно крайне богато витаминами, жирными кислотами и микроэлементами, его передозировка может вызвать неприятные побочные эффекты. Полностью отказаться от его применения следует при заболевании почек, инфекционных патологиях, аллергической реакции на продукты пчеловодства, опухолях и при болезни Аддисона.

В случае артериальной гипертонии, тромбофлебите, тромбозах, сахарном диабете и высокой свертываемости крови, перед употреблением королевского желе стоит проконсультироваться со специалистом. В остальных случаях оно полезно всем вне зависимости от пола и возраста.

Польза маточного молочка для мужчин

Широта целебных качеств королевского желе делает его полезным для мужчин всех возрастов. Прием желе и препаратов на его основе особенно полезен при: отсутствии аппетита, рассеянности, ОРВИ, упадке сил, простатите, пониженном иммунитете, переломах и растяжении связок.

Может проблема в экологии и неправильном питании, а может быть в накоплении стресса, но в последнее время проблема мужского бесплодия становится все более остро. А лечить его дело дорогостоящее. Но медицина не стоит на месте и постоянно находится в поисках простых, и доступных методов лечения этого недуга. Исследования пчелиного молока показали, что его употребление повышает выработку в мужском организме гормона тестостерона, который напрямую влияет на качество спермы, количестве в ней сперматозоидов и их подвижность.

В результате окислительных реакций в организме происходит постепенное повреждение тканей и клеток, в том числе и репродуктивных органов. Антиоксидантные качества пчелиного эликсира останавливают эти процессы, а жирные кислоты в его составе стимулируют процессы восстановления и омоложения клеток.

Польза молочка для женщин

Из всего перечня полезных качеств маточного молочка, наиболее интересным для женщин представляется его омолаживающее действие. Благодаря повышению регенерации клеток, оно применяется во многих косметических кремах и средствах по уходу за кожей.

В пчелином молоке содержится основной женский гормон «прогестерон», который необходим для стабильной работы всего женского организма. Королевское желе рекомендуется употреблять для лечения бесплодия, при нарушении менструальных циклов, при отсутствии овуляции и при некоторых женских заболеваниях.

Это одно из немногих сильнодействующих веществ широкого спектра применения, которое можно употреблять при беременности и кормящим женщинам. Оно способствует укреплению организма перед родами, после родов помогает женскому организму восстановиться, стимулирует молочные железы, обогащает материнское молоко витаминами и полезными микроэлементами.

Гормоны в составе желе повышают половое влечение, помогают женщинам легче перенести начало климакса и устраняют гормональные сбои.

Для детей

Принимать пчелиное молоко можно уже с первого года жизни. Обычно ребенок подвержен различным респираторным и детским заболеваниям. Регулярное употребление этого средства укрепляет детский иммунитет и способствует профилактики различных заболеваний.

Во времена СССР молочко давали детям уже через 20 дней после рождения. Оно улучшает биохимию крови, насыщает растущий организм необходимыми для роста микроэлементами и укрепляет косную ткань.

В отличие от химических препаратов, «пчелиная медицина» не вредит полезной микрофлоре, способствует выведению шлаков и токсинов, и обладает противовоспалительным эффектом. Так же, желе полезно для здоровья недоношенных младенцев и при замедлении в развитии в возрасте от 2 месяцев.

Для мальчиков оно полезно при: простуде, нарушениях пищеварения и обмена веществ, пониженном мышечном тонусе.

Противопоказания

Высокая концентрация полезных веществ в маточном молочке делает его мощным биостимулятором. И, как у любого сильного стимулятора, у него имеются противопоказания:

1.  Аллергия в виде покраснений и сыпи на коже.
2. Тяжелые формы ОРВИ.
3. Заболевания желудочно-кишечного тракта.
4. Болезнь Аддисона.
5. Опухоли.
6. Беременным и кормящим матерям употреблять маточное молоко можно только по рекомендации врача.

Как правильно принимать

Суточная норма меда с маточным молочком для взрослого составляет одну чайную ложку (примерно 20г) перед едой 4 раза в день. Заметная польза будет только от ежедневного приема на протяжении от двух до трех недель.

Прием лекарственных препаратов детьми рекомендуется курсами по 2 недели около 3-4 раз в году. (по курсу на каждый сезон).

Что лечит маточное молоко

В итоге, что же лечит маточное молочко пчел? Исходя из того, как этот продукт используют сами пчелы, матка, которая им питается всю жизнь, живет до 50 раз дольше обычной пчелы и обладает удивительными репродуктивными способностями. Основная направленность его целебных качеств это комплексное стимулирование роста, деления клеток, нормализация обменных процессов внутри клеток и стимулирование выработкой организмом сильный половых клеток.

Исследования пчелиного молока подтверждаю эти его качества. Препарат рекомендуется для укрепления репродуктивных способностей мужчин и женщин, для нормализации обмена веществ и гормонального баланса. Так же он незаменим для укрепления иммунитета детей, беременных и кормящих матерей.

Мед БЕРЕСТОВ А.С. Энергия жизни с маточным молочком живой, 240г, Россия, 240 г

Производитель

ООО «Частные Пасеки Берестова»

Серия

Энергия жизни

Вес

240 г

Пищевая ценность

324 кКал/1377 кДж

Страна производителя

Россия

Сахар

Без добавления сахара

Вид упаковки

Стеклянная банка

Условия хранения

Хранить при температуре не выше +20 градусов.

Содержание глютена

Нет

Содержание фруктозы

Нет

Содержание лактозы

Нет

Для веганов

Нет

Для вегетарианцев

Нет

Назначение

Для употребления в пищу, для выпечки, для десертов, для добавления в напитки

Кошер

Нет

Готово к употреблению

Да

Стандарт качества

СТО

Мед натуральный Крафтовый с пчелиным маточным молочком, Берестов А.С., 260 г

Снижение веса, похудение (827)

Сахар в крови, диета (734)

Кето диета (160)

For Men (14)

For Woman (38)

Антиоксидантное действие (33)

Бодрость, антистресс (7)

Внимание, память, КПД головного мозга (17)

Диета Дюкана I этап (318)

Диета Дюкана II этап (587)

Диета Дюкана III этап (648)

Диета Дюкана IV этап (662)

Дыхательная система, легкие (5)

Забота о зрении (12)

Забота о печени, желчном пузыре (69)

Забота о пищеварении, ЖКТ (197)

Забота о связках и суставах (12)

Здоровье нервной системы (19)

Здоровье сердца и сосудов (28)

Кожа, волосы, ногти (17)

Кости, мышцы, суставы (11)

Кровеносная система (31)

Мочеполовая система (8)

Набор мышечной массы (75)

Очищение организма, детокс (171)

Поддержка иммунитета (148)

Простуда, ОРВИ, грипп, герпесвирус (64)

Сон, поддержка (5)

Холестерин, контроль (94)

Эндокринная система (1)

Энергия, тонус организма (349)

Без глютена (912)

ПОСТНЫЙ продукт (756)

белый мёд с маточным молочком

Белый мёд с маточным молочком сейчас становится всё более популярным и пользуется большим спросом. Его часто можно купить на различных ярмарках и в других торговых точках, а как же отличить подделку белого мёда с маточным молочком, от обычного натурального мёда с пчелиным маточным молочком? Ведь почему-то так сложилось, что такой мёд почти всегда белого цвета.
 

Почему мёд белого цвета?

Давайте разберёмся в этом. Маточное молочко можно смешать с любым по цвету мёдом. Процентная концентрация маточного молочка в меду небольшая-1-2%. Поэтому маточное молочко не может сделать тёмный мёд белым. Для смешивания маточного молочка берут в основном прошлогодний загустевший мёд, а, как известно, мёд при кристаллизации становится светлее. При интенсивном перемешивании, в мёд попадают пузырьки воздуха, что тоже делает мёд светлее. Но в любом случае гречишный мёд с маточным молочком никак не станет белым.

Итак, мы выяснили, что для приготовления такой медовой композиции стараются брать светлые сорта мёда, но от цвета мёда не зависят полезные качества смеси мёда и маточного молочка. Естественный белый цвет после кристаллизации имеют следующие сорта: липовый мёд, мёд белой акации, кипрейный, донниковый, мёд белого клевера, малины, из верблюжьей колючки, эспарцетовый мёд, аккураевый мёд (из псоралеи костянковой), мёд из хлопчатника.
 

                       

 

Как делают крем-мёд с маточным молочком.

Отдельно следует сказать о белом крем мёде с маточным молочком. Этого мёда в природе не существует, его делают люди из обыкновенного натурального мёда, путём многократного перемешивания. Крем-мёд имеет очень нежную консистенцию, маслообразный, в нём нет крупинок, внешне похож на мороженое, хорошо намазывается на хлеб, не пачкает руки. Вкус очень приятный, сладкий, напоминает любимую всеми сгущёнку. Поэтому белый мёд с маточным молочком привлекает всё больше потребителей. Спрос рождает предложение, сейчас этот мёд можно часто встретить в продаже.

Большую популярность такой мёд имеет в Америке и Европе. Если белый крем мёд с маточным молочком приготовлен правильно, с соблюдением всех технологий, то такой мёд можно употреблять в пищу. Для того чтобы получить такой мёд нужно специальное оборудование, в котором этот мёд взбивается в течение нескольких дней, да его ещё иногда и нагревают. А, как известно мёд нельзя долго нагревать, в нём может образовываться оксиметилфурфурол, канцерогенное вещество, в большой концентрации вызывающее рак. Изначально получение крем — мёда не подразумевало нагревания мёда, и все полезные вещества в нём сохранялись.
 

Экономия при производстве.

В погоне за прибылью для удешевления затрат на производство крем – мёда с маточным молочком некоторые нечестные продавцы используют загустители, студнеобразователи, чтобы мёд при хранении не расслаивался и имел маслянистую консистенцию. Под видом белого мёда с маточным молочком могут продаваться просто белый крем мёд, в котором нет ни капли маточного молочка. При покупке мёда с маточным молочком нужно быть очень внимательным и осторожным. Не стоит покупать очень белый мёд, неестественного белого цвета. Мёд должен раствориться в воде без осадка, раствор мёда должен быть прозрачный. Если обнаружился на дне осадок и раствор мутный, то такой мёд употреблять не следует. Лучше, конечно покупать мёд у проверенных продавцов или у самих пчеловодов, в которых вы уверены, которые не подсунут вам просто белый крем — мёд под видом белого мёда с маточным молочком.

 

 

средства для кожи с медом, маточным молочком и воском – Москвич Mag – 04.06.2020

В этом мае уже в третий раз отмечали Всемирный день пчел, задача которого — привлечь внимание и к роли, которую эти насекомые играют в жизни планеты, и к грозящей им опасности из-за ухудшения экологии.

Основоположником современного пчеловодства считают жившего в XVIII веке словенца Антона Яншу — Всемирный день пчел как раз назначили на день его рождения. С его наблюдений и публикаций началось активное исследование задач, которые выполняют эти трудолюбивые насекомые, и это далеко не только изготовление меда. Пчелы были и остаются главными опылителями большинства растений на планете. Если их популяция снизится, мы очень быстро лишимся многих видов фруктов, овощей, орехов, злаков и ягод. Пчелиный вклад в производство сельскохозяйственных продовольственных культур гораздо больше, чем многие себе представляют — он оценивается примерно в 150 млрд евро в год. Однако исчезновение пчел, как утверждают эксперты, не только ударит по мировой экономике и вызовет продовольственный кризис, но и приведет к гибели целых видов животных.

Основными причинами сокращения популяции пчел специалисты называют чрезмерное использование пестицидов и инсектицидов, увеличившееся количество паразитов, которые иногда приводят к гибели целых ульев, и возрастание радиочастотного фона в связи с увеличением количества базовых станций сотовой связи и мобильных телефонов. По некоторым наблюдениям, по вине электромагнитного излучения пчелиные матки откладывают значительно меньше яиц, а рабочие пчелы теряют способность хорошо ориентироваться в пространстве, не могут найти дорогу домой и погибают. Похоже, армия противников сотовых вышек скоро может сильно увеличиться.

Конечно, задача восстановления мировой пчелиной популяции требует комплексных мер на государственном уровне — это и инициативы по улучшению экологической обстановки, и переход к менее вредным удобрениям и сельскохозяйственным технологиям, и много чего еще. Но и жители городов могут внести свой вклад в улучшение ситуации. Специалисты советуют бороться за максимальное озеленение улиц, высаживать цветы на балконах и создавать цветущие садики во дворах и на клумбах, следить за тем, чтобы хозяйственные службы не слишком усердствовали в обрезании деревьев, особенно фруктовых, и не использовали агрессивные инсектицидные средства. Пчелам нужны открытые водоемы. Если их в округе мало, эксперты советуют организовывать небольшие поилки хоть в пустых цветочных горшках. А еще они призывают поддерживать производителей меда, которые делают все для того, чтобы численность пчел не уменьшалась.

Поддержкой пчел заняты и некоторые косметические марки, например Guerlain почти десять лет финансово поддерживает Ассоциацию бретонской черной пчелы, а с этого года запущено сотрудничество с программой UNESCO «Человек и биосфера», которая обучает пчеловодов по всему миру и помогает созданию и развитию пчеловодных хозяйств. Многие бренды закупают мед, воск и маточное молочко напрямую у производителей, что тоже помогает им оставаться на плаву и работать над спасением этих насекомых.

О пользе меда и маточного молочка для здоровья известно, наверное, всем — эти продукты укрепляют иммунитет, помогают бороться с простудными заболеваниями, отлично влияют на обмен веществ, тонизируют и снабжают целым списком необходимых нам микроэлементов. Главное, помнить об умеренности, ведь мед — это еще и большое количество сахара, фруктозы, если быть точнее, а также потенциальный аллерген. Ложки в день, говорят специалисты, вполне достаточно.

Для кожи мед не менее полезен — он питает, увлажняет и смягчает ее, помогает более скорому восстановлению, обеззараживает, используется как антивозрастной ингредиент и как хороший компонент для борьбы с дряблостью и целлюлитом. Домашние маски на основе меда остаются популярными среди приверженцев всего натурального, но и тут стоит помнить о его довольно высокой аллергенности — неприятная и довольно сильная реакция может случиться и со стороны кожи. Для того чтобы ее избежать, стоит все же обратиться к готовым средствам, над формулой которых работали косметические химики. Кстати, кроме собственно меда и молочка в косметике используют воск — это один из самых эффективных, надежных и безопасных компонентов в увлажняющих, питательных и восстанавливающих кремах и бальзамах. И хотя армия веганов, которая борется против эксплуатации животного мира на благо человечества, с этим, наверное, не согласится, конкретно пчелам, кажется, сейчас нужна и такая поддержка в том числе.

Питательная маска для лица «Мед из Эфиопии», The Body Shop

Насыщенный увлажняющий крем для тела «Королевский мед», Apivita

Обновляющий крем для лица Pure Vitality Skin Renewing Cream, Kiehl’s

Восстанавливающая маска-гель на основе меда Abeille Royale, Guerlain

Подтягивающий скраб для тела с тремя видами меда Crazy Desserts, Natura Siberica

Питательный крем для тела с медом и маслом карите «Медовый фестиваль», L’Occitane

Суперпитательный восстанавливающий медовый бальзам для лица и тела Reve de Miel, Nuxe

Питательный крем для рук с маточным молочком Nutrix Royal Mains, Lancome

Мед с маточным молочком: рецепт, полезные свойства

Маточное молочко или, как его еще называют, “королевское желе” — это особая смесь, вырабатываемая пчелами для вскармливания потомства в первые дни жизни. Кроме того, оно предназначено для ежедневного рациона матки. Именно поэтому питательных свойств молочку не занимать. Как и натуральному меду, ценность которого известна даже маленьким детям. А что будет, если смешать мед с маточным молочком? Мы получим мощное и эффективное лекарственное средство.

Зачем смешивать?

Мед с маточным молочком не найдешь на обыкновенном продовольственном рынке или в масс-маркете. Даже не каждый пасечник возьмется собирать “королевское желе” — слишком уж кропотливый это труд, а готовый продукт хранится сравнительно недолго. Но вот тут-то и приходит на помощь мед. Он является консервантом, который позволит лекарству оставаться полезным до 24 месяцев. И это — первый плюс от смешивания двух натуральных продуктов воедино.

Кроме того, смешивая пчелиные дары, Вы делаете лекарство намного более вкусным. И это — второй плюс. Дело в том, что само по себе молочко имеет кисловатый привкус и специфический запах. Добавив к нему мед, вы с легкостью избавитесь от этого “дефекта” — смесь приобретет сладость и душистый аромат. Таким образом, Вы сможете приобщить к употреблению народного средства даже маленьких детей.

Третий и важнейший плюс от смешивания маточного молочка с медом — удвоенная польза. Комбинированный пчелопродукт позволяет объединить весь диапазон присущих им по-отдельности лекарственных свойств. В результате получится вдвое более эффективное средство против многочисленных недугов. Каких именно — читайте далее.

Статья в тему: Что такое маточное молочко?

Приобрести маточное молочко с медом можно напрямую с нашей пасеки «Свій мед»

Польза маточного молочка с медом

Лечебные свойства смеси охватывают широкий спектр заболеваний: начиная от эмоциональных расстройств, заканчивая онкологией! Ниже приведены показания к применению пчелиного молочка с натуральным медом:

• для организма в целом: ослабленный иммунитет, авитаминоз, пониженный тонус, физическая слабость вследствие перенесенных операций или травм, простудные и вирусные заболевания

• для сердечно-сосудистой системы: пониженный уровень гемоглобина, анемия, ишемия, малокровие, гипертония и гипотония, атеросклероз, высокий уровень холестерина

• для желудочно-кишечного тракта: плохой аппетит, замедленный обмен веществ, гастрит, язва, колит, гастродуоденит, холицистит, колики и запоры, желчекаменная болезнь

• для дыхательной системы: кашель, ангина, астма, бронхит, туберкулез

• для мужской мочеполовой системы: эректильная дисфункция, простатит, импотенция, низкий уровень активности сперматозоидов, бесплодие

• для женской мочеполовой системы: гормональные сбои, нарушения регулярности менструального цикла, бесплодие, угроза выкидыша, сильный токсикоз, слабая лактация

• для нервной системы: хроническая усталость, сниженная работоспособность, склероз и другие расстройства памяти

• для кожи: увядание, сухость, угревая сыпь, а также различные повреждения (раны, ожоги, обморожения, фурункулы и т.п.).

Интересный факт: смесь широко используется спортсменами. За счет своего состава она способствует повышению физического тонуса, увеличению заряда бодрости, а также наращиванию мышечной массы.

Статьи в тему:

Чем полезно пчелиное маточное молочко для женщин?

Магия природы: маточное молочко при бесплодии

Пчелиное маточное молочко при беременности и для лактации

Рецепт пчелиного маточного молочка с медом

Несмотря на такой чудодейственный эффект от употребления средства, приготовить его в домашних условиях весьма просто. Первый вариант — самый простой. Вы можете просто пересыпать восковые маточники в стеклянную банку и залить и доверху жидким медом. Второй вариант — приготовить однородную смесь. Именно о ее рецепте мы и поговорим далее подробно.

Как приготовить смесь маточного молочка пчел с медом:

• шаг 1: выбор. Как мы уже выяснили, “королевское желе” должно быть свежим, т.е. таким, которое не поддавалось основательной заморозке. При выборе обращайте внимание на внешние характеристики: молочко должно иметь светлый молочный или белесоватый оттенок, а восковый маточник — цельным, без признаков гнили или плесени. Мед лучше выбирать жидкий. Пасечники рекомендуют отдавать предпочтение светлым сортам: акациевому меду, липовому, цветочному.

• шаг 2: смешивание. Продукты используются в пропорциях 1:100 — на 100 г меда необходим всего 1 г молочка. Обратите внимание, что Вам необходимо предварительно извлечь “желе” из восковых маточников. Личинки можно оставить нетронутыми или отделить их — в любом случае, вреда они не принесут. Компоненты необходимо перемешать до состояния однородной массы — удобнее всего это сделать с помощью блендера или миксера.

• шаг 3: фасовка. Когда смесь будет готова, переложите ее в стеклянную тару с герметичными крышками.

Интересный факт: главная сложность заключается в том, чтобы купить качественное и свежее маточное молочко (нативное). Такой продукт лучше заказывать напрямую с пасеки, так как сразу после сбора “желе” оперативно поддается глубокой заморозке. В противном случае, срок его годности составит всего 3-5 дней. Поэтому заранее договоритесь с пасечником о том, чтобы он приберег для Вас свежие маточники. Сделать это можно только в период с мая по август.

Статья в тему: Маточное молочко пчелиное: адсорбированное или нативное?

Инструкция по применению меда с молочком маточным

Чтобы извлечь максимальную пользу из употребления смеси, необходимо ознакомиться с подробной инструкцией по применению.

Для профилактики показаны следующие дозировки:

• детям до 1 года — не рекомендуется давать

• детям 1-6 лет — ½ чайной ложки 1 раз в день

• детям 6-12 лет — по ½ чайной ложки 2 раза в день

• взрослым — по 1 чайной ложке 2-3 раза в день

• беременным женщинам — по 1 чайной ложке 2 раза в день

Обратите внимание, что для лечения простудных, вирусных или каких-либо других заболеваний рекомендуется употреблять увеличенную дозу смеси. К примеру, при ОРЗ у взрослых людей — по 1 чайной ложке 4 раза в день. Тем не менее, рекомендуем предварительно проконсультироваться со своим врачом.

Существует несколько базовых правил применения:

• перед употреблением прополоскать рот водой или слабым содовым раствором

• прием осуществлять натощак или минимум за 30 минут до еды

• не глотать смесь сразу, некоторое время рассасывать ее

• не запивать водой и не закусывать

• не употреблять в вечернее время, т.к. есть риск спровоцировать бессонницу

Срок профилактического курса составляет 1 месяц. После необходимо сделать обязательный перерыв (аналогичный по продолжительности). Рекомендуется употреблять смесь курсами 3 раза в год, когда организм наиболее остро нуждается в витаминах и минералах: осенью, зимой и весной.

При необходимости смесь также можно применять наружно: в форме масок для лица и волос, кремов, компрессов и т.п. 

Статьи в тему:

Пчелиное маточное молочко: как правильно принимать?

Пчелиное маточное молочко для кожи лица

Пчелиное маточное молочко для волос

Противопоказания

Согласно отзывам, мед с маточным молочком, как и любое другое лекарство, имеет ряд противопоказаний. К ним относятся:

• индивидуальная непереносимость продуктов пчеловодства

• склонность к аллергии

• гипервитаминоз

• гиперкоагуляция

• хроническая недостаточность коры надпочечников

• инфекционные заболевания

Также следует с осторожностью отнестись к подбору правильной дозы. Именно поэтому мы рекомендуем перед началом применения проконсультироваться с врачом и пройти предварительное обследование. Особенно это касается женщин во время беременности и в период кормления грудью, а также детей в возрасте до 3 лет. 

Статья в тему: Пчелиное маточное молочко при сахарном диабете: за или против?

Хранение меда с молочком пчел

Хранить медовое молочко следует исключительно в холодильнике при температуре от +5 до +18 градусов. При этом, смесь необходимо держать вдали от посторонних запахов, прямых солнечных лучей и токсичных продуктов.

При соблюдении всех вышеперечисленных условий срок годности народного средства составит 24 месяца.

Статья в тему: Маточное молочко: хранение в домашних условиях

Видео «Что такое пчелиное маточное молочко»

Источник

Википедия: Мед,Маточное молочко

Автор статьи, Йосипенко Роман Сергеевич, пасечник, эксперт по применении продукции пчеловодства. Страница на Facebook — https://www.facebook.com/roma.yosypenko Электронная почта: [email protected]

Влияние натурального вагинального продукта на основе меда на успех внутриматочной инсеминации (ВМИ) при лечении бесплодия.

Авиценна Дж. Фитомед. 2019 июль-август; 9 (4): 310–321.

Марьям Кавуси

¹ Кафедра персидской медицины, Школа персидской и дополнительной медицины, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

Найере Хадем Гэби

² Кафедра акушерства и гинекологии медицинского факультета Университета медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

Мона Наджаф Наджафи

³ Отдел клинических исследований, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

Рошанак Мокаберинежд

⁴ Кафедра традиционной медицины, Школа традиционной медицины, Университет медицинских наук Шахида Бехешти, Тегеран, Иран.

Зохре Фейзабади

¹ Кафедра персидской медицины, Школа персидской и дополнительной медицины, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

Рошанак Салари

⁵ Кафедра фармацевтических наук в персидской медицине, Школа персидской и дополнительной медицины, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

¹ Кафедра персидской медицины, Школа персидской и дополнительной медицины, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

² Кафедра акушерства и гинекологии медицинского факультета Университета медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

³ Отдел клинических исследований, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

⁴ Кафедра традиционной медицины, Школа традиционной медицины, Университет медицинских наук Шахида Бехешти, Тегеран, Иран.

⁵ Кафедра фармацевтических наук в персидской медицине, Школа персидской и дополнительной медицины, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

^* Автор для корреспонденции: Тел .: +985138848930, Факс: +985138829279, [email protected]

Поступила в редакцию 13 октября 2018 г .; Пересмотрено 27 октября 2018 г .; Принято 7 ноября 2018 г.

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License (http://creativecommons.org/licenses/by/3.0/), которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение в любых средний при условии правильного цитирования оригинала.

Abstract

Цель:

В связи с высокой распространенностью бесплодия и растущей тенденцией к комплементарной медицине, это исследование было проведено для изучения влияния вагинального натурального продукта на основе меда и 1% экстракта Myristica Fragrans на степень успех внутриматочной инсеминации (ВМИ).

Материалы и методы:

Это нерандомизированное клиническое исследование с исторической контрольной группой проводилось на бесплодных женщинах. В этом исследовании 159 пациентов были отнесены к группе вмешательства, а 288 пациентов — к группе контроля. Все участники получали кломифен или летрозол с третьего по седьмой день менструации, а на 6, 7 и 8 дни им делали инъекции менопаузального гонадотропина (ГМГ). ВМИ проводили через 36 часов после инъекции хорионического гонадотропина человека (ХГЧ).В группе вмешательства, помимо вышеуказанного лечения, использовался натуральный вагинальный продукт с 7 дня менструации до дня перед проведением ВМИ. Через шестнадцать дней после ВМИ был измерен бета-ХГЧ в сыворотке для исследования химической беременности, а через шесть недель после ВМИ была проведена вагинальная сонография для исследования клинической беременности.

Результаты:

Анализ показал, что частота наступления беременности была выше в группе, получавшей натуральный продукт, по сравнению с контрольной группой.Частота химической беременности составила 18,1% против 15,4%, а частота клинической беременности составила 15,2% против 13,8% для групп вмешательства и контроля, соответственно; но эта разница не была значительной.

Заключение:

Похоже, что использование этого вагинального продукта в течение более длительного периода времени и в течение нескольких менструальных циклов перед ВМИ может дать более положительные результаты. Однако необходимы дальнейшие исследования.

Ключевые слова: Бесплодие, Мед, Myristica Fragrans, Mace, Внутриматочная инсеминация (ВМИ)

Введение

Внутриматочная инсеминация (ВМИ) — один из старейших методов лечения бесплодия.Хотя использование медицинских услуг для лечения бесплодия увеличилось, в последние годы распространенность бесплодия не снизилась (Abdelkader and Yeh, 2009 ▶). Около 10-15% пар во всем мире страдают бесплодием. В Иране эта распространенность выше, чем в среднем по миру, поскольку, согласно сообщениям, она составляет 17,3-20,2% (Akhondi et al., 2013 ▶; Kazemijaliseh et al., 2015 ▶). Показатель успешности ВМИ с гомологичной спермой варьируется (10-20% на каждый цикл) в разных исследованиях (Abdelkader and Yeh, 2009; Monraisin, et al., 2016 ▶; Аллахбадия, 2017 ▶; Irani et al., 2018 ▶). ВМИ используется для лечения бесплодия с различными причинами, включая цервикальные причины, ановуляцию, эндометриоз, иммунологические причины, мужское бесплодие и неизвестные факторы (Allahbadia, 2017; Cabry et al., 2017). Действительно, ВМИ считается промежуточным, более простым и дешевым подходом по сравнению с другими методами, используемыми для лечения бесплодия, такими как оплодотворение in vitro (ЭКО) или внутрицитоплазматическая инъекция сперматозоидов (ИКСИ) (Велтман и др., 2016 ▶). Поэтому необходимо провести больше исследований, чтобы повысить эффективность ВМИ.

Исследования традиционных методов лечения, которые были прописаны тысячу лет назад известными врачами, такими как Ибн Сина, кажутся важными, учитывая склонность пациентов к альтернативной медицине. Мед и булава входят в число соединений, которые поддерживаются персидской медициной при лечении бесплодия и доказали свою эффективность в исследованиях как на людях, так и на животных (Abdelhafiz and Muhamad, 2008 ▶; Zaid et al., 2010 ▶; Zaid et al., 2014 ▶, Lavaf et al., 2017 ▶).

Мед — это пересыщенный сахаром кислый раствор с высоким осмотическим давлением, который не подходит для роста бактерий и грибков. Действительно, эта естественная кислотность предотвращает рост многих патогенных агентов. Мед содержит различные типы белков, витаминов, минералов, флавоноидов и алкалоидов (Grembecka and Szefer, 2013 ▶; Ranjbaret al., 2015 ▶). В клинических испытаниях назначение вагинального соединения, содержащего мед и маточное молочко, наряду с физиологическим раствором, было очень эффективным при лечении бесплодия, вызванного астенозооспермией (Abdelhafiz and Muhamad, 2008 ▶).Кроме того, добавление меда (10%) к криопротекторному раствору привело к повышению качества спермы после замораживания (Fakhrildin and Alsaadi, 2014 ▶; El-Sheshtawy et al., 2016 ▶). В другом клиническом исследовании, посвященном влиянию вагинального меда на вагинит Candida , был сделан вывод, что вагинальное употребление меда, обладая антибактериальным и противогрибковым действием, может поддерживать и укреплять нормальную микрофлору влагалища за счет увеличения количества лактобацилл (Seifi et al., 2016 ▶). Недавние исследования микробиома влагалища сообщили о влиянии видов бактерий на бесплодие посредством секвенирования следующего поколения (NGS) (Campisciano et al., 2017 ▶). Кроме того, патологические изменения микробиоты матки могут отрицательно сказаться на процессе имплантации и повлиять на результаты ЭКО (Moreno et al., 2016 ▶). Следовательно, мед может положительно влиять на фертильность, влияя на микробиоту влагалища и, в свою очередь, на микробиоту матки. В исследовании, проведенном Zaid et al., Мед оказался эффективным в улучшении циклов эстрогена у мышей с токсичностью искусственных яичников (Zaid et al., 2014 ▶). Кроме того, назначение меда в течение двух недель привело к увеличению толщины эпителия влагалища и увеличению веса матки у самок мышей после овариэктомии (Zaid et al., 2010 ▶).

Внешняя кора мускатного ореха (Myristica Fragrans) называется булавой (USDA, 2007 ▶), она содержит различные типы фитоэстрогенов, флавоноидов и минералов (Zhang et al., 2012 ▶; Chiu et al., 2016 ▶). Он оказывает афродизиак, а также обладает антибактериальным, противогрибковым, гепатопротекторным, противовоспалительным и иммуномодулирующим действием (Tajuddin et al., 2003 ▶; Tajuddin et al., 2005 ▶; Checker et al., 2008 ▶; Zhang et al., 2012 ▶).

Исследования показали, что уровни кальция и магния в крови снижаются во время стимуляции овуляции и повышения уровня эстрогена у бесплодных женщин (Grossi et al., 2017 ▶). Кроме того, в различных исследованиях добавление фитоэстрогена наряду с индукцией овуляции с помощью кломифена могло улучшить процесс овуляции и частоту наступления беременности (Shahin et al., 2008; Shahin and Mohammed, 2014). В исследовании, проведенном Таджуддином и др., M. Fragrans вызвали значительное увеличение сексуальной активности у самцов мышей (Таджуддин и др., 2003; Таджуддин и др., 2005). Похоже, что это вагинальное соединение может повысить вероятность зачатия за счет увеличения количества половых контактов, в дополнение к своим фитоэстрогенным свойствам, которые могут быть эффективными для индукции овуляции.

В персидской медицине многие препараты от бесплодия используются вагинально, и недавние исследования доказали влияние вагинального меда на слизистую влагалища, микробиоту влагалища, микробиоту матки, облегчение подвижности и продвижение сперматозоидов во влагалище (Abdelhafiz and Muhamad, 2008 ▶) . Начиная с M. Fragrans содержит множество фитоэстрогенов, которые могут быть эффективны в процессе оплодотворения. Поскольку комбинация меда и M. Fragrans используется в персидской медицине в качестве вспомогательного средства для лечения бесплодия (Азамхан, 2008 ▶), это исследование было проведено для изучения эффекта вагинального натурального продукта, изготовленного из меда и 1% экстракта . М.Fragrans (Mace) по успешности IUI.

Материалы и методы

Дизайн исследования

Это клиническое исследование с исторической контрольной группой проводилось с 2016 по 2018 год на бесплодных женщинах-кандидатах на ВМИ, в центре бесплодия Милад при Университете медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран. В группе вмешательства выборка была последовательно проведена у пациентов, которые обратились в центр бесплодия Милад с 2017/9/23 по 2018/7/1 для проведения ВМИ и соответствовали критериям включения.В контрольной группе, независимо от исхода беременности, образцы были последовательно собраны из архива этого центра от пациенток, направленных с 2016/9/22 по 2017/9/22 и соответствующих критериям включения. Затем информация о пациентах была записана. Пациенты были подобраны по возрасту и продолжительности бесплодия между экспериментальной и контрольной группами. Это исследование было одобрено этическим комитетом Университета медицинских наук Мешхеда (IR.MUMS.REC.1395.487) и зарегистрировано в центре регистрации клинических исследований Ирана (IRCT2016111130827N1).В группе вмешательства сначала пациентам разъясняли результаты исследования, а затем пациентов просили подписать форму согласия (если они желают участвовать в исследовании).

Участники

Пациенты были сначала обследованы и оценены гинекологом и направлены к исследователю в Центр бесплодия Милад. Критерии включения включали готовность участвовать, возраст <40 лет, продолжительность бесплодия <15 лет, бесплодие из-за ановуляции, бесплодие из-за мужского фактора и необъяснимое бесплодие, количество сперматозоидов в соответствии с общей функцией подвижности сперматозоидов (TMFS) более 5 миллионов. на мл после подготовки спермы, нормальность гормональных тестов, нормальность матки при гистеросальпингографии и наличие хотя бы одной открытой маточной трубы.

Критерии исключения включали индекс массы тела> 35, неподходящий размер фолликула для введения ХГЧ на 12-14 день и эндометриоз.

Процедура IUI

Протокол ВМИ, который выполняли для обеих групп, был следующим: с 3 по 7 день менструации они получали кломифен (100 мг / день) или (летрозол 5 мг / день) в течение пяти дней, а на 6, 7 дни — и 8, они получили HMG. Доза HMG была скорректирована на основании мониторинга яичников. На 9 ^{-й день} была проведена вагинальная сонография (если диаметр фолликула был менее 12 мм, то они получали ГМГ во второй раз), а в случае фолликула ≥ 18 мм на 12-14 день цикла — 5000 были введены единицы ХГЧ.Затем, через 36 часов, была проведена ВМИ с образцом спермы жены пациента, который был промыт и подготовлен в тот же день. Для поддержки лютеиновой фазы после ВМИ прописывали прогестерон (8% вагинальный гель, один предварительно заполненный аппликатор один раз в день).

Вмешательство

В группе вмешательства, с 7 ^-го дня менструации до дня перед проведением ВМИ, натуральный продукт из меда и 1% экстракта M. Fragrans (Mace) применялся вагинально с помощью аппликатора один раз в день. ночью самой пациенткой.Пациентам также был предоставлен список возможных побочных эффектов продукта. Контрольная группа не получала вагинальный натуральный продукт.

Рандомизация и ослепление

Т.к. контрольная группа выбрана из архива центра бесплодия; Это испытание не было ни рандомизированным, ни слепым.

Препарат

Сбор и извлечение растений

Булава — красная мясистая чаша вокруг мускатного ореха.Растение было проверено ботаником из отдела ботанического исследовательского центра по наукам о растениях в Университете Фирдоуси в Мешхеде, Иран, и Мейс было приготовлено из центра Sobhan Herb в Мешхеде, Иран. Мед высокого качества был приготовлен из Мешхеда, Хорасан Разави, Иран. После приготовления булавы ее измельчали ​​и водный экстракт экстрагировали путем мацерации в воде. Полученный жидкий экстракт измельчали ​​в сублимационной сушилке. Затем измельченный экстракт выдерживали при 2-4 ° C. Все этапы экстракции были выполнены Исследовательским центром пищевых наук и промышленности Мешхеда.

Количество экстракта растений составляло 2% от веса растения.

Приготовление вагинального продукта на травах

Мейс и мед были смешаны вместе до 1% (т.е. каждые 100 г меда были смешаны с 1 г Мейса), и 80-граммовые тюбики были заполнены смесью. Эти этапы были выполнены фармацевтом факультета персидской медицины Университета медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран. Каждая пробирка содержала 79,2 г меда и 0,8 г экстракта булавы. После заполнения трубочки передавались пациентам вместе с аппликатором для вагинального применения.Дозу этого соединения определяли как один аппликатор на ночь, начиная с 7 ^-го дня менструации и заканчивая днем ​​перед проведением ВМИ. Каждый аппликатор, содержащий 8 г этого продукта, содержал не менее 0,08 г булавы и 7,92 г меда.

Стандартизирующий водный экстракт булавы

Водный экстракт Mace был стандартизирован на основе общего фенола с использованием метода Folin-Ciocalteu (Hosseini et al., 2017). Всего 20 мкл экстракта (10 мг / мл) и галловая кислота (0, 50, 100, 150, 250 и 500 мг / л), используемые в качестве стандарта, были смешаны со 100 мкл реагента Folin-Ciacalteu. и 300 мкл 1 М раствора карбоната натрия.Конечный объем был достигнут 2 мл с использованием деионизированной воды, и через 2 часа оптическое поглощение образцов было измерено спектрофотометром при 765 нм. Затем была построена стандартная кривая для галловой кислоты, и уровень фенольных соединений в экстракте был выражен в миллиграммах галловой кислоты. Общее содержание фенола в экстракте Mace было равно 70,4 мг галловой кислоты на грамм чистого экстракта Mace, а общее содержание фенола в натуральном продукте было равно 0,704 мг галловой кислоты на грамм, исходя из содержания экстракта Maces в продукте.

Микробиологические тесты

Микробиологические тесты были выполнены для продукта, содержащего мед и булаву, в микробиологической лаборатории больницы Гем в Мешхеде на основе стандартного метода фармакопеи США USP32-NF27 (Pharmacopeia, 2004 ▶). Продукт был отрицательным для Escherichia coli , Candida albicans , Staphylococcus aureus , аэробных мезофильных бактерий, плесени, клебсиелл и дрожжей.

Измерения и результаты

Полная история болезни пациентов регистрировалась по прибытии, и исследователь проводил физический осмотр.Были записаны демографические и основные характеристики пациентов, включая возраст пациента, возраст супруга, ИМТ, продолжительность бесплодия, время проведения ВМИ и тип бесплодия с точки зрения первичного или вторичного бесплодия. Диагностические тесты для измерения уровней ФСГ и ЛГ были выполнены всем пациентам на третий день менструального цикла. Кроме того, гинекологом была проведена вагинальная сонография на третий и 9 ^-й -й дни менструального цикла, где было записано количество фолликулов и размер самого большого фолликула.Кроме того, анализ спермы также проводился для супруга пациентов, которые считались нормальными, если у них были следующие характеристики, в соответствии с руководящими принципами Всемирной организации здравоохранения. Объем сперматозоидов ≥1,5 мл, количество сперматозоидов ≥15 миллионов / мл, подвижность сперматозоидов (процент прогрессивной подвижности) ≥32%, морфология сперматозоидов в соответствии со строгими критериями (Tygerberg) ≥4%.

После записи анамнеза и проведения физического обследования, биохимических тестов и сонографии была указана и записана причина бесплодия (женский или мужской фактор, или и то, и другое, или необъяснимое бесплодие).

Первичный результат включал частоту химической и клинической беременности. Через шестнадцать дней после проведения ВМИ определяли уровень βHCG (хорионический гонадотропин человека) в сыворотке с помощью метода ELISA (иммуноферментного анализа). Химическая беременность была подтверждена, если уровень βHCG был ≥25 МЕ / л. Далее, через шесть недель после ВМИ гинекологом в центре лечения бесплодия была проведена вагинальная сонография, где при наличии мешка беременности была подтверждена клиническая беременность. Вторичным результатом были побочные эффекты продукта.

Анкета темперамента была заполнена для всех пациентов в группе вмешательства. Анкета для определения темперамента (Опросник моджахеди Мизадж, MMQ) является стандартной анкетой, утвержденной в Иране в 2014 году, и ее надежность и валидность были подтверждены. Альфа-коэффициент Кронбаха в этой анкете составляет 0,71. Эта анкета содержит 10 пунктов с оценкой от 1 до 3. После суммирования баллов оценка ≤14 считается холодным темпераментом, 15-18 — умеренным темпераментом, а ≥19 — теплым темпераментом (Mojahedi et al., 2014 ▶).

Размер выборки

Поскольку показатель успеха ВМИ в Центре бесплодия Милад составлял около 10%, и учитывая, что вышеупомянутое вмешательство может повысить показатель успеха на 10%, что приведет к успеху на 20% (α = 0,05 и β = 0,2 ), размер выборки в группе вмешательства и контрольной группе был определен как 144 и 288 соответственно. С учетом 10% потерь в группу вмешательства вошли 159 человек. Из-за ограничений доступа к лекарству (натуральному вагинальному продукту) из-за его высокой стоимости и количества пациентов, а также для стабилизации эффективности исследования контрольная группа считалась вдвое большей группой вмешательства.

Статистический анализ

Записанные данные были проанализированы с помощью программного обеспечения SPSS (версия 16). Для представления данных использовались методы описательной статистики, включая центральные индексы, распределение и частотное распределение. Независимый t-критерий использовался для сравнения количественных переменных между двумя группами, если распределение данных было нормальным; в противном случае использовали тест Манна-Уитни. Для сравнения качественных переменных между двумя группами использовались критерий хи-квадрат и, при необходимости, точный критерий Фишера.Модель логистической регрессии использовалась для корректировки смешивающих переменных. Во всех расчетах статистически значимым считалось p <0,05 .

Результаты

В этом испытании в группу вмешательства были включены 159 субъектов. Пятьдесят четыре субъекта из 159 были исключены по разным причинам (23 субъекта из-за неподходящего фолликула, 7 из-за неподходящих сперматозоидов и 14 из-за нежелания продолжать этапы ВМИ, 9 субъектов из-за неиспользования продукта и 1 субъект из-за возникновения вагинального зуда и жжения).Наконец, 105 человек были проанализированы как группа вмешательства. В контрольной группе собрана и исследована информация о 288 пациентах. Из контрольной группы 28 пациентов были исключены из-за неполной информации, а 260 человек были проанализированы как контрольная группа ().

Блок-схема исследования

Средний возраст пациентов в экспериментальной и контрольной группах составлял 28,3 ± 4 и 28,6 ± 5 лет, соответственно, и не было существенной разницы между двумя группами (p = 0.619).

Средняя продолжительность бесплодия в экспериментальной и контрольной группах составляла 5,36 ± 3 и 4,7 ± 3 года, соответственно, и не было значительной разницы между двумя группами ().

Таблица 1

Основные характеристики пациентов

± 4,8 27,3 9027 18 (15-26)

	Вмешательство	Контроль	Значение P
Возраст пациента (лет) a	0.619
Возраст мужа (лет) a	32,20 ± 5,3	32,28 ± 5	0,875
ИМТ (кг / м2) a	25 ± 3,5	0,139
Продолжительность бесплодия (лет) a	5,36	4,7 ± 3	0,052
Время IUI b Первое		Третий Четвертый	45 (42.9%) 36 (34,3%) 15 (14,3%) 9 (8,5%)	114 (43,8%) 92 (35,4%) 46 (17,7%) 8 (3,1%)	0,627
Вид бесплодия c
Первичное Среднее	77 (73,3%) 28 (26,7%)	200 (77,2%) 603 0,431
причина бесплодия c
Женский фактор Мужской фактор Оба (женский и мужской) Неизвестно	29 (27.6%) 29 (27,6%) 11 (10,5%) 36 (34,3%)	59 (22,8%) 71 (27,4%) 19 (7,3%) 110 (42,5%)	0,413
FSH (миль / м) d	6,2 (2-19)	6,37 (0,01-28,2)	0,417
LH (miu / m) d	4,8 (0,1- 26)	4,9 (1,1-26,8)	0,562
Анализ спермы c , e
Объем Count Motility 903.2%) 105 (100%) 88 (83,8%) 101 (96,2%)	247 (95,4%) 258 (99,6%) 208 (80%) 233 (89,6%)	0,958 0,524 0,400 0,060
Количество фолликулов d	4 (1-14)	5 (1-15)	<0,01
Максимальный размер фолликула (мм) d	18 (15-25)	0,507
Толщина эндометрия (мм) a	6.9 ± 1,5	7,2 ± 1,6	0,222
Лекарственные средства c
летрозол кломифен	60 (4527102) 90,27% %) 158 (60,8%)	0,003

Не было доказательств статистически значимых различий между двумя группами (вмешательство и контроль) с точки зрения химической беременности (OR = 1,048, CI = 0,538-2,04, P = 0.890) и клинической беременности (OR = 1,120, CI = 0,561–2,23, P = 0,748) после корректировки мешающих переменных, таких как количество фолликулов и типы препаратов, используемых для стимуляции овуляции (летрозол или кломифон). Другие демографические и базовые переменные представлены в.

Частота химической беременности (CHPR) в экспериментальной и контрольной группах составила 18,1% и 15,4%, соответственно, без существенной разницы между ними; однако уровень химической беременности был выше в группе вмешательства (p = 0.524). Частота клинической беременности (СЛР) составила 15,2% в группе вмешательства и 13,8% в группе контроля, которые статистически не различались; однако СЛР была выше (p = 0,731) в группе вмешательства ().

Результаты в группах вмешательства и контроля (A: частота химической беременности; B: частота клинической беременности).

CHPR: Показатель химической беременности; и СЛР: клиническая частота наступления беременности.

Хотя частота различных причин бесплодия была одинаковой в экспериментальной и контрольной группах, в экспериментальной группе большинство субъектов, забеременевших (как химически, так и клинически), имели бесплодие с женским фактором.С другой стороны, в контрольной группе большинство беременностей (химических и клинических) произошло по необъяснимым причинам (). В группе вмешательства сравнивали общий темперамент пациенток в группах с положительной и отрицательной химической беременностью; большинство испытуемых с положительной химической беременностью продемонстрировали теплый характер, но не было существенной разницы между положительными и отрицательными группами химической беременности p = 0,306).

Таблица 2

Сравнение успешности химической и клинической беременности из-за различных причин бесплодия в группе вмешательства

N (%)

		Причина бесплодия
Женский фактор			Мужской фактор	Оба (женский и мужской)	Неизвестно	P *
CHPR	Положительный N (%)	7 (36.8)	3 (15,8)	3 (14,8)	6 (31,6)	0,464
	Отрицательный N (%)	22 (25,6)	26 (30,2)	8 (9,3)	30 (34,9)
СЛР	Положительный N (%)	7 (43,8)	3 (18,8)	3 (18,8)	3 (18,8)	0,505
	22 (24,7)	26 (29,2)	8 (9)	33 (37.1)

Далее, в группе вмешательства сравнивались группы положительной и отрицательной клинической беременности по общему темпераменту; у пациенток с положительной клинической беременностью был вспыльчивый характер, но не было существенной разницы между группами положительной и отрицательной клинической беременности по общему темпераменту (p = 0,144) ().

Таблица 3

Сравнение общего темперамента (mizajaam) между двумя группами частота положительных и отрицательных беременностей в группе вмешательства

9057

Группа		Теплый	Холодный	Умеренный	P *
CHPR	Положительный N (%)	8 (42.1)	5 (26,3)	6 (31,6)	0,306
	Отрицательный N (%)	20 (24,1)	23 (27,7)	40 (48,2)
Положительный N (%)	7 (43,8)	3 (18,8)	6 (37,5)	0,144
Отрицательный N (%)	21 (24,4)	25 (29,1)	40 (46,5)

В группе вмешательства общий темперамент сравнивался между группами положительной и отрицательной химической беременности, где большинство субъектов с положительной химической беременностью демонстрировали теплый темперамент, но не было существенной разницы между положительной и отрицательной химической беременностью. группы беременностей (p = 0.306). Кроме того, в группе вмешательства сравнивались группы положительной и отрицательной клинической беременности по общему темпераменту, где группы с положительной клинической беременностью были вспыльчивыми, но не было существенной разницы между группами положительной и отрицательной клинической беременности по общему темпераменту ( р = 0,144) ().

Наблюдались очень ограниченные побочные эффекты; о зуде и жжении сообщил пациент, который в анамнезе употреблял большое количество острых приправ, который был исключен из группы вмешательства.

Обсуждение

Настоящее исследование является первым исследованием, в котором оценивалась эффективность натурального вагинального продукта, содержащего булаву и мед, у пациенток-кандидатов на ВМИ. Эффект Mace, как фитоэстрогенного соединения наряду с медом, вагинально сочетающимся с индукцией овуляции, ранее не оценивался у бесплодных пациентов.

Результаты показали, что частота химической и клинической беременности в группе, получавшей вагинальный продукт, была выше по сравнению с контрольной группой (18.1 против 15,4% для химической беременности и 15,2 против 13,8% для клинической беременности, соответственно), но это различие не было статистически значимым. Это увеличение частоты успеха ВМИ произошло после семи дней использования этого вагинального продукта. Возможно, использование этого вагинального продукта в нескольких последовательных циклах может дать положительный результат. Поскольку в исследовании, проведенном Abdelhafiz et al. при использовании вагинальных продуктов, содержащих мед, маточное молочко и пчелиный хлеб, в течение 2 недель и трех последовательных циклов частота наступления беременности значительно увеличилась по сравнению с контрольной группой (Abdelhafiz and Muhamad, 2008 ▶).Поскольку исследование, проведенное Abdelhafiz et al. было единственным клиническим испытанием, аналогичным нашему, кажется, что короткая продолжительность лечения (одна неделя против двух недель) и непрекращающееся лечение (один цикл против трех) были среди причин, из-за которых показатель успеха препарата снизился в этом исследовании.

В нашем исследовании в контрольной группе количество пациентов, получавших кломифен, было больше, чем летрозол, что значительно отличалось от группы вмешательства. В различных исследованиях изучалось влияние этих двух препаратов на фертильность (Roque et al., 2015, Ганн и Бейтс, 2016). Похоже, что влияние кломифена и летрозола на клинические исходы и коэффициент фертильности у женщин с необъяснимым бесплодием и синдромом поликистозных яичников ( СПКЯ ) одинаково (Ghahiri et al., 2016 ▶, Eskew et al., 2019 ▶). В нашем исследовании вероятность химической беременности и клинической беременности в экспериментальной и контрольной группах после корректировки мешающих переменных (например, количества фолликулов и типов препаратов), используемых для стимуляции овуляции (летрозол или кломифон)) не имела каких-либо существенных различий.

Различные исследования показали, что цервикальная инфекция, вызванная грамотрицательными бактериями, может отрицательно влиять на вспомогательные репродуктивные технологии (Salim et al., 2002; Moreno and Franasiak, 2017). Более того, удаление цервикальной слизи перед IUI, как было показано, увеличивает коэффициент фертильности вдвое с возможным механизмом удаления микробов, загрязняющих кончик катетера, что вызывает нарушение имплантации. Однако наличие цервикальной слизи не позволяет сперматозоидам вернуться во влагалище после оплодотворения.Таким образом, увеличивается уровень сперматозоидов в маточной трубе. Таким образом, при вагинальном применении меда можно добиться положительного воздействия на фертильность без физического удаления вагинальной слизи за счет улучшения микробиоты. Хотя различные исследования показали, что мед улучшает микробиоту матки (Brudzynski and Sjaarda, 2015; Seifi et al., 2016), длительное потребление этого продукта может повысить эффективность лечения бесплодия, поскольку в исследовании, проведенном Абдельхафизом , и другие., использование вагинального продукта, содержащего мед, в течение 2 недель дало положительные результаты (Abdelhafiz and Muhamad, 2008 ▶).

В интервенционной группе 43,7% забеременевших имели женское бесплодие, а в контрольной группе этот показатель составил 24,7%. Хотя эта разница не была статистически значимой, кажется, что вагинальный продукт может иметь большее влияние на женские причины. Другими словами, вагинальное применение этого продукта, влияя на нормальную флору влагалища или его микробиоту, может привести к успешному ВМИ у лиц с женским бесплодием.С другой стороны, результаты исследования, проведенного Абдельхафизом и др., Показали, что вагинальный продукт, содержащий мед, маточное молочко и цветочную пыльцу, был эффективен у бесплодных пациентов с мужскими причинами за счет увеличения подвижности сперматозоидов во влагалище без какой-либо ВМИ (Абдельхафиз и Мухамад , 2008 ▶).

Учитывая общий темперамент, большинство беременных в группе вмешательства имели теплый темперамент, в то время как у лиц с холодным темпераментом было минимальное количество беременностей (42 против 26% для? И? Соответственно).Этот результат чем-то похож на результаты, полученные Sohrabvand et al; они сообщили, что наиболее распространенным темпераментом в их исследовании, которое проводилось на бесплодных женщинах, обращающихся в клинику по лечению бесплодия, был холод (Sohrabvand et al., 2014). Поскольку темперамент нашего травяного продукта теплый, кажется, что непродолжительность употребления наркотиков является одной из причин снижения эффективности ВМИ у людей с холодным темпераментом по сравнению с людьми с теплым темпераментом. Возможно, если вагинальный продукт использовался в течение более длительного времени в течение нескольких последовательных циклов до того, как IUI и образ жизни и порядок еды также были скорректированы с учетом темперамента, этот продукт мог бы иметь большее влияние на успех IUI, разогревая темперамент.

Сильными сторонами этого исследования было изучение влияния продукта на бесплодие в случаях с женскими, мужскими и необъяснимыми факторами. С другой стороны, Abdelafiz и др. Изучали людей с бесплодием только по мужскому фактору, и эффект препарата не оценивался в случаях других причин бесплодия. Слабым местом этого исследования было ограничение количества пациентов, которые вызывали, чтобы стабилизировать мощность исследования. Таким образом, в настоящем исследовании историческая контрольная группа рассматривала дважды группу вмешательства.Таким образом, в текущем исследовании рандомизация и ослепление были невозможны. Другим слабым местом этого исследования была короткая продолжительность применения лекарств. Кроме того, другим ограничением исследования было отсутствие средств для скрининга микробиоты матки до и после вмешательства.

Принимая во внимание увеличение частоты успеха ВМИ в группе вмешательства, хотя и незначительное, следует провести дальнейшие исследования с более продолжительным лечением, по крайней мере, в течение двух недель в каждом цикле фертильности и в течение не менее трех циклов.Кроме того, пероральное употребление этого соединения в то же время, что и вагинальное применение, может улучшить реакцию на лечение, учитывая пероральный эффект фитоэстрогенов на индукцию овуляции.

Выражение признательности

Это исследование является частью результатов докторской диссертации по персидской медицине (IR.MUMS.REC.1395.487), выполненной в Университете медицинских наук Мешхеда. Поэтому мы благодарим вице-президента Университета по исследованиям, а также выдающихся профессоров, которые помогли нам в этом исследовании.

Конфликт интересов

В этом исследовании нет конфликта интересов.

Ссылки

• Abdelhafiz AT, Muhamad JA. Перикоитальный перикоитальный интравагинальный пчелиный мед и маточное молочко для лечения мужского бесплодия. Int J Gynaecol Obstet. 2008. 101: 146–149. [PubMed] [Google Scholar]
• Абделькадер А.М., Йе Дж. Потенциальное использование внутриматочной инсеминации в качестве основного метода лечения бесплодия: обзор медицинских учреждений с ограниченными технологиями. Obstet Gynecol Int.2009; 2009: 584837. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Ахонди М.М., Камали К., Ранджбар Ф., Ширзад М., Шафегхати С., Бехджати Ардакани З., Гуджани А., Парсеян М. Распространенность первичного бесплодия в Иране в 2010 г. Иран Дж. Здравоохранение. 2013; 42: 1398–1404. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Аллахбадия, Г. Н. Внутриматочное осеменение: пересмотр основ. J Obstet Gynaecol India. 2017; 67: 385–392. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Азамхан, М.Exir Azam. Тегеран: Институт истории медицины; 2008. С. 704–753. [Google Scholar]
• Brudzynski K, Sjaarda C. Гликопротеины меда, содержащие антимикробные пептиды, Jelleins из основного протеина маточного молочка 1, отвечают за литическую и бактерицидную активность клеточной стенки меда. PLoS One. 2015; 10: e0120238. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Cabry-Goubet R, Scheffler F, Belhadri-Mansouri N, Belloc S, Lourdel E, Devaux A, Chahine H, De Mouzon J, Copin H.Влияние типов гонадотропинов и показаний на успех гомологичной внутриматочной инсеминации: исследование из 1251 цикла и обзор литературы. Biomed Res Int. 2017; 2017: 3512784. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Campisciano G, Florian F, D’Eustacchio A, Stankovic D, Ricci G, De Seta F. Субклинические изменения шейно-вагинального микробиома у женщин с идиопатическим бесплодием. J. Cell Physiol. 2017; 232: 1681–1688. [PubMed] [Google Scholar]
• Чекер Р., Чаттерджи С., Шарма Д., Гупта С., Варияр П., Шарма А.Иммуномодулирующее и радиозащитное действие лигнанов, полученных из свежего мускатного ореха (Myristica Fragrans), на спленоциты млекопитающих. Int Imp. 2008; 8: 661–669. [PubMed] [Google Scholar]
• Чиу С., Ван Т., Бельски М., Абурашед Э.А. Выделение, очистка и характеристика фенилпропаноидов и фенольных компонентов ядра мускатного ореха (Myristica Fragrans) под контролем ВЭЖХ Nat Prod Commun. 2016; 11: 483–488. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Эль-Шештави Р.И., Эль-Бадри Д.А., Гамаль А., Эль-Наттат В.С., Алмаати AMA.Натуральный мед как криопротектор для улучшения параметров спермы арабских жеребцов после размораживания. Азиатский Pac J Reprod. 2016; 5: 331–334. [Google Scholar]
• Эскью А.М., Бедрик Б.С., Харди А., Столл CRT, Колдиц Г.А., Туули М.Г. Летрозол в сравнении с цитратом кломифена при необъяснимом бесплодии: систематический обзор и метаанализ. Obstet Gynecol. 2019; 3: 437–444. [PubMed] [Google Scholar]
• Фахрилдин М.Б., Алсаади РА. Добавление меда в среду для замораживания спермы улучшает параметры спермы человека после размораживания.J Family Reprod Health. 2014; 8: 27–31. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Ghahiri A, Mogharehabed N, Mamourian M. Летрозол как средство первой линии лечения бесплодных женщин с синдромом поликистозных яичников (СПКЯ) по сравнению с цитратом кломифена: клиническое испытание. Adv Biomed Res. 2016; 5: 6. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Grembecka M, Szefer P. Оценка качества меда и продуктов пчеловодства на основе их минерального состава с использованием многомерных методов.Оценка состояния окружающей среды. 2013; 185: 4033–4047. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Grossi E, Castiglioni S, Moscheni C, Antonazzo P, Cetin I, Savasi VM. Уровни магния и кальция в сыворотке крови у бесплодных женщин во время цикла репродуктивной помощи. Magnes Res. 2017; 30: 35–41. [PubMed] [Google Scholar]
• Хоссейни А., Моллазаде Х., Амири М.С., Садегния Х.Р., Горбани, 2017. Biomed Pharmacother. Влияние стандартизированного экстракта корня Rheum turkestanicum Janischew на диабетические изменения в почках, печени и сердце у крыс с диабетом, вызванным стрептозотоцином; 86: 605-611.[PubMed] [Google Scholar]
• Ирани М., Чоу С., Китинг Д., Старейшина С., Розенвакс З., Палермо Г. Оптимизация лечения бесплодия первой линии. Гинекол Эндокринол. 2018; 20: 1–5. [PubMed] [Google Scholar]
• Каземиджалисех Х., Рамезани Теграни Ф., Бехбуди-Гандевани С., Хоссейнпанах Ф., Халили Д., Азизи Ф. Распространенность и причины первичного бесплодия в Иране: популяционное исследование. Glob J Health Sci. 2015; 7: 226–232. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Lavaf M, Simbar M, Mojab F, Alavi Majd H, Samimi M.Сравнение эффектов меда и крема фенитоина (PHT) на интенсивность боли и заживление ран после эпизиотомии у нерожавших женщин. J Complement Integr Med. 2017; 15: 28981445. [PubMed] [Google Scholar]
• Моджахеди М., Насери М., Майдзаде Р., Кешаварз М., Эбадини М., Назем Э. Оценка надежности и достоверности опросника мизадж: новая шкала самооценки в традиционной иранской медицине. Иранский Красный Полумесяц, Med J. 2014; 16: e15924. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Monraisin O, Chansel-Debordeaux L, Chiron A, Floret S, Cens S, Bourrinet S.Оценка практики внутриматочного оплодотворения: годичное проспективное исследование в семи французских центрах технологий вспомогательной репродукции. Fertil Steril. 2016; 105: 1589–1593. [PubMed] [Google Scholar]
• Moreno I, Codoner FM, Vilella F, Valbuena D, Martinez-Blanch JF, Jimenez-Almazan J. Доказательства того, что микробиота эндометрия влияет на успех или неудачу имплантации. Am J Obstet Gynecol. 2016; 215: 684–703. [PubMed] [Google Scholar]
• Морено И., Франасиак Дж. М.. Микробиота эндометрия — новый игрок в городе.Fertil Steril. 2017; 108: 32–39. [PubMed] [Google Scholar]
• Pharmacopeia U. Тест на бактериальный эндотоксин. USP32 / NF27: Фармакопея США и Национальный формуляр. 2004; 2004: 93–96. [Google Scholar]
• Ранджбар А.М., Садехпур О., Ханави М., Шамс Ардекани М.Р., Молудиан Х., Хаджимахмуди М. Влияние процесса удаления шлака на некоторые физико-химические параметры меда. Iran J Pharm Res. 2015; 14: 657–662. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Салим Р., Бен-Шломо И., Колоднер Р., Кенесс И., Шалев Э.Бактериальная колонизация шейки матки и успешность вспомогательной репродукции: результаты проспективного обследования. Hum Reprod. 2002; 17: 337–340. [PubMed] [Google Scholar]
• Сейфи Надер Голи З., Нахиди Ф., Сафеян А.Р., Джавадзаде Й., Этераф Оскуи Т. Влияние вагинального геля с медом и вагинального крема с клотримазолом на нормальную муку во влагалище у женщин с кандидозным вагинитом. ИДЖОГИ. 2016; 19: 32–39. [Google Scholar]
• Шахин А.Ю., Исмаил А.М., Захран К.М., Махлуф А.М. Добавление фитоэстрогенов к индукции кломифена у пациентов с необъяснимым бесплодием — рандомизированное исследование.Репродукция Биомед онлайн. 2008; 16: 580–588. [PubMed] [Google Scholar]
• Шахин А.Ю., Мохаммед С.А. Добавление фитоэстрогена Cimicifugae Racemosae к циклам индукции кломифена с синхронизированным половым актом при синдроме поликистозных яичников улучшает результаты цикла и частоту наступления беременности — рандомизированное исследование. Гинекол Эндокринол. 2014; 30: 505–510. [PubMed] [Google Scholar]
• Сохрабванд Ф., Назем Э., Танзаз М., Кешаварз М., Хашем Дабагян Ф., Никбахт Насрабади А., Гошехгир А., Биос С., Мокаберинеджад Р.Исследование личного и маточного юмора у бесплодных женщин, обращенных в больницу Вали-Э-Ас в Тегеране, Иран, в 2012 году. IJOGI. 2014; 17: 10–19. [Google Scholar]
• Таджуддин, Ахмад С., Латиф А., Касми И.А. Афродизиак 50% спиртовых экстрактов Myristica Fragrans Houtt (мускатный орех) и Syzygium aromaticum (L) Merr & Perry (гвоздика) у самцов мышей: сравнительное исследование. BMC Complement Altern Med. 2003; 3: 6. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Таджуддин, Ахмад С., Латиф А., Касми И.А., Амин К.М.Экспериментальное исследование улучшения сексуальной функции Myristica Fragrans Houtt (мускатный орех) BMC Complement Altern Med. 2005; 5: 16. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• USDA N. 2007. База данных PLANTS (http://plants.usda.gov, 6 августа 2007 г.). Национальный центр данных по растениям. Батон-Руж, 2007: 70874-74490.
• Veltman-Verhulst SM, Hughes E, Ayeleke RO, Cohlen BJ. Внутриматочная инсеминация при необъяснимой недостаточности фертильности. Кокрановская база данных Syst Rev.2016; 2: CD001838. [PubMed] [Google Scholar]
• Заид С.С., Осман С., Кассим Н.М.Потенциальный защитный эффект меда Туаланг на токсичность яичников, вызванную BPA, у крыс препубертатного возраста. BMC Complement Altern Med. 2014; 14: 509. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Заид С.С., Сулейман С.А., Сираджудин К.Н., Осман Н.Х. Влияние меда Туаланг на женские репродуктивные органы, большеберцовую кость и гормональный фон у крыс с удаленными яичниками — животная модель менопаузы. BMC Complement Altern Med. 2010; 10: 82. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Zhang C, Qi X, Shi Y, Sun Y, Li S, Gao X.Оценка содержания микроэлементов в булаве (Myristica Fragrans Houtt) и их влияние на рак шейки матки, вызванный метилхолантреном. Biol Trace Elem Res. 2012; 149: 431–434. [PubMed] [Google Scholar]

Влияние натурального вагинального продукта на основе меда на успех внутриматочной инсеминации (ВМИ) при лечении бесплодия

Авиценна Дж. Фитомед. 2019 июль-август; 9 (4): 310–321.

Марьям Кавуси

¹ Кафедра персидской медицины, Школа персидской и дополнительной медицины, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

Найере Хадем Гэби

² Кафедра акушерства и гинекологии медицинского факультета Университета медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

Мона Наджаф Наджафи

³ Отдел клинических исследований, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

Рошанак Мокаберинежд

⁴ Кафедра традиционной медицины, Школа традиционной медицины, Университет медицинских наук Шахида Бехешти, Тегеран, Иран.

Зохре Фейзабади

¹ Кафедра персидской медицины, Школа персидской и дополнительной медицины, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

Рошанак Салари

⁵ Кафедра фармацевтических наук в персидской медицине, Школа персидской и дополнительной медицины, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

¹ Кафедра персидской медицины, Школа персидской и дополнительной медицины, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

² Кафедра акушерства и гинекологии медицинского факультета Университета медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

³ Отдел клинических исследований, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

⁴ Кафедра традиционной медицины, Школа традиционной медицины, Университет медицинских наук Шахида Бехешти, Тегеран, Иран.

⁵ Кафедра фармацевтических наук в персидской медицине, Школа персидской и дополнительной медицины, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

^* Автор для корреспонденции: Тел .: +985138848930, Факс: +985138829279, [email protected]

Поступила в редакцию 13 октября 2018 г .; Пересмотрено 27 октября 2018 г .; Принято 7 ноября 2018 г.

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License (http://creativecommons.org/licenses/by/3.0/), которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение в любых средний при условии правильного цитирования оригинала.

Abstract

Цель:

В связи с высокой распространенностью бесплодия и растущей тенденцией к комплементарной медицине, это исследование было проведено для изучения влияния вагинального натурального продукта на основе меда и 1% экстракта Myristica Fragrans на степень успех внутриматочной инсеминации (ВМИ).

Материалы и методы:

Это нерандомизированное клиническое исследование с исторической контрольной группой проводилось на бесплодных женщинах. В этом исследовании 159 пациентов были отнесены к группе вмешательства, а 288 пациентов — к группе контроля. Все участники получали кломифен или летрозол с третьего по седьмой день менструации, а на 6, 7 и 8 дни им делали инъекции менопаузального гонадотропина (ГМГ). ВМИ проводили через 36 часов после инъекции хорионического гонадотропина человека (ХГЧ).В группе вмешательства, помимо вышеуказанного лечения, использовался натуральный вагинальный продукт с 7 дня менструации до дня перед проведением ВМИ. Через шестнадцать дней после ВМИ был измерен бета-ХГЧ в сыворотке для исследования химической беременности, а через шесть недель после ВМИ была проведена вагинальная сонография для исследования клинической беременности.

Результаты:

Анализ показал, что частота наступления беременности была выше в группе, получавшей натуральный продукт, по сравнению с контрольной группой.Частота химической беременности составила 18,1% против 15,4%, а частота клинической беременности составила 15,2% против 13,8% для групп вмешательства и контроля, соответственно; но эта разница не была значительной.

Заключение:

Похоже, что использование этого вагинального продукта в течение более длительного периода времени и в течение нескольких менструальных циклов перед ВМИ может дать более положительные результаты. Однако необходимы дальнейшие исследования.

Ключевые слова: Бесплодие, Мед, Myristica Fragrans, Mace, Внутриматочная инсеминация (ВМИ)

Введение

Внутриматочная инсеминация (ВМИ) — один из старейших методов лечения бесплодия.Хотя использование медицинских услуг для лечения бесплодия увеличилось, в последние годы распространенность бесплодия не снизилась (Abdelkader and Yeh, 2009 ▶). Около 10-15% пар во всем мире страдают бесплодием. В Иране эта распространенность выше, чем в среднем по миру, поскольку, согласно сообщениям, она составляет 17,3-20,2% (Akhondi et al., 2013 ▶; Kazemijaliseh et al., 2015 ▶). Показатель успешности ВМИ с гомологичной спермой варьируется (10-20% на каждый цикл) в разных исследованиях (Abdelkader and Yeh, 2009; Monraisin, et al., 2016 ▶; Аллахбадия, 2017 ▶; Irani et al., 2018 ▶). ВМИ используется для лечения бесплодия с различными причинами, включая цервикальные причины, ановуляцию, эндометриоз, иммунологические причины, мужское бесплодие и неизвестные факторы (Allahbadia, 2017; Cabry et al., 2017). Действительно, ВМИ считается промежуточным, более простым и дешевым подходом по сравнению с другими методами, используемыми для лечения бесплодия, такими как оплодотворение in vitro (ЭКО) или внутрицитоплазматическая инъекция сперматозоидов (ИКСИ) (Велтман и др., 2016 ▶). Поэтому необходимо провести больше исследований, чтобы повысить эффективность ВМИ.

Исследования традиционных методов лечения, которые были прописаны тысячу лет назад известными врачами, такими как Ибн Сина, кажутся важными, учитывая склонность пациентов к альтернативной медицине. Мед и булава входят в число соединений, которые поддерживаются персидской медициной при лечении бесплодия и доказали свою эффективность в исследованиях как на людях, так и на животных (Abdelhafiz and Muhamad, 2008 ▶; Zaid et al., 2010 ▶; Zaid et al., 2014 ▶, Lavaf et al., 2017 ▶).

Мед — это пересыщенный сахаром кислый раствор с высоким осмотическим давлением, который не подходит для роста бактерий и грибков. Действительно, эта естественная кислотность предотвращает рост многих патогенных агентов. Мед содержит различные типы белков, витаминов, минералов, флавоноидов и алкалоидов (Grembecka and Szefer, 2013 ▶; Ranjbaret al., 2015 ▶). В клинических испытаниях назначение вагинального соединения, содержащего мед и маточное молочко, наряду с физиологическим раствором, было очень эффективным при лечении бесплодия, вызванного астенозооспермией (Abdelhafiz and Muhamad, 2008 ▶).Кроме того, добавление меда (10%) к криопротекторному раствору привело к повышению качества спермы после замораживания (Fakhrildin and Alsaadi, 2014 ▶; El-Sheshtawy et al., 2016 ▶). В другом клиническом исследовании, посвященном влиянию вагинального меда на вагинит Candida , был сделан вывод, что вагинальное употребление меда, обладая антибактериальным и противогрибковым действием, может поддерживать и укреплять нормальную микрофлору влагалища за счет увеличения количества лактобацилл (Seifi et al., 2016 ▶). Недавние исследования микробиома влагалища сообщили о влиянии видов бактерий на бесплодие посредством секвенирования следующего поколения (NGS) (Campisciano et al., 2017 ▶). Кроме того, патологические изменения микробиоты матки могут отрицательно сказаться на процессе имплантации и повлиять на результаты ЭКО (Moreno et al., 2016 ▶). Следовательно, мед может положительно влиять на фертильность, влияя на микробиоту влагалища и, в свою очередь, на микробиоту матки. В исследовании, проведенном Zaid et al., Мед оказался эффективным в улучшении циклов эстрогена у мышей с токсичностью искусственных яичников (Zaid et al., 2014 ▶). Кроме того, назначение меда в течение двух недель привело к увеличению толщины эпителия влагалища и увеличению веса матки у самок мышей после овариэктомии (Zaid et al., 2010 ▶).

Внешняя кора мускатного ореха (Myristica Fragrans) называется булавой (USDA, 2007 ▶), она содержит различные типы фитоэстрогенов, флавоноидов и минералов (Zhang et al., 2012 ▶; Chiu et al., 2016 ▶). Он оказывает афродизиак, а также обладает антибактериальным, противогрибковым, гепатопротекторным, противовоспалительным и иммуномодулирующим действием (Tajuddin et al., 2003 ▶; Tajuddin et al., 2005 ▶; Checker et al., 2008 ▶; Zhang et al., 2012 ▶).

Исследования показали, что уровни кальция и магния в крови снижаются во время стимуляции овуляции и повышения уровня эстрогена у бесплодных женщин (Grossi et al., 2017 ▶). Кроме того, в различных исследованиях добавление фитоэстрогена наряду с индукцией овуляции с помощью кломифена могло улучшить процесс овуляции и частоту наступления беременности (Shahin et al., 2008; Shahin and Mohammed, 2014). В исследовании, проведенном Таджуддином и др., M. Fragrans вызвали значительное увеличение сексуальной активности у самцов мышей (Таджуддин и др., 2003; Таджуддин и др., 2005). Похоже, что это вагинальное соединение может повысить вероятность зачатия за счет увеличения количества половых контактов, в дополнение к своим фитоэстрогенным свойствам, которые могут быть эффективными для индукции овуляции.

В персидской медицине многие препараты от бесплодия используются вагинально, и недавние исследования доказали влияние вагинального меда на слизистую влагалища, микробиоту влагалища, микробиоту матки, облегчение подвижности и продвижение сперматозоидов во влагалище (Abdelhafiz and Muhamad, 2008 ▶) . Начиная с M. Fragrans содержит множество фитоэстрогенов, которые могут быть эффективны в процессе оплодотворения. Поскольку комбинация меда и M. Fragrans используется в персидской медицине в качестве вспомогательного средства для лечения бесплодия (Азамхан, 2008 ▶), это исследование было проведено для изучения эффекта вагинального натурального продукта, изготовленного из меда и 1% экстракта . М.Fragrans (Mace) по успешности IUI.

Материалы и методы

Дизайн исследования

Это клиническое исследование с исторической контрольной группой проводилось с 2016 по 2018 год на бесплодных женщинах-кандидатах на ВМИ, в центре бесплодия Милад при Университете медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран. В группе вмешательства выборка была последовательно проведена у пациентов, которые обратились в центр бесплодия Милад с 2017/9/23 по 2018/7/1 для проведения ВМИ и соответствовали критериям включения.В контрольной группе, независимо от исхода беременности, образцы были последовательно собраны из архива этого центра от пациенток, направленных с 2016/9/22 по 2017/9/22 и соответствующих критериям включения. Затем информация о пациентах была записана. Пациенты были подобраны по возрасту и продолжительности бесплодия между экспериментальной и контрольной группами. Это исследование было одобрено этическим комитетом Университета медицинских наук Мешхеда (IR.MUMS.REC.1395.487) и зарегистрировано в центре регистрации клинических исследований Ирана (IRCT2016111130827N1).В группе вмешательства сначала пациентам разъясняли результаты исследования, а затем пациентов просили подписать форму согласия (если они желают участвовать в исследовании).

Участники

Пациенты были сначала обследованы и оценены гинекологом и направлены к исследователю в Центр бесплодия Милад. Критерии включения включали готовность участвовать, возраст <40 лет, продолжительность бесплодия <15 лет, бесплодие из-за ановуляции, бесплодие из-за мужского фактора и необъяснимое бесплодие, количество сперматозоидов в соответствии с общей функцией подвижности сперматозоидов (TMFS) более 5 миллионов. на мл после подготовки спермы, нормальность гормональных тестов, нормальность матки при гистеросальпингографии и наличие хотя бы одной открытой маточной трубы.

Критерии исключения включали индекс массы тела> 35, неподходящий размер фолликула для введения ХГЧ на 12-14 день и эндометриоз.

Процедура IUI

Протокол ВМИ, который выполняли для обеих групп, был следующим: с 3 по 7 день менструации они получали кломифен (100 мг / день) или (летрозол 5 мг / день) в течение пяти дней, а на 6, 7 дни — и 8, они получили HMG. Доза HMG была скорректирована на основании мониторинга яичников. На 9 ^{-й день} была проведена вагинальная сонография (если диаметр фолликула был менее 12 мм, то они получали ГМГ во второй раз), а в случае фолликула ≥ 18 мм на 12-14 день цикла — 5000 были введены единицы ХГЧ.Затем, через 36 часов, была проведена ВМИ с образцом спермы жены пациента, который был промыт и подготовлен в тот же день. Для поддержки лютеиновой фазы после ВМИ прописывали прогестерон (8% вагинальный гель, один предварительно заполненный аппликатор один раз в день).

Вмешательство

В группе вмешательства, с 7 ^-го дня менструации до дня перед проведением ВМИ, натуральный продукт из меда и 1% экстракта M. Fragrans (Mace) применялся вагинально с помощью аппликатора один раз в день. ночью самой пациенткой.Пациентам также был предоставлен список возможных побочных эффектов продукта. Контрольная группа не получала вагинальный натуральный продукт.

Рандомизация и ослепление

Т.к. контрольная группа выбрана из архива центра бесплодия; Это испытание не было ни рандомизированным, ни слепым.

Препарат

Сбор и извлечение растений

Булава — красная мясистая чаша вокруг мускатного ореха.Растение было проверено ботаником из отдела ботанического исследовательского центра по наукам о растениях в Университете Фирдоуси в Мешхеде, Иран, и Мейс было приготовлено из центра Sobhan Herb в Мешхеде, Иран. Мед высокого качества был приготовлен из Мешхеда, Хорасан Разави, Иран. После приготовления булавы ее измельчали ​​и водный экстракт экстрагировали путем мацерации в воде. Полученный жидкий экстракт измельчали ​​в сублимационной сушилке. Затем измельченный экстракт выдерживали при 2-4 ° C. Все этапы экстракции были выполнены Исследовательским центром пищевых наук и промышленности Мешхеда.

Количество экстракта растений составляло 2% от веса растения.

Приготовление вагинального продукта на травах

Мейс и мед были смешаны вместе до 1% (т.е. каждые 100 г меда были смешаны с 1 г Мейса), и 80-граммовые тюбики были заполнены смесью. Эти этапы были выполнены фармацевтом факультета персидской медицины Университета медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран. Каждая пробирка содержала 79,2 г меда и 0,8 г экстракта булавы. После заполнения трубочки передавались пациентам вместе с аппликатором для вагинального применения.Дозу этого соединения определяли как один аппликатор на ночь, начиная с 7 ^-го дня менструации и заканчивая днем ​​перед проведением ВМИ. Каждый аппликатор, содержащий 8 г этого продукта, содержал не менее 0,08 г булавы и 7,92 г меда.

Стандартизирующий водный экстракт булавы

Водный экстракт Mace был стандартизирован на основе общего фенола с использованием метода Folin-Ciocalteu (Hosseini et al., 2017). Всего 20 мкл экстракта (10 мг / мл) и галловая кислота (0, 50, 100, 150, 250 и 500 мг / л), используемые в качестве стандарта, были смешаны со 100 мкл реагента Folin-Ciacalteu. и 300 мкл 1 М раствора карбоната натрия.Конечный объем был достигнут 2 мл с использованием деионизированной воды, и через 2 часа оптическое поглощение образцов было измерено спектрофотометром при 765 нм. Затем была построена стандартная кривая для галловой кислоты, и уровень фенольных соединений в экстракте был выражен в миллиграммах галловой кислоты. Общее содержание фенола в экстракте Mace было равно 70,4 мг галловой кислоты на грамм чистого экстракта Mace, а общее содержание фенола в натуральном продукте было равно 0,704 мг галловой кислоты на грамм, исходя из содержания экстракта Maces в продукте.

Микробиологические тесты

Микробиологические тесты были выполнены для продукта, содержащего мед и булаву, в микробиологической лаборатории больницы Гем в Мешхеде на основе стандартного метода фармакопеи США USP32-NF27 (Pharmacopeia, 2004 ▶). Продукт был отрицательным для Escherichia coli , Candida albicans , Staphylococcus aureus , аэробных мезофильных бактерий, плесени, клебсиелл и дрожжей.

Измерения и результаты

Полная история болезни пациентов регистрировалась по прибытии, и исследователь проводил физический осмотр.Были записаны демографические и основные характеристики пациентов, включая возраст пациента, возраст супруга, ИМТ, продолжительность бесплодия, время проведения ВМИ и тип бесплодия с точки зрения первичного или вторичного бесплодия. Диагностические тесты для измерения уровней ФСГ и ЛГ были выполнены всем пациентам на третий день менструального цикла. Кроме того, гинекологом была проведена вагинальная сонография на третий и 9 ^-й -й дни менструального цикла, где было записано количество фолликулов и размер самого большого фолликула.Кроме того, анализ спермы также проводился для супруга пациентов, которые считались нормальными, если у них были следующие характеристики, в соответствии с руководящими принципами Всемирной организации здравоохранения. Объем сперматозоидов ≥1,5 мл, количество сперматозоидов ≥15 миллионов / мл, подвижность сперматозоидов (процент прогрессивной подвижности) ≥32%, морфология сперматозоидов в соответствии со строгими критериями (Tygerberg) ≥4%.

После записи анамнеза и проведения физического обследования, биохимических тестов и сонографии была указана и записана причина бесплодия (женский или мужской фактор, или и то, и другое, или необъяснимое бесплодие).

Первичный результат включал частоту химической и клинической беременности. Через шестнадцать дней после проведения ВМИ определяли уровень βHCG (хорионический гонадотропин человека) в сыворотке с помощью метода ELISA (иммуноферментного анализа). Химическая беременность была подтверждена, если уровень βHCG был ≥25 МЕ / л. Далее, через шесть недель после ВМИ гинекологом в центре лечения бесплодия была проведена вагинальная сонография, где при наличии мешка беременности была подтверждена клиническая беременность. Вторичным результатом были побочные эффекты продукта.

Анкета темперамента была заполнена для всех пациентов в группе вмешательства. Анкета для определения темперамента (Опросник моджахеди Мизадж, MMQ) является стандартной анкетой, утвержденной в Иране в 2014 году, и ее надежность и валидность были подтверждены. Альфа-коэффициент Кронбаха в этой анкете составляет 0,71. Эта анкета содержит 10 пунктов с оценкой от 1 до 3. После суммирования баллов оценка ≤14 считается холодным темпераментом, 15-18 — умеренным темпераментом, а ≥19 — теплым темпераментом (Mojahedi et al., 2014 ▶).

Размер выборки

Поскольку показатель успеха ВМИ в Центре бесплодия Милад составлял около 10%, и учитывая, что вышеупомянутое вмешательство может повысить показатель успеха на 10%, что приведет к успеху на 20% (α = 0,05 и β = 0,2 ), размер выборки в группе вмешательства и контрольной группе был определен как 144 и 288 соответственно. С учетом 10% потерь в группу вмешательства вошли 159 человек. Из-за ограничений доступа к лекарству (натуральному вагинальному продукту) из-за его высокой стоимости и количества пациентов, а также для стабилизации эффективности исследования контрольная группа считалась вдвое большей группой вмешательства.

Статистический анализ

Записанные данные были проанализированы с помощью программного обеспечения SPSS (версия 16). Для представления данных использовались методы описательной статистики, включая центральные индексы, распределение и частотное распределение. Независимый t-критерий использовался для сравнения количественных переменных между двумя группами, если распределение данных было нормальным; в противном случае использовали тест Манна-Уитни. Для сравнения качественных переменных между двумя группами использовались критерий хи-квадрат и, при необходимости, точный критерий Фишера.Модель логистической регрессии использовалась для корректировки смешивающих переменных. Во всех расчетах статистически значимым считалось p <0,05 .

Результаты

В этом испытании в группу вмешательства были включены 159 субъектов. Пятьдесят четыре субъекта из 159 были исключены по разным причинам (23 субъекта из-за неподходящего фолликула, 7 из-за неподходящих сперматозоидов и 14 из-за нежелания продолжать этапы ВМИ, 9 субъектов из-за неиспользования продукта и 1 субъект из-за возникновения вагинального зуда и жжения).Наконец, 105 человек были проанализированы как группа вмешательства. В контрольной группе собрана и исследована информация о 288 пациентах. Из контрольной группы 28 пациентов были исключены из-за неполной информации, а 260 человек были проанализированы как контрольная группа ().

Блок-схема исследования

Средний возраст пациентов в экспериментальной и контрольной группах составлял 28,3 ± 4 и 28,6 ± 5 лет, соответственно, и не было существенной разницы между двумя группами (p = 0.619).

Средняя продолжительность бесплодия в экспериментальной и контрольной группах составляла 5,36 ± 3 и 4,7 ± 3 года, соответственно, и не было значительной разницы между двумя группами ().

Таблица 1

Основные характеристики пациентов

± 4,8 27,3 9027 18 (15-26)

	Вмешательство	Контроль	Значение P
Возраст пациента (лет) a	0.619
Возраст мужа (лет) a	32,20 ± 5,3	32,28 ± 5	0,875
ИМТ (кг / м2) a	25 ± 3,5	0,139
Продолжительность бесплодия (лет) a	5,36	4,7 ± 3	0,052
Время IUI b Первое		Третий Четвертый	45 (42.9%) 36 (34,3%) 15 (14,3%) 9 (8,5%)	114 (43,8%) 92 (35,4%) 46 (17,7%) 8 (3,1%)	0,627
Вид бесплодия c
Первичное Среднее	77 (73,3%) 28 (26,7%)	200 (77,2%) 603 0,431
причина бесплодия c
Женский фактор Мужской фактор Оба (женский и мужской) Неизвестно	29 (27.6%) 29 (27,6%) 11 (10,5%) 36 (34,3%)	59 (22,8%) 71 (27,4%) 19 (7,3%) 110 (42,5%)	0,413
FSH (миль / м) d	6,2 (2-19)	6,37 (0,01-28,2)	0,417
LH (miu / m) d	4,8 (0,1- 26)	4,9 (1,1-26,8)	0,562
Анализ спермы c , e
Объем Count Motility 903.2%) 105 (100%) 88 (83,8%) 101 (96,2%)	247 (95,4%) 258 (99,6%) 208 (80%) 233 (89,6%)	0,958 0,524 0,400 0,060
Количество фолликулов d	4 (1-14)	5 (1-15)	<0,01
Максимальный размер фолликула (мм) d	18 (15-25)	0,507
Толщина эндометрия (мм) a	6.9 ± 1,5	7,2 ± 1,6	0,222
Лекарственные средства c
летрозол кломифен	60 (4527102) 90,27% %) 158 (60,8%)	0,003

Не было доказательств статистически значимых различий между двумя группами (вмешательство и контроль) с точки зрения химической беременности (OR = 1,048, CI = 0,538-2,04, P = 0.890) и клинической беременности (OR = 1,120, CI = 0,561–2,23, P = 0,748) после корректировки мешающих переменных, таких как количество фолликулов и типы препаратов, используемых для стимуляции овуляции (летрозол или кломифон). Другие демографические и базовые переменные представлены в.

Частота химической беременности (CHPR) в экспериментальной и контрольной группах составила 18,1% и 15,4%, соответственно, без существенной разницы между ними; однако уровень химической беременности был выше в группе вмешательства (p = 0.524). Частота клинической беременности (СЛР) составила 15,2% в группе вмешательства и 13,8% в группе контроля, которые статистически не различались; однако СЛР была выше (p = 0,731) в группе вмешательства ().

Результаты в группах вмешательства и контроля (A: частота химической беременности; B: частота клинической беременности).

CHPR: Показатель химической беременности; и СЛР: клиническая частота наступления беременности.

Хотя частота различных причин бесплодия была одинаковой в экспериментальной и контрольной группах, в экспериментальной группе большинство субъектов, забеременевших (как химически, так и клинически), имели бесплодие с женским фактором.С другой стороны, в контрольной группе большинство беременностей (химических и клинических) произошло по необъяснимым причинам (). В группе вмешательства сравнивали общий темперамент пациенток в группах с положительной и отрицательной химической беременностью; большинство испытуемых с положительной химической беременностью продемонстрировали теплый характер, но не было существенной разницы между положительными и отрицательными группами химической беременности p = 0,306).

Таблица 2

Сравнение успешности химической и клинической беременности из-за различных причин бесплодия в группе вмешательства

N (%)

		Причина бесплодия
Женский фактор			Мужской фактор	Оба (женский и мужской)	Неизвестно	P *
CHPR	Положительный N (%)	7 (36.8)	3 (15,8)	3 (14,8)	6 (31,6)	0,464
	Отрицательный N (%)	22 (25,6)	26 (30,2)	8 (9,3)	30 (34,9)
СЛР	Положительный N (%)	7 (43,8)	3 (18,8)	3 (18,8)	3 (18,8)	0,505
	22 (24,7)	26 (29,2)	8 (9)	33 (37.1)

Далее, в группе вмешательства сравнивались группы положительной и отрицательной клинической беременности по общему темпераменту; у пациенток с положительной клинической беременностью был вспыльчивый характер, но не было существенной разницы между группами положительной и отрицательной клинической беременности по общему темпераменту (p = 0,144) ().

Таблица 3

Сравнение общего темперамента (mizajaam) между двумя группами частота положительных и отрицательных беременностей в группе вмешательства

9057

Группа		Теплый	Холодный	Умеренный	P *
CHPR	Положительный N (%)	8 (42.1)	5 (26,3)	6 (31,6)	0,306
	Отрицательный N (%)	20 (24,1)	23 (27,7)	40 (48,2)
Положительный N (%)	7 (43,8)	3 (18,8)	6 (37,5)	0,144
Отрицательный N (%)	21 (24,4)	25 (29,1)	40 (46,5)

В группе вмешательства общий темперамент сравнивался между группами положительной и отрицательной химической беременности, где большинство субъектов с положительной химической беременностью демонстрировали теплый темперамент, но не было существенной разницы между положительной и отрицательной химической беременностью. группы беременностей (p = 0.306). Кроме того, в группе вмешательства сравнивались группы положительной и отрицательной клинической беременности по общему темпераменту, где группы с положительной клинической беременностью были вспыльчивыми, но не было существенной разницы между группами положительной и отрицательной клинической беременности по общему темпераменту ( р = 0,144) ().

Наблюдались очень ограниченные побочные эффекты; о зуде и жжении сообщил пациент, который в анамнезе употреблял большое количество острых приправ, который был исключен из группы вмешательства.

Обсуждение

Настоящее исследование является первым исследованием, в котором оценивалась эффективность натурального вагинального продукта, содержащего булаву и мед, у пациенток-кандидатов на ВМИ. Эффект Mace, как фитоэстрогенного соединения наряду с медом, вагинально сочетающимся с индукцией овуляции, ранее не оценивался у бесплодных пациентов.

Результаты показали, что частота химической и клинической беременности в группе, получавшей вагинальный продукт, была выше по сравнению с контрольной группой (18.1 против 15,4% для химической беременности и 15,2 против 13,8% для клинической беременности, соответственно), но это различие не было статистически значимым. Это увеличение частоты успеха ВМИ произошло после семи дней использования этого вагинального продукта. Возможно, использование этого вагинального продукта в нескольких последовательных циклах может дать положительный результат. Поскольку в исследовании, проведенном Abdelhafiz et al. при использовании вагинальных продуктов, содержащих мед, маточное молочко и пчелиный хлеб, в течение 2 недель и трех последовательных циклов частота наступления беременности значительно увеличилась по сравнению с контрольной группой (Abdelhafiz and Muhamad, 2008 ▶).Поскольку исследование, проведенное Abdelhafiz et al. было единственным клиническим испытанием, аналогичным нашему, кажется, что короткая продолжительность лечения (одна неделя против двух недель) и непрекращающееся лечение (один цикл против трех) были среди причин, из-за которых показатель успеха препарата снизился в этом исследовании.

В нашем исследовании в контрольной группе количество пациентов, получавших кломифен, было больше, чем летрозол, что значительно отличалось от группы вмешательства. В различных исследованиях изучалось влияние этих двух препаратов на фертильность (Roque et al., 2015, Ганн и Бейтс, 2016). Похоже, что влияние кломифена и летрозола на клинические исходы и коэффициент фертильности у женщин с необъяснимым бесплодием и синдромом поликистозных яичников ( СПКЯ ) одинаково (Ghahiri et al., 2016 ▶, Eskew et al., 2019 ▶). В нашем исследовании вероятность химической беременности и клинической беременности в экспериментальной и контрольной группах после корректировки мешающих переменных (например, количества фолликулов и типов препаратов), используемых для стимуляции овуляции (летрозол или кломифон)) не имела каких-либо существенных различий.

Различные исследования показали, что цервикальная инфекция, вызванная грамотрицательными бактериями, может отрицательно влиять на вспомогательные репродуктивные технологии (Salim et al., 2002; Moreno and Franasiak, 2017). Более того, удаление цервикальной слизи перед IUI, как было показано, увеличивает коэффициент фертильности вдвое с возможным механизмом удаления микробов, загрязняющих кончик катетера, что вызывает нарушение имплантации. Однако наличие цервикальной слизи не позволяет сперматозоидам вернуться во влагалище после оплодотворения.Таким образом, увеличивается уровень сперматозоидов в маточной трубе. Таким образом, при вагинальном применении меда можно добиться положительного воздействия на фертильность без физического удаления вагинальной слизи за счет улучшения микробиоты. Хотя различные исследования показали, что мед улучшает микробиоту матки (Brudzynski and Sjaarda, 2015; Seifi et al., 2016), длительное потребление этого продукта может повысить эффективность лечения бесплодия, поскольку в исследовании, проведенном Абдельхафизом , и другие., использование вагинального продукта, содержащего мед, в течение 2 недель дало положительные результаты (Abdelhafiz and Muhamad, 2008 ▶).

В интервенционной группе 43,7% забеременевших имели женское бесплодие, а в контрольной группе этот показатель составил 24,7%. Хотя эта разница не была статистически значимой, кажется, что вагинальный продукт может иметь большее влияние на женские причины. Другими словами, вагинальное применение этого продукта, влияя на нормальную флору влагалища или его микробиоту, может привести к успешному ВМИ у лиц с женским бесплодием.С другой стороны, результаты исследования, проведенного Абдельхафизом и др., Показали, что вагинальный продукт, содержащий мед, маточное молочко и цветочную пыльцу, был эффективен у бесплодных пациентов с мужскими причинами за счет увеличения подвижности сперматозоидов во влагалище без какой-либо ВМИ (Абдельхафиз и Мухамад , 2008 ▶).

Учитывая общий темперамент, большинство беременных в группе вмешательства имели теплый темперамент, в то время как у лиц с холодным темпераментом было минимальное количество беременностей (42 против 26% для? И? Соответственно).Этот результат чем-то похож на результаты, полученные Sohrabvand et al; они сообщили, что наиболее распространенным темпераментом в их исследовании, которое проводилось на бесплодных женщинах, обращающихся в клинику по лечению бесплодия, был холод (Sohrabvand et al., 2014). Поскольку темперамент нашего травяного продукта теплый, кажется, что непродолжительность употребления наркотиков является одной из причин снижения эффективности ВМИ у людей с холодным темпераментом по сравнению с людьми с теплым темпераментом. Возможно, если вагинальный продукт использовался в течение более длительного времени в течение нескольких последовательных циклов до того, как IUI и образ жизни и порядок еды также были скорректированы с учетом темперамента, этот продукт мог бы иметь большее влияние на успех IUI, разогревая темперамент.

Сильными сторонами этого исследования было изучение влияния продукта на бесплодие в случаях с женскими, мужскими и необъяснимыми факторами. С другой стороны, Abdelafiz и др. Изучали людей с бесплодием только по мужскому фактору, и эффект препарата не оценивался в случаях других причин бесплодия. Слабым местом этого исследования было ограничение количества пациентов, которые вызывали, чтобы стабилизировать мощность исследования. Таким образом, в настоящем исследовании историческая контрольная группа рассматривала дважды группу вмешательства.Таким образом, в текущем исследовании рандомизация и ослепление были невозможны. Другим слабым местом этого исследования была короткая продолжительность применения лекарств. Кроме того, другим ограничением исследования было отсутствие средств для скрининга микробиоты матки до и после вмешательства.

Принимая во внимание увеличение частоты успеха ВМИ в группе вмешательства, хотя и незначительное, следует провести дальнейшие исследования с более продолжительным лечением, по крайней мере, в течение двух недель в каждом цикле фертильности и в течение не менее трех циклов.Кроме того, пероральное употребление этого соединения в то же время, что и вагинальное применение, может улучшить реакцию на лечение, учитывая пероральный эффект фитоэстрогенов на индукцию овуляции.

Выражение признательности

Это исследование является частью результатов докторской диссертации по персидской медицине (IR.MUMS.REC.1395.487), выполненной в Университете медицинских наук Мешхеда. Поэтому мы благодарим вице-президента Университета по исследованиям, а также выдающихся профессоров, которые помогли нам в этом исследовании.

Конфликт интересов

В этом исследовании нет конфликта интересов.

Ссылки

• Abdelhafiz AT, Muhamad JA. Перикоитальный перикоитальный интравагинальный пчелиный мед и маточное молочко для лечения мужского бесплодия. Int J Gynaecol Obstet. 2008. 101: 146–149. [PubMed] [Google Scholar]
• Абделькадер А.М., Йе Дж. Потенциальное использование внутриматочной инсеминации в качестве основного метода лечения бесплодия: обзор медицинских учреждений с ограниченными технологиями. Obstet Gynecol Int.2009; 2009: 584837. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Ахонди М.М., Камали К., Ранджбар Ф., Ширзад М., Шафегхати С., Бехджати Ардакани З., Гуджани А., Парсеян М. Распространенность первичного бесплодия в Иране в 2010 г. Иран Дж. Здравоохранение. 2013; 42: 1398–1404. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Аллахбадия, Г. Н. Внутриматочное осеменение: пересмотр основ. J Obstet Gynaecol India. 2017; 67: 385–392. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Азамхан, М.Exir Azam. Тегеран: Институт истории медицины; 2008. С. 704–753. [Google Scholar]
• Brudzynski K, Sjaarda C. Гликопротеины меда, содержащие антимикробные пептиды, Jelleins из основного протеина маточного молочка 1, отвечают за литическую и бактерицидную активность клеточной стенки меда. PLoS One. 2015; 10: e0120238. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Cabry-Goubet R, Scheffler F, Belhadri-Mansouri N, Belloc S, Lourdel E, Devaux A, Chahine H, De Mouzon J, Copin H.Влияние типов гонадотропинов и показаний на успех гомологичной внутриматочной инсеминации: исследование из 1251 цикла и обзор литературы. Biomed Res Int. 2017; 2017: 3512784. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Campisciano G, Florian F, D’Eustacchio A, Stankovic D, Ricci G, De Seta F. Субклинические изменения шейно-вагинального микробиома у женщин с идиопатическим бесплодием. J. Cell Physiol. 2017; 232: 1681–1688. [PubMed] [Google Scholar]
• Чекер Р., Чаттерджи С., Шарма Д., Гупта С., Варияр П., Шарма А.Иммуномодулирующее и радиозащитное действие лигнанов, полученных из свежего мускатного ореха (Myristica Fragrans), на спленоциты млекопитающих. Int Imp. 2008; 8: 661–669. [PubMed] [Google Scholar]
• Чиу С., Ван Т., Бельски М., Абурашед Э.А. Выделение, очистка и характеристика фенилпропаноидов и фенольных компонентов ядра мускатного ореха (Myristica Fragrans) под контролем ВЭЖХ Nat Prod Commun. 2016; 11: 483–488. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Эль-Шештави Р.И., Эль-Бадри Д.А., Гамаль А., Эль-Наттат В.С., Алмаати AMA.Натуральный мед как криопротектор для улучшения параметров спермы арабских жеребцов после размораживания. Азиатский Pac J Reprod. 2016; 5: 331–334. [Google Scholar]
• Эскью А.М., Бедрик Б.С., Харди А., Столл CRT, Колдиц Г.А., Туули М.Г. Летрозол в сравнении с цитратом кломифена при необъяснимом бесплодии: систематический обзор и метаанализ. Obstet Gynecol. 2019; 3: 437–444. [PubMed] [Google Scholar]
• Фахрилдин М.Б., Алсаади РА. Добавление меда в среду для замораживания спермы улучшает параметры спермы человека после размораживания.J Family Reprod Health. 2014; 8: 27–31. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Ghahiri A, Mogharehabed N, Mamourian M. Летрозол как средство первой линии лечения бесплодных женщин с синдромом поликистозных яичников (СПКЯ) по сравнению с цитратом кломифена: клиническое испытание. Adv Biomed Res. 2016; 5: 6. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Grembecka M, Szefer P. Оценка качества меда и продуктов пчеловодства на основе их минерального состава с использованием многомерных методов.Оценка состояния окружающей среды. 2013; 185: 4033–4047. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Grossi E, Castiglioni S, Moscheni C, Antonazzo P, Cetin I, Savasi VM. Уровни магния и кальция в сыворотке крови у бесплодных женщин во время цикла репродуктивной помощи. Magnes Res. 2017; 30: 35–41. [PubMed] [Google Scholar]
• Хоссейни А., Моллазаде Х., Амири М.С., Садегния Х.Р., Горбани, 2017. Biomed Pharmacother. Влияние стандартизированного экстракта корня Rheum turkestanicum Janischew на диабетические изменения в почках, печени и сердце у крыс с диабетом, вызванным стрептозотоцином; 86: 605-611.[PubMed] [Google Scholar]
• Ирани М., Чоу С., Китинг Д., Старейшина С., Розенвакс З., Палермо Г. Оптимизация лечения бесплодия первой линии. Гинекол Эндокринол. 2018; 20: 1–5. [PubMed] [Google Scholar]
• Каземиджалисех Х., Рамезани Теграни Ф., Бехбуди-Гандевани С., Хоссейнпанах Ф., Халили Д., Азизи Ф. Распространенность и причины первичного бесплодия в Иране: популяционное исследование. Glob J Health Sci. 2015; 7: 226–232. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Lavaf M, Simbar M, Mojab F, Alavi Majd H, Samimi M.Сравнение эффектов меда и крема фенитоина (PHT) на интенсивность боли и заживление ран после эпизиотомии у нерожавших женщин. J Complement Integr Med. 2017; 15: 28981445. [PubMed] [Google Scholar]
• Моджахеди М., Насери М., Майдзаде Р., Кешаварз М., Эбадини М., Назем Э. Оценка надежности и достоверности опросника мизадж: новая шкала самооценки в традиционной иранской медицине. Иранский Красный Полумесяц, Med J. 2014; 16: e15924. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Monraisin O, Chansel-Debordeaux L, Chiron A, Floret S, Cens S, Bourrinet S.Оценка практики внутриматочного оплодотворения: годичное проспективное исследование в семи французских центрах технологий вспомогательной репродукции. Fertil Steril. 2016; 105: 1589–1593. [PubMed] [Google Scholar]
• Moreno I, Codoner FM, Vilella F, Valbuena D, Martinez-Blanch JF, Jimenez-Almazan J. Доказательства того, что микробиота эндометрия влияет на успех или неудачу имплантации. Am J Obstet Gynecol. 2016; 215: 684–703. [PubMed] [Google Scholar]
• Морено И., Франасиак Дж. М.. Микробиота эндометрия — новый игрок в городе.Fertil Steril. 2017; 108: 32–39. [PubMed] [Google Scholar]
• Pharmacopeia U. Тест на бактериальный эндотоксин. USP32 / NF27: Фармакопея США и Национальный формуляр. 2004; 2004: 93–96. [Google Scholar]
• Ранджбар А.М., Садехпур О., Ханави М., Шамс Ардекани М.Р., Молудиан Х., Хаджимахмуди М. Влияние процесса удаления шлака на некоторые физико-химические параметры меда. Iran J Pharm Res. 2015; 14: 657–662. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Салим Р., Бен-Шломо И., Колоднер Р., Кенесс И., Шалев Э.Бактериальная колонизация шейки матки и успешность вспомогательной репродукции: результаты проспективного обследования. Hum Reprod. 2002; 17: 337–340. [PubMed] [Google Scholar]
• Сейфи Надер Голи З., Нахиди Ф., Сафеян А.Р., Джавадзаде Й., Этераф Оскуи Т. Влияние вагинального геля с медом и вагинального крема с клотримазолом на нормальную муку во влагалище у женщин с кандидозным вагинитом. ИДЖОГИ. 2016; 19: 32–39. [Google Scholar]
• Шахин А.Ю., Исмаил А.М., Захран К.М., Махлуф А.М. Добавление фитоэстрогенов к индукции кломифена у пациентов с необъяснимым бесплодием — рандомизированное исследование.Репродукция Биомед онлайн. 2008; 16: 580–588. [PubMed] [Google Scholar]
• Шахин А.Ю., Мохаммед С.А. Добавление фитоэстрогена Cimicifugae Racemosae к циклам индукции кломифена с синхронизированным половым актом при синдроме поликистозных яичников улучшает результаты цикла и частоту наступления беременности — рандомизированное исследование. Гинекол Эндокринол. 2014; 30: 505–510. [PubMed] [Google Scholar]
• Сохрабванд Ф., Назем Э., Танзаз М., Кешаварз М., Хашем Дабагян Ф., Никбахт Насрабади А., Гошехгир А., Биос С., Мокаберинеджад Р.Исследование личного и маточного юмора у бесплодных женщин, обращенных в больницу Вали-Э-Ас в Тегеране, Иран, в 2012 году. IJOGI. 2014; 17: 10–19. [Google Scholar]
• Таджуддин, Ахмад С., Латиф А., Касми И.А. Афродизиак 50% спиртовых экстрактов Myristica Fragrans Houtt (мускатный орех) и Syzygium aromaticum (L) Merr & Perry (гвоздика) у самцов мышей: сравнительное исследование. BMC Complement Altern Med. 2003; 3: 6. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Таджуддин, Ахмад С., Латиф А., Касми И.А., Амин К.М.Экспериментальное исследование улучшения сексуальной функции Myristica Fragrans Houtt (мускатный орех) BMC Complement Altern Med. 2005; 5: 16. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• USDA N. 2007. База данных PLANTS (http://plants.usda.gov, 6 августа 2007 г.). Национальный центр данных по растениям. Батон-Руж, 2007: 70874-74490.
• Veltman-Verhulst SM, Hughes E, Ayeleke RO, Cohlen BJ. Внутриматочная инсеминация при необъяснимой недостаточности фертильности. Кокрановская база данных Syst Rev.2016; 2: CD001838. [PubMed] [Google Scholar]
• Заид С.С., Осман С., Кассим Н.М.Потенциальный защитный эффект меда Туаланг на токсичность яичников, вызванную BPA, у крыс препубертатного возраста. BMC Complement Altern Med. 2014; 14: 509. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Заид С.С., Сулейман С.А., Сираджудин К.Н., Осман Н.Х. Влияние меда Туаланг на женские репродуктивные органы, большеберцовую кость и гормональный фон у крыс с удаленными яичниками — животная модель менопаузы. BMC Complement Altern Med. 2010; 10: 82. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Zhang C, Qi X, Shi Y, Sun Y, Li S, Gao X.Оценка содержания микроэлементов в булаве (Myristica Fragrans Houtt) и их влияние на рак шейки матки, вызванный метилхолантреном. Biol Trace Elem Res. 2012; 149: 431–434. [PubMed] [Google Scholar]

Влияние натурального вагинального продукта на основе меда на успех внутриматочной инсеминации (ВМИ) при лечении бесплодия

Авиценна Дж. Фитомед. 2019 июль-август; 9 (4): 310–321.

Марьям Кавуси

¹ Кафедра персидской медицины, Школа персидской и дополнительной медицины, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

Найере Хадем Гэби

² Кафедра акушерства и гинекологии медицинского факультета Университета медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

Мона Наджаф Наджафи

³ Отдел клинических исследований, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

Рошанак Мокаберинежд

⁴ Кафедра традиционной медицины, Школа традиционной медицины, Университет медицинских наук Шахида Бехешти, Тегеран, Иран.

Зохре Фейзабади

¹ Кафедра персидской медицины, Школа персидской и дополнительной медицины, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

Рошанак Салари

⁵ Кафедра фармацевтических наук в персидской медицине, Школа персидской и дополнительной медицины, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

¹ Кафедра персидской медицины, Школа персидской и дополнительной медицины, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

² Кафедра акушерства и гинекологии медицинского факультета Университета медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

³ Отдел клинических исследований, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

⁴ Кафедра традиционной медицины, Школа традиционной медицины, Университет медицинских наук Шахида Бехешти, Тегеран, Иран.

⁵ Кафедра фармацевтических наук в персидской медицине, Школа персидской и дополнительной медицины, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

^* Автор для корреспонденции: Тел .: +985138848930, Факс: +985138829279, [email protected]

Поступила в редакцию 13 октября 2018 г .; Пересмотрено 27 октября 2018 г .; Принято 7 ноября 2018 г.

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License (http://creativecommons.org/licenses/by/3.0/), которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение в любых средний при условии правильного цитирования оригинала.

Abstract

Цель:

В связи с высокой распространенностью бесплодия и растущей тенденцией к комплементарной медицине, это исследование было проведено для изучения влияния вагинального натурального продукта на основе меда и 1% экстракта Myristica Fragrans на степень успех внутриматочной инсеминации (ВМИ).

Материалы и методы:

Это нерандомизированное клиническое исследование с исторической контрольной группой проводилось на бесплодных женщинах. В этом исследовании 159 пациентов были отнесены к группе вмешательства, а 288 пациентов — к группе контроля. Все участники получали кломифен или летрозол с третьего по седьмой день менструации, а на 6, 7 и 8 дни им делали инъекции менопаузального гонадотропина (ГМГ). ВМИ проводили через 36 часов после инъекции хорионического гонадотропина человека (ХГЧ).В группе вмешательства, помимо вышеуказанного лечения, использовался натуральный вагинальный продукт с 7 дня менструации до дня перед проведением ВМИ. Через шестнадцать дней после ВМИ был измерен бета-ХГЧ в сыворотке для исследования химической беременности, а через шесть недель после ВМИ была проведена вагинальная сонография для исследования клинической беременности.

Результаты:

Анализ показал, что частота наступления беременности была выше в группе, получавшей натуральный продукт, по сравнению с контрольной группой.Частота химической беременности составила 18,1% против 15,4%, а частота клинической беременности составила 15,2% против 13,8% для групп вмешательства и контроля, соответственно; но эта разница не была значительной.

Заключение:

Похоже, что использование этого вагинального продукта в течение более длительного периода времени и в течение нескольких менструальных циклов перед ВМИ может дать более положительные результаты. Однако необходимы дальнейшие исследования.

Ключевые слова: Бесплодие, Мед, Myristica Fragrans, Mace, Внутриматочная инсеминация (ВМИ)

Введение

Внутриматочная инсеминация (ВМИ) — один из старейших методов лечения бесплодия.Хотя использование медицинских услуг для лечения бесплодия увеличилось, в последние годы распространенность бесплодия не снизилась (Abdelkader and Yeh, 2009 ▶). Около 10-15% пар во всем мире страдают бесплодием. В Иране эта распространенность выше, чем в среднем по миру, поскольку, согласно сообщениям, она составляет 17,3-20,2% (Akhondi et al., 2013 ▶; Kazemijaliseh et al., 2015 ▶). Показатель успешности ВМИ с гомологичной спермой варьируется (10-20% на каждый цикл) в разных исследованиях (Abdelkader and Yeh, 2009; Monraisin, et al., 2016 ▶; Аллахбадия, 2017 ▶; Irani et al., 2018 ▶). ВМИ используется для лечения бесплодия с различными причинами, включая цервикальные причины, ановуляцию, эндометриоз, иммунологические причины, мужское бесплодие и неизвестные факторы (Allahbadia, 2017; Cabry et al., 2017). Действительно, ВМИ считается промежуточным, более простым и дешевым подходом по сравнению с другими методами, используемыми для лечения бесплодия, такими как оплодотворение in vitro (ЭКО) или внутрицитоплазматическая инъекция сперматозоидов (ИКСИ) (Велтман и др., 2016 ▶). Поэтому необходимо провести больше исследований, чтобы повысить эффективность ВМИ.

Исследования традиционных методов лечения, которые были прописаны тысячу лет назад известными врачами, такими как Ибн Сина, кажутся важными, учитывая склонность пациентов к альтернативной медицине. Мед и булава входят в число соединений, которые поддерживаются персидской медициной при лечении бесплодия и доказали свою эффективность в исследованиях как на людях, так и на животных (Abdelhafiz and Muhamad, 2008 ▶; Zaid et al., 2010 ▶; Zaid et al., 2014 ▶, Lavaf et al., 2017 ▶).

Мед — это пересыщенный сахаром кислый раствор с высоким осмотическим давлением, который не подходит для роста бактерий и грибков. Действительно, эта естественная кислотность предотвращает рост многих патогенных агентов. Мед содержит различные типы белков, витаминов, минералов, флавоноидов и алкалоидов (Grembecka and Szefer, 2013 ▶; Ranjbaret al., 2015 ▶). В клинических испытаниях назначение вагинального соединения, содержащего мед и маточное молочко, наряду с физиологическим раствором, было очень эффективным при лечении бесплодия, вызванного астенозооспермией (Abdelhafiz and Muhamad, 2008 ▶).Кроме того, добавление меда (10%) к криопротекторному раствору привело к повышению качества спермы после замораживания (Fakhrildin and Alsaadi, 2014 ▶; El-Sheshtawy et al., 2016 ▶). В другом клиническом исследовании, посвященном влиянию вагинального меда на вагинит Candida , был сделан вывод, что вагинальное употребление меда, обладая антибактериальным и противогрибковым действием, может поддерживать и укреплять нормальную микрофлору влагалища за счет увеличения количества лактобацилл (Seifi et al., 2016 ▶). Недавние исследования микробиома влагалища сообщили о влиянии видов бактерий на бесплодие посредством секвенирования следующего поколения (NGS) (Campisciano et al., 2017 ▶). Кроме того, патологические изменения микробиоты матки могут отрицательно сказаться на процессе имплантации и повлиять на результаты ЭКО (Moreno et al., 2016 ▶). Следовательно, мед может положительно влиять на фертильность, влияя на микробиоту влагалища и, в свою очередь, на микробиоту матки. В исследовании, проведенном Zaid et al., Мед оказался эффективным в улучшении циклов эстрогена у мышей с токсичностью искусственных яичников (Zaid et al., 2014 ▶). Кроме того, назначение меда в течение двух недель привело к увеличению толщины эпителия влагалища и увеличению веса матки у самок мышей после овариэктомии (Zaid et al., 2010 ▶).

Внешняя кора мускатного ореха (Myristica Fragrans) называется булавой (USDA, 2007 ▶), она содержит различные типы фитоэстрогенов, флавоноидов и минералов (Zhang et al., 2012 ▶; Chiu et al., 2016 ▶). Он оказывает афродизиак, а также обладает антибактериальным, противогрибковым, гепатопротекторным, противовоспалительным и иммуномодулирующим действием (Tajuddin et al., 2003 ▶; Tajuddin et al., 2005 ▶; Checker et al., 2008 ▶; Zhang et al., 2012 ▶).

Исследования показали, что уровни кальция и магния в крови снижаются во время стимуляции овуляции и повышения уровня эстрогена у бесплодных женщин (Grossi et al., 2017 ▶). Кроме того, в различных исследованиях добавление фитоэстрогена наряду с индукцией овуляции с помощью кломифена могло улучшить процесс овуляции и частоту наступления беременности (Shahin et al., 2008; Shahin and Mohammed, 2014). В исследовании, проведенном Таджуддином и др., M. Fragrans вызвали значительное увеличение сексуальной активности у самцов мышей (Таджуддин и др., 2003; Таджуддин и др., 2005). Похоже, что это вагинальное соединение может повысить вероятность зачатия за счет увеличения количества половых контактов, в дополнение к своим фитоэстрогенным свойствам, которые могут быть эффективными для индукции овуляции.

В персидской медицине многие препараты от бесплодия используются вагинально, и недавние исследования доказали влияние вагинального меда на слизистую влагалища, микробиоту влагалища, микробиоту матки, облегчение подвижности и продвижение сперматозоидов во влагалище (Abdelhafiz and Muhamad, 2008 ▶) . Начиная с M. Fragrans содержит множество фитоэстрогенов, которые могут быть эффективны в процессе оплодотворения. Поскольку комбинация меда и M. Fragrans используется в персидской медицине в качестве вспомогательного средства для лечения бесплодия (Азамхан, 2008 ▶), это исследование было проведено для изучения эффекта вагинального натурального продукта, изготовленного из меда и 1% экстракта . М.Fragrans (Mace) по успешности IUI.

Материалы и методы

Дизайн исследования

Это клиническое исследование с исторической контрольной группой проводилось с 2016 по 2018 год на бесплодных женщинах-кандидатах на ВМИ, в центре бесплодия Милад при Университете медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран. В группе вмешательства выборка была последовательно проведена у пациентов, которые обратились в центр бесплодия Милад с 2017/9/23 по 2018/7/1 для проведения ВМИ и соответствовали критериям включения.В контрольной группе, независимо от исхода беременности, образцы были последовательно собраны из архива этого центра от пациенток, направленных с 2016/9/22 по 2017/9/22 и соответствующих критериям включения. Затем информация о пациентах была записана. Пациенты были подобраны по возрасту и продолжительности бесплодия между экспериментальной и контрольной группами. Это исследование было одобрено этическим комитетом Университета медицинских наук Мешхеда (IR.MUMS.REC.1395.487) и зарегистрировано в центре регистрации клинических исследований Ирана (IRCT2016111130827N1).В группе вмешательства сначала пациентам разъясняли результаты исследования, а затем пациентов просили подписать форму согласия (если они желают участвовать в исследовании).

Участники

Пациенты были сначала обследованы и оценены гинекологом и направлены к исследователю в Центр бесплодия Милад. Критерии включения включали готовность участвовать, возраст <40 лет, продолжительность бесплодия <15 лет, бесплодие из-за ановуляции, бесплодие из-за мужского фактора и необъяснимое бесплодие, количество сперматозоидов в соответствии с общей функцией подвижности сперматозоидов (TMFS) более 5 миллионов. на мл после подготовки спермы, нормальность гормональных тестов, нормальность матки при гистеросальпингографии и наличие хотя бы одной открытой маточной трубы.

Критерии исключения включали индекс массы тела> 35, неподходящий размер фолликула для введения ХГЧ на 12-14 день и эндометриоз.

Процедура IUI

Протокол ВМИ, который выполняли для обеих групп, был следующим: с 3 по 7 день менструации они получали кломифен (100 мг / день) или (летрозол 5 мг / день) в течение пяти дней, а на 6, 7 дни — и 8, они получили HMG. Доза HMG была скорректирована на основании мониторинга яичников. На 9 ^{-й день} была проведена вагинальная сонография (если диаметр фолликула был менее 12 мм, то они получали ГМГ во второй раз), а в случае фолликула ≥ 18 мм на 12-14 день цикла — 5000 были введены единицы ХГЧ.Затем, через 36 часов, была проведена ВМИ с образцом спермы жены пациента, который был промыт и подготовлен в тот же день. Для поддержки лютеиновой фазы после ВМИ прописывали прогестерон (8% вагинальный гель, один предварительно заполненный аппликатор один раз в день).

Вмешательство

В группе вмешательства, с 7 ^-го дня менструации до дня перед проведением ВМИ, натуральный продукт из меда и 1% экстракта M. Fragrans (Mace) применялся вагинально с помощью аппликатора один раз в день. ночью самой пациенткой.Пациентам также был предоставлен список возможных побочных эффектов продукта. Контрольная группа не получала вагинальный натуральный продукт.

Рандомизация и ослепление

Т.к. контрольная группа выбрана из архива центра бесплодия; Это испытание не было ни рандомизированным, ни слепым.

Препарат

Сбор и извлечение растений

Булава — красная мясистая чаша вокруг мускатного ореха.Растение было проверено ботаником из отдела ботанического исследовательского центра по наукам о растениях в Университете Фирдоуси в Мешхеде, Иран, и Мейс было приготовлено из центра Sobhan Herb в Мешхеде, Иран. Мед высокого качества был приготовлен из Мешхеда, Хорасан Разави, Иран. После приготовления булавы ее измельчали ​​и водный экстракт экстрагировали путем мацерации в воде. Полученный жидкий экстракт измельчали ​​в сублимационной сушилке. Затем измельченный экстракт выдерживали при 2-4 ° C. Все этапы экстракции были выполнены Исследовательским центром пищевых наук и промышленности Мешхеда.

Количество экстракта растений составляло 2% от веса растения.

Приготовление вагинального продукта на травах

Мейс и мед были смешаны вместе до 1% (т.е. каждые 100 г меда были смешаны с 1 г Мейса), и 80-граммовые тюбики были заполнены смесью. Эти этапы были выполнены фармацевтом факультета персидской медицины Университета медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран. Каждая пробирка содержала 79,2 г меда и 0,8 г экстракта булавы. После заполнения трубочки передавались пациентам вместе с аппликатором для вагинального применения.Дозу этого соединения определяли как один аппликатор на ночь, начиная с 7 ^-го дня менструации и заканчивая днем ​​перед проведением ВМИ. Каждый аппликатор, содержащий 8 г этого продукта, содержал не менее 0,08 г булавы и 7,92 г меда.

Стандартизирующий водный экстракт булавы

Водный экстракт Mace был стандартизирован на основе общего фенола с использованием метода Folin-Ciocalteu (Hosseini et al., 2017). Всего 20 мкл экстракта (10 мг / мл) и галловая кислота (0, 50, 100, 150, 250 и 500 мг / л), используемые в качестве стандарта, были смешаны со 100 мкл реагента Folin-Ciacalteu. и 300 мкл 1 М раствора карбоната натрия.Конечный объем был достигнут 2 мл с использованием деионизированной воды, и через 2 часа оптическое поглощение образцов было измерено спектрофотометром при 765 нм. Затем была построена стандартная кривая для галловой кислоты, и уровень фенольных соединений в экстракте был выражен в миллиграммах галловой кислоты. Общее содержание фенола в экстракте Mace было равно 70,4 мг галловой кислоты на грамм чистого экстракта Mace, а общее содержание фенола в натуральном продукте было равно 0,704 мг галловой кислоты на грамм, исходя из содержания экстракта Maces в продукте.

Микробиологические тесты

Микробиологические тесты были выполнены для продукта, содержащего мед и булаву, в микробиологической лаборатории больницы Гем в Мешхеде на основе стандартного метода фармакопеи США USP32-NF27 (Pharmacopeia, 2004 ▶). Продукт был отрицательным для Escherichia coli , Candida albicans , Staphylococcus aureus , аэробных мезофильных бактерий, плесени, клебсиелл и дрожжей.

Измерения и результаты

Полная история болезни пациентов регистрировалась по прибытии, и исследователь проводил физический осмотр.Были записаны демографические и основные характеристики пациентов, включая возраст пациента, возраст супруга, ИМТ, продолжительность бесплодия, время проведения ВМИ и тип бесплодия с точки зрения первичного или вторичного бесплодия. Диагностические тесты для измерения уровней ФСГ и ЛГ были выполнены всем пациентам на третий день менструального цикла. Кроме того, гинекологом была проведена вагинальная сонография на третий и 9 ^-й -й дни менструального цикла, где было записано количество фолликулов и размер самого большого фолликула.Кроме того, анализ спермы также проводился для супруга пациентов, которые считались нормальными, если у них были следующие характеристики, в соответствии с руководящими принципами Всемирной организации здравоохранения. Объем сперматозоидов ≥1,5 мл, количество сперматозоидов ≥15 миллионов / мл, подвижность сперматозоидов (процент прогрессивной подвижности) ≥32%, морфология сперматозоидов в соответствии со строгими критериями (Tygerberg) ≥4%.

После записи анамнеза и проведения физического обследования, биохимических тестов и сонографии была указана и записана причина бесплодия (женский или мужской фактор, или и то, и другое, или необъяснимое бесплодие).

Первичный результат включал частоту химической и клинической беременности. Через шестнадцать дней после проведения ВМИ определяли уровень βHCG (хорионический гонадотропин человека) в сыворотке с помощью метода ELISA (иммуноферментного анализа). Химическая беременность была подтверждена, если уровень βHCG был ≥25 МЕ / л. Далее, через шесть недель после ВМИ гинекологом в центре лечения бесплодия была проведена вагинальная сонография, где при наличии мешка беременности была подтверждена клиническая беременность. Вторичным результатом были побочные эффекты продукта.

Анкета темперамента была заполнена для всех пациентов в группе вмешательства. Анкета для определения темперамента (Опросник моджахеди Мизадж, MMQ) является стандартной анкетой, утвержденной в Иране в 2014 году, и ее надежность и валидность были подтверждены. Альфа-коэффициент Кронбаха в этой анкете составляет 0,71. Эта анкета содержит 10 пунктов с оценкой от 1 до 3. После суммирования баллов оценка ≤14 считается холодным темпераментом, 15-18 — умеренным темпераментом, а ≥19 — теплым темпераментом (Mojahedi et al., 2014 ▶).

Размер выборки

Поскольку показатель успеха ВМИ в Центре бесплодия Милад составлял около 10%, и учитывая, что вышеупомянутое вмешательство может повысить показатель успеха на 10%, что приведет к успеху на 20% (α = 0,05 и β = 0,2 ), размер выборки в группе вмешательства и контрольной группе был определен как 144 и 288 соответственно. С учетом 10% потерь в группу вмешательства вошли 159 человек. Из-за ограничений доступа к лекарству (натуральному вагинальному продукту) из-за его высокой стоимости и количества пациентов, а также для стабилизации эффективности исследования контрольная группа считалась вдвое большей группой вмешательства.

Статистический анализ

Записанные данные были проанализированы с помощью программного обеспечения SPSS (версия 16). Для представления данных использовались методы описательной статистики, включая центральные индексы, распределение и частотное распределение. Независимый t-критерий использовался для сравнения количественных переменных между двумя группами, если распределение данных было нормальным; в противном случае использовали тест Манна-Уитни. Для сравнения качественных переменных между двумя группами использовались критерий хи-квадрат и, при необходимости, точный критерий Фишера.Модель логистической регрессии использовалась для корректировки смешивающих переменных. Во всех расчетах статистически значимым считалось p <0,05 .

Результаты

В этом испытании в группу вмешательства были включены 159 субъектов. Пятьдесят четыре субъекта из 159 были исключены по разным причинам (23 субъекта из-за неподходящего фолликула, 7 из-за неподходящих сперматозоидов и 14 из-за нежелания продолжать этапы ВМИ, 9 субъектов из-за неиспользования продукта и 1 субъект из-за возникновения вагинального зуда и жжения).Наконец, 105 человек были проанализированы как группа вмешательства. В контрольной группе собрана и исследована информация о 288 пациентах. Из контрольной группы 28 пациентов были исключены из-за неполной информации, а 260 человек были проанализированы как контрольная группа ().

Блок-схема исследования

Средний возраст пациентов в экспериментальной и контрольной группах составлял 28,3 ± 4 и 28,6 ± 5 лет, соответственно, и не было существенной разницы между двумя группами (p = 0.619).

Средняя продолжительность бесплодия в экспериментальной и контрольной группах составляла 5,36 ± 3 и 4,7 ± 3 года, соответственно, и не было значительной разницы между двумя группами ().

Таблица 1

Основные характеристики пациентов

± 4,8 27,3 9027 18 (15-26)

	Вмешательство	Контроль	Значение P
Возраст пациента (лет) a	0.619
Возраст мужа (лет) a	32,20 ± 5,3	32,28 ± 5	0,875
ИМТ (кг / м2) a	25 ± 3,5	0,139
Продолжительность бесплодия (лет) a	5,36	4,7 ± 3	0,052
Время IUI b Первое		Третий Четвертый	45 (42.9%) 36 (34,3%) 15 (14,3%) 9 (8,5%)	114 (43,8%) 92 (35,4%) 46 (17,7%) 8 (3,1%)	0,627
Вид бесплодия c
Первичное Среднее	77 (73,3%) 28 (26,7%)	200 (77,2%) 603 0,431
причина бесплодия c
Женский фактор Мужской фактор Оба (женский и мужской) Неизвестно	29 (27.6%) 29 (27,6%) 11 (10,5%) 36 (34,3%)	59 (22,8%) 71 (27,4%) 19 (7,3%) 110 (42,5%)	0,413
FSH (миль / м) d	6,2 (2-19)	6,37 (0,01-28,2)	0,417
LH (miu / m) d	4,8 (0,1- 26)	4,9 (1,1-26,8)	0,562
Анализ спермы c , e
Объем Count Motility 903.2%) 105 (100%) 88 (83,8%) 101 (96,2%)	247 (95,4%) 258 (99,6%) 208 (80%) 233 (89,6%)	0,958 0,524 0,400 0,060
Количество фолликулов d	4 (1-14)	5 (1-15)	<0,01
Максимальный размер фолликула (мм) d	18 (15-25)	0,507
Толщина эндометрия (мм) a	6.9 ± 1,5	7,2 ± 1,6	0,222
Лекарственные средства c
летрозол кломифен	60 (4527102) 90,27% %) 158 (60,8%)	0,003

Не было доказательств статистически значимых различий между двумя группами (вмешательство и контроль) с точки зрения химической беременности (OR = 1,048, CI = 0,538-2,04, P = 0.890) и клинической беременности (OR = 1,120, CI = 0,561–2,23, P = 0,748) после корректировки мешающих переменных, таких как количество фолликулов и типы препаратов, используемых для стимуляции овуляции (летрозол или кломифон). Другие демографические и базовые переменные представлены в.

Частота химической беременности (CHPR) в экспериментальной и контрольной группах составила 18,1% и 15,4%, соответственно, без существенной разницы между ними; однако уровень химической беременности был выше в группе вмешательства (p = 0.524). Частота клинической беременности (СЛР) составила 15,2% в группе вмешательства и 13,8% в группе контроля, которые статистически не различались; однако СЛР была выше (p = 0,731) в группе вмешательства ().

Результаты в группах вмешательства и контроля (A: частота химической беременности; B: частота клинической беременности).

CHPR: Показатель химической беременности; и СЛР: клиническая частота наступления беременности.

Хотя частота различных причин бесплодия была одинаковой в экспериментальной и контрольной группах, в экспериментальной группе большинство субъектов, забеременевших (как химически, так и клинически), имели бесплодие с женским фактором.С другой стороны, в контрольной группе большинство беременностей (химических и клинических) произошло по необъяснимым причинам (). В группе вмешательства сравнивали общий темперамент пациенток в группах с положительной и отрицательной химической беременностью; большинство испытуемых с положительной химической беременностью продемонстрировали теплый характер, но не было существенной разницы между положительными и отрицательными группами химической беременности p = 0,306).

Таблица 2

Сравнение успешности химической и клинической беременности из-за различных причин бесплодия в группе вмешательства

N (%)

		Причина бесплодия
Женский фактор			Мужской фактор	Оба (женский и мужской)	Неизвестно	P *
CHPR	Положительный N (%)	7 (36.8)	3 (15,8)	3 (14,8)	6 (31,6)	0,464
	Отрицательный N (%)	22 (25,6)	26 (30,2)	8 (9,3)	30 (34,9)
СЛР	Положительный N (%)	7 (43,8)	3 (18,8)	3 (18,8)	3 (18,8)	0,505
	22 (24,7)	26 (29,2)	8 (9)	33 (37.1)

Далее, в группе вмешательства сравнивались группы положительной и отрицательной клинической беременности по общему темпераменту; у пациенток с положительной клинической беременностью был вспыльчивый характер, но не было существенной разницы между группами положительной и отрицательной клинической беременности по общему темпераменту (p = 0,144) ().

Таблица 3

Сравнение общего темперамента (mizajaam) между двумя группами частота положительных и отрицательных беременностей в группе вмешательства

9057

Группа		Теплый	Холодный	Умеренный	P *
CHPR	Положительный N (%)	8 (42.1)	5 (26,3)	6 (31,6)	0,306
	Отрицательный N (%)	20 (24,1)	23 (27,7)	40 (48,2)
Положительный N (%)	7 (43,8)	3 (18,8)	6 (37,5)	0,144
Отрицательный N (%)	21 (24,4)	25 (29,1)	40 (46,5)

В группе вмешательства общий темперамент сравнивался между группами положительной и отрицательной химической беременности, где большинство субъектов с положительной химической беременностью демонстрировали теплый темперамент, но не было существенной разницы между положительной и отрицательной химической беременностью. группы беременностей (p = 0.306). Кроме того, в группе вмешательства сравнивались группы положительной и отрицательной клинической беременности по общему темпераменту, где группы с положительной клинической беременностью были вспыльчивыми, но не было существенной разницы между группами положительной и отрицательной клинической беременности по общему темпераменту ( р = 0,144) ().

Наблюдались очень ограниченные побочные эффекты; о зуде и жжении сообщил пациент, который в анамнезе употреблял большое количество острых приправ, который был исключен из группы вмешательства.

Обсуждение

Настоящее исследование является первым исследованием, в котором оценивалась эффективность натурального вагинального продукта, содержащего булаву и мед, у пациенток-кандидатов на ВМИ. Эффект Mace, как фитоэстрогенного соединения наряду с медом, вагинально сочетающимся с индукцией овуляции, ранее не оценивался у бесплодных пациентов.

Результаты показали, что частота химической и клинической беременности в группе, получавшей вагинальный продукт, была выше по сравнению с контрольной группой (18.1 против 15,4% для химической беременности и 15,2 против 13,8% для клинической беременности, соответственно), но это различие не было статистически значимым. Это увеличение частоты успеха ВМИ произошло после семи дней использования этого вагинального продукта. Возможно, использование этого вагинального продукта в нескольких последовательных циклах может дать положительный результат. Поскольку в исследовании, проведенном Abdelhafiz et al. при использовании вагинальных продуктов, содержащих мед, маточное молочко и пчелиный хлеб, в течение 2 недель и трех последовательных циклов частота наступления беременности значительно увеличилась по сравнению с контрольной группой (Abdelhafiz and Muhamad, 2008 ▶).Поскольку исследование, проведенное Abdelhafiz et al. было единственным клиническим испытанием, аналогичным нашему, кажется, что короткая продолжительность лечения (одна неделя против двух недель) и непрекращающееся лечение (один цикл против трех) были среди причин, из-за которых показатель успеха препарата снизился в этом исследовании.

В нашем исследовании в контрольной группе количество пациентов, получавших кломифен, было больше, чем летрозол, что значительно отличалось от группы вмешательства. В различных исследованиях изучалось влияние этих двух препаратов на фертильность (Roque et al., 2015, Ганн и Бейтс, 2016). Похоже, что влияние кломифена и летрозола на клинические исходы и коэффициент фертильности у женщин с необъяснимым бесплодием и синдромом поликистозных яичников ( СПКЯ ) одинаково (Ghahiri et al., 2016 ▶, Eskew et al., 2019 ▶). В нашем исследовании вероятность химической беременности и клинической беременности в экспериментальной и контрольной группах после корректировки мешающих переменных (например, количества фолликулов и типов препаратов), используемых для стимуляции овуляции (летрозол или кломифон)) не имела каких-либо существенных различий.

Различные исследования показали, что цервикальная инфекция, вызванная грамотрицательными бактериями, может отрицательно влиять на вспомогательные репродуктивные технологии (Salim et al., 2002; Moreno and Franasiak, 2017). Более того, удаление цервикальной слизи перед IUI, как было показано, увеличивает коэффициент фертильности вдвое с возможным механизмом удаления микробов, загрязняющих кончик катетера, что вызывает нарушение имплантации. Однако наличие цервикальной слизи не позволяет сперматозоидам вернуться во влагалище после оплодотворения.Таким образом, увеличивается уровень сперматозоидов в маточной трубе. Таким образом, при вагинальном применении меда можно добиться положительного воздействия на фертильность без физического удаления вагинальной слизи за счет улучшения микробиоты. Хотя различные исследования показали, что мед улучшает микробиоту матки (Brudzynski and Sjaarda, 2015; Seifi et al., 2016), длительное потребление этого продукта может повысить эффективность лечения бесплодия, поскольку в исследовании, проведенном Абдельхафизом , и другие., использование вагинального продукта, содержащего мед, в течение 2 недель дало положительные результаты (Abdelhafiz and Muhamad, 2008 ▶).

В интервенционной группе 43,7% забеременевших имели женское бесплодие, а в контрольной группе этот показатель составил 24,7%. Хотя эта разница не была статистически значимой, кажется, что вагинальный продукт может иметь большее влияние на женские причины. Другими словами, вагинальное применение этого продукта, влияя на нормальную флору влагалища или его микробиоту, может привести к успешному ВМИ у лиц с женским бесплодием.С другой стороны, результаты исследования, проведенного Абдельхафизом и др., Показали, что вагинальный продукт, содержащий мед, маточное молочко и цветочную пыльцу, был эффективен у бесплодных пациентов с мужскими причинами за счет увеличения подвижности сперматозоидов во влагалище без какой-либо ВМИ (Абдельхафиз и Мухамад , 2008 ▶).

Учитывая общий темперамент, большинство беременных в группе вмешательства имели теплый темперамент, в то время как у лиц с холодным темпераментом было минимальное количество беременностей (42 против 26% для? И? Соответственно).Этот результат чем-то похож на результаты, полученные Sohrabvand et al; они сообщили, что наиболее распространенным темпераментом в их исследовании, которое проводилось на бесплодных женщинах, обращающихся в клинику по лечению бесплодия, был холод (Sohrabvand et al., 2014). Поскольку темперамент нашего травяного продукта теплый, кажется, что непродолжительность употребления наркотиков является одной из причин снижения эффективности ВМИ у людей с холодным темпераментом по сравнению с людьми с теплым темпераментом. Возможно, если вагинальный продукт использовался в течение более длительного времени в течение нескольких последовательных циклов до того, как IUI и образ жизни и порядок еды также были скорректированы с учетом темперамента, этот продукт мог бы иметь большее влияние на успех IUI, разогревая темперамент.

Сильными сторонами этого исследования было изучение влияния продукта на бесплодие в случаях с женскими, мужскими и необъяснимыми факторами. С другой стороны, Abdelafiz и др. Изучали людей с бесплодием только по мужскому фактору, и эффект препарата не оценивался в случаях других причин бесплодия. Слабым местом этого исследования было ограничение количества пациентов, которые вызывали, чтобы стабилизировать мощность исследования. Таким образом, в настоящем исследовании историческая контрольная группа рассматривала дважды группу вмешательства.Таким образом, в текущем исследовании рандомизация и ослепление были невозможны. Другим слабым местом этого исследования была короткая продолжительность применения лекарств. Кроме того, другим ограничением исследования было отсутствие средств для скрининга микробиоты матки до и после вмешательства.

Принимая во внимание увеличение частоты успеха ВМИ в группе вмешательства, хотя и незначительное, следует провести дальнейшие исследования с более продолжительным лечением, по крайней мере, в течение двух недель в каждом цикле фертильности и в течение не менее трех циклов.Кроме того, пероральное употребление этого соединения в то же время, что и вагинальное применение, может улучшить реакцию на лечение, учитывая пероральный эффект фитоэстрогенов на индукцию овуляции.

Выражение признательности

Это исследование является частью результатов докторской диссертации по персидской медицине (IR.MUMS.REC.1395.487), выполненной в Университете медицинских наук Мешхеда. Поэтому мы благодарим вице-президента Университета по исследованиям, а также выдающихся профессоров, которые помогли нам в этом исследовании.

Конфликт интересов

В этом исследовании нет конфликта интересов.

Ссылки

• Abdelhafiz AT, Muhamad JA. Перикоитальный перикоитальный интравагинальный пчелиный мед и маточное молочко для лечения мужского бесплодия. Int J Gynaecol Obstet. 2008. 101: 146–149. [PubMed] [Google Scholar]
• Абделькадер А.М., Йе Дж. Потенциальное использование внутриматочной инсеминации в качестве основного метода лечения бесплодия: обзор медицинских учреждений с ограниченными технологиями. Obstet Gynecol Int.2009; 2009: 584837. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Ахонди М.М., Камали К., Ранджбар Ф., Ширзад М., Шафегхати С., Бехджати Ардакани З., Гуджани А., Парсеян М. Распространенность первичного бесплодия в Иране в 2010 г. Иран Дж. Здравоохранение. 2013; 42: 1398–1404. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Аллахбадия, Г. Н. Внутриматочное осеменение: пересмотр основ. J Obstet Gynaecol India. 2017; 67: 385–392. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Азамхан, М.Exir Azam. Тегеран: Институт истории медицины; 2008. С. 704–753. [Google Scholar]
• Brudzynski K, Sjaarda C. Гликопротеины меда, содержащие антимикробные пептиды, Jelleins из основного протеина маточного молочка 1, отвечают за литическую и бактерицидную активность клеточной стенки меда. PLoS One. 2015; 10: e0120238. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Cabry-Goubet R, Scheffler F, Belhadri-Mansouri N, Belloc S, Lourdel E, Devaux A, Chahine H, De Mouzon J, Copin H.Влияние типов гонадотропинов и показаний на успех гомологичной внутриматочной инсеминации: исследование из 1251 цикла и обзор литературы. Biomed Res Int. 2017; 2017: 3512784. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Campisciano G, Florian F, D’Eustacchio A, Stankovic D, Ricci G, De Seta F. Субклинические изменения шейно-вагинального микробиома у женщин с идиопатическим бесплодием. J. Cell Physiol. 2017; 232: 1681–1688. [PubMed] [Google Scholar]
• Чекер Р., Чаттерджи С., Шарма Д., Гупта С., Варияр П., Шарма А.Иммуномодулирующее и радиозащитное действие лигнанов, полученных из свежего мускатного ореха (Myristica Fragrans), на спленоциты млекопитающих. Int Imp. 2008; 8: 661–669. [PubMed] [Google Scholar]
• Чиу С., Ван Т., Бельски М., Абурашед Э.А. Выделение, очистка и характеристика фенилпропаноидов и фенольных компонентов ядра мускатного ореха (Myristica Fragrans) под контролем ВЭЖХ Nat Prod Commun. 2016; 11: 483–488. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Эль-Шештави Р.И., Эль-Бадри Д.А., Гамаль А., Эль-Наттат В.С., Алмаати AMA.Натуральный мед как криопротектор для улучшения параметров спермы арабских жеребцов после размораживания. Азиатский Pac J Reprod. 2016; 5: 331–334. [Google Scholar]
• Эскью А.М., Бедрик Б.С., Харди А., Столл CRT, Колдиц Г.А., Туули М.Г. Летрозол в сравнении с цитратом кломифена при необъяснимом бесплодии: систематический обзор и метаанализ. Obstet Gynecol. 2019; 3: 437–444. [PubMed] [Google Scholar]
• Фахрилдин М.Б., Алсаади РА. Добавление меда в среду для замораживания спермы улучшает параметры спермы человека после размораживания.J Family Reprod Health. 2014; 8: 27–31. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Ghahiri A, Mogharehabed N, Mamourian M. Летрозол как средство первой линии лечения бесплодных женщин с синдромом поликистозных яичников (СПКЯ) по сравнению с цитратом кломифена: клиническое испытание. Adv Biomed Res. 2016; 5: 6. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Grembecka M, Szefer P. Оценка качества меда и продуктов пчеловодства на основе их минерального состава с использованием многомерных методов.Оценка состояния окружающей среды. 2013; 185: 4033–4047. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Grossi E, Castiglioni S, Moscheni C, Antonazzo P, Cetin I, Savasi VM. Уровни магния и кальция в сыворотке крови у бесплодных женщин во время цикла репродуктивной помощи. Magnes Res. 2017; 30: 35–41. [PubMed] [Google Scholar]
• Хоссейни А., Моллазаде Х., Амири М.С., Садегния Х.Р., Горбани, 2017. Biomed Pharmacother. Влияние стандартизированного экстракта корня Rheum turkestanicum Janischew на диабетические изменения в почках, печени и сердце у крыс с диабетом, вызванным стрептозотоцином; 86: 605-611.[PubMed] [Google Scholar]
• Ирани М., Чоу С., Китинг Д., Старейшина С., Розенвакс З., Палермо Г. Оптимизация лечения бесплодия первой линии. Гинекол Эндокринол. 2018; 20: 1–5. [PubMed] [Google Scholar]
• Каземиджалисех Х., Рамезани Теграни Ф., Бехбуди-Гандевани С., Хоссейнпанах Ф., Халили Д., Азизи Ф. Распространенность и причины первичного бесплодия в Иране: популяционное исследование. Glob J Health Sci. 2015; 7: 226–232. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Lavaf M, Simbar M, Mojab F, Alavi Majd H, Samimi M.Сравнение эффектов меда и крема фенитоина (PHT) на интенсивность боли и заживление ран после эпизиотомии у нерожавших женщин. J Complement Integr Med. 2017; 15: 28981445. [PubMed] [Google Scholar]
• Моджахеди М., Насери М., Майдзаде Р., Кешаварз М., Эбадини М., Назем Э. Оценка надежности и достоверности опросника мизадж: новая шкала самооценки в традиционной иранской медицине. Иранский Красный Полумесяц, Med J. 2014; 16: e15924. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Monraisin O, Chansel-Debordeaux L, Chiron A, Floret S, Cens S, Bourrinet S.Оценка практики внутриматочного оплодотворения: годичное проспективное исследование в семи французских центрах технологий вспомогательной репродукции. Fertil Steril. 2016; 105: 1589–1593. [PubMed] [Google Scholar]
• Moreno I, Codoner FM, Vilella F, Valbuena D, Martinez-Blanch JF, Jimenez-Almazan J. Доказательства того, что микробиота эндометрия влияет на успех или неудачу имплантации. Am J Obstet Gynecol. 2016; 215: 684–703. [PubMed] [Google Scholar]
• Морено И., Франасиак Дж. М.. Микробиота эндометрия — новый игрок в городе.Fertil Steril. 2017; 108: 32–39. [PubMed] [Google Scholar]
• Pharmacopeia U. Тест на бактериальный эндотоксин. USP32 / NF27: Фармакопея США и Национальный формуляр. 2004; 2004: 93–96. [Google Scholar]
• Ранджбар А.М., Садехпур О., Ханави М., Шамс Ардекани М.Р., Молудиан Х., Хаджимахмуди М. Влияние процесса удаления шлака на некоторые физико-химические параметры меда. Iran J Pharm Res. 2015; 14: 657–662. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Салим Р., Бен-Шломо И., Колоднер Р., Кенесс И., Шалев Э.Бактериальная колонизация шейки матки и успешность вспомогательной репродукции: результаты проспективного обследования. Hum Reprod. 2002; 17: 337–340. [PubMed] [Google Scholar]
• Сейфи Надер Голи З., Нахиди Ф., Сафеян А.Р., Джавадзаде Й., Этераф Оскуи Т. Влияние вагинального геля с медом и вагинального крема с клотримазолом на нормальную муку во влагалище у женщин с кандидозным вагинитом. ИДЖОГИ. 2016; 19: 32–39. [Google Scholar]
• Шахин А.Ю., Исмаил А.М., Захран К.М., Махлуф А.М. Добавление фитоэстрогенов к индукции кломифена у пациентов с необъяснимым бесплодием — рандомизированное исследование.Репродукция Биомед онлайн. 2008; 16: 580–588. [PubMed] [Google Scholar]
• Шахин А.Ю., Мохаммед С.А. Добавление фитоэстрогена Cimicifugae Racemosae к циклам индукции кломифена с синхронизированным половым актом при синдроме поликистозных яичников улучшает результаты цикла и частоту наступления беременности — рандомизированное исследование. Гинекол Эндокринол. 2014; 30: 505–510. [PubMed] [Google Scholar]
• Сохрабванд Ф., Назем Э., Танзаз М., Кешаварз М., Хашем Дабагян Ф., Никбахт Насрабади А., Гошехгир А., Биос С., Мокаберинеджад Р.Исследование личного и маточного юмора у бесплодных женщин, обращенных в больницу Вали-Э-Ас в Тегеране, Иран, в 2012 году. IJOGI. 2014; 17: 10–19. [Google Scholar]
• Таджуддин, Ахмад С., Латиф А., Касми И.А. Афродизиак 50% спиртовых экстрактов Myristica Fragrans Houtt (мускатный орех) и Syzygium aromaticum (L) Merr & Perry (гвоздика) у самцов мышей: сравнительное исследование. BMC Complement Altern Med. 2003; 3: 6. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Таджуддин, Ахмад С., Латиф А., Касми И.А., Амин К.М.Экспериментальное исследование улучшения сексуальной функции Myristica Fragrans Houtt (мускатный орех) BMC Complement Altern Med. 2005; 5: 16. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• USDA N. 2007. База данных PLANTS (http://plants.usda.gov, 6 августа 2007 г.). Национальный центр данных по растениям. Батон-Руж, 2007: 70874-74490.
• Veltman-Verhulst SM, Hughes E, Ayeleke RO, Cohlen BJ. Внутриматочная инсеминация при необъяснимой недостаточности фертильности. Кокрановская база данных Syst Rev.2016; 2: CD001838. [PubMed] [Google Scholar]
• Заид С.С., Осман С., Кассим Н.М.Потенциальный защитный эффект меда Туаланг на токсичность яичников, вызванную BPA, у крыс препубертатного возраста. BMC Complement Altern Med. 2014; 14: 509. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Заид С.С., Сулейман С.А., Сираджудин К.Н., Осман Н.Х. Влияние меда Туаланг на женские репродуктивные органы, большеберцовую кость и гормональный фон у крыс с удаленными яичниками — животная модель менопаузы. BMC Complement Altern Med. 2010; 10: 82. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Zhang C, Qi X, Shi Y, Sun Y, Li S, Gao X.Оценка содержания микроэлементов в булаве (Myristica Fragrans Houtt) и их влияние на рак шейки матки, вызванный метилхолантреном. Biol Trace Elem Res. 2012; 149: 431–434. [PubMed] [Google Scholar]

Влияние натурального вагинального продукта на основе меда на успех внутриматочной инсеминации (ВМИ) при лечении бесплодия

Авиценна Дж. Фитомед. 2019 июль-август; 9 (4): 310–321.

Марьям Кавуси

¹ Кафедра персидской медицины, Школа персидской и дополнительной медицины, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

Найере Хадем Гэби

² Кафедра акушерства и гинекологии медицинского факультета Университета медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

Мона Наджаф Наджафи

³ Отдел клинических исследований, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

Рошанак Мокаберинежд

⁴ Кафедра традиционной медицины, Школа традиционной медицины, Университет медицинских наук Шахида Бехешти, Тегеран, Иран.

Зохре Фейзабади

¹ Кафедра персидской медицины, Школа персидской и дополнительной медицины, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

Рошанак Салари

⁵ Кафедра фармацевтических наук в персидской медицине, Школа персидской и дополнительной медицины, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

¹ Кафедра персидской медицины, Школа персидской и дополнительной медицины, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

² Кафедра акушерства и гинекологии медицинского факультета Университета медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

³ Отдел клинических исследований, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

⁴ Кафедра традиционной медицины, Школа традиционной медицины, Университет медицинских наук Шахида Бехешти, Тегеран, Иран.

⁵ Кафедра фармацевтических наук в персидской медицине, Школа персидской и дополнительной медицины, Университет медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран.

^* Автор для корреспонденции: Тел .: +985138848930, Факс: +985138829279, [email protected]

Поступила в редакцию 13 октября 2018 г .; Пересмотрено 27 октября 2018 г .; Принято 7 ноября 2018 г.

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License (http://creativecommons.org/licenses/by/3.0/), которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение в любых средний при условии правильного цитирования оригинала.

Abstract

Цель:

В связи с высокой распространенностью бесплодия и растущей тенденцией к комплементарной медицине, это исследование было проведено для изучения влияния вагинального натурального продукта на основе меда и 1% экстракта Myristica Fragrans на степень успех внутриматочной инсеминации (ВМИ).

Материалы и методы:

Это нерандомизированное клиническое исследование с исторической контрольной группой проводилось на бесплодных женщинах. В этом исследовании 159 пациентов были отнесены к группе вмешательства, а 288 пациентов — к группе контроля. Все участники получали кломифен или летрозол с третьего по седьмой день менструации, а на 6, 7 и 8 дни им делали инъекции менопаузального гонадотропина (ГМГ). ВМИ проводили через 36 часов после инъекции хорионического гонадотропина человека (ХГЧ).В группе вмешательства, помимо вышеуказанного лечения, использовался натуральный вагинальный продукт с 7 дня менструации до дня перед проведением ВМИ. Через шестнадцать дней после ВМИ был измерен бета-ХГЧ в сыворотке для исследования химической беременности, а через шесть недель после ВМИ была проведена вагинальная сонография для исследования клинической беременности.

Результаты:

Анализ показал, что частота наступления беременности была выше в группе, получавшей натуральный продукт, по сравнению с контрольной группой.Частота химической беременности составила 18,1% против 15,4%, а частота клинической беременности составила 15,2% против 13,8% для групп вмешательства и контроля, соответственно; но эта разница не была значительной.

Заключение:

Похоже, что использование этого вагинального продукта в течение более длительного периода времени и в течение нескольких менструальных циклов перед ВМИ может дать более положительные результаты. Однако необходимы дальнейшие исследования.

Ключевые слова: Бесплодие, Мед, Myristica Fragrans, Mace, Внутриматочная инсеминация (ВМИ)

Введение

Внутриматочная инсеминация (ВМИ) — один из старейших методов лечения бесплодия.Хотя использование медицинских услуг для лечения бесплодия увеличилось, в последние годы распространенность бесплодия не снизилась (Abdelkader and Yeh, 2009 ▶). Около 10-15% пар во всем мире страдают бесплодием. В Иране эта распространенность выше, чем в среднем по миру, поскольку, согласно сообщениям, она составляет 17,3-20,2% (Akhondi et al., 2013 ▶; Kazemijaliseh et al., 2015 ▶). Показатель успешности ВМИ с гомологичной спермой варьируется (10-20% на каждый цикл) в разных исследованиях (Abdelkader and Yeh, 2009; Monraisin, et al., 2016 ▶; Аллахбадия, 2017 ▶; Irani et al., 2018 ▶). ВМИ используется для лечения бесплодия с различными причинами, включая цервикальные причины, ановуляцию, эндометриоз, иммунологические причины, мужское бесплодие и неизвестные факторы (Allahbadia, 2017; Cabry et al., 2017). Действительно, ВМИ считается промежуточным, более простым и дешевым подходом по сравнению с другими методами, используемыми для лечения бесплодия, такими как оплодотворение in vitro (ЭКО) или внутрицитоплазматическая инъекция сперматозоидов (ИКСИ) (Велтман и др., 2016 ▶). Поэтому необходимо провести больше исследований, чтобы повысить эффективность ВМИ.

Исследования традиционных методов лечения, которые были прописаны тысячу лет назад известными врачами, такими как Ибн Сина, кажутся важными, учитывая склонность пациентов к альтернативной медицине. Мед и булава входят в число соединений, которые поддерживаются персидской медициной при лечении бесплодия и доказали свою эффективность в исследованиях как на людях, так и на животных (Abdelhafiz and Muhamad, 2008 ▶; Zaid et al., 2010 ▶; Zaid et al., 2014 ▶, Lavaf et al., 2017 ▶).

Мед — это пересыщенный сахаром кислый раствор с высоким осмотическим давлением, который не подходит для роста бактерий и грибков. Действительно, эта естественная кислотность предотвращает рост многих патогенных агентов. Мед содержит различные типы белков, витаминов, минералов, флавоноидов и алкалоидов (Grembecka and Szefer, 2013 ▶; Ranjbaret al., 2015 ▶). В клинических испытаниях назначение вагинального соединения, содержащего мед и маточное молочко, наряду с физиологическим раствором, было очень эффективным при лечении бесплодия, вызванного астенозооспермией (Abdelhafiz and Muhamad, 2008 ▶).Кроме того, добавление меда (10%) к криопротекторному раствору привело к повышению качества спермы после замораживания (Fakhrildin and Alsaadi, 2014 ▶; El-Sheshtawy et al., 2016 ▶). В другом клиническом исследовании, посвященном влиянию вагинального меда на вагинит Candida , был сделан вывод, что вагинальное употребление меда, обладая антибактериальным и противогрибковым действием, может поддерживать и укреплять нормальную микрофлору влагалища за счет увеличения количества лактобацилл (Seifi et al., 2016 ▶). Недавние исследования микробиома влагалища сообщили о влиянии видов бактерий на бесплодие посредством секвенирования следующего поколения (NGS) (Campisciano et al., 2017 ▶). Кроме того, патологические изменения микробиоты матки могут отрицательно сказаться на процессе имплантации и повлиять на результаты ЭКО (Moreno et al., 2016 ▶). Следовательно, мед может положительно влиять на фертильность, влияя на микробиоту влагалища и, в свою очередь, на микробиоту матки. В исследовании, проведенном Zaid et al., Мед оказался эффективным в улучшении циклов эстрогена у мышей с токсичностью искусственных яичников (Zaid et al., 2014 ▶). Кроме того, назначение меда в течение двух недель привело к увеличению толщины эпителия влагалища и увеличению веса матки у самок мышей после овариэктомии (Zaid et al., 2010 ▶).

Внешняя кора мускатного ореха (Myristica Fragrans) называется булавой (USDA, 2007 ▶), она содержит различные типы фитоэстрогенов, флавоноидов и минералов (Zhang et al., 2012 ▶; Chiu et al., 2016 ▶). Он оказывает афродизиак, а также обладает антибактериальным, противогрибковым, гепатопротекторным, противовоспалительным и иммуномодулирующим действием (Tajuddin et al., 2003 ▶; Tajuddin et al., 2005 ▶; Checker et al., 2008 ▶; Zhang et al., 2012 ▶).

Исследования показали, что уровни кальция и магния в крови снижаются во время стимуляции овуляции и повышения уровня эстрогена у бесплодных женщин (Grossi et al., 2017 ▶). Кроме того, в различных исследованиях добавление фитоэстрогена наряду с индукцией овуляции с помощью кломифена могло улучшить процесс овуляции и частоту наступления беременности (Shahin et al., 2008; Shahin and Mohammed, 2014). В исследовании, проведенном Таджуддином и др., M. Fragrans вызвали значительное увеличение сексуальной активности у самцов мышей (Таджуддин и др., 2003; Таджуддин и др., 2005). Похоже, что это вагинальное соединение может повысить вероятность зачатия за счет увеличения количества половых контактов, в дополнение к своим фитоэстрогенным свойствам, которые могут быть эффективными для индукции овуляции.

В персидской медицине многие препараты от бесплодия используются вагинально, и недавние исследования доказали влияние вагинального меда на слизистую влагалища, микробиоту влагалища, микробиоту матки, облегчение подвижности и продвижение сперматозоидов во влагалище (Abdelhafiz and Muhamad, 2008 ▶) . Начиная с M. Fragrans содержит множество фитоэстрогенов, которые могут быть эффективны в процессе оплодотворения. Поскольку комбинация меда и M. Fragrans используется в персидской медицине в качестве вспомогательного средства для лечения бесплодия (Азамхан, 2008 ▶), это исследование было проведено для изучения эффекта вагинального натурального продукта, изготовленного из меда и 1% экстракта . М.Fragrans (Mace) по успешности IUI.

Материалы и методы

Дизайн исследования

Это клиническое исследование с исторической контрольной группой проводилось с 2016 по 2018 год на бесплодных женщинах-кандидатах на ВМИ, в центре бесплодия Милад при Университете медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран. В группе вмешательства выборка была последовательно проведена у пациентов, которые обратились в центр бесплодия Милад с 2017/9/23 по 2018/7/1 для проведения ВМИ и соответствовали критериям включения.В контрольной группе, независимо от исхода беременности, образцы были последовательно собраны из архива этого центра от пациенток, направленных с 2016/9/22 по 2017/9/22 и соответствующих критериям включения. Затем информация о пациентах была записана. Пациенты были подобраны по возрасту и продолжительности бесплодия между экспериментальной и контрольной группами. Это исследование было одобрено этическим комитетом Университета медицинских наук Мешхеда (IR.MUMS.REC.1395.487) и зарегистрировано в центре регистрации клинических исследований Ирана (IRCT2016111130827N1).В группе вмешательства сначала пациентам разъясняли результаты исследования, а затем пациентов просили подписать форму согласия (если они желают участвовать в исследовании).

Участники

Пациенты были сначала обследованы и оценены гинекологом и направлены к исследователю в Центр бесплодия Милад. Критерии включения включали готовность участвовать, возраст <40 лет, продолжительность бесплодия <15 лет, бесплодие из-за ановуляции, бесплодие из-за мужского фактора и необъяснимое бесплодие, количество сперматозоидов в соответствии с общей функцией подвижности сперматозоидов (TMFS) более 5 миллионов. на мл после подготовки спермы, нормальность гормональных тестов, нормальность матки при гистеросальпингографии и наличие хотя бы одной открытой маточной трубы.

Критерии исключения включали индекс массы тела> 35, неподходящий размер фолликула для введения ХГЧ на 12-14 день и эндометриоз.

Процедура IUI

Протокол ВМИ, который выполняли для обеих групп, был следующим: с 3 по 7 день менструации они получали кломифен (100 мг / день) или (летрозол 5 мг / день) в течение пяти дней, а на 6, 7 дни — и 8, они получили HMG. Доза HMG была скорректирована на основании мониторинга яичников. На 9 ^{-й день} была проведена вагинальная сонография (если диаметр фолликула был менее 12 мм, то они получали ГМГ во второй раз), а в случае фолликула ≥ 18 мм на 12-14 день цикла — 5000 были введены единицы ХГЧ.Затем, через 36 часов, была проведена ВМИ с образцом спермы жены пациента, который был промыт и подготовлен в тот же день. Для поддержки лютеиновой фазы после ВМИ прописывали прогестерон (8% вагинальный гель, один предварительно заполненный аппликатор один раз в день).

Вмешательство

В группе вмешательства, с 7 ^-го дня менструации до дня перед проведением ВМИ, натуральный продукт из меда и 1% экстракта M. Fragrans (Mace) применялся вагинально с помощью аппликатора один раз в день. ночью самой пациенткой.Пациентам также был предоставлен список возможных побочных эффектов продукта. Контрольная группа не получала вагинальный натуральный продукт.

Рандомизация и ослепление

Т.к. контрольная группа выбрана из архива центра бесплодия; Это испытание не было ни рандомизированным, ни слепым.

Препарат

Сбор и извлечение растений

Булава — красная мясистая чаша вокруг мускатного ореха.Растение было проверено ботаником из отдела ботанического исследовательского центра по наукам о растениях в Университете Фирдоуси в Мешхеде, Иран, и Мейс было приготовлено из центра Sobhan Herb в Мешхеде, Иран. Мед высокого качества был приготовлен из Мешхеда, Хорасан Разави, Иран. После приготовления булавы ее измельчали ​​и водный экстракт экстрагировали путем мацерации в воде. Полученный жидкий экстракт измельчали ​​в сублимационной сушилке. Затем измельченный экстракт выдерживали при 2-4 ° C. Все этапы экстракции были выполнены Исследовательским центром пищевых наук и промышленности Мешхеда.

Количество экстракта растений составляло 2% от веса растения.

Приготовление вагинального продукта на травах

Мейс и мед были смешаны вместе до 1% (т.е. каждые 100 г меда были смешаны с 1 г Мейса), и 80-граммовые тюбики были заполнены смесью. Эти этапы были выполнены фармацевтом факультета персидской медицины Университета медицинских наук Мешхеда, Мешхед, Иран. Каждая пробирка содержала 79,2 г меда и 0,8 г экстракта булавы. После заполнения трубочки передавались пациентам вместе с аппликатором для вагинального применения.Дозу этого соединения определяли как один аппликатор на ночь, начиная с 7 ^-го дня менструации и заканчивая днем ​​перед проведением ВМИ. Каждый аппликатор, содержащий 8 г этого продукта, содержал не менее 0,08 г булавы и 7,92 г меда.

Стандартизирующий водный экстракт булавы

Водный экстракт Mace был стандартизирован на основе общего фенола с использованием метода Folin-Ciocalteu (Hosseini et al., 2017). Всего 20 мкл экстракта (10 мг / мл) и галловая кислота (0, 50, 100, 150, 250 и 500 мг / л), используемые в качестве стандарта, были смешаны со 100 мкл реагента Folin-Ciacalteu. и 300 мкл 1 М раствора карбоната натрия.Конечный объем был достигнут 2 мл с использованием деионизированной воды, и через 2 часа оптическое поглощение образцов было измерено спектрофотометром при 765 нм. Затем была построена стандартная кривая для галловой кислоты, и уровень фенольных соединений в экстракте был выражен в миллиграммах галловой кислоты. Общее содержание фенола в экстракте Mace было равно 70,4 мг галловой кислоты на грамм чистого экстракта Mace, а общее содержание фенола в натуральном продукте было равно 0,704 мг галловой кислоты на грамм, исходя из содержания экстракта Maces в продукте.

Микробиологические тесты

Микробиологические тесты были выполнены для продукта, содержащего мед и булаву, в микробиологической лаборатории больницы Гем в Мешхеде на основе стандартного метода фармакопеи США USP32-NF27 (Pharmacopeia, 2004 ▶). Продукт был отрицательным для Escherichia coli , Candida albicans , Staphylococcus aureus , аэробных мезофильных бактерий, плесени, клебсиелл и дрожжей.

Измерения и результаты

Полная история болезни пациентов регистрировалась по прибытии, и исследователь проводил физический осмотр.Были записаны демографические и основные характеристики пациентов, включая возраст пациента, возраст супруга, ИМТ, продолжительность бесплодия, время проведения ВМИ и тип бесплодия с точки зрения первичного или вторичного бесплодия. Диагностические тесты для измерения уровней ФСГ и ЛГ были выполнены всем пациентам на третий день менструального цикла. Кроме того, гинекологом была проведена вагинальная сонография на третий и 9 ^-й -й дни менструального цикла, где было записано количество фолликулов и размер самого большого фолликула.Кроме того, анализ спермы также проводился для супруга пациентов, которые считались нормальными, если у них были следующие характеристики, в соответствии с руководящими принципами Всемирной организации здравоохранения. Объем сперматозоидов ≥1,5 мл, количество сперматозоидов ≥15 миллионов / мл, подвижность сперматозоидов (процент прогрессивной подвижности) ≥32%, морфология сперматозоидов в соответствии со строгими критериями (Tygerberg) ≥4%.

После записи анамнеза и проведения физического обследования, биохимических тестов и сонографии была указана и записана причина бесплодия (женский или мужской фактор, или и то, и другое, или необъяснимое бесплодие).

Первичный результат включал частоту химической и клинической беременности. Через шестнадцать дней после проведения ВМИ определяли уровень βHCG (хорионический гонадотропин человека) в сыворотке с помощью метода ELISA (иммуноферментного анализа). Химическая беременность была подтверждена, если уровень βHCG был ≥25 МЕ / л. Далее, через шесть недель после ВМИ гинекологом в центре лечения бесплодия была проведена вагинальная сонография, где при наличии мешка беременности была подтверждена клиническая беременность. Вторичным результатом были побочные эффекты продукта.

Анкета темперамента была заполнена для всех пациентов в группе вмешательства. Анкета для определения темперамента (Опросник моджахеди Мизадж, MMQ) является стандартной анкетой, утвержденной в Иране в 2014 году, и ее надежность и валидность были подтверждены. Альфа-коэффициент Кронбаха в этой анкете составляет 0,71. Эта анкета содержит 10 пунктов с оценкой от 1 до 3. После суммирования баллов оценка ≤14 считается холодным темпераментом, 15-18 — умеренным темпераментом, а ≥19 — теплым темпераментом (Mojahedi et al., 2014 ▶).

Размер выборки

Поскольку показатель успеха ВМИ в Центре бесплодия Милад составлял около 10%, и учитывая, что вышеупомянутое вмешательство может повысить показатель успеха на 10%, что приведет к успеху на 20% (α = 0,05 и β = 0,2 ), размер выборки в группе вмешательства и контрольной группе был определен как 144 и 288 соответственно. С учетом 10% потерь в группу вмешательства вошли 159 человек. Из-за ограничений доступа к лекарству (натуральному вагинальному продукту) из-за его высокой стоимости и количества пациентов, а также для стабилизации эффективности исследования контрольная группа считалась вдвое большей группой вмешательства.

Статистический анализ

Записанные данные были проанализированы с помощью программного обеспечения SPSS (версия 16). Для представления данных использовались методы описательной статистики, включая центральные индексы, распределение и частотное распределение. Независимый t-критерий использовался для сравнения количественных переменных между двумя группами, если распределение данных было нормальным; в противном случае использовали тест Манна-Уитни. Для сравнения качественных переменных между двумя группами использовались критерий хи-квадрат и, при необходимости, точный критерий Фишера.Модель логистической регрессии использовалась для корректировки смешивающих переменных. Во всех расчетах статистически значимым считалось p <0,05 .

Результаты

В этом испытании в группу вмешательства были включены 159 субъектов. Пятьдесят четыре субъекта из 159 были исключены по разным причинам (23 субъекта из-за неподходящего фолликула, 7 из-за неподходящих сперматозоидов и 14 из-за нежелания продолжать этапы ВМИ, 9 субъектов из-за неиспользования продукта и 1 субъект из-за возникновения вагинального зуда и жжения).Наконец, 105 человек были проанализированы как группа вмешательства. В контрольной группе собрана и исследована информация о 288 пациентах. Из контрольной группы 28 пациентов были исключены из-за неполной информации, а 260 человек были проанализированы как контрольная группа ().

Блок-схема исследования

Средний возраст пациентов в экспериментальной и контрольной группах составлял 28,3 ± 4 и 28,6 ± 5 лет, соответственно, и не было существенной разницы между двумя группами (p = 0.619).

Средняя продолжительность бесплодия в экспериментальной и контрольной группах составляла 5,36 ± 3 и 4,7 ± 3 года, соответственно, и не было значительной разницы между двумя группами ().

Таблица 1

Основные характеристики пациентов

± 4,8 27,3 9027 18 (15-26)

	Вмешательство	Контроль	Значение P
Возраст пациента (лет) a	0.619
Возраст мужа (лет) a	32,20 ± 5,3	32,28 ± 5	0,875
ИМТ (кг / м2) a	25 ± 3,5	0,139
Продолжительность бесплодия (лет) a	5,36	4,7 ± 3	0,052
Время IUI b Первое		Третий Четвертый	45 (42.9%) 36 (34,3%) 15 (14,3%) 9 (8,5%)	114 (43,8%) 92 (35,4%) 46 (17,7%) 8 (3,1%)	0,627
Вид бесплодия c
Первичное Среднее	77 (73,3%) 28 (26,7%)	200 (77,2%) 603 0,431
причина бесплодия c
Женский фактор Мужской фактор Оба (женский и мужской) Неизвестно	29 (27.6%) 29 (27,6%) 11 (10,5%) 36 (34,3%)	59 (22,8%) 71 (27,4%) 19 (7,3%) 110 (42,5%)	0,413
FSH (миль / м) d	6,2 (2-19)	6,37 (0,01-28,2)	0,417
LH (miu / m) d	4,8 (0,1- 26)	4,9 (1,1-26,8)	0,562
Анализ спермы c , e
Объем Count Motility 903.2%) 105 (100%) 88 (83,8%) 101 (96,2%)	247 (95,4%) 258 (99,6%) 208 (80%) 233 (89,6%)	0,958 0,524 0,400 0,060
Количество фолликулов d	4 (1-14)	5 (1-15)	<0,01
Максимальный размер фолликула (мм) d	18 (15-25)	0,507
Толщина эндометрия (мм) a	6.9 ± 1,5	7,2 ± 1,6	0,222
Лекарственные средства c
летрозол кломифен	60 (4527102) 90,27% %) 158 (60,8%)	0,003

Не было доказательств статистически значимых различий между двумя группами (вмешательство и контроль) с точки зрения химической беременности (OR = 1,048, CI = 0,538-2,04, P = 0.890) и клинической беременности (OR = 1,120, CI = 0,561–2,23, P = 0,748) после корректировки мешающих переменных, таких как количество фолликулов и типы препаратов, используемых для стимуляции овуляции (летрозол или кломифон). Другие демографические и базовые переменные представлены в.

Частота химической беременности (CHPR) в экспериментальной и контрольной группах составила 18,1% и 15,4%, соответственно, без существенной разницы между ними; однако уровень химической беременности был выше в группе вмешательства (p = 0.524). Частота клинической беременности (СЛР) составила 15,2% в группе вмешательства и 13,8% в группе контроля, которые статистически не различались; однако СЛР была выше (p = 0,731) в группе вмешательства ().

Результаты в группах вмешательства и контроля (A: частота химической беременности; B: частота клинической беременности).

CHPR: Показатель химической беременности; и СЛР: клиническая частота наступления беременности.

Хотя частота различных причин бесплодия была одинаковой в экспериментальной и контрольной группах, в экспериментальной группе большинство субъектов, забеременевших (как химически, так и клинически), имели бесплодие с женским фактором.С другой стороны, в контрольной группе большинство беременностей (химических и клинических) произошло по необъяснимым причинам (). В группе вмешательства сравнивали общий темперамент пациенток в группах с положительной и отрицательной химической беременностью; большинство испытуемых с положительной химической беременностью продемонстрировали теплый характер, но не было существенной разницы между положительными и отрицательными группами химической беременности p = 0,306).

Таблица 2

Сравнение успешности химической и клинической беременности из-за различных причин бесплодия в группе вмешательства

N (%)

		Причина бесплодия
Женский фактор			Мужской фактор	Оба (женский и мужской)	Неизвестно	P *
CHPR	Положительный N (%)	7 (36.8)	3 (15,8)	3 (14,8)	6 (31,6)	0,464
	Отрицательный N (%)	22 (25,6)	26 (30,2)	8 (9,3)	30 (34,9)
СЛР	Положительный N (%)	7 (43,8)	3 (18,8)	3 (18,8)	3 (18,8)	0,505
	22 (24,7)	26 (29,2)	8 (9)	33 (37.1)

Далее, в группе вмешательства сравнивались группы положительной и отрицательной клинической беременности по общему темпераменту; у пациенток с положительной клинической беременностью был вспыльчивый характер, но не было существенной разницы между группами положительной и отрицательной клинической беременности по общему темпераменту (p = 0,144) ().

Таблица 3

Сравнение общего темперамента (mizajaam) между двумя группами частота положительных и отрицательных беременностей в группе вмешательства

9057

Группа		Теплый	Холодный	Умеренный	P *
CHPR	Положительный N (%)	8 (42.1)	5 (26,3)	6 (31,6)	0,306
	Отрицательный N (%)	20 (24,1)	23 (27,7)	40 (48,2)
Положительный N (%)	7 (43,8)	3 (18,8)	6 (37,5)	0,144
Отрицательный N (%)	21 (24,4)	25 (29,1)	40 (46,5)

В группе вмешательства общий темперамент сравнивался между группами положительной и отрицательной химической беременности, где большинство субъектов с положительной химической беременностью демонстрировали теплый темперамент, но не было существенной разницы между положительной и отрицательной химической беременностью. группы беременностей (p = 0.306). Кроме того, в группе вмешательства сравнивались группы положительной и отрицательной клинической беременности по общему темпераменту, где группы с положительной клинической беременностью были вспыльчивыми, но не было существенной разницы между группами положительной и отрицательной клинической беременности по общему темпераменту ( р = 0,144) ().

Наблюдались очень ограниченные побочные эффекты; о зуде и жжении сообщил пациент, который в анамнезе употреблял большое количество острых приправ, который был исключен из группы вмешательства.

Обсуждение

Настоящее исследование является первым исследованием, в котором оценивалась эффективность натурального вагинального продукта, содержащего булаву и мед, у пациенток-кандидатов на ВМИ. Эффект Mace, как фитоэстрогенного соединения наряду с медом, вагинально сочетающимся с индукцией овуляции, ранее не оценивался у бесплодных пациентов.

Результаты показали, что частота химической и клинической беременности в группе, получавшей вагинальный продукт, была выше по сравнению с контрольной группой (18.1 против 15,4% для химической беременности и 15,2 против 13,8% для клинической беременности, соответственно), но это различие не было статистически значимым. Это увеличение частоты успеха ВМИ произошло после семи дней использования этого вагинального продукта. Возможно, использование этого вагинального продукта в нескольких последовательных циклах может дать положительный результат. Поскольку в исследовании, проведенном Abdelhafiz et al. при использовании вагинальных продуктов, содержащих мед, маточное молочко и пчелиный хлеб, в течение 2 недель и трех последовательных циклов частота наступления беременности значительно увеличилась по сравнению с контрольной группой (Abdelhafiz and Muhamad, 2008 ▶).Поскольку исследование, проведенное Abdelhafiz et al. было единственным клиническим испытанием, аналогичным нашему, кажется, что короткая продолжительность лечения (одна неделя против двух недель) и непрекращающееся лечение (один цикл против трех) были среди причин, из-за которых показатель успеха препарата снизился в этом исследовании.

В нашем исследовании в контрольной группе количество пациентов, получавших кломифен, было больше, чем летрозол, что значительно отличалось от группы вмешательства. В различных исследованиях изучалось влияние этих двух препаратов на фертильность (Roque et al., 2015, Ганн и Бейтс, 2016). Похоже, что влияние кломифена и летрозола на клинические исходы и коэффициент фертильности у женщин с необъяснимым бесплодием и синдромом поликистозных яичников ( СПКЯ ) одинаково (Ghahiri et al., 2016 ▶, Eskew et al., 2019 ▶). В нашем исследовании вероятность химической беременности и клинической беременности в экспериментальной и контрольной группах после корректировки мешающих переменных (например, количества фолликулов и типов препаратов), используемых для стимуляции овуляции (летрозол или кломифон)) не имела каких-либо существенных различий.

Различные исследования показали, что цервикальная инфекция, вызванная грамотрицательными бактериями, может отрицательно влиять на вспомогательные репродуктивные технологии (Salim et al., 2002; Moreno and Franasiak, 2017). Более того, удаление цервикальной слизи перед IUI, как было показано, увеличивает коэффициент фертильности вдвое с возможным механизмом удаления микробов, загрязняющих кончик катетера, что вызывает нарушение имплантации. Однако наличие цервикальной слизи не позволяет сперматозоидам вернуться во влагалище после оплодотворения.Таким образом, увеличивается уровень сперматозоидов в маточной трубе. Таким образом, при вагинальном применении меда можно добиться положительного воздействия на фертильность без физического удаления вагинальной слизи за счет улучшения микробиоты. Хотя различные исследования показали, что мед улучшает микробиоту матки (Brudzynski and Sjaarda, 2015; Seifi et al., 2016), длительное потребление этого продукта может повысить эффективность лечения бесплодия, поскольку в исследовании, проведенном Абдельхафизом , и другие., использование вагинального продукта, содержащего мед, в течение 2 недель дало положительные результаты (Abdelhafiz and Muhamad, 2008 ▶).

В интервенционной группе 43,7% забеременевших имели женское бесплодие, а в контрольной группе этот показатель составил 24,7%. Хотя эта разница не была статистически значимой, кажется, что вагинальный продукт может иметь большее влияние на женские причины. Другими словами, вагинальное применение этого продукта, влияя на нормальную флору влагалища или его микробиоту, может привести к успешному ВМИ у лиц с женским бесплодием.С другой стороны, результаты исследования, проведенного Абдельхафизом и др., Показали, что вагинальный продукт, содержащий мед, маточное молочко и цветочную пыльцу, был эффективен у бесплодных пациентов с мужскими причинами за счет увеличения подвижности сперматозоидов во влагалище без какой-либо ВМИ (Абдельхафиз и Мухамад , 2008 ▶).

Учитывая общий темперамент, большинство беременных в группе вмешательства имели теплый темперамент, в то время как у лиц с холодным темпераментом было минимальное количество беременностей (42 против 26% для? И? Соответственно).Этот результат чем-то похож на результаты, полученные Sohrabvand et al; они сообщили, что наиболее распространенным темпераментом в их исследовании, которое проводилось на бесплодных женщинах, обращающихся в клинику по лечению бесплодия, был холод (Sohrabvand et al., 2014). Поскольку темперамент нашего травяного продукта теплый, кажется, что непродолжительность употребления наркотиков является одной из причин снижения эффективности ВМИ у людей с холодным темпераментом по сравнению с людьми с теплым темпераментом. Возможно, если вагинальный продукт использовался в течение более длительного времени в течение нескольких последовательных циклов до того, как IUI и образ жизни и порядок еды также были скорректированы с учетом темперамента, этот продукт мог бы иметь большее влияние на успех IUI, разогревая темперамент.

Сильными сторонами этого исследования было изучение влияния продукта на бесплодие в случаях с женскими, мужскими и необъяснимыми факторами. С другой стороны, Abdelafiz и др. Изучали людей с бесплодием только по мужскому фактору, и эффект препарата не оценивался в случаях других причин бесплодия. Слабым местом этого исследования было ограничение количества пациентов, которые вызывали, чтобы стабилизировать мощность исследования. Таким образом, в настоящем исследовании историческая контрольная группа рассматривала дважды группу вмешательства.Таким образом, в текущем исследовании рандомизация и ослепление были невозможны. Другим слабым местом этого исследования была короткая продолжительность применения лекарств. Кроме того, другим ограничением исследования было отсутствие средств для скрининга микробиоты матки до и после вмешательства.

Принимая во внимание увеличение частоты успеха ВМИ в группе вмешательства, хотя и незначительное, следует провести дальнейшие исследования с более продолжительным лечением, по крайней мере, в течение двух недель в каждом цикле фертильности и в течение не менее трех циклов.Кроме того, пероральное употребление этого соединения в то же время, что и вагинальное применение, может улучшить реакцию на лечение, учитывая пероральный эффект фитоэстрогенов на индукцию овуляции.

Выражение признательности

Это исследование является частью результатов докторской диссертации по персидской медицине (IR.MUMS.REC.1395.487), выполненной в Университете медицинских наук Мешхеда. Поэтому мы благодарим вице-президента Университета по исследованиям, а также выдающихся профессоров, которые помогли нам в этом исследовании.

Конфликт интересов

В этом исследовании нет конфликта интересов.

Ссылки

• Abdelhafiz AT, Muhamad JA. Перикоитальный перикоитальный интравагинальный пчелиный мед и маточное молочко для лечения мужского бесплодия. Int J Gynaecol Obstet. 2008. 101: 146–149. [PubMed] [Google Scholar]
• Абделькадер А.М., Йе Дж. Потенциальное использование внутриматочной инсеминации в качестве основного метода лечения бесплодия: обзор медицинских учреждений с ограниченными технологиями. Obstet Gynecol Int.2009; 2009: 584837. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Ахонди М.М., Камали К., Ранджбар Ф., Ширзад М., Шафегхати С., Бехджати Ардакани З., Гуджани А., Парсеян М. Распространенность первичного бесплодия в Иране в 2010 г. Иран Дж. Здравоохранение. 2013; 42: 1398–1404. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Аллахбадия, Г. Н. Внутриматочное осеменение: пересмотр основ. J Obstet Gynaecol India. 2017; 67: 385–392. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Азамхан, М.Exir Azam. Тегеран: Институт истории медицины; 2008. С. 704–753. [Google Scholar]
• Brudzynski K, Sjaarda C. Гликопротеины меда, содержащие антимикробные пептиды, Jelleins из основного протеина маточного молочка 1, отвечают за литическую и бактерицидную активность клеточной стенки меда. PLoS One. 2015; 10: e0120238. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Cabry-Goubet R, Scheffler F, Belhadri-Mansouri N, Belloc S, Lourdel E, Devaux A, Chahine H, De Mouzon J, Copin H.Влияние типов гонадотропинов и показаний на успех гомологичной внутриматочной инсеминации: исследование из 1251 цикла и обзор литературы. Biomed Res Int. 2017; 2017: 3512784. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Campisciano G, Florian F, D’Eustacchio A, Stankovic D, Ricci G, De Seta F. Субклинические изменения шейно-вагинального микробиома у женщин с идиопатическим бесплодием. J. Cell Physiol. 2017; 232: 1681–1688. [PubMed] [Google Scholar]
• Чекер Р., Чаттерджи С., Шарма Д., Гупта С., Варияр П., Шарма А.Иммуномодулирующее и радиозащитное действие лигнанов, полученных из свежего мускатного ореха (Myristica Fragrans), на спленоциты млекопитающих. Int Imp. 2008; 8: 661–669. [PubMed] [Google Scholar]
• Чиу С., Ван Т., Бельски М., Абурашед Э.А. Выделение, очистка и характеристика фенилпропаноидов и фенольных компонентов ядра мускатного ореха (Myristica Fragrans) под контролем ВЭЖХ Nat Prod Commun. 2016; 11: 483–488. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Эль-Шештави Р.И., Эль-Бадри Д.А., Гамаль А., Эль-Наттат В.С., Алмаати AMA.Натуральный мед как криопротектор для улучшения параметров спермы арабских жеребцов после размораживания. Азиатский Pac J Reprod. 2016; 5: 331–334. [Google Scholar]
• Эскью А.М., Бедрик Б.С., Харди А., Столл CRT, Колдиц Г.А., Туули М.Г. Летрозол в сравнении с цитратом кломифена при необъяснимом бесплодии: систематический обзор и метаанализ. Obstet Gynecol. 2019; 3: 437–444. [PubMed] [Google Scholar]
• Фахрилдин М.Б., Алсаади РА. Добавление меда в среду для замораживания спермы улучшает параметры спермы человека после размораживания.J Family Reprod Health. 2014; 8: 27–31. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Ghahiri A, Mogharehabed N, Mamourian M. Летрозол как средство первой линии лечения бесплодных женщин с синдромом поликистозных яичников (СПКЯ) по сравнению с цитратом кломифена: клиническое испытание. Adv Biomed Res. 2016; 5: 6. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Grembecka M, Szefer P. Оценка качества меда и продуктов пчеловодства на основе их минерального состава с использованием многомерных методов.Оценка состояния окружающей среды. 2013; 185: 4033–4047. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Grossi E, Castiglioni S, Moscheni C, Antonazzo P, Cetin I, Savasi VM. Уровни магния и кальция в сыворотке крови у бесплодных женщин во время цикла репродуктивной помощи. Magnes Res. 2017; 30: 35–41. [PubMed] [Google Scholar]
• Хоссейни А., Моллазаде Х., Амири М.С., Садегния Х.Р., Горбани, 2017. Biomed Pharmacother. Влияние стандартизированного экстракта корня Rheum turkestanicum Janischew на диабетические изменения в почках, печени и сердце у крыс с диабетом, вызванным стрептозотоцином; 86: 605-611.[PubMed] [Google Scholar]
• Ирани М., Чоу С., Китинг Д., Старейшина С., Розенвакс З., Палермо Г. Оптимизация лечения бесплодия первой линии. Гинекол Эндокринол. 2018; 20: 1–5. [PubMed] [Google Scholar]
• Каземиджалисех Х., Рамезани Теграни Ф., Бехбуди-Гандевани С., Хоссейнпанах Ф., Халили Д., Азизи Ф. Распространенность и причины первичного бесплодия в Иране: популяционное исследование. Glob J Health Sci. 2015; 7: 226–232. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Lavaf M, Simbar M, Mojab F, Alavi Majd H, Samimi M.Сравнение эффектов меда и крема фенитоина (PHT) на интенсивность боли и заживление ран после эпизиотомии у нерожавших женщин. J Complement Integr Med. 2017; 15: 28981445. [PubMed] [Google Scholar]
• Моджахеди М., Насери М., Майдзаде Р., Кешаварз М., Эбадини М., Назем Э. Оценка надежности и достоверности опросника мизадж: новая шкала самооценки в традиционной иранской медицине. Иранский Красный Полумесяц, Med J. 2014; 16: e15924. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Monraisin O, Chansel-Debordeaux L, Chiron A, Floret S, Cens S, Bourrinet S.Оценка практики внутриматочного оплодотворения: годичное проспективное исследование в семи французских центрах технологий вспомогательной репродукции. Fertil Steril. 2016; 105: 1589–1593. [PubMed] [Google Scholar]
• Moreno I, Codoner FM, Vilella F, Valbuena D, Martinez-Blanch JF, Jimenez-Almazan J. Доказательства того, что микробиота эндометрия влияет на успех или неудачу имплантации. Am J Obstet Gynecol. 2016; 215: 684–703. [PubMed] [Google Scholar]
• Морено И., Франасиак Дж. М.. Микробиота эндометрия — новый игрок в городе.Fertil Steril. 2017; 108: 32–39. [PubMed] [Google Scholar]
• Pharmacopeia U. Тест на бактериальный эндотоксин. USP32 / NF27: Фармакопея США и Национальный формуляр. 2004; 2004: 93–96. [Google Scholar]
• Ранджбар А.М., Садехпур О., Ханави М., Шамс Ардекани М.Р., Молудиан Х., Хаджимахмуди М. Влияние процесса удаления шлака на некоторые физико-химические параметры меда. Iran J Pharm Res. 2015; 14: 657–662. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Салим Р., Бен-Шломо И., Колоднер Р., Кенесс И., Шалев Э.Бактериальная колонизация шейки матки и успешность вспомогательной репродукции: результаты проспективного обследования. Hum Reprod. 2002; 17: 337–340. [PubMed] [Google Scholar]
• Сейфи Надер Голи З., Нахиди Ф., Сафеян А.Р., Джавадзаде Й., Этераф Оскуи Т. Влияние вагинального геля с медом и вагинального крема с клотримазолом на нормальную муку во влагалище у женщин с кандидозным вагинитом. ИДЖОГИ. 2016; 19: 32–39. [Google Scholar]
• Шахин А.Ю., Исмаил А.М., Захран К.М., Махлуф А.М. Добавление фитоэстрогенов к индукции кломифена у пациентов с необъяснимым бесплодием — рандомизированное исследование.Репродукция Биомед онлайн. 2008; 16: 580–588. [PubMed] [Google Scholar]
• Шахин А.Ю., Мохаммед С.А. Добавление фитоэстрогена Cimicifugae Racemosae к циклам индукции кломифена с синхронизированным половым актом при синдроме поликистозных яичников улучшает результаты цикла и частоту наступления беременности — рандомизированное исследование. Гинекол Эндокринол. 2014; 30: 505–510. [PubMed] [Google Scholar]
• Сохрабванд Ф., Назем Э., Танзаз М., Кешаварз М., Хашем Дабагян Ф., Никбахт Насрабади А., Гошехгир А., Биос С., Мокаберинеджад Р.Исследование личного и маточного юмора у бесплодных женщин, обращенных в больницу Вали-Э-Ас в Тегеране, Иран, в 2012 году. IJOGI. 2014; 17: 10–19. [Google Scholar]
• Таджуддин, Ахмад С., Латиф А., Касми И.А. Афродизиак 50% спиртовых экстрактов Myristica Fragrans Houtt (мускатный орех) и Syzygium aromaticum (L) Merr & Perry (гвоздика) у самцов мышей: сравнительное исследование. BMC Complement Altern Med. 2003; 3: 6. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Таджуддин, Ахмад С., Латиф А., Касми И.А., Амин К.М.Экспериментальное исследование улучшения сексуальной функции Myristica Fragrans Houtt (мускатный орех) BMC Complement Altern Med. 2005; 5: 16. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• USDA N. 2007. База данных PLANTS (http://plants.usda.gov, 6 августа 2007 г.). Национальный центр данных по растениям. Батон-Руж, 2007: 70874-74490.
• Veltman-Verhulst SM, Hughes E, Ayeleke RO, Cohlen BJ. Внутриматочная инсеминация при необъяснимой недостаточности фертильности. Кокрановская база данных Syst Rev.2016; 2: CD001838. [PubMed] [Google Scholar]
• Заид С.С., Осман С., Кассим Н.М.Потенциальный защитный эффект меда Туаланг на токсичность яичников, вызванную BPA, у крыс препубертатного возраста. BMC Complement Altern Med. 2014; 14: 509. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Заид С.С., Сулейман С.А., Сираджудин К.Н., Осман Н.Х. Влияние меда Туаланг на женские репродуктивные органы, большеберцовую кость и гормональный фон у крыс с удаленными яичниками — животная модель менопаузы. BMC Complement Altern Med. 2010; 10: 82. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Zhang C, Qi X, Shi Y, Sun Y, Li S, Gao X.Оценка содержания микроэлементов в булаве (Myristica Fragrans Houtt) и их влияние на рак шейки матки, вызванный метилхолантреном. Biol Trace Elem Res. 2012; 149: 431–434. [PubMed] [Google Scholar]

Домашние средства для естественного избавления от кист и миомы!

У многих женщин кисты и миомы появляются во время вынашивания ребенка. Миомы, как правило, развиваются в женской репродуктивной системе и известны как миомы матки или фибромы. Это твердые и компактные опухоли с гладкомышечными клетками и волокнистой соединительной тканью.Кисты, с другой стороны, представляют собой мешочки, заполненные жидкостью, которые развиваются внутри или вне яичников.

В большинстве случаев кисты и миомы имеют доброкачественный и незлокачественный характер.

Вот несколько эффективных домашних средств от них:

Лимонный сок

Сок, извлеченный из лимона, содержит лимонную кислоту, которая является отличным антиоксидантом и действует непосредственно против опухоли матки. Возьмите две чайные ложки лимонного сока и одну чайную ложку пищевой соды и смешайте ее со стаканом воды.Для достижения наилучших результатов продолжайте пить это регулярно.

Чеснок

Он богат витамином C и B6, которые эффективны для баланса женских гормонов. Его антиоксидантные свойства излечивают миому и предотвращают ее дальнейший рост. Чеснок удаляет катаболические отходы из полости таза, ткани матки и яичников, тем самым обращая вспять рост миомы. Регулярно жуйте зубчики чеснока и добавляйте их в пищу.

Имбирь

Стимулируя работу желез внутренней секреции, имбирь помогает телу достичь гормонального баланса.В результате прекращается избыточное поступление эстрогена и останавливается рост клетчатки. Вы можете съесть тертый свежий имбирь или принять капсулу имбиря.

Куркума

Хорошо лечит ряд недугов, и миома — одна из них. Вы можете есть сырую куркуму или принимать капсулы с куркумой. Вы также можете добавить куркуму в пищу. Наполните кастрюлю водой, добавьте в нее немного куркумы и кипятите смесь в течение 15 минут. Как только смесь остынет, выпейте ее.

Мед

Это эффективный способ лечения кисты яичников. Смешайте столовую ложку меда и столовую ложку пыльцы со стаканом воды. Добавьте к нему сок алоэ вера и выпейте.

Свекла

Он содержит соединение под названием бетацианин, которое помогает печени выводить токсины из организма. Щелочная природа свеклы также помогает сбалансировать кислотность в организме. Это помогает уменьшить симптомы кисты яичника. Приготовьте смесь свежего свекольного сока с одной столовой ложкой геля алоэ вера и черной патоки.Продолжайте пить эту смесь, пока симптомы миомы не уменьшатся.

Оливковое масло

Блокирует кислород, тем самым предотвращая рост миомы. Когда уровень эстрогена находится в желаемом диапазоне, нет риска миомы. Возьмите столовую ложку оливкового масла и лимонного сока, смешайте их со стаканом воды и выпейте натощак, первым делом с утра.

Яблочный уксус

Это отличный способ лечения кист и миомы.Возьмите две столовые ложки яблочного уксуса и смешайте их со стаканом воды. Вы также можете добавить в него одну столовую ложку пищевой соды. Для достижения наилучших результатов регулярно пейте этот раствор.

Рыба

Омега-3 жирные кислоты, присутствующие в рыбе, очень эффективны для сокращения миомы. Выбирайте холодноводную рыбу, такую ​​как тунец, лосось, сельдь и сардины, чтобы избавиться от миомы матки.

Касторовое масло

Это масло — традиционное средство для лечения кист и миомы.Помимо очищения организма от лишних тканей и токсинов, он стимулирует кровообращение и лимфатическую систему, что помогает уменьшать и растворять кисты. Нагрейте касторовое масло и переложите его в миску. Смочите чистую мочалку в масле, сложите ткань и приложите ее к области живота. Накройте ткань полиэтиленовой пленкой и накройте старым полотенцем. Теперь поставьте на него грелку и оставьте на полчаса. Для достижения наилучших результатов повторяйте процесс три раза в неделю и продолжайте эту практику в течение трех месяцев.

Домашние средства отлично подходят, когда кисты и миомы не слишком серьезны, но если боль выходит из-под контроля, желательно проконсультироваться со специалистом. Назначьте встречу с экспертами в больницах Apollo Spectra, чтобы получить все факты и сделать осознанный выбор в отношении дальнейших действий.

Гормон стресса и репродуктивная система в ответ на добавку меда в сочетании с различной интенсивностью прыжковых упражнений у самок крыс

Это исследование было проведено для определения влияния 8-недельного приема меда в сочетании с различной интенсивностью прыжков на кортизол, прогестерон, эстрадиол в сыворотке крови. и репродуктивные органы.Восемьдесят четыре 9-недельных самок крыс были разделены на 7 групп: исходный контроль (), сидячая группа (C), 20 и 80 прыжков в день (,), мед (H) и комбинированный мед с 20 и 80 прыжками. в день (,) группы. Прыжки выполнялись 5 дней в неделю, а мед давали в дозе 1 г / кг веса тела в день в течение 7 дней в неделю. Уровень кортизола в сыворотке был выше и по сравнению с C. Уровень кортизола в сыворотке был значительно ниже по сравнению с. Уровни прогестерона в сыворотке были значительно ниже и по сравнению с C.Однако уровни прогестерона в сыворотке были значительно выше и по сравнению с и. Относительный вес матки был значительно больше по сравнению с C и, соответственно. Не было значимой разницы в уровне эстрадиола и относительной массе яичников среди всех групп. Таким образом, мед оказал положительное влияние на снижение уровня кортизола и повышение уровня прогестерона, вызванное прыжковыми упражнениями разной интенсивности у самок крыс.

1.Введение

Несмотря на значительную пользу для здоровья, обеспечиваемую физической активностью и физическими упражнениями, в нескольких исследованиях сообщалось, что женщины, занимающиеся физическими упражнениями большого объема, могут сталкиваться с проблемами репродуктивных расстройств и остеопороза [1–4]. Было показано, что продолжительная физическая активность сопровождается нарушением системы гипоталамус-гипофиз и яичников (HPO) и приводит к нарушению пульсации гонадотропин-рилизинг-гормона (GnRH). Это нарушение ГнРГ сопровождается увеличением длины фолликулярной фазы и снижением секреции лютеиновой фазы у животных [5] и человека [6].Высокий уровень кортизола в сыворотке крови из-за физиологического стресса, вызванного физическими упражнениями, может быть вероятным фактором подавления пульсации гонадотропина у спортсменок [7, 8]. Низкая доступность энергии, которая описывается как потребление энергии с пищей за вычетом затрат энергии на упражнения, также является важным фактором, приводящим к нарушению HPO и гипоэстрогении у спортсменок [3, 9]. Продольное исследование, проведенное Williams et al. (2001) [10] предоставили убедительные доказательства роли низкой доступности энергии в развитии аменореи, вызванной физическими упражнениями, у обезьян.

В нескольких предыдущих исследованиях сообщалось, что большой объем упражнений в зависимости от интенсивности и продолжительности может повысить выработку активных форм кислорода (АФК), продуцируемых метаболическими и физиологическими процессами, которые могут вызывать клеточные повреждения, такие как повреждение липидов, ингибирование синтеза белка и истощение АТФ. [11–13]. Кроме того, сообщалось о физиологических и патогенетических эффектах АФК на репродуктивную систему [14]. Недавнее исследование показало, что 8 недель интенсивных тренировок на велосипеде значительно увеличили цитокины семенной плазмы, биомаркеры семенного окислительного стресса, такие как АФК и малоновый диальдегид (МДА), и снизили уровни семенных антиоксидантов супероксиддисмутазы (SOD), каталазы, общей антиоксидантной способности (TAC). ) и параметры спермы у велосипедистов-мужчин [15].Антиоксидантные ферменты, такие как каталаза, супероксиддисмутаза и глутатионпероксидаза, и многочисленные неферментативные антиоксиданты, включая витамины A, E и C, глутатион и флавоноиды, являются поглотителями свободных радикалов, которые могут уменьшать образование и нейтрализовать свободные радикалы [14, 16 , 17]. Также было показано, что добавление аскорбиновой кислоты в качестве неферментативного антиоксиданта может вызывать положительные эффекты в улучшении стероидного генеза у пациентов с дефицитом лютеиновой фазы в анамнезе [17].

Мед как природный комплекс сахаров традиционно используется для достижения терапевтического эффекта.Мед содержит углеводы, такие как глюкоза, фруктоза, сахароза и раффиноза, ферменты, флавоноиды, антиоксиданты, минералы, органические кислоты, белки, фенольные кислоты и витамины, такие как витамин C и витамин E [18]. Мед Туаланг — это дикий мультифлоральный мед из тропических лесов Малайзии с промежуточным гликемическим индексом (65 ± 7) [19] и содержит фенольные соединения, которые показали хорошую антиоксидантную активность [20]. В исследовании, проведенном на велосипедистах, добавление меда показало значительно меньшее повышение АФК и MDA в семенной жидкости, а также значительно меньшее снижение параметров спермы после длительных интенсивных тренировок на велосипеде у мужчин.Результаты этого исследования показали, что в ответ на добавление меда SOD, каталаза и TAC в семенной плазме велосипедистов значительно увеличились после упражнений по сравнению с исходными значениями. Авторы предположили, что возможно, что добавка меда будет эффективна для снижения цитокинов семенной плазмы и биомаркеров окислительного стресса, а также повышения уровня антиоксидантов в семенной жидкости и, вероятно, будет связана с улучшением сперматогенеза и фертильности у людей [15].В предыдущем исследовании на животных, проведенном Zaid et al. [21], введение меда Туаланг оказало положительное влияние на увеличение веса матки и толщины эпителия влагалища у крыс с удаленными яичниками. Кроме того, недавние исследования показали, что мед может вызывать защитный эффект против вызванных сигаретным дымом нарушений функций яичек и низкого уровня тестостерона у крыс, частично благодаря своим антиоксидантным свойствам [22, 23].

Однако до настоящего времени не проводилось исследований по изучению преимуществ меда для защиты от неблагоприятного воздействия на уровень гормона стресса и женской репродуктивной системы, вызванного большим объемом физической активности.Более того, мы предположили, что мед как источник энергии с антиоксидантными свойствами может играть защитную роль против неблагоприятных эффектов, вызванных физическими упражнениями на гормон стресса и женскую репродуктивную систему. Поэтому целью этого исследования было изучить влияние добавок меда в сочетании с различной интенсивностью прыжковых упражнений, то есть низкой и высокой интенсивностью, на гормон стресса, репродуктивные гормоны и вес репродуктивных органов у крыс.

1.1. Животные

Восемьдесят четыре самки крысы Sprague-Dawley в возрасте 9 недель со средней начальной массой тела 191.3 ± 13,4 г были получены из Центра исследований и обслуживания животных, Universiti Sains Malaysia (USM). Протокол эксперимента был одобрен Комитетом по этике животных, USM (USM / Animal Ethics Approval 2011 / [71] [325]).

1.2. Группировка животных

Крысы были случайным образом разделены на 7 экспериментальных групп по 12 крыс в каждой группе: исходная контрольная группа с крысами, которых умерщвляли в возрасте 9 недель в начале исследования (C ₀ ), сидячая группа без добавления меда и упражнений (активность в свободной клетке) в течение 8 недель (C), прыжковые упражнения низкой интенсивности с 20 прыжками в день 5 дней в неделю в течение 8 недель (), прыжковые упражнения высокой интенсивности с 80 прыжками в день в течение 5 дней в неделя в течение 8 недель (), добавление меда в течение 7 дней в неделю в течение 8 недель (H), низкая интенсивность 20 прыжков в день в течение 5 дней в неделю в сочетании с добавлением меда в течение 8 недель () и высокая интенсивность 80 прыжков в день день в течение 5 дней в неделю в сочетании с добавлением меда в течение 8 недель ().

1.3. Влагалищный мазок и измерение массы тела

В начале и в конце этого исследования был выполнен мазок из влагалища для подтверждения фазы диэструса у крыс для стандартизации гормональной фазы. Влагалищный секрет каждой крысы собирали пластиковой пипеткой, заполненной 10 мкл л физиологического раствора (NaCl 0,9%), вставляя кончик пипетки во влагалище крысы, а затем неокрашенные материалы наблюдали под световым микроскопом при 100-кратном увеличении. Начальный и конечный вес тела измеряли с точностью до нуля.1 г с использованием весов для взвешивания тела (Navigator, OHAUS Corporation, N2B110, Швейцария).

1,4. Добавка меда

Добавка меда Туаланг давалась крысам в дозе 1 г на кг массы тела в день через желудочный зонд в течение 7 дней в неделю. Крыс, получавших комбинированный мед с группами прыжков (и), кормили медом за 30 минут до тренировки с прыжками. Дозировка меда рассчитывалась исходя из массы тела крысы каждые две недели [24].

1.5. Программа тренировок

Протокол тренировки прыжков в этом исследовании был основан на предыдущем исследовании [24], с 5 днями в неделю, которое состояло из 20 или 80 прыжков в день в течение 8 недель. Вкратце, каждую крысу в группах прыжковых упражнений помещали на дно специально сконструированного деревянного ящика размером 30,5 × 30,5 см и 40 см в длину, ширину и высоту, соответственно. Прыжковое упражнение инициировалось подачей электрического тока на проводной пол (электрическую сеть) бокса через стимулятор.При стимуляции каждая крыса спрыгивала с пола ящика и ловила передними лапами верхний край ящика. Затем крысу немедленно возвращали на пол бокса, чтобы повторить процедуру. Время, необходимое для прыжка, составляло около 4 секунд. После нескольких дней обучения крысы прыгали без электростимуляции. Крыс в группах, ведущих малоподвижный образ жизни, также обрабатывали во время исследования без каких-либо электрических стимулов, имитирующих стресс, вызванный манипуляциями.

1,6. Сбор крови и репродуктивных органов и измерения

После 8 недель экспериментального периода крыс анестезировали, лежа в течение 2-3 минут в высушенном сосуде, содержащем марлевую салфетку, пропитанную хлороформом; затем их обезглавили с помощью небольшой гильотины (Scientific Research Instrument, Великобритания).Кровь из обезглавленного участка собирали в пробирку на 10 мл через воронку, давали полностью свернуться и затем центрифугировали при 4 ° C в течение 15 минут при 4000 об / мин (Health-Ratina 46RS, Германия). Сыворотку собирали и хранили при -80 ° C (Heto Ultra Freezer 3410, Дания) для последующего анализа гормонов сыворотки. Уровни эстрадиола, прогестерона и кортизола в сыворотке измеряли с использованием коммерческих наборов для иммуноанализа (набор ELISA для эстрадиола крыс, Cusbio, США; набор для ELISA на прогестерон крысы, Cusabio, США; набор для ELISA на кортизол крыс, Cusbio, США).

Репродуктивные органы, то есть рога матки и яичники, были осторожно удалены, очищены и взвешены с помощью электронных весов (Denver Instrument Company, США). Относительный вес яичников и матки был получен путем деления абсолютного веса яичников и матки на конечный вес тела, соответственно.

1,7. Статистический анализ

Статистический анализ был выполнен с использованием пакета статистических данных социальных наук (SPSS) версии 18.0. Все данные представлены в виде среднего значения ± стандартное отклонение (SD).После проверки нормальности и однородности данные с нормальным распределением и однородной дисперсией были проанализированы с использованием одностороннего дисперсионного анализа (ANOVA) с апостериорным тестом (наименьшая значимая разница) для определения значимости различий между группами. значение <0,05 считалось статистически значимым и использовалось для всех сравнений.

2. Результаты

Средние уровни кортизола, эстрадиола и прогестерона в сыворотке представлены в таблице 1. Уровни кортизола в сыворотке были значительно () ниже по C, H, и по сравнению с C ₀ .Значения сывороточного кортизола были значительно () выше в и по сравнению с C. Уровень кортизола был ниже () по сравнению с. Однако уровни кортизола в обеих группах существенно не отличались от C. Не было значительных различий в уровне эстрадиола во всех группах. Для сывороточного прогестерона не было существенной разницы в этом измеренном параметре во всех группах по сравнению с C ₀ . Однако уровни прогестерона в сыворотке были значительно () ниже и по сравнению с C.Между тем, уровни прогестерона в сыворотке были значительно () выше и по сравнению с и, соответственно.

9269 9026 926 934 9347 926 934 9347 9276 9349 Группа Кортизол Прогестерон Эстрадиол пг / мл пг / мл нг / мл C H 9026 1.19 ± 0,44 a, d, e 191,05 ± 153,2 d, e 146,85 ± 85,5 d, e 99 Данные были проанализированы с помощью однофакторного дисперсионного анализа. a значительно отличается от (), b значительно отличается от C (), c значительно отличается от H (), d значительно отличается от () и e значительно отличается от (). : исходный контроль; C: сидячий образ жизни без меда и прыжков; H: добавка меда из расчета 1 г / кг массы тела / день; : низкая интенсивность 20 прыжков / день; : высокая интенсивность 80 прыжков / день; : комбинированный прием меда с низкой интенсивностью 20 прыжков / день; : комбинированный прием меда с высокой интенсивностью 80 прыжков в день. Средние значения конечной массы тела, относительной массы яичников и массы матки всех экспериментальных групп представлены в таблице 2. Не было значительных различий в средней конечной массе тела среди всех групп.Было обнаружено, что относительный вес яичников был значительно больше () во всех группах по сравнению с C 0 . Однако не было существенной разницы в относительной массе яичников между C и всеми другими экспериментальными группами. Относительный вес матки был значительно больше по сравнению с C и соответственно. 9026 9026 9349 9026 9349 93490 90260 3532 a Значительно отличается от (). b Значительно отличается от C (). c Значительно отличается от (). Группы Конечная масса тела (г) Относительная масса матки (мг / кг массы тела) Относительная масса яичников (мг / кг) Относительная масса яичников (мг / кг) C H 3. Обсуждение В настоящем исследовании мы наблюдали, что уровень кортизола в сыворотке, как индикатор физиологического стресса, был значительно выше в группах с 20 и 80 прыжками в день по сравнению с группой, ведущей сидячий образ жизни. Это более высокое значение кортизола в сыворотке сопровождалось снижением уровня прогестерона в сыворотке в группах прыжков, которые состояли из 20 и 80 прыжков в день.Причина снижения уровня прогестерона в группах, выполняющих только упражнения, может быть связана с физиологическим стрессом, вызванным физическими упражнениями, и низкой доступностью энергии без добавления меда у крыс. Сообщалось, что физические упражнения могут влиять на активацию оси гипоталамуса и гипофиза надпочечников (HPA) и, как следствие, на повышение уровня кортизола в сыворотке крови у животных [25]. Точно так же повышенный уровень кортизола наблюдался у крыс, которые тренировались в одиночку в настоящем исследовании.Повышение уровня кортизола может подавлять ось гипоталамус-гипофиз-яичники (HPO) и действовать как вредный фактор на пульсацию лютеинизирующего гормона (ЛГ) [26–29]. Соответственно, в настоящем исследовании был обнаружен пониженный уровень концентрации прогестерона у крыс, которые тренировались в одиночку. Что касается низкой доступности энергии, то в нескольких предыдущих исследованиях было указано, что низкая доступность энергии, но не стресс от физических упражнений, также может влиять на пульсацию ЛГ у женщин, занимающихся физическими упражнениями [9, 10, 30]. Сообщалось, что низкая доступность энергии за счет снижения циркуляции инсулина [31] и инсулиноподобного фактора роста I (IGF-I) может вызвать повышение уровня IGF-связывающего белка (IGFBP-1) и уровня кортизола.Это снижение активности IGF-I может влиять на стимуляцию гипоталамо-гипофизарно-гонадной оси (HPG), тогда как высокий уровень концентрации кортизола может подавлять секрецию гонадолиберина в гипоталамусе [7]. Как видно из настоящего исследования, низкие уровни прогестерона в сыворотке крови наблюдались у прыгающих крыс без добавления меда. Таким образом, предполагается, что у этих крыс имел место сценарий низкой доступности энергии. Настоящее исследование показало, что уровень кортизола в сыворотке у крыс в группе добавок меда в сочетании с 20 прыжками в день был значительно ниже по сравнению с группой 80 прыжков в день без добавления меда.Сообщалось, что мед Туаланг имеет самый высокий источник фенольных кислот и флавоноидных соединений среди малазийских медов, которые обладают сильной активностью по улавливанию свободных радикалов [32]. Аналогичным образом, другое предыдущее исследование показало, что добавление меда может уменьшить окислительный стресс и повреждение яичек у самцов крыс, подвергшихся воздействию сигаретного дыма [22]. Таким образом, предполагается, что добавка меда могла сыграть свою роль в снижении окислительного стресса, вызванного прыжками. В исследовании, проведенном Williams et al.(2001) [10], сообщалось, что пищевая добавка, содержащая около 138–181% калорий, состоящая из батончиков мюсли, сухофруктов, свежих фруктов и коммерческого обезьяньего корма, может повышать уровни эстрадиола и прогестерона с временем восстановления циркулирующего гонадотропина. уровни и восстановленные овуляторные циклы во время напряженных ежедневных тренировок у самок обезьян с аменореей. Их исследование показало, что низкая доступность энергии играет причинную роль в развитии аменореи, вызванной физическими упражнениями, и репродуктивной дисфункции.В настоящем исследовании было обнаружено, что уровни прогестерона в сыворотке были значительно выше при добавлении меда в сочетании с 20 и 80 прыжками в день по сравнению с одними только прыжками с низкой и высокой интенсивностью. Это повышение уровня прогестерона может показать, что добавление меда через его углеводные компоненты, такие как фруктоза, глюкоза, мальтоза и сахароза [18], что эквивалентно 313 калориям на 100 г [21], и его антиоксидантные свойства, такие как фенольные и флавоноидные соединения [32, 33] может вызывать защитные эффекты против отрицательного энергетического баланса и окислительного стресса, вызванного прыжками на обоих уровнях интенсивности.Поэтому предполагается, что антиоксидантные свойства меда могут быть одной из причин защиты измененных уровней кортизола и прогестерона в сыворотке крови, вызванных прыжками у крыс. О низком уровне эстрадиола в сыворотке крови сообщалось в предыдущем исследовании на самках крыс, получавших добавку меда в дозах 0,2, 1 и 2 г / кг [21]. Настоящее исследование показало немного более низкий уровень эстрадиола в группах упражнений и группе, принимающей мед, по сравнению с группой, ведущей малоподвижный образ жизни, хотя различия не были статистически значимыми.В предыдущем исследовании было показано, что интенсивные упражнения без ограничения в еде не вызывают значительных изменений уровня концентрации эстрадиола [34]. Расхождение между настоящим открытием и предыдущими исследованиями может быть связано с различиями в дизайне экспериментов. Настоящее исследование показало, что прием медовой добавки в дозе 1 г / кг массы тела в сочетании с 20 прыжками в день () в течение 8 недель может увеличить относительную массу матки у самок крыс по сравнению с сидячими крысами и крысами, которых кормили такая же дозировка меда в сочетании с 80 прыжками в день.Этот вывод согласуется с предыдущим исследованием, проведенным Zaid et al. (2010) [21], которые обнаружили, что мед Туаланг увеличивает массу матки и толщину вагинального эпителия у крыс с удаленными яичниками. Эти положительные эффекты меда могут быть связаны с содержанием в нем фенольных соединений и флавоноидов [32], что подтверждается данными предыдущих исследований, в которых сообщалось об эстрогенной активности флавоноидов, особенно кемпферола и кверцетина [35, 36]. Следовательно, предполагается, что увеличение веса матки, обнаруженное в этом исследовании, может быть связано с эстрогенным эффектом присутствия фенольных соединений в меде.Кроме того, было обнаружено, что низкая интенсивность прыжков в 20 прыжков в день может увеличить вес матки; однако интенсивность упражнений с 80 прыжками в день не показала такого же эффекта. Настоящее исследование также показало, что тренировочный протокол, который состоял из 20 и 80 прыжков в день, не влиял на вес яичников у тренированных крыс. Точно так же добавка меда 1 г / кг массы тела также не повлияла на относительную массу яичников. Точные механизмы этих наблюдений неясны, и необходимы дальнейшие исследования гистологических изменений яичников и матки крыс для подтверждения этих наблюдений.Ограничения настоящего исследования заключались в том, что кортикостерон, который является индикатором стресса, помимо кортизола, лютеинизирующий гормон, который является репродуктивным гормоном, и маркеры окислительного стресса не измерялись, и предлагается включить эти измеренные параметры в дальнейшие исследования. 4. Заключение Добавки меда показали эффективную роль в увеличении веса матки у самок крыс. Тем не менее, прием меда Туаланг оказывает благотворное влияние на уменьшение побочных эффектов, вызванных прыжковыми упражнениями на женские репродуктивные гормоны и гормон стресса у крыс.Таким образом, добавка меда может быть полезна спортсменкам для поддержания их нормальных репродуктивных функций. Тем не менее, для подтверждения настоящего исследования необходимы дальнейшие исследования на людях. Конфликт интересов Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов в отношении публикации данной статьи. Вклад авторов Марьям Мосават участвовала в сборе данных, анализе и интерпретации данных, а также в написании этой статьи.Foong Kiew Ooi участвовал в разработке эксперимента, сборе данных, интерпретации данных, редактировании и представлении этой рукописи. Маханим Мохамед участвовал в разработке эксперимента, сборе данных, интерпретации данных и редактировании этой рукописи. Все исследования проводятся авторами. Благодарности Это исследование было поддержано краткосрочным исследовательским грантом (№ 304 / PPSP / 61312031) от Universiti Sains Malaysia. Авторы хотели бы поблагодарить сотрудников лабораторий физиологии и спортивной науки, Universiti Sains Malaysia, г-жуДжамаая бт Осман, г-н Мохд Низам Харон, г-жа Сомайе Садат Тавафзаде, г-жа Нор Айни бт Судин, г-жа Нурул Набилла бт Хасбулла, г-жа Парималах Вело и доктор Сейед Мохаммадреза Гадири за их помощь в этом исследовании. Tualang Honey защищает от индуцированных BPA морфологических аномалий и нарушения экспрессии мРНК ERα, ERβ и C3 и белков в матке крыс Бисфенол A (BPA) является химическим веществом, нарушающим работу эндокринной системы (EDC) репродуктивной системы.Цель исследования — изучить потенциальные защитные эффекты меда Туаланг против маточной токсичности, вызванной BPA, у крыс пубертатного возраста. Крысам вводили BPA через желудочный зонд в течение шести недель. Токсичность матки у крыс, подвергшихся воздействию BPA, определяли по степени морфологических аномалий, повышенному перекисному окислению липидов и нарушению регуляции экспрессии и распределения ER α , ER β и C3 по сравнению с контрольными крысами. Одновременное лечение крыс BPA и медом Tualang значительно улучшило морфологические аномалии матки, уменьшило перекисное окисление липидов и нормализовало экспрессию и распределение ER α , ER β и C3.У крыс, получавших только мед Туаланг, не наблюдалось никаких аномальных изменений, сравнимых с контрольными крысами. В заключение, мед Туаланг может сыграть потенциальную роль в защите матки от токсичности, вызванной BPA, что, возможно, объясняется его фитохимическими свойствами. 1. Введение Бисфенол A (BPA) (2,2-бис (4-гидроксифенил)) является одним из наиболее распространенных в мире химических веществ, нарушающих эндокринную систему (EDC). Он широко используется в промышленности как пластификатор для производства эпоксидных смол поликарбонатных пластиков и как неполимерная добавка к другим пластмассам [1].Он привлек значительное внимание во всем мире из-за его воздействия на человека через выщелачивание с внутренней поверхности контейнеров для пищевых продуктов и напитков, пластиковых бутылок, стоматологических герметиков, водопроводных труб и клеев [2]. Многие исследования выявили негативное влияние BPA на развитие репродуктивной системы человека и лабораторных животных [3, 4]. БФА обнаружен в сыворотке крови, фолликулярной и амниотической жидкости [5], сыворотке плода [6], молоке кормящих матерей [7] и моче [8, 9].Эти отчеты предполагают, что люди регулярно подвергаются воздействию BPA. Таким образом, это вызвало в умах людей дополнительную озабоченность по поводу того, что использование бисфенола А для здоровья. В многочисленных исследованиях сообщалось, что BPA может вызывать морфологические и функциональные изменения женской половой системы, особенно матки [3, 10]. Основная функция матки регулируется циклическими изменениями половых стероидных гормонов, и по этой причине она широко используется в качестве классического органа-мишени для определения эстрогенных эффектов BPA [11].Было показано, что BPA вызывает нарушения в матке, влияя на экспрессию и распределение рецептора эстрогена α (ER α ) и рецептора эстрогена β (ER β ) [12]. Также сообщалось, что BPA снижает иммунитет матки за счет нарушения регуляции экспрессии комплемента C3, что вызывает восходящие инфекции в женских половых путях [13]. Исследование Xiao et al. (2011) обнаружили, что пренатальное воздействие BPA может отрицательно повлиять на транспортировку и предимплантацию эмбриона из-за нарушения восприимчивости матки, что приводит к бесплодию у самок крыс [14].Кроме того, сообщалось, что BPA способствует окислительному стрессу и воспалению в женских репродуктивных трактах, что может способствовать морфологическим и функциональным нарушениям [15]. Природные соединения с антиоксидантными свойствами были тщательно изучены как средства противодействия окислительному стрессу, связанному с болезнью [16]. Помня об этом, мы использовали натуральный продукт с высоким содержанием антиоксидантов, а именно мед Туаланг (Agromas, Малайзия), в качестве возможного потенциального терапевтического агента для противодействия пагубному воздействию BPA.Предыдущие научные исследования утверждали, что мед Туаланг обладает способностью уменьшать окислительный стресс в почках и поджелудочной железе у крыс с индуцированным стрептозотоцином диабетом [17], обратно атрофированной матке и влагалище [18], а также улучшать остеопороз костей [19] на моделях животных в постменопаузе. . Кроме того, мед Туаланг обладает способностью защищать яички от вызванного сигаретой повреждения [20] и противодействовать пролиферации плоскоклеточного рака полости рта (OSCC) [21], остеосаркомы человека [21] и келоидных фибробластов [22]. Мед Туаланг, темно-коричневатый мед, как сообщается, содержит более 200 веществ, включая сахара, аминокислоты, витамины, минералы, ферменты, органические кислоты и фитохимические вещества. Основное содержание меда Туаланг — это инвертированные сахара, которые состоят из 29,6% фруктозы, 30% глюкозы, 0,6% сахарозы и 7,9% мальтозы, а также небольшого количества сложной смеси других сахаридов (дисахаридов, трисахаридов и олигосахаридов) [23 ]. Он также содержит большое количество фенольных соединений (галловая, сиринговая, бензойная, транс-коричная, п-кумаровая и кофейная кислоты) и флавоноиды (катехин, кемпферол, нарингенин, лютеолин и апигенин) [24].Он обладает огромными антиоксидантными свойствами с высокой активностью улавливания радикалов и антиоксидантной активностью [25]. Другими соединениями, присутствующими в меде Туаланг, являются стеариновая кислота, фурфурол, уксусная кислота, 2-фурилметилкетон, пальмитиновая кислота, этиллинолеат, олеиновая кислота, 2-гидрокси-2-циклопентен-1-он, гиацинтин и 5-метилфурфурол [23 ]. Целью нашего исследования было изучить влияние субхронического введения BPA на морфологию и функцию матки путем определения перекисного окисления липидов, распределения белков и экспрессии мРНК рецептора эстрогена α , рецептора эстрогена β , и дополнение C3.Следовательно, проводится исследование возможных защитных эффектов меда Туаланг против маточной токсичности, вызванной BPA. 2. Материалы и методы 2.1. Мед Туаланг (Агромас, Малайзия) Мед Туаланг был закуплен у Федерального агентства по сельскохозяйственному маркетингу (FAMA) при Министерстве сельского хозяйства и агропромышленности Малайзии. Мед Туаланг — это дикий многоцветковый мед, собранный из улья Apis dorsata , построенного на гигантском дереве Koompassia excelsa (местное известное как дерево Туаланг) в тропических лесах Кедаха, Малайзия.В Центре обработки меда в Куала-Неранге, Кедах, мед проходил несколько этапов (проверка качества, обезвоживание, упаковка и маркировка). Вкратце, мед фильтровали для удаления твердых частиц, концентрировали в печи при 40 ° C и подвергали облучению γ при 25 кГр в Sterilgamma (M) Sdn. Bhd. (Селангор, Малайзия). Концентрация воды в меде была стандартизирована FAMA и составляла 18%. 2.2. Модель на животных и экспериментальный план Самок крыс линии Sprague (P21) получали из животноводства медицинского факультета Малайского университета.Все экспериментальные планы и процедуры проводились в соответствии с руководством Национальных институтов здравоохранения по уходу и использованию лабораторных животных (Публикации NIH, номер 8023, пересмотрено 1978 г.), которое было одобрено Комитетом по уходу за животными (ACUC) Университета г. Малая. В течение всего экспериментального периода крыс содержали в стандартных лабораторных условиях (температура ° C, относительная влажность% и нормальный фотопериод: 12 часов темноты и 12 часов света) и снабжали ad libitum водой и коммерческой пеллетной диетой (Gold Coin Комбикормовые заводы Pte.Ltd., Малайзия). Крыс помещали в клетки из нержавеющей стали с деревянной подстилкой, а воду подавали в стеклянные бутылки, чтобы свести к минимуму дополнительное воздействие эндокринных разрушителей. Они были акклиматизированы в лабораторных условиях за семь дней до начала эксперимента. В возрасте 28 дней крыс случайным образом разделили на четыре группы (в каждой группе). Группе NC (отрицательный контроль) вводили носитель (0,2 мл кукурузного масла). Группе ПК (положительный контроль) вводили BPA (10 мг / кг веса тела, суспендированные в кукурузном масле).Группе THC (контроль меда Tualang) вводили мед Tualang (200 мг / кг массы тела за 30 минут до введения кукурузного масла). Группе TH (мед Туаланг + BPA) вводили мед Tualang (200 мг / кг массы тела за 30 минут до введения BPA в дозе 10 мг / кг массы тела). Процедуру выполняли утром (с 9:00 до 10:00) один раз в день через желудочный зонд (чтобы имитировать наиболее вероятный путь воздействия на человека) в течение шести недель подряд. В течение всего периода введения регистрировали суточную массу тела.После последней обработки крыс умерщвляли во время фазы диэстра. После умерщвления крысы регистрировали влажную массу всей матки для оценки утеротрофического ответа. Левый рог матки немедленно фиксировали в 10% забуференном формалине для гистопатологического анализа. Одну половину правого рога матки хранили в фосфатном буфере для определения малонового диальдегида (MDA), а другую половину хранили в RNAlater для экстракции мРНК, а затем хранили в морозильной камере -80 ° C до дальнейшего анализа.Выбор дозы BPA при 10 мг / г массы тела был основан на предыдущих исследованиях, в которых сообщалось, что BPA в этой дозе вызывает нарушение морфологических и биохимических параметров в репродуктивной системе [3, 26–28]. Что касается меда Туаланг, то его ежедневно готовили свежеприготовленным, чтобы избежать окисления антиоксидантов. Доза меда Туаланг в 200 мг / кг веса тела была основана на предыдущем исследовании, которое показало положительное биологическое воздействие на женские репродуктивные органы, и доза была равна одной столовой ложке, которую обычно принимает взрослый человек [18]. 2.3. Гистопатологическая оценка Матки фиксировали в 10% забуференном формалине в течение 24 часов перед дальнейшей обработкой для гистопатологического исследования. Матки были соответствующим образом обрезаны, обезвожены посредством постепенного увеличения концентрации этанола, очищены ксилолом и, наконец, заключены в парафин с образованием парафинового блока. Затем были получены срезы тканей толщиной 5 мкм и мкм, которые были помещены на предметные стекла, депарафинизированы в ксилоле, гидратированы водой и окрашены гематоксилином и эозином (Sigma-Aldrich, США).Снова срезы были обезвожены в этаноле, очищенном ксилолом и закреплены канадским бальзамом (Sigma-Aldrich). Все срезы были проанализированы на предмет любых морфологических изменений под световым микроскопом (Olympus CH-B145-2), подключенным к анализатору изображений (NIS-Elements Advanced Research, Nikon, Япония). Были сделаны репрезентативные микрофотографии для дальнейшего использования. 2.4. Гистоморфометрия Для гистоморфометрического анализа матки срезы ткани были просмотрены, и наиболее четкие репрезентативные срезы на каждом слайде были сфотографированы при увеличении × 20 и × 40.Средние значения высоты эпителиальных клеток просвета, толщины эндометрия и слоев миометрия измеряли в шести случайно выбранных областях срезов. Все измерения ( мкм м) были определены вручную путем отслеживания экранных изображений с помощью компьютерной программы анализа изображений (NIS-Elements Advanced Research, Nikon, Япония). 2,5. Иммуногистохимия 2.5.1. Рецептор эстрогена α и комплемент C3 Распределение рецептора эстрогена α и комплемента C3 в матке крысы оценивали с использованием системы окрашивания ImmunoCruz Rabbit ABC sc-2018 и набора системы окраски ImmunoCruz Goat ABC sc-2023 соответственно . Вкратце, срезы тканей депарафинизировали, гидратировали до воды, кипятили в 0,1 М натрий-цитратном буфере (pH 6,0) в течение 15 минут и инкубировали с 0,1% –1% перекиси водорода в течение 10 минут для подавления активности эндогенной пероксидазы. Неспецифическое окрашивание блокировали инкубацией в 1,5% блокирующей сыворотке. Затем срезы инкубировали с первичным антителом при разведении 1: 100 ER α (MC-20: sc-542, Santa Cruz Biotechnology, США) или при разведении 1: 100 C3 (V-20: sc-14612, Santa Cruz Biotechnology, США) в течение ночи при 4 ° C.На следующий день срезы инкубировали с биотинилированным вторичным антителом в течение одного часа, а затем инкубировали с ферментным реагентом AB в течение еще 30 минут. Положительное окрашивание появилось (голубоватого цвета) после инкубации с пероксидазой аннотация в течение 10 минут, и, наконец, срезы были контрастно окрашены гематоксилином. Затем срезы дегидратировали с помощью дозированной серии этанола, очищали в ксилоле и покрывали канадским бальзамом (Sigma-Aldrich) и закрывали покровными стеклами перед исследованием под световой микроскопией.Ткань отрицательного контроля (не инкубированная с первичным антителом) была включена, чтобы гарантировать отсутствие ложноположительного окрашивания и для точной интерпретации результатов окрашивания. 2.5.2. Рецептор эстрогена β Распределение рецептора эстрогена β в матке крыс оценивали с использованием набора Abcam IHC для определения HRP / DAB (ABC) кролика. Вкратце, срезы депарафинизировали, гидратировали, кипятили в 0,1 М натрий-цитратном буфере (pH 6,0) в течение 15 минут и инкубировали с перекисью водорода в течение 20 минут для подавления эндогенной пероксидазной активности.Неспецифическое окрашивание блокировали инкубацией с белковым блоком. Затем срезы инкубировали с первичным антителом в разведении 1: 200 (антитело ER β ab3576, Abcam, США) в течение ночи при 4 ° C. На следующий день срезы инкубировали с биотинилированным вторичным козьим антиполивалентным антителом в течение 30 минут при комнатной температуре. Положительное окрашивание развивалось после инкубации с хромогеном DAB в течение 10 минут с последующим контрастным окрашиванием гематоксилином. Срезы обезвоживали в 2x 95% этаноле, 2x 100% и 3x ксилолах в течение 10 секунд каждый.Наконец, срезы покрывали канадским бальзамом (Sigma-Aldrich) и закрывали покровными стеклами для наблюдения под световой микроскопией. Ткань отрицательного контроля (не инкубированная с первичным антителом) была включена, чтобы гарантировать отсутствие ложноположительного окрашивания и точную интерпретацию результатов окрашивания. 2.5.3. Определение уровней малонового диальдегида (MDA) Уровни MDA в матке измеряли методом двойного нагревания [29] с использованием анализа реактивных веществ тиобарбитуровой кислоты (TBARS) (набор для анализа OxiSelect TBARS, Cell Biolabs, США).Матку каждого животного гомогенизировали в забуференном фосфатом физиологическом растворе (PBS), содержащем бутилированный гидрокситолуол (BHT). Затем гомогенат матки центрифугировали при 10000 g в течение 5 минут для сбора супернатанта для анализа TBARS. Вкратце, 100 мкл л образцов и стандартов смешивали со 100 мкл л раствора для лизиса SDS в соответствующих пробирках и инкубировали в течение 5 минут при комнатной температуре. Затем в каждую пробирку добавляли 250 мкл л реагента TBA, после чего инкубировали в течение 60 минут при 95 ° C.Пробирки охлаждали при комнатной температуре на ледяной бане в течение пяти минут. Все пробирки центрифугировали при 3000 об / мин в течение 15 минут и 200 мкл л супернатанта переносили в 96-луночный микропланшет для измерения оптической плотности с использованием спектрофотометра при длине волны 532 нм. Концентрацию MDA рассчитывали с использованием коэффициента поглощения комплекса MDA-TBA и выражали в микромолях на микрограмм белка ( мкг М / мкг г белка). 2.6.Экспрессия мРНК ER α , ER β и комплемента C3 2.6.1. Очистка общей РНК Очистку общей РНК матки проводили с использованием набора RNeasy Protect Mini Kit, Qiagen, США. 30 мг образцов ткани матки были разрушены и гомогенизированы в буфере RLT. Лизат центрифугировали при максимальной скорости (12000 об / мин). Супернатант переносили в новую пробирку на 1,5 мл и добавляли один объем 70% этанола. Этот образец переносили в спин-колонку RNeasy и центрифугировали, а остаток отбрасывали.Впоследствии буферный RPE был добавлен в спин-колонку RNeasy и центрифугирован в течение одной минуты при 10000 об / мин, и проточный поток снова был отброшен. Этот шаг был повторен, но центрифугирование продолжалось более двух минут. Наконец, спин-колонку помещали в новую пробирку на 1,5 мл, добавляли 30 мкл л воды, свободной от РНКазы, и центрифугировали при 10000 об / мин в течение одной минуты для элюирования РНК. Наконец, измерение концентрации и чистоты РНК было выполнено с использованием NanoDrop (BioTek, США) при OD 260/280 , в то время как оценка качества проводилась с помощью денатурирующего электрофореза в агарозном геле.РНК хранили при -20 ° C до дальнейшего анализа. 2.6.2. Обратная транскрипция РНК в кДНК Обратную транскрипцию (RT) РНК в одноцепочечную кДНК проводили с использованием Applied Biosystems Kit, США. Равные количества РНК (300 нг) из каждого образца подвергали обратной транскрипции в кДНК. Каждая реакционная смесь RT состояла из 2x буфера RT (10 мкл, л), 1 мкл л обратной транскриптазы, воды без нуклеаз и образца РНК, доведенного до общего объема 20 мкл лРеакционные смеси кратковременно центрифугировали для центрифугирования содержимого и удаления пузырьков воздуха. Наконец, пробирки помещали в программируемый термоциклер (Thermo Scientific) на 60 минут при 37 ° C, а затем на пять минут при 95 ° C. 2.6.3. Количественная ПЦР в реальном времени выбранных генов Количественная ПЦР в реальном времени выбранных генов была проведена с использованием Applied Biosystems Kit, США. Реакционную смесь для ПЦР (размер реакции 20 мк л) готовили в трех экземплярах. Каждая реакционная смесь для ПЦР состоит из 20-кратного анализа экспрессии генов TaqMan (1 мкл, л), 2x-кратного анализа экспрессии генов TaqMan (10 мкл, мкл), матрицы кДНК (4 мкл мкл) и воды, не содержащей РНКазы (5 мкл). мк л).Эндогенный контрольный ген, использованный в этом исследовании, представлял собой мРНК β -актина. Для обеспечения специфической амплификации в реакцию ПЦР были включены три типа контролей (только вода, реакция без праймеров и матрицы, полученные без обратной транскриптазы). Подготовленную реакционную смесь для ПЦР переворачивали для смешивания компонентов реакции с последующим кратковременным центрифугированием. Двадцать мкл мкл реакционной смеси для ПЦР переносили в каждый соответствующий 96-луночный реакционный планшет и кратко центрифугировали. Наконец, планшет помещали в систему ПЦР в реальном времени StepOne Plus (Applied Biosystems, США) с последующей автоматической амплификацией интересующих генов. Точку, в которой начинается экспоненциальная амплификация продуктов ПЦР (значения порога цикла: CT), определяли с помощью программного обеспечения Applied Biosystems. Относительное содержание целевой мРНК рассчитывали по методике [30]. Эксперимент повторяли трижды, чтобы убедиться в достоверности результатов. Относительные уровни экспрессии мРНК для каждого выбранного гена рассчитывали с точки зрения внутреннего контроля β -актина.Последовательности праймера, использованного для амплификации гена, показаны в таблице 1. Ген Прямой праймер Обратный праймер Ссылки (номер доступа) 6 9 Рецептор эстрогена α 5′-AAGCTGGCCTGACTCTGCAG-3 ‘ 5′-GCAGGTCATAGAGAGGCACGA-3′ Spreafico et al. [31] (X61098) Рецептор эстрогена — β 5′-CTCTGTGTGAAGGCCATGAT-3 ‘ 5′-GGAGATACCAATTCT al.[32] (U57439) Комплемент C3 5′-CTGTACGGCATAGGGATATCACG-3 ‘ 5′-ATGCTGGCCTGACCTTCTC 9027 et al. [33] (X52477) 2.7. Статистический анализ Все статистические оценки были выполнены с помощью статистического пакета для социальных наук (SPSS Inc., Чикаго, Иллинойс, США, версия 18.0 для Windows). Во-первых, был проведен тест Шапиро-Уилка, чтобы проверить, все ли результаты соответствуют нормальному распределению (нормально распределенному, если значение было больше 0.05). Параметрические переменные анализировали с использованием одностороннего дисперсионного анализа (ANOVA) с последующим тестом Бонферрони для множественных сравнений для выявления значимых различий между группами. Значения были представлены как Среднее ± SEM. считалось значительным. 3. Результаты 3.1. Масса тела и масса матки В токсикологических исследованиях анализ массы тела и веса отдельных органов является чувствительным индикатором неблагоприятных последствий химического воздействия. В частности, анализ нормализации абсолютной массы органа к массе тела (относительной массе органа) является более точной аналитической конечной точкой для выявления вредного воздействия токсического агента на массу органов.Изменения прироста массы тела и относительной массы матки животных во всех экспериментальных группах показаны в таблице 2 и на рисунках 1 (а) и 1 (б) соответственно. 89,5 ± 10,64 Группа Прибавка массы тела (г) Относительная масса матки (влажная масса / масса тела) Уровень малонового диальдегида (MDA) (M / белок) Высота эпителиальные клетки (м) Толщина эндометрия (м) Толщина миометрия (м) NC 78.88 ± 14,61 1,89 ± 0,12 0,0037 ± 0,00026 30,51 ± 1,37 571,87 ± 19,14 299,18 ± 16,86 PC 99,25 ± 9,90 1,41 ± 0,04 0,0074 ± 0,00053 18,88 ± 0,81 486,74 ± 1026934 486,74 ± 1026 926 926 926 926 926 926 926 926 926 926 926 926 926 926 1,83 ± 0,07 0,0036 ± 0,00089 28,23 ± 0,48 574.25 ± 19,40 Данные выражены как Среднее ± SEM. (1) и против NC (отрицательный контроль). (2), и по сравнению с ПК (BPA 10 мг / кг). (3) и по сравнению с TH (мед Туаланг 200 мг / кг + BPA 10 мг / кг). (4), и по сравнению с ТГК (мед Туаланг 200 мг / кг). Чтобы определить, вызывает ли воздействие BPA изменения массы тела в результате токсических эффектов, в течение всего экспериментального периода контролировали массу тела всех крыс. Хотя изменения в приросте массы тела не были статистически значимыми между группой, получавшей BPA, и всеми другими группами, шесть недель субхронического воздействия BPA в группе PC вызвали небольшое увеличение (17,3%) прироста массы тела по сравнению с контрольные животные (группа NC).Аналогичное увеличение (16,55%) прироста массы тела было также отмечено у крыс, одновременно получавших BPA и мед Туаланг (группа TH). Изменения в приросте веса у крыс, получавших только мед Туаланг (группа THC), были сопоставимы с контрольными крысами (группа NC). Аналогичным образом изменения веса матки регистрировались в конце периода введения, поскольку это можно было использовать в качестве индикатора любых изменений в нормальных функциях. После шести недель воздействия BPA (группа PC) наблюдалось значительное снижение относительной массы матки на 25% по сравнению с контрольными крысами (группа NC).Однако одновременное лечение крыс BPA и медом Tualang (группа TH) значительно предотвратило этот эффект. Относительный вес матки у крыс, получавших только мед Tualang (группа THC), был сравним с контрольной крысой (группа NC), что свидетельствует о том, что мед Tualang сам по себе не оказывает вредного воздействия на вес матки. 3.2. Малоновый диальдегид (MDA) Уровень Перекиси липидов являются нестабильными первичными продуктами перекисного окисления липидов, которые разлагаются до стабильной формы малонового диальдегида (MDA).Измерение уровней MDA как конечного продукта перекисного окисления липидов является широко распространенным методом анализа и считается важным показателем окислительного стресса, связанного с патофизиологией органов у животных. Как показано в таблице 2 и на рисунке 2, у крыс, подвергшихся воздействию BPA (группа PC), по сравнению с контрольными крысами (группа NC) было отмечено значительное увеличение уровня MDA на 49,7%. Однако одновременное лечение BPA с медом Tualang привело к значительному снижению уровня MDA (группа TH).На уровень МДА не влияла только обработка медом Туаланг (группа ТГК), и значение сравнимо с нормальными крысами (группа NC). 3.3. Гистоморфометрический анализ матки Как показано в Таблице 2 и на Рисунках 3 (a), 3 (b) и 3 (c), воздействие BPA вызвало значительное снижение всех гистоморфометрических параметров (включая клетки эпителия просвета и толщину эндометрия и др.). слои миометрия) (группа ПК) по сравнению со всеми другими группами (группы NC, TH и THC). У крыс, подвергшихся воздействию BPA (группа PC), снижение высоты просветных эпителиальных клеток и толщины эндометрия и миометрия составило 38,11%, 14,88% и 23,66% соответственно. Интересно, что в соответствии со снижением относительной массы матки одновременное лечение крыс BPA и медом Туаланг (группа TH) значительно предотвратило снижение этих параметров. Между тем значения этих параметров в трех группах были сопоставимы между собой. 3.4. Морфология матки Морфологический анализ репрезентативной матки из срезов всех групп показан на рисунке 4. Морфологические изменения соответствовали гистоморфометрическому анализу. У контрольных крыс (группа NC) наблюдали нормальный гистологический вид (рисунки 4, 4 (B) и 4 (C)). Люминальные эпителиальные клетки состояли из высокого псевдостратифицированного столбчатого эпителия цилиндрической формы с хорошо закругленными ядрами и покоились на выступающей базальной мембране.Собственная пластинка не была повреждена, железы эндометрия были здоровыми, а в строме было высокое содержание клеток. Ряд митотических фигур был виден в железистых эпителиальных клетках. Миометрий в норме. Гистологические проявления эндометрия у крыс, получавших только мед Туаланг (группа THC), были сопоставимы с контрольными крысами (группа NC) (Фигуры 4, 4 (H) и 4 (I)). В матке крыс, подвергшихся воздействию BPA (группа PC), наблюдались деструктивные изменения, как показано на рисунках 4, 4 (E) и 4 (F), по сравнению с контрольными крысами (группа NC).Клетки просветного эпителия были короче, строма имела меньшую популяцию клеток и выглядела дезорганизованной, а некоторые клетки были искажены и имели ядра неправильной формы. Некоторые ядра имели более конденсированный хроматин. Между клетками стромы было очень мало интерстициальных внутриклеточных пространств. Железы эндометрия выглядели нездоровыми из-за того, что они были меньше по размеру и выстланы сморщенными и деформированными эпителиальными клетками с ядрами неправильной формы и некоторыми пикнотическими ядрами, которые менее организованы и уменьшены в количестве.Пучки гладких мышц миометрия, которые также были меньше и сморщены вместе с внутренними круговыми и внешними продольными гладкими мышечными волокнами, выглядели разрушенными. По сравнению с крысами, подвергавшимися воздействию BPA (группа PC), морфология матки туалангского меда (группа TH) (рисунки 4, 4 (K) и 4 (L)) показала слегка улучшенный поверхностный эпителий, но выглядел здоровым популяция стромальных клеток с более крупными стромальными клетками и относительно большим количеством интерстициальных пространств между клетками по сравнению с группой ПК.Железы эндометрия выглядели нормально, выстланы железистым эпителием, что очень похоже на группу NC. Более того, миометрий тоже выглядел нормальным. 3.5. ER α , ER β и распределение белков C3 Репрезентативные срезы ткани матки окрашивали с использованием иммуногистохимического метода для оценки клеточно-специфических изменений в ER α , ER β и белках C3 комплемента. Эти белки локализуются в ядрах эпителиальных и стромальных клеток матки. В целом интенсивность окрашивания экспрессии рецептора белка ER α во всех репрезентативных срезах матки была самой высокой в ​​просветных и железистых эпителиальных клетках, но более низкая интенсивность окрашивания была обнаружена в клетках стромы эндометрия (примерно от 50 до 80%) ( Рисунок 5). Среди всех групп наиболее выраженная интенсивность иммуноокрашивания наблюдалась у контрольных крыс (группы NC) (рисунки 5 и 5 (D)) и крыс, получавших только мед Tualang (группа THC) (фигуры 5 и 5 (H)).Как и ожидалось, более низкая интенсивность иммуноокрашивания наблюдалась у крыс, подвергшихся воздействию BPA (группа PC) (рисунки 5 и 5 (F)), и у крыс, получавших одновременно лечение медом Tualang (группа TH) (фигуры 5 и 5 (J)). Как показано на Фигуре 6, образцы иммуноокрашивания и интенсивности ER β отличались от ER α . Сопоставимые интенсивности иммуноокрашивания наблюдались у крыс из группы NC (Рисунки 6 и 6 (D)), группы THC (Рисунки 6 и 6 (H)) и группы TH (Рисунки 6 и 6 (J)), в то время как иммуноокрашивание было меньше. интенсивность во всех компартментах (а именно, клетках просвета и железистого эпителия и строме) у крыс, подвергшихся воздействию BPA (группа PC). Для экспрессии белка С3 комплемента интенсивность иммуноокрашивания была самой высокой как у контрольных крыс (группа NC), так и у крыс, получавших только мед Tualang (группа THC) (Фигуры 7, 7 и 7, 7, соответственно). У крыс, подвергшихся воздействию BPA (группа PC), была меньшая интенсивность иммуноокрашивания (рисунки 7 и 7), в то время как интенсивность окрашивания стромы крыс была немного выше при одновременном лечении медом Tualang (группа TH) (рисунки 7 и 7). . 3.6. ER α , ER β и экспрессия мРНК C3 Изменения в экспрессии мРНК генов, связанных с эстрогеном, измеряли для подтверждения иммуногистохимического анализа.Экспрессия мРНК ER α , ER β и комплемента C3 показана на рисунках 8 (a), 8 (b) и 8 (c). Как показано на Фигуре 8 (a), воздействие BPA на животных группы PC значительно подавляло экспрессию мРНК ER α примерно в 4 раза по сравнению с контрольными крысами (группа NC). Однако при одновременном лечении медом Туаланг (группа TH) этот показатель снизился в 3 раза. Напротив, обработка медом Туаланг (группа ТГК) показала 1,5-кратную индукцию экспрессии мРНК ER α по сравнению с контрольной группой. На фиг. 8 (b) показан несходный паттерн экспрессии мРНК ER β по сравнению с экспрессией мРНК ER α . По сравнению с контрольными крысами (группа NC), экспрессия ER β была значительно повышена примерно в 1,4 раза у крыс, подвергшихся воздействию BPA (группа PC), и была снижена до 1,1 раза при одновременном лечении медом Туаланг ( TH группа). Это указывает на то, что одновременное лечение медом Туаланг смогло снизить экспрессию мРНК ER β у крыс, подвергшихся воздействию BPA, на 80%.Между тем, только мед Туаланг (группа THC) не оказывал влияния на экспрессию мРНК ER β со значением экспрессии, сравнимым с контрольными крысами (группа NC). Как показано на Фигуре 8 (c), воздействие BPA (группа PC) вызывало резкое подавление экспрессии мРНК C3 комплемента почти на 90% по сравнению с контрольными крысами (группа NC). Удивительно, но этот эффект полностью изменился при одновременном лечении медом Туаланг (группа TH). Фактически, экспрессия мРНК C3 в группе меда Туаланг (группа TH) составляла 1.В 8 раз выше, чем у контрольных крыс (группа NC). Один только туалангский мед не оказывал влияния на экспрессию мРНК C3 со значением экспрессии, сравнимым с контрольными крысами (группа NC). 4. Обсуждение BPA, как химическое вещество, разрушающее эндокринную систему (EDC), обладает способностью имитировать, усиливать или подавлять активность природного эстрогена и нарушать функции рецепторов эстрогенных ядерных гормонов в разнообразных тканях-мишенях. [8, 13, 15, 34]. Таким образом, определение только BPA как экологического эстрогена или селективного модулятора рецептора эстрогена (SERM) действительно неточно [2]. За последние несколько десятилетий было накоплено значительное количество доказательств, демонстрирующих тот факт, что молодые женщины могут подвергаться высокому риску репродуктивного бесплодия из-за постоянного воздействия многочисленных продуктов с бисфенолом А в повседневной жизни [35]. Принимая во внимание эту озабоченность, в нашем настоящем исследовании изучалось разрушительное влияние бисфенола А на репродуктивную физиологию самок с особым акцентом на морфологию, окислительные маркеры, белковые и молекулярные изменения, которые происходят в матке крысы.Кроме того, была оценена потенциальная защитная роль меда Туаланг как натурального продукта в снижении разрушительного воздействия BPA на вышеупомянутые выбранные параметры. Также были исследованы механизмы трансляционных и транскрипционных факторов в рецепторах эстрогенов. В дополнение к классическому инструменту in vivo (утеротрофический анализ) были приняты более чувствительные инструменты, такие как анализ транскрипции генов и экспрессии белков, для исследования молекулярных ответов, вызванных воздействием BPA. В токсикологическом исследовании различия в массе тела и веса органов у нелеченных и леченых животных могут быть надежным индикатором токсических эффектов тестируемых соединений [36]. В настоящем исследовании данные токсикологии показали, что эффекты BPA, по-видимому, очень специфичны для матки, поскольку снижение веса, по-видимому, влияет на саму матку, не оказывая значительного воздействия на массу всего тела. Эти текущие результаты согласуются с предыдущим отчетом Ashby et al.[37]. Напротив, другие исследования показали, что воздействие BPA на животных-грызунов связано с увеличением веса [38-40]. BPA является одним из предложенных EDC, которые индуцируют активные формы кислорода (ROS), которые играют важную роль в патологии женских репродуктивных заболеваний, таких как эндометриоз матки [35]. Кроме того, перекисное окисление липидов (ПОЛ) — это процесс взаимодействия между активными формами кислорода (АФК) и клеточной мембраной, который вызывает повреждение клеточных макромолекул и ДНК [41].Поскольку малоновый диальдегид (МДА) является вторичным продуктом ПОЛ, он обычно считается маркером окислительного стресса [42]. Связь между оксидативным стрессом и бесплодием у женщин была доказана в нескольких научных исследованиях [43, 44]. Эпидемиологические данные показали, что более высокие уровни активных форм кислорода (АФК) и более низкие уровни антиоксидантов были обнаружены у бесплодных женщин по сравнению с фертильными женщинами [45, 46]. В настоящем исследовании уровень MDA в матке у животных, подвергшихся воздействию BPA, был значительно выше по сравнению с нормальными контрольными животными.Результаты могут быть связаны с процессом перекисного окисления липидов с помощью BPA, и этот результат хорошо коррелирует с гистопатологическим, иммуногистохимическим анализами и анализами экспрессии генов. Лечение медом Туаланг крыс, подвергшихся воздействию BPA, значительно снизило уровни MDA в матке. Это наблюдение может быть связано с антиоксидантным действием меда Туаланг, которое снижает количество свободных радикалов. Это объяснение основано на нескольких опубликованных данных, в которых сообщается, что мед Туаланг является эффективным антиоксидантом, снижающим уровень МДА у людей и животных [17, 47]. В дополнение к этому, у крыс, подвергшихся воздействию BPA, были очевидны поразительные морфологические изменения матки (нарушение нормальной структуры просветного эпителия, эндометрия, миометрия и железистых эпителиальных клеток), связанные с окислительным стрессом, по сравнению с контрольной группой. Эти морфологические изменения могут быть связаны с потенциальным прямым воздействием BPA на саму ДНК, что приводит к изменению экспрессии генов. Очевидно, что о повреждении ДНК, вызванном BPA, сообщалось в исследованиях in vivo, и in vitro, [48, 49].Это связано с тем, что BPA может окисляться до бисфенол-о-хинона, который ковалентно связывается с дезоксигуанозином с образованием аддуктов ДНК. Впоследствии аддукты ДНК вызывают неправильную и неполную репликацию, что приводит к образованию атипичных клеток. Интересно, что разрушительное воздействие BPA на морфологию матки было частично уменьшено после одновременного лечения медом Туаланг. Улучшение, опять же, можно объяснить высоким содержанием природных антиоксидантов в меде Туаланг в дополнение к углеводам, аминокислотам, белкам, органическим кислотам, витаминам и различным фитохимическим веществам [24, 50].В естественном состоянии клетки нашего тела способны поддерживать нормальное равновесие баланса антиоксидантно-окислительного стресса путем нейтрализации или прямого уменьшения окислительного повреждения с помощью ферментативных и неферментативных антиоксидантов [51]. Очевидно, мед Tualang содержит неферментативные антиоксиданты, такие как витамины E и C, с их взаимодействующими эффектами как липофильные и гидрофильные поглотители свободных радикалов соответственно [52], что, возможно, объясняет улучшение, наблюдаемое у обработанных крыс. Витамин Е находится в основном в клеточных мембранах, поэтому играет важную роль в поддержании состояния клеточных мембран [53]. Между тем, основная функция витамина С заключается в том, что он улавливает свободные радикалы во внеклеточной жидкости, улавливает радикалы в водной фазе, защищает биомембраны от нарушения пероксидазы и восстанавливает токоферол (витамин E) от токофероксильных радикалов в мембране [54]. Несколько исследований показали, что оба антиоксиданта могут смягчать неблагоприятные патологические воздействия за счет минимизации эффектов генотоксичности и цитотоксичности в клетках [55–57].Флавонолы (кверцетин и кемпферол) со слабой эстрогенной активностью объясняются снижением внутриклеточных активных форм кислорода (АФК) за счет механизма, который включает рецепторы эстрогена [58]. Таким образом, в нашем исследовании антиоксидантные свойства меда Туаланг могут способствовать защитным эффектам в клетках путем улавливания и инактивации свободных радикалов, что наблюдается при улучшении гетерогенных типов клеток матки (стромальный, просветный эпителий, эндометриальные железы, и гладкие мышцы). Тем не менее, морфологическое восстановление матки, подвергшейся воздействию БФА, после лечения медом Туаланг является частичным. Это может быть связано с присутствием других активных форм кислорода, которые также могут вызывать разрушительные эффекты. Более того, даже после удаления BPA неактивным детоксифицирующим белкам / ферментам может потребоваться определенный период времени для восстановления, как подтверждают Chevallet et al. [59]. Другие результаты нашего исследования, которые также согласуются с предыдущими исследованиями, показали, что BPA может нарушать развитие, рост и функции матки, прерывая регуляцию экспрессии мРНК и распределения белка ER α , ER β , и дополнение C3 [12, 13, 60].Рецептор эстрогена (ER) является членом суперсемейства стероидных рецепторов, лиганд-активируемым белком-энхансером, который активируется гормоном эстрогеном (17 β -эстрадиол) и способен регулировать транскрипцию гена с помощью элементов, чувствительных к эстрогену [61]. К сожалению, он также может быть активирован другими соединениями, включая химические вещества, нарушающие работу эндокринной системы, такие как BPA [62]. ER кодируется двумя генами подтипа, а именно ER α и ER β , которые действуют как преобразователь сигнала и фактор транскрипции при модуляции экспрессии генов-мишеней [63].Эндогенный эстроген (17 β -эстрадиол) имеет более низкую аффинность связывания с ER β , чем ER α [34], но оба рецептора имеют сходство с точки зрения трансактивации через эстроген-чувствительный элемент (ERE) [64]. Напротив, они обладают разными функциями в отношении их роли в активации транскрипции, которая очень сильно зависит от лигандов и их реагирующих элементов [65]. BPA считается слабым эстрогеном окружающей среды, поскольку его аффинность связывания с ER α и ER β , по оценкам, в 10000 раз ниже, чем у эндогенного эстрогена, с относительной аффинностью связывания в 6 раз выше в ER β по сравнению с ER α [34, 62].С другой стороны, в некоторых типах клеток BPA проявляет эстрадиолоподобную агонистическую активность через ER β и смешанную агонистическую / антагонистическую активность через ER α [15]. Оба подтипа содержат лиганд-зависимый домен трансактивации, названный AF2 (функция активации 2), для активации транскрипции генов-мишеней путем привлечения транскрипционных кофакторов, коактиватора стероидного рецептора-1 (SRC-1) и промежуточного фактора транскрипции-2 (TIF- 2) [66]. Разрушающая роль BPA в этом пути значительно увеличивает рекрутирование этих кофакторов [67].Это могло быть возможным объяснением наших настоящих данных, которые показали значительное повышение экспрессии мРНК и более высокое распределение белка ER β у животных, подвергшихся воздействию BPA (группа PC), по сравнению с контрольными крысами. В нашем исследовании, помимо роли перекисного окисления липидов, повышенная регуляция ER β у животных, подвергшихся воздействию BPA, может быть отнесена к разрушительным эффектам в матке. Отчет Weihua et al. выявили, что в матке ER β действует как модулятор транскрипции гена, опосредованного ER α [68].Роль ER β заключается в качестве трансдоминантного репрессора, который ингибирует транскрипционную активность ER α [69]. Ингибирующие эффекты обусловлены способностью ER β образовывать гетеродимеры с ER α , которые, в свою очередь, регулируют функции рецепторов эстрогенов [70]. Таким образом, в отличие от ER α , ER β не имеет классических утеротрофических эффектов, а скорее разрушает ER α . Другие исследования с помощью анализа кристаллографической структуры и компьютерного моделирования показали, что BPA имеет более высокое сродство связывания с ERR γ и ER α [71, 72].ERR γ представляет собой орфанный ядерный рецептор, принадлежащий к семейству ERR (связанный с рецепторами эстрогена) [73]. Хотя рецепторы ER α и ERR γ обладают сходной гомологией последовательностей, 17 β -эстрадиол не связывается с ERR γ [74]. Было высказано предположение, что взаимодействие BPA-ERR γ запускает гетеродимеризацию между ER α и ERR γ , что приводит к подавлению транскрипционной активности ER α [71].Сходным образом, Huppunen и Aarnisalo также сообщили, что модуляция BPA как ингибитора передачи сигналов ER α также осуществляется через ERR γ [75]. Такое взаимодействие могло быть объяснением наших настоящих данных, которые показали значительное подавление экспрессии мРНК и более низкое распределение белка ER α у животных, подвергшихся воздействию BPA (группа PC), по сравнению с контрольными нормальными животными. Кроме того, экспрессия мРНК ER α также была значительно выше у крыс, получавших мед Туаланг.Однако распределение белков не сильно отличалось от нормальных контрольных крыс. Следовательно, эти результаты предполагают, что мед Туаланг, вероятно, модулирует экспрессию мРНК ER α на уровне транскрипции, но не на уровне трансляции. Комплемент С3 участвует в врожденном иммунитете. Решающая роль C3 — регулировать любую активацию повреждения клетки-хозяина, способствуя фагоцитозу, инициируя местные воспалительные реакции против патогенов, и инструктируя соответствующий адаптивный иммунный ответ на антигены для гуморального ответа [76].В 2004 г. Seidlová-Wuttke et al. использовали количественный анализ RT-PCR для исследования влияния BPA на транскрипцию мРНК C3 в матке крысы [13]. По мнению авторов, лечение эстрадиолом значительно усиливало экспрессию мРНК C3. Интересно, что эффект не имитировался воздействием BPA, когда наблюдалось подавление экспрессии мРНК C3. Этот эффект также наблюдался в нашем настоящем исследовании. Однако одновременное лечение медом Туаланг позволило значительно увеличить экспрессию C3, что указывает на некоторое улучшение врожденной иммунной системы.Интересно, что экспрессия мРНК у крыс, получавших мед Туаланг, также была значительно выше по сравнению с контрольными животными. Это может быть связано с более высокой активацией транскрипционной активности C3, вызванной некоторыми биоактивными соединениями, которые противодействуют влиянию BPA на врожденную иммунную систему. Однако распределение белка у крыс, получавших мед Туаланг, не сильно отличалось от крыс, получавших BPA. Следовательно, эти результаты предполагают, что мед Туаланг, вероятно, модулирует экспрессию мРНК C3 на уровне транскрипции, но не на уровне трансляции. Улучшение белков и молекулярных уровней ER α , ER β и C3 у животных, подвергшихся воздействию BPA, получавших мед Tualang, можно объяснить тем фактом, что мед Tualang содержит антиоксиданты с высоким питательным профилем, включая флавоноиды, в частности флавонолы. [58]. Два основных встречающихся в природе флавонола, а именно кверцетин и кемпферол, имеют структурное сходство с 17 β -эстрадиолом и, следовательно, потенциально могут иметь слабые эстрогенные эффекты [58].Данные нашего предыдущего исследования показали, что помимо способности удалять оксиданты и свободные радикалы [19], биологически активные эстрогеноподобные соединения в меде Туаланг также улучшают состояние атрофии матки и влагалища [18]. Кроме того, наши предыдущие результаты также показали, что потенциальное конкурентное связывание этих соединений также способствовало улучшению функции гипоталамо-гипофизарной оси у животных, подвергшихся воздействию BPA [77], что также подтверждается более ранним исследованием [78]. Эффекты перекисного окисления липидов BPA на повреждение ДНК также были тщательно протестированы в исследованиях in vivo, и in vitro, [79–81].Сообщалось, что антигенотоксический эффект туалангского меда происходит через несколько механизмов: активация ферментов репарации двухцепочечной ДНК [82], уменьшение димеров циклобутан-пиримидина и 8-оксо-dG-положительных клеток (биомаркеры повреждения ДНК) [83], и индукция апоптоза [84]. Подобные защитные механизмы против повреждения ДНК были предложены в исследованиях гречишного меда и меда из засушливых регионов, которые также согласуются с текущими данными о меде Туаланг [85, 86]. 5.Выводы В заключение, мед Туаланг имеет потенциальную роль в сокращении разрушения матки, вызванного BPA, возможно, благодаря его фитохимическим свойствам. В связи с этим, мед Tualang может быть предложен в качестве многообещающего кандидата на натуральный продукт для снижения токсического воздействия BPA на матку. Таким образом, необходимы дальнейшие исследования, чтобы установить точное и лучшее понимание роли фитохимических соединений в меде Туаланг, которые влияют на снижение токсичности матки, вызванной BPA. Сокращения 9349 9349 рецептор эстрогена 934 Положительный контроль 934 Группа отрицательного контроля группа BPA: Бисфенол A OSCC: Плоскоклеточная карцинома полости рта ER α ER: Бета-рецептор эстрогена MDA: Малоновый диальдегид TBARS: Вещества, реагирующие с тиобарбитуровой кислотой PBS: 9Butol 9034 9-солевой буферизованный 9-солевой буферизованный 9-солевой фосфат РНК: Рибонуклеиновая кислота кДНК: Комплементарная дезоксирибонуклеиновая кислота ПЦР: Полимеразная цепная реакция NC16 9027 934 TH: Мед Tualang + группа BPA THC: Контроль меда Tualang. Добавить комментарий Отменить ответ Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены * Комментарий * Имя * Email * Сайт Рубрики Мед Советы ↑