Ооо рт мед: ООО «РТ-МЕД», Ленинградская обл Выборгский Выборг (ИНН 4704093440, ОГРН 1134704001937) – реквизиты

Содержание

О компании

ООО «РТ-мед» специализируется на комплексных поставках расходных материалов и оборудования медицинского назначения для лечебных учреждений. Мы работаем как с государственными, так и с частными клиентами. 

Медицинское оборудование

Среди поставляемого нами оборудования — ультразвуковые аппараты, рентгеновская техника, электрохирургическое оборудование, оборудование для эндовидеохирургии и гибкой эндоскопии, оборудование для функциональной диагностики. 

Сотрудники компании помогут клиенту грамотно спланировать расходы, подобрать оптимальную конфигурацию оборудования. Среди консультантов компании — практикующие специалисты высокой квалификации, доктора и кандидаты медицинских наук. Вопрос подбора оборудования для медицинских проектов может быть решен на высоком профессиональном уровне, с обеспечением оптимального баланса между качеством и надежностью техники и ее стоимостью. Мы всегда способны предоставить нашим клиентам наиболее привлекательные условия для сотрудничества. 

Расходные материалы

Наша компания поставляет как расходные материалы медицинского назначения, так и широкий спектр расходных материалов общего профиля. Мы специализируемся на поставках расходных материалов для операционных блоков (одноразовое стерильное белье, стерильные халаты, перчатки, шовные материалы, гемостатические средства и др.). Благодаря значительным объемам поставок «РТ-мед» предоставляет своим клиентам конкурентоспособные цены и удобный график поставок. 

Сервисное обслуживание медицинской техники

Профессиональное сервисное обслуживание и ремонт медицинской техники — одно из важнейших направлений работы нашей компании. Среди наших сотрудников — инженеры высокой квалификации, располагающие значительным опытом в области работы с медоборудованием. Мы располагаем качественно оборудованным цехом по ремонту оборудования, позволяющим производить наиболее сложные виды ремонта. Также сотрудники компании обеспечивают выездное обслуживание медицинской техники в пределах Санкт-Петербурга и Ленинградской области. 

Карточка предприятия | СМО «Чулпан-Мед»

Наименование, организационно-правовая форма (ООО, ОАО): Общество с ограниченной ответственностью Страховая медицинская организация
«Чулпан-Мед»

ООО СМО « Чулпан-Мед»

Юридический адрес: 423450, РТ, г.Альметьевск, ул.Пушкина, д.66, пом.1

Фактическое местонахождение: 423450, РТ, г.Альметьевск, ул.Пушкина, д.66, пом.1

Филиалы, представительства и пункты выдачи полисов ОМС (наименование и фактическое местонахождение):


  • РТ, г. Альметьевск, ул. Пушкина, д.66, пом.1. Тел.: (8553) 304-494
  • РТ, г. Казань, ул. Пушкина д. 30 офис 112.: (843) 291-53-93
  • РТ, г. Набережные Челны, пр. Мира, д.40. Тел.: (8552) 306-090
  • РТ, г. Набережные Челны, пр. Мусы Джалиля, д. 78 (ГЭС 10/10А), 2 этаж, 201 каб. Тел: 8-987-210-25-03
  • РТ, г. Набережные Челны, ул. Ак.Рубаненко, д.4. (1/06). Тел.: 8-917-860-85-84
  • РТ, г. Нижнекамск,ул. Кайманова, д.1. Тел.: (8555) 43-01-43
  • РТ, г. Азнакаево, ул.Ленина, д. 2а. Тел.: (85592) 7-01-21
  • РТ, Алексеевский район, пгт.Алексеевское, ул. Куйбышева, д.90А, пом.№9. Тел.: (84341) 2-70-45
  • РТ, с.Актаныш, пр.Мира, д.7, кв.10. Тел.: 8-958-626-17-07
  • РТ, г. Бавлы, ул. Пушкина, д. 27. Тел.: 8-958-626-89-65
  • РТ, г. Бугульма, ул. Оршанского, д.22. Тел.: 8-939-339-35-32
  • РТ, г. Бугульма, ул. Джалиля, д. 23. Тел.: 8-958-627-18-11
  • РТ, г. Елабуга, пр. Нефтяников, 60а. Тел.: (85557) 7-18-61
  • РТ, г. Лениногорск, ул. Заварыкина, д.2а. Тел.: (85595) 4-00-11
  • РТ, г. Нурлат, ул. К.Маркса, д.45, 2 этаж, каб.4. Тел.: 8-987-230-05-66
  • РТ, Сармановский р-он, с. Сарманово, ул. Ленина, д.52. Тел.: 8-902-719-03-14
  • РТ, Сармановский р-он, пгт. Джалиль, ул. 30 лет Победы, д.13. Тел.: (85559) 50-333
  • РТ, Ютазинский район, пгт. Уруссу, ул. Ленина, д.17. Тел.: 8-958-626-46-87
  • РТ, г. Зеленодольск, ул. Татарстан, д.20, 1 этаж. Тел.: 8-917-909-95-76
  • РТ, пгт Кукмор, ул. Ворошилова, д.2. Тел.: (84364) 2-66-06
  • РТ, г. Мамадыш, ул.Советская, 12А. Тел.: 8-939-396-54-83
  • РТ, с. Муслюмово, ул. Первомайская, д.22. Тел.: 8-958-626-47-53.
  • РТ, г. Чистополь, ул. К.Маркса, 47а. Тел.: (84342) 5-16-35
  • РТ, г. Заинск, пр.Нефтяников, д.37. Тел.: 8-908-339-70-24

Основной вид деятельности: Обязательное медицинское страхование

Наименование учредителя: АО СК «Чулпан»

Сведения о руководителе и главном бухгалтере организации: ФИО, тел.,факс:

Директор – Калимуллин Анвар Рамилевич
(8553)304-494, факс (8553) 304-485
Гл.бухгалтер – Боровцова Ирина Юрьевна
(8553)304-494, факс (8553) 304-485

Контактное лицо по оплате (ФИО, тел., e-mail,факс):

Бухгалтер – Черешова Людмила Геннадьевна
(8553)304-494, факс (8553) 304-485

Контактное лицо по техническим вопросам (ФИО, тел., e-mail,факс)

Ахметшина Мадина Асхатовна (8553) 304-494

ИНН: 1644031803

КПП: 164401001

ОКВЭД: 66.12.1, 66.12.9

ОКПО: 74575006

ОГРН: 1041608018726

БИК: 049205702

Банковские реквизиты:

Филиал «Приволжский» ПАО Банка «ЗЕНИТ»

Расчетный счет: 40701810500090001461

Корреспондентский счет: 30101810200000000702

Дата размещения/обновления: 16.07.2021 10:08:58

МРТ бесплатно по полису ОМС для Казани и регионов

Как сделать МРТ бесплатно по системе ОМС?

Полис обязательного медицинского страхования включает в себя список бесплатных услуг, которые можно получить в случае заболевания застрахованного лица. МРТ является высокотехнологичным исследованием и входит в список бесплатно оказываемых услуг по полису ОМС.

Выбрав клинику Эксперт+, Вы получаете возможность пройти бесплатное медицинское обследование на современном магнитно-резонансном томографе Siemens Magnetom Symphony Maestro Class 1,5

Для получения услуги (МРТ) в рамках программы ОМС необходимо:

  1. получить направление на исследование установленного образца, заверенное подписью руководителя и печатью медицинской организации, которое оформляет лечащий врач в поликлинике по месту прикрепления или в стационаре;
  2. записаться на исследование.
    Запись осуществляется по телефону: 8 (843) 205-59-17 с 7:00 до 23:00
  3. медицинские услуги (МРТ) оказываются в сроки, предусмотренные территориальной программой государственных гарантий бесплатного оказания гражданам медицинской помощи на 2021 год.

При себе необходимо иметь: полис обязательного медицинского страхования, паспорт, направление, СНИЛС

По стандарту «Эксперт+» результаты медицинского исследования оформляются заключением на бумажном носителе с регистрацией (записью) данных исследования и выдачей снимков НА ДИСКЕ. Регистрация (запись) данных медицинского исследования на ином носителе (плёнка, USB-флеш-носитель) либо повторная регистрация данных медицинского исследования на диске являются самостоятельными медицинскими услугами и оплачиваются дополнительно по установленным ценам (тарифам).

Также вы можете  проконсультироваться по уже имеющимся у Вас снимкам из других клиник,  наши опытные врачи с удовольствием проведут для Вас консультацию по снимкам и дадут все необходимые рекомендации.

У вас остались вопросы? Оставьте заявку, и мы Вам перезвоним! Это бесплатно.

Данные отчетности по отдельным страховщикам | Банк России

№ пп Краткое наименование субъекта страхового дела Организационно-правовая форма Полное наименование субъекта страхового дела Местонахождение Регистрационный номер по Единому государственному реестру субъектов страхового дела Сведения о деятельности страховщика
1 АБСОЛЮТ СТРАХОВАНИЕ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Абсолют Страхование» 123290, г.Москва, 1-й Магистральный тупик, д.5А 2496 XLS | XML
2 АВАНГАРД-ГАРАНТ Акционерное общество Акционерное общество «Страховая группа АВАНГАРД-ГАРАНТ» 129090, Москва, Грохольский пер., 29, стр.1 796 XLS | XML
3 АДВАНТ-СТРАХОВАНИЕ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Адвант-Страхование» 191014, Санкт-Петербург, Артиллерийская ул.,д.1, лит.А, пом.26-н 3290 XLS | XML
4
АДОНИС
ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая фирма «Адонис» 614022 г.Пермь ул. Братьев Игнатовых, дом 3 585 XLS | XML
5 АИГ СТРАХОВАЯ КОМПАНИЯ ЗАО Акционерное общество «АИГ страховая компания» 125315, Москва, Ленинградский проспект, д.72, корп.2 3947 XLS | XML
6 АИЖК Акционерное общество Акционерное общество «Страховая компания АИЖК» 125009, город Москва, улица Воздвиженка, дом 10 4210 XLS | XML
7 АК БАРС СТРАХОВАНИЕ ООО Общество с ограниченной ответственностью «АК БАРС СТРАХОВАНИЕ» 420124, РТ, г.Казань, ул.Меридианная, д.1а 3867 XLS | XML
8 АК БАРС-МЕД ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания «АК БАРС-Мед» 420124, Республика Татарстан, г.Казань, ул.Меридианная,1а 3943 XLS | XML
9 АКЦЕПТ ООО Общество с ограниченной ответственностью Страховое общество «Акцепт» 140000, Московская область, Люберецкий район, город Люберцы, проспект Октябрьский, д.133, офис 103 3572 XLS | XML
10 АЛЛЕГА ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания «Аллега» 295001, Республика Крым, г.Симферополь, ул.Чехова, д.51 3859 XLS | XML
11 АЛЬФАСТРАХОВАНИЕ ОАО Открытое акционерное общество «АльфаСтрахование» 115162, г. Москва, ул. Шаболовка, д. 31, стр. Б 2239 XLS | XML
12 АЛЬФАСТРАХОВАНИЕ — ОМС ООО Общество с ограниченной ответственностью «АльфаСтрахование-ОМС» 115162, г. Москва, ул. Шаболовка, д.31, стр.8 193 XLS | XML
13 АЛЬФАСТРАХОВАНИЕ-ЖИЗНЬ ООО Общество с ограниченной ответственностью «АльфаСтрахование-Жизнь» 115162, г. Москва, ул. Шаболовка, д. 31, стр. Б 3447 XLS | XML
14 АЛЬЯНС ОАО Акционерное общество Страховая компания «Альянс» 115184, г. Москва, Озерковская набережная, д.30 290 XLS | XML
15 АЛЬЯНС ЖИЗНЬ ООО Общество с ограниченной ответственностью Страховая компания «Альянс Жизнь» 115184, г. Москва, Озерковская набережная, д.30 3828 XLS | XML
16 АЛЬЯНС-МЕД ООО Общество с ограниченной ответственностью страховая компания «Альянс-Мед» 446001 Самарская область г. Сызрань ул. Ульяновская д.79 2699 XLS | XML
17 АМТ СТРАХОВАНИЕ ООО Общество с ограниченной ответственностью «АМТ Страхование» г. Москва, ул. Ямского поля, 3-я, д.2, корп. 26 436 XLS | XML
18 АНГАРА ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания «Ангара» 665708,Иркутская обл.,г.Братск,ул.Южная,23 66 XLS | XML
19 АНДРОМЕДА ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания Андромеда» 111024, г.Москва, ул.Авиамоторная, вл.12 2982 XLS | XML
20 АРМЕЕЦ Акционерное общество Акционерное общество Страховая компания «Армеец » 125040, город Москва, Ленинградский проспект, дом 20, строение 1 1858 XLS | XML
21 АРСЕНАЛ МЕДИЦИНСКОЕ СТРАХОВАНИЕ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Арсенал медицинское страхование» 111020, г. Москва, ул. Боровая, д.7, стр.7 4324 XLS | XML
22 АРСЕНАЛЪ ООО Общество с ограниченной ответственностью «СТРАХОВАЯ КОМПАНИЯ «АРСЕНАЛЪ» 111020, г. Москва, 2-ая ул. Синичкина, д. 9а, строение 10 3193 XLS | XML
23 АСКО ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая группа «АСКО» РФ, РТ, г.Набережные Челны, проспект Вахитова, 24 2489 XLS | XML
24 АСКО-ЖИЗНЬ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания «АСКО-Жизнь» РФ, РТ, г. Набережные Челны, пр. Вахитова, д.36 В 3999 XLS | XML
25 АСКО-ЗАБОТА ООО Общество с ограниченной ответственностью «Медицинская страховая компания «АСКО-ЗАБОТА» 644042 г.Омск ул.Бульвар Победы 7 1894 XLS | XML
26 АСКОМЕД Акционерное общество Акционерное общество «Страховая компания «АСКОМЕД» 443010, г. Самара, ул. Молодогвардейская, 146 278 XLS | XML
27 АСКОР ООО Общество с ограниченной ответственностью Страховая компания «АСКОР» 109029, г. Москва, Автомобильный проезд, д.4, стр.1 3767 XLS | XML
28 АСКО-ЦЕНТР Акционерное общество Акционерное общество «Страховая компания АСКО-Центр» 305004, г. Курск, ул. Челюскинцев,14 2144 XLS | XML
29 АСТРАМЕД-МС Акционерное общество СТРАХОВАЯ МЕДИЦИНСКАЯ КОМПАНИЯ «АСТРАМЕД-МС» (АКЦИОНЕРНОЕ ОБЩЕСТВО) 620073, г.Екатеринбург, ул Крестинского, 46А, оф.303 1372 XLS | XML
30 АСТРА-МЕТАЛЛ ООО Общество с ограниченной ответственностью Страховая медицинская компания «АСТРА-МЕТАЛЛ» 455045, Челябинская область, г.Магнитогорск, ул.Завенягина, 1/2 758 XLS | XML
31 АСТРО-ВОЛГА Акционерное общество Акционерное общество «Страховая компания «Астро-Волга» 443001, г. Самара, ул.Арцыбушевская, д.167 2619 XLS | XML
32 АСТРО-ВОЛГА-МЕД Акционерное общество Акционерное общество «Страховая компания «Астро-Волга-Мед» 443001, Российская Федерация, г. Самара, ул. Арцыбушевская, д. 167 2684 XLS | XML
33 АТРАДИУС РУС КРЕДИТНОЕ СТРАХОВАНИЕ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Атрадиус Рус Кредитное Страхование» 109147, г. Москва, ул. Таганская, дом 17-23 4334 XLS | XML
34 БАСК ОАО Открытое акционерное общество Страховая компания «БАСК» 652600, г.Белово, Кемеровская область, пер.Цинкзаводской, 8А 518 XLS | XML
35 БИН СТРАХОВАНИЕ ООО ОБЩЕСТВО С ОГРАНИЧЕННОЙ ОТВЕТСТВЕННОСТЬЮ «БИН СТРАХОВАНИЕ» 121552, г. Москва, ул Островная, д 4, помещение 22В 3487 XLS | XML
36 БЛАГОСОСТОЯНИЕ Акционерное общество Акционерное общество «Страховая компания БЛАГОСОСТОЯНИЕ» 127055, г. Москва, ул. Новолесная д.2 3991 XLS | XML
37 БЛАГОСОСТОЯНИЕ ОБЩЕЕ СТРАХОВАНИЕ Акционерное общество Акционерное общество «Страховая компания БЛАГОСОСТОЯНИЕ ОБЩЕЕ СТРАХОВАНИЕ» 127018, г.Москва, ул. Сущевский Вал, д.18 1207 XLS | XML
38 БОРОВИЦКОЕ СТРАХОВОЕ ОБЩЕСТВО Акционерное общество Акционерное общество «Боровицкое страховое общество» 101000, Москва г, Покровский б-р, дом № 4/17, строение 3 3064 XLS | XML
39 БРИТАНСКИЙ СТРАХОВОЙ ДОМ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Британский Страховой Дом» 129626, Россия, г. Москва, Графский пер., дом 12А, стр. 2 3799 XLS | XML
40 ВЕРНА ООО Общество с ограниченной ответственностью Страховое общество «ВЕРНА» 350015, Краснодарский край, г. Краснодар, ул. Новокузнечнкая, д.40 3245 XLS | XML
41 ВИС Некоммерческая организация Некоммерческая организация общество взаимного страхования «Взаимопомощь и страхование» Республика Дагестнан, г.Махачкала, пр-т.Акушинского 98″е» 4170 XLS | XML
42 ВИТАЛ-ПОЛИС ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания «ВИТАЛ-Полис» 115114, г. Москва, 2-ой Кожевнический пер., д. 12, стр. 2 3561 XLS | XML
43 ВИТА-СТРАХОВАНИЕ ООО Общество с ограниченной ответсвенностью 628404, Российская Федерация, Тюменская область, Ханты-Мансийский автономный округ-Югра, г. Сургут, ул. Григория Кукуевицкого, д. 18 3826 XLS | XML
44 ВОЗРОЖДЕНИЕ-КРЕДИТ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Красноярская страховая компания «Возрождение-Кредит» 660037, г.Красноярск, пр-т им.газеты «Красноярский рабочий» д.59 1440 XLS | XML
45 ВОСТОЧНО-СТРАХОВОЙ АЛЬЯНС ООО ОБЩЕСТО С ОГРАНИЧЕННОЙ ОТВЕТСТВЕННОСТЮ СТРАХОВАЯ МЕДИЦИНСКАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ «ВОСТОЧНО-СТРАХОВОЙ АЛЬЯНС» 690002 Приморский крвй, г. Владивосток, ул. Алтайская, д. 3 3570 XLS | XML
46 ВОСТСИБЖАСО Акционерное общество Акционерное Общество «Восточно-Сибирское Железнодорожное Акционерное Страховое общество» 664025, г.Иркутск, ул.Пролетарская, 8 433 XLS | XML
47 ВСК Акционерное общество Страховое акционерное общество «ВСК» 121552, г. Москва, ул. Островная, д.4 621 XLS | XML
48 ВСК-ЛИНИЯ ЖИЗНИ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания «ВСК — Линия жизни» 121552, г. Москва, ул. Островная, д.4 3866 XLS | XML
49 ВСК-МИЛОСЕРДИЕ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания «ВСК-Милосердие» 121552, г. Москва, ул. Островная, д.4 3978 XLS | XML
50 ВТБ МЕДИЦИНСКОЕ СТРАХОВАНИЕ Акционерное общество Акционерное Общество ВТБ Медицинское страхование 115432, г. Москва, Проезд Южнопортовый 2-й, дом 27А, стр.1 257 XLS | XML
51 ВТБ СТРАХОВАНИЕ ООО Общество с ограниченной ответственностью Страховая компания «ВТБ Страхование» 101000, г. Москва, Чистопрудный бульвар, д. 8, стр. 1. 3398 XLS | XML
52 ВТБ СТРАХОВАНИЕ ЖИЗНИ Акционерное общество Акционерное общество ВТБ Страхование жизни 107078, Москва, ул. Мясницкая, д.48 3995 XLS | XML
53 ВЫРУЧИМ! Акционерное общество АО Страховая компания «Выручим!» 620026, г.Екатеринбург, ул.Белинского 56, офис 412 3780 XLS | XML
54 ГАЙДЕ Публичное акционерное общество Акционерное общество «Страховая компания Гайде» 191119, Санкт-Петербург, Лиговский пр., д. 108, лит.А 630 XLS | XML
55 ГАЛАКТИКА ООО 3908
56 ГАРАНТИЯ ИНВЕСТИЦИЙ Некоммерческая организация Некоммерческая корпоративная организация — Потребительское общество взаимного страхования «Гарантия Инвестиций» 129110, г. Москва, ул. Щепкина, дом 60/2, стр. 1, пом. III 4169 XLS | XML
57 ГЕЛИОС ООО Общество с ограниченной ответственностью Страховая Компания «Гелиос» 109544, г. Москва Бульвар Энтузиастов, д. 2 397 XLS | XML
58 ГЕОПОЛИС ООО Общество с ограниченной ответственностью Страховое общество «Геополис» 119017, Москва, Б. Толмачевский пер. д. 16 стр. 4 2397 XLS | XML
59 ГЕОПОЛИС ЗАО Страховое Акционерное Общество «Геополис» 119017, Москва, Мал. Толмачевский пер., д. 10 448 XLS | XML
60 ГОРОДСКАЯ СТРАХОВАЯ МЕДИЦИНСКАЯ КОМПАНИЯ ОАО Открытое акционерное общество «Городская страховая медицинская компания» г. Санкт-Петербург, Кузнечный пер., д. 2-4 2071 XLS | XML
61 ГРАЖДАНСКИЙ СТРАХОВОЙ ДОМ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания «Гражданский страховой дом» 127055 г.Москва, Порядковый пер., д.21 3678 XLS | XML
62 ГРАНТА ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания «Гранта» 420126, Республика Татарстан, город Казань, проспект Ф. Амирхана, дом 21, помещение 1011 2042 XLS | XML
63 ГРУППА РЕНЕССАНС СТРАХОВАНИЕ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Группа Ренессанс Страхование» 115114, Москва, Дербеневская набережная, дом 7, стр. 22 1284 XLS | XML
64 ГУТА-СТРАХОВАНИЕ Акционерное общество Акционерное общество «ГУТА-Страхование» 107078, г. Москва, Орликов пер., д. 5, стр. 3 1820 XLS | XML
65 Д2 СТРАХОВАНИЕ Акционерное общество Акционерное общество «Д2 Страхование» 630099, г.Новосибирск, ул.Советская, 33 1412 XLS | XML
66 ДАЛЬАКФЕС ООО 2214 XLS | XML
67 ДАЛЬЖАСО Акционерное общество Дальневосточное железнодорожное акционерное страховое общество «ДальЖАСО» Российская Федерация, город Хабаровск, ул.Пушкина, дом 38а 55 XLS | XML
68 ДАЛЬ-РОСМЕД ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания «ДАЛЬ-РОСМЕД» 680021, г.Хабаровск, улица Некрасова, дом 44 525 XLS | XML
69 ДВАДЦАТЬ ПЕРВЫЙ ВЕК ЗАО Акционерное общество «Страховая компания «Двадцать первый век» 191014 Санкт-Петербург, Литейный проспект д. 57А, ЛИТ.А 2027 XLS | XML
70 ДЕЛО ЖИЗНИ ООО Общество с ограниченной ответственностью страховая компания «ДЕЛО ЖИЗНИ» 125252,г.Москва,ул.Зорге,д.22А,оф.811 3870 XLS | XML
71 ДИАМАНТ ООО Общество с ограниченной ответственностью Страховая Компания «Диамант» 105062, г. Москва, Фурманный пер., д. 9/12 оф. 501 1363 XLS | XML
72 ДИАНА Акционерное общество Акционерное общество «Страховая Компания «ДИАНА» 665835, г.Ангарск, 7 мкр., дом 15, помещение 294 206 XLS | XML
73 ЕВРОИНС ООО Общество с ограниченной ответственностью «РУССКОЕ СТРАХОВОЕ ОБЩЕСТВО «ЕВРОИНС» 214000, Смоленская обл., г. Смоленск, ул.Глинки, дом 7, этаж 2 помещение 9 3954 XLS | XML
74 ЕВРОПА Акционерное общество 990
75 ЕРВ ТУРИСТИЧЕСКОЕ СТРАХОВАНИЕ Акционерное общество Акционерное общество «ЕРВ Туристическое Страхование» 119049, г.Москва, 4-й Добрынинский пер., д.8, пом.С14-1, комн. 21-26 4009 XLS | XML
76 ЕСЕЯ Некоммерческая организация 4307
77 ЖАСО-ЛАЙФ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания ЖАСО-ЛАЙФ» 105066, г.Москва, ул. Доброслободская,19 4003 XLS | XML
78 ЖЕЛЕЗНОДОРОЖНЫЙ СТРАХОВОЙ ФОНД Акционерное общество Акционерное общество «Страховая компания «Железнодорожный страховой фонд» г.Нижний Новгород, пр-т Ленина д.10 2447 XLS | XML
79 ЗАБАЙКАЛМЕДСТРАХ Государственное унитарное предприятие Государственное унитарное предприятие Забайкальского края «Государственная страховая медицинская компания «Забайкалмедстрах» 672000, г Чита, Лермонтова, 2 2456 XLS | XML
80 ЗАПОЛЯРЬЕ Акционерное общество Акционерное общество «Государственная медицинская страховая компания «Заполярье» 629003 Ямало-Ненецкий автономный округ г.Салехард ул.Маяковского 4 1947 XLS | XML
81 ЗЕТТА СТРАХОВАНИЕ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Зетта Страхование» 121087, Москва, Багратионовский проезд, 7, корп.11 1083 XLS | XML
82 ИНВЕСТ-ПОЛИС ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания „Инвест-Полис“ 141070, Московская область, г.Королев, Калининградская ул., д.20 3616 XLS | XML
83 ИНВЕСТСТРАХ Акционерное общество Акционерное общество АКЦИОНЕРНАЯ СТРАХОВАЯ КОМПАНИЯ „ИНВЕСТСТРАХ“ 117405, г. Москва, ул. Кирпичные выемки, д.2, стр.1, оф. 307 2401 XLS | XML
84 ИНГВАР Акционерное общество Акционерное общество Страховая компания „Ингвар“ 101000, г. Москва, ул. Мясницкая, д. 46/2, стр.3 425 XLS | XML
85 ИНГОССТРАХ Публичное акционерное общество Страховое публичное акционерное общество „Ингосстрах“ 117997, г. Москва, ул. Пятницкая, д.12, стр.2 928 XLS | XML
86 ИНГОССТРАХ ОНДД КРЕДИТНОЕ СТРАХОВАНИЕ ООО Общество с ограниченной ответственностью „Ингосстрах ОНДД Кредитное Страхование“ 115054, г. Москва, Павелецкая пл., д. 2, стр. 1 4189 XLS | XML
87 ИНГОССТРАХ-ЖИЗНЬ ООО Общество с ограниченной ответственностью „Страховая компания „Ингосстрах-Жизнь“ 125171, г. Москва, Ленинградское шоссе, дом 16, стр. 9 3823 XLS | XML
88 ИНГОССТРАХ-М ООО Общество с ограниченной ответственностью “ Страховая компания» Ингосстрах-М» 117997, г. Москва, ул. Пятницкая, д12, стр.2 3837 XLS | XML
89 ИНЕРТЕК ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания «Инертек» 190031,г.Санкт-Петербург,Спасский переулок, дом 14/35,литер А,оф.605 2169 XLS | XML
90 ИНКО-МЕД ООО Общество с ограниченной ответственностью «Медицинская страховая компания „ИНКО-МЕД“ 643,394018,36,город Воронеж,улица Платонова,дом 14 2031 XLS | XML
91 ИНТАЧ СТРАХОВАНИЕ Акционерное общество Акционерное общество „ИНТАЧ СТРАХОВАНИЕ“ 123018 г. Москва, ул. Сущевский вал дом 18 870 XLS | XML
92 КАЙРОС ООО Общество с ограниченной ответственностью Страховая компания „Кайрос“ 683003, Камчатский край, г.Петропавловск-Камчатский, ул. Ленинградская, д. 27 902 XLS | XML
93 КАПИТАЛ ПЕРЕСТРАХОВАНИЕ ЗАО Закрытое акционерное общество „Капитал Перестрахование“ 121059, Россия, г.Москва, ул.Киевская, д.7 3175 XLS | XML
94 КАПИТАЛ СТРАХОВАНИЕ ОАО Открытое Акционерное Общество „Капитал Страхование“ 628486, ХМАО-ЮГРА, Тюменская область, г.Когалым, ул. Молодежная, д. 10 1298 XLS | XML
95 КАПИТАЛ-ПОЛИС ЗАО Закрытое акционерное общество „Страховая компания „Капитал-полис“ 190013 г.Санкт-Петербург Московский пр., д.22, литера З 1336 XLS | XML
96 КАПИТАЛ-ПОЛИС МЕДИЦИНА ООО Общество с ограниченной ответственностью Страховая компания “ Капитал-полис Медицина» 190013, Санкт-Петербург, Московский проспект, дом 22, лит.З 2875 XLS | XML
97 КЛУВЕР ООО 3629
98 КОЛЫМСКАЯ Акционерное общество Акционерное общество «Страховая компания „Колымская“ г. Хабаровск, ул. Суворова, 45 507 XLS | XML
99 КОМЕСТРА-ТОМЬ ООО Общество с ограниченной ответственностью Страховая Корпорация » Коместра-Томь« 634021 город Томск проспект Фрунзе 115 1867 XLS | XML
100 КОМПАНИЯ БАНКОВСКОГО СТРАХОВАН ООО Общество с ограниченной ответственностью «Компания Банковского Страхования» 107023, г. Москва, Малая Семеновская, дом 9, стр. 1, 2 этаж 3993 XLS | XML
101 КОМПАНИЯ ПРОМЫШЛЕННО-ТОРГОВОГО ООО Общество с ограниченной ответственностью «Компания промышленно-торгового страхования» 654038, город Новокузнецк, ул. М.Тореза, 43-а 3059 XLS | XML
102 КООПЕРАТИВНОЕ ЕДИНСТВО Некоммерческая организация Некоммерческая корпоративная организация потребительское общество взаимного страхования «Кооперативное единство» 630099, г.Новосибирск, Красный проспект, д.29, кв.35 4279 XLS | XML
103 КООП-РЕСУРС Некоммерческая организация Некоммерческая корпоративная организация потребительское общество взаимного страхования «Кооп-Ресурс» 160011, Вологодская обл., г.Вологда, ул.Козленская, д.63 4296 XLS | XML
104 КОФАС РУС СТРАХОВАЯ КОМПАНИЯ ЗАО Закрытое акционерное общество «Кофас Рус Страховая Компания» 125047, г. Москва, ул. 1-я Тверская-Ямская, д. 23,стр. 1 4209 XLS | XML
105 КРЕДИТ ЕВРОПА ЛАЙФ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания «Кредит Европа Лайф» 129090, г. Москва, Олимпийский пр-кт, 14 4117 XLS | XML
106 КРИСТАЛЛ Акционерное общество Страховое Акционерное Общество «Кристалл» 350058, г. Краснодар, Центральный внутригородской округ, ул. Старокубанская, дом 92 4246 XLS | XML
107 КРК-СТРАХОВАНИЕ ООО Общество с ограниченной ответственностью «КРК-Страхование» 107140, г. Москва, ул. Русаковская, д.13, офис 04-09 3781 XLS | XML
108 КРЫММЕДСТРАХ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая медицинская компания «Крыммедстрах» Республика Крым, г.Симферополь, ул. Карла Маркса, 29 4325 XLS | XML
109 КРЫМСКАЯ ПЕРВАЯ СТРАХОВАЯ КОМПАНИЯ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Крымская первая страховая компания» Республика Крым, г. Симферополь, ул. К. Маркса, 29 4326 XLS | XML
110 КРЫМСКИЙ СТРАХОВОЙ АЛЬЯНС Акционерное общество АКЦИОНЕРНОЕ ОБЩЕСТВО «КРЫМСКИЙ СТРАХОВОЙ АЛЬЯНС» 296000, г. Красноперекопск, ул. Толбухина дом 4 каб.1 4337 XLS | XML
111 КС СТРАХОВАНИЕ Акционерное общество АКЦИОНЕРНОЕ ОБЩЕСТВО «МЕДИЦИНСКАЯ СТРАХОВАЯ КОМПАНИЯ „КС СТРАХОВАНИЕ“ 430005, Республика Мордовия, г.Саранск, ул.Коммунистическая,д.52, оф.308 4310 XLS | XML
112 ЛЕКСГАРАНТ Акционерное общество Страховое акционерное общество „ЛЕКСГАРАНТ“ 101000 г. Москва Малый Златоустинский пер. дом. 10 стр.2 348 XLS | XML
113 ЛИБЕРТИ СТРАХОВАНИЕ Акционерное общество Либерти Страхование (Акционерное общество) Российская Федерация, 196084, г. Санкт-Петербург, Московский проспект,.д.79а, литер А 1675 XLS | XML
114 МАКС ЗАО Закрытое акционерное общество „Московская акционерная страховая компания“ 115184, г.Москва, ул. М. Ордынка, д.50 1427 XLS | XML
115 МАКС-ЖИЗНЬ ООО Общество с ограниченной ответсвенностью Страховая компания» МАКС страхование жизни« 115184, г. Москва, ул. Малая Ордынка, дом 50 4013 XLS | XML
116 МАКС-М Акционерное общество Акционерное общество «Медицинская акционерная страховая компания» 115184, Москва, ул.Малая Ордынка, д.50 2226 XLS | XML
117 МАСКИ ОАО Акционерное общество «Медицинская акционерная страховая компания Иркутской области» 664011, Российская Федерация, Иркутская область, г. Иркутск, ул. Карла Маркса, д.30 195 XLS | XML
118 МЕГАРУСС-Д ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания «Мегарусс-Д» 107031 г. Москва, Рождественский б-р, д.14, стр.2 2877 XLS | XML
119 МЕД-ГАРАНТ Акционерное общество 797
120 МЕДИКА-ВОСТОК ООО Общество с ограниченной отвественностью медицинская страховая компания «Медика-Восток» 660093, г. Красноярск, Кольцевая, 5, пом. 70 660 XLS | XML
121 МЕДИЦИНСКАЯ СТРАХОВАЯ КОМПАНИЯ СТРАЖ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Медицинская страховая компания СТРАЖ» 390000 г.Рязань, ул.Павлова, д.12 1958 XLS | XML
122 МЕДСТРАХ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Медицинская страховая компания «МЕДСТРАХ» 107140, г. Москва, ул. Верхняя Красносельская, д. 20, стр. 1 484 XLS | XML
123 МЕДЭКСПРЕСС Акционерное общество Страховое акционерное общество «Медэкспресс» 191186, г. Санкт-Петербург, ул. Гороховая, д. 14/26 141 XLS | XML
124 МЕЖДУНАРОДНАЯ СТРАХОВАЯ ГРУППА ООО Общество с ограниченной ответственностью «Международная Страховая Группа» 119002, г.Москва, пер. Сивцев Вражек, д.29/16 3594 XLS | XML
125 МЕТЛАЙФ Акционерное общество Акционерное общество «Страховая компания МетЛайф» 127015, г.Москва, ул.Бутырская, д.76 стр.1 3256 XLS | XML
126 МОВС Некоммерческая организация НЕКОММЕРЧЕСКАЯ КОРПОРАТИВНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ «МЕЖРЕГИОНАЛЬНОЕ ПОТРЕБИТЕЛЬСКОЕ ОБЩЕСТВО ВЗАИМНОГО СТРАХОВАНИЯ» 190000, Санкт-Петербург г, Обводный канал, дом № 148, корпус 2 4349 XLS | XML
127 МОСКВА-ВОЛГА ООО 2950
128 МОСКОВИЯ ООО Общество с ограниченной ответственностью Страховая компания «Московия» г.Москва, г.Троицк, Октябрьский пр-т, д.3а 2290 XLS | XML
129 МСК АЙАЙСИ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Международная страховая компания «АйАйСи» 115114, г. Москва, Павелецкая наб., д. 2, стр. 2, помещение 37 3128 XLS | XML
130 МСК СТРАЖ ООО Общество с ограниченной ответственностью Муниципальная страховая компания «СТРАЖ» им.С.Живаго 390000 г.Рязань, ул.Павлова, д.12 413 XLS | XML
131 МСК УРАЛСИБ Акционерное общество Акционерное общество «Медицинская Страховая Компания «УралСиб» 142180, РОССИЯ, Московская область, г. Климовск, ул. Ленина, д. 1 2326 XLS | XML
132 МСК-МЕДИЦИНА ООО Акционерное общество «Муниципальная страховая компания г.Краснодара-Медицина» 350000,Краснодарский край, г.Краснодар,ул.Красная д.33 3624 XLS | XML
133 НАДЕЖДА Акционерное общество Акционерное общество «Медицинскоя страховая организация «Надежда» 660003, г. Красноярск, ул. Академика Павлова, д.14 1447 XLS | XML
134 НАДЕЖДА Акционерное общество Страховое акционерное общество «Надежда» 660049, г. Красноярск, ул. Парижской коммуны, д. 39 2182 XLS | XML
135 НАРОДНЫЕ КАССЫ Некоммерческая организация Некоммерческая организация Общество взаимного страхования «Народные кассы» 109431, г. Москва, ул. Привольная, д.61, корпус 1 4192 XLS | XML
136 НАСКО ТАТАРСТАН Акционерное общество Акционерное общество «Национальная страховая компания ТАТАРСТАН» 420094, РТ, г.Казань, ул.Чуйкова, 2, Б 3116 XLS | XML
137 НАЦИОНАЛЬНЫЕ СТРАХОВЫЕ ТРАДИЦИИ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания «Национальные Страховые Традиции» 119285, г. Москва, Аллея Воробьёвское, д. 6 3493 XLS | XML
138 НЕЗАВИСИМАЯ СТРАХОВАЯ ГРУППА ООО Общество с ограниченной отвественностью Страховая компания «Независимая страховая группа» 117209, г.Москва, Севастопольский проспект д.28, корп.1 3847 XLS | XML
139 НИК ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания НИК» 432072, г.Ульяновск, ул. 40 летия Победы, 29 2917 XLS | XML
140 НИК-ЛАЙФ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая Компания НИК-Лайф» 432072, г.Ульяновск, ул. 40-летия Победы, 29 401 XLS | XML
141 НКО ОВСС Некоммерческая организация Некоммерческая корпоративная организация «Потребительское общество взаимного страхования сбережений» 129329, г.Москва, ул.Кольская, д.1 4323 XLS | XML
142 НОВЫЙ УРЕНГОЙ Акционерное общество Акционерное общество «Медицинская страховая компания «Новый Уренгой» 625306, Тюменская обл., г.Новый Уренгой, ул.Геологоразведчиков, д.16 Б 1961 XLS | XML
143 НСГ-РОСЭНЕРГО ООО Общество с ограниченной ответственностью «Национальная страховая группа-«РОСЭНЕРГО» 649000, Республика Алтай, г.Горно-Алтайск, пр.Коммунистический, 9-1 3295 XLS | XML
144 ОБЛАСТНАЯ МЕД.СТРАХ. КОМПАНИЯ Акционерное общество Акционерное общество «Областная медицинская страховая компания» 236000, г.Калининград, ул.Космонавта Леонова, д.18 3010 XLS | XML
145 ОБЪЕДИНЕННАЯ СТРАХОВАЯ КОМПАНИЯ Акционерное общество Акционерное общество «Объединенная страховая компания» 443099, г. Самара, ул. Молодогвардейская, д. 94 2346 XLS | XML
146 ОВС ЗАСТРОЙЩИКОВ Некоммерческая организация Некоммерческая корпоративная организация «Потребительское общество взаимного страхования гражданской ответственности застройщиков» 111024, Москва, ул.Авиамоторная, д.10, корп.2 4314 XLS | XML
147 ОВС МЕД Некоммерческое партнерство Потребительский кооператив «Некоммерческая организация медицинское потребительское общество взаимного страхования» Тюменская область, г. Тюмень, ул. Мельникайте, д. 120, к. 51 4348 XLS | XML
148 ОВС НОВС Некоммерческая организация Некоммерческая корпоративная организация «Национальное потребительское общество взаимного страхования» 403877, Волгоградская обл., г.Камышин, ул.Некрасова, д.4 «А» 4301 XLS | XML
149 ОЙЛЕР ГЕРМЕС РУ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая Компания»Ойлер Гермес Ру« 119049, г. Москва, 4-й Добрынинский переулок, д. 8, помещение С08-I, ком. 7 4293 XLS | XML
150 ОПОРА Акционерное общество Акционерное общество «Страховая Компания Опора»« 111033, Россия, г. Москва, ул. Золоторожский вал, дом 11, стр. 29 3099 XLS | XML
151 ОРБИТА ООО Общество с ограниченной ответственностью Страховая компания «Орбита» 107023, г.Москва, Площадь Журавлева, д. 2, стр. 2 326 XLS | XML
152 ОСЖ РЕСО-ГАРАНТИЯ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Общество страхования жизни «РЕСО-Гарантия» 117105, Москва г, Нагорный проезд, д.6, стр.8 4008 XLS | XML
153 ОТКРЫТИЕ СТРАХОВАНИЕ ЖИЗНИ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Открытие страхование жизни» 115114 г.Москва, 1-й Дербеневский пер., дом 5, стр 2 3645 XLS | XML
154 ПАНАЦЕЯ ООО Общество с ограниченной ответственностью Медицинское страховое общество «Панацея» 344012 г.Ростов на Дону ул Мечникова 43 173 XLS | XML
155 ПАРИ Акционерное общество Акционерное общеcтво «Страховая компания «ПАРИ» 127015, г. Москва, ул. Расковой, д.34, стр.14 915 XLS | XML
156 ПАРИТЕТ-СК ООО Общество с ограниченной ответственностью Страховая компания «Паритет-СК» 117152, г.Москва, Загородное шоссе, д.6, к.5 3268 XLS | XML
157 ПЛАТО ЗАО Закрытое акционерное общество «Генеральное страховое акционерное общество «Плато» 119071,Москва,Ленинский пр-т, д.15А 2284 XLS | XML
158 ПОВОЛЖСКИЙ СТРАХОВОЙ АЛЬЯНС ООО Общество с ограниченной ответственностью «Поволжский страховой альянс» 446001, РФ, Самарская область, г.Сызрань, ул. Ульяновская, д.79 3568 XLS | XML
159 ПОДМОСКОВЬЕ Акционерное общество 1111 XLS | XML
160 ПОЛИС-ГАРАНТ Акционерное общество Акционерное общество «Страховая компания «ПОЛИС-ГАРАНТ» 119991, г.Москва, Ленинский пр-кт, 32А, зона «Б-1» 3390 XLS | XML
161 ППФ СТРАХОВАНИЕ ЖИЗНИ ООО Общество с ограниченной ответственностью «ППФ Страхование жизни» 108811, город Москва, километр Киевское шоссе 22-й (п. Московский), домовл. 6, строение 1. 3609 XLS | XML
162 ПРЕСТИЖ-ПОЛИС Акционерное общество Акционерное общество «Страховая Группа «ПРЕСТИЖ-ПОЛИС» 123423, Москва г, Мневники ул, дом № 13 3889 XLS | XML
163 ПРОМИНСТРАХ ООО Общество с ограниченной ответственностью «ПРОМИНСТРАХ» 123610, г.Москва, Набережная Краснопресненская, д. 12, помещение 1705-1707 3438 XLS | XML
164 ПРОФСОДРУЖЕСТВО Акционерное общество Акционерное общество страховая компания «ПРОФСОДРУЖЕСТВО» 119034, г. Москва, Гагаринский пер. д.5 2682 XLS | XML
165 РАЙФФАЙЗЕН ЛАЙФ ООО ООО «СК «Райффайзен Лайф» 115230, г. Москва, 1-й Нагатинский проезд, д.10, стр.1 4179 XLS | XML
166 РЕГИОНАЛЬНАЯ СТРАХОВАЯ КОМПАНИЯ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Региональная страховая компания» 127051, г.Москва, Б.Каретный пер., влад. 20, стр. 3 72 XLS | XML
167 РЕГИОНАЛЬНЫЙ СТРАХОВОЙ ЦЕНТР ООО Общество с ограниченной ответственностью «Региональный Страховой Центр» 125080, г. Москва, Волоколамское шоссе, д. 1, стр. 1 3621 XLS | XML
168 РЕГИОНГАРАНТ Акционерное общество Акционерное общество «Страховая компания «РЕГИОНГАРАНТ» 129090, г. Москва, ул. Гиляровского, д. 18, стр. 1 1908 XLS | XML
169 РЕЗЕРВ ЗАО Закрытое акционерное общество «Страховая компания «Резерв» 680030,г.Хабаровск, ул.Постышева,д.22а 2733 XLS | XML
170 РЕНЕССАНС ЖИЗНЬ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая Компания «Ренессанс Жизнь» 115114, г. Москва, Дербеневская набережная, д. 7, стр. 22 3972 XLS | XML
171 РЕСО-ГАРАНТИЯ Публичное акционерное общество Страховое публичное акционерное общество «РЕСО-Гарантия» 125047, Москва, ул. Гашека, д.12, стр.1 1209 XLS | XML
172 РЕСО-МЕД ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая медицинская компания РЕСО-МЕД» 142500, Московская область, г. Павловский Посад, ул.Урицкого д. 26 879 XLS | XML
173 РЕСО-ШАНС ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания „РЕСО-Шанс“ 117105, г.Москва, Нагорный проезд, д.6, стр.3 13 XLS | XML
174 РЕСПЕКТ ООО Общество с ограниченной ответственностью „Страховая компания “ РЕСПЕКТ» 390023, Рязанская обл.., г.Рязань ул.Есенина, д.29 3492 XLS | XML
175 РИКС ООО Общество с ограниченной ответственностью «Розничное и корпоративное страхование» г. Ярославль, ул. Некрасова. д. 42 473 XLS | XML
176 РНПК Акционерное общество АКЦИОНЕРНОЕ ОБЩЕСТВО «РОССИЙСКАЯ НАЦИОНАЛЬНАЯ ПЕРЕСТРАХОВОЧНАЯ КОМПАНИЯ» 125047, г. Москва, улица Гашека, дом 6, Помещение XII, БЦ «Дукат Плейс III», 5 этаж 4351 XLS | XML
177 РОСГОССТРАХ Публичное акционерное общество Публичное акционерное общество Страховая Компания «Росгосстрах» 140002, Московская обл., г. Люберцы, ул. Парковая, д. 3. 1 XLS | XML
178 РОСГОССТРАХ-ЖИЗНЬ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания «Росгосстрах — Жизнь» 119991, Москва, ул. Б.Ордынка, дом 40, стр.3 3984 XLS | XML
179 РОСГОССТРАХ-МЕДИЦИНА ООО Общество с ограниченной ответственностью «Росгосстрах-Медицина» 121059, г.Москва, ул. Киевская, д.7 3676 XLS | XML
180 РОСИНКОР РЕЗЕРВ ООО Общество с ограниченной ответственностью Страховая компания «РОСИНКОР Резерв» 109147, Москва, ул. Таганская, д. 17/23 3535 XLS | XML
181 РОСМЕД Акционерное общество Акционерное общество «Акционерная страховая компания «РОСМЕД» 119049, г.Москва, ул.Донская, д.11, стр.2 3451 XLS | XML
182 РОСМЕДСТРАХ — К ООО Общество с ограниченной ответственностью «Росмедстрах-К» 305008 г.Курск ул. Пучковка 53 2191 XLS | XML
183 РОСНО-МС ОАО Открытое акционерное общество Страховая компания «РОСНО-МС» 115184, г. Москва, Озерковская наб., д.30 2890 XLS | XML
184 РСХБ-СТРАХОВАНИЕ ЗАО Закрытое акционерное общество «Страховая компания «РСХБ-Страхование» 119034, г.Москва, Гагаринский пер., д.3 2947 XLS | XML
185 РУССКАЯ КОРОНА ООО Общество с ограниченной отвественностью «Страховая компания «РУССКАЯ КОРОНА» 390046, г. Рязань, пр. Машиностроителей, дом 4а 1999 XLS | XML
186 РУССКИЙ СТАНДАРТ СТРАХОВАНИЕ Акционерное общество Акционерное общество «Русский Стандарт Страхование» 107023, г. Москва, ул. Малая Семеновская, дом 9, стр. 1 3748 XLS | XML
187 РУССКОЕ ПЕРЕСТРАХОВОЧНОЕ ОБ-ВО Акционерное общество Акционерное общество «Русское перестраховочное общество» 105062, Москва, Лялин переулок, д.19, корпус 1, RussianRe Бизнес-центр 235 XLS | XML
188 САКЛАУ Некоммерческая организация Некоммерческая организация Общество взаимного страхования «Саклау» город Казань, улица Шамиля Усманова, дом 32А 4202 XLS | XML
189 САХАМЕДСТРАХ Акционерное общество Акционерное общество «Страховая медицинская компания «Сахамедстрах» 677005, г. Якутск, ул. Курашова, 44А 2873 XLS | XML
190 СБЕРБАНК СТРАХОВАНИЕ ООО Общество с ограниченной ответственностью Страховая компания «Сбербанк страхование» 115093, г. Москва, ул. Павловская, д.7 4331 XLS | XML
191 СБЕРБАНК СТРАХОВАНИЕ ЖИЗНИ ООО Общество с ограниченной ответственностью Страховая компания «Сбербанк страхование жизни» 115162, г. Москва, ул. Шаболовка, 31Г 3692 XLS | XML
192 СЕЛЕКТА ООО 924
193 СЕРВИСРЕЗЕРВ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания «СЕРВИСРЕЗЕРВ» 601901, Владимирская обл. г.Ковров, ул. Чернышевского, д.17 632 XLS | XML
194 СИБИРСКИЙ ДОМ СТРАХОВАНИЯ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания «Сибирский Дом Страхования» 650000, г. Кемерово, ул. Весенняя,5 2353 XLS | XML
195 СИБИРСКИЙ СПАС ЗАО Акционерное общество страховая компания Сибирский Спас 654007, Кемеровская обл., г.Новокузнецк, пр.Кузнецкстроевский, 13 3467 XLS | XML
196 СИБИРСКИЙ СПАС-МЕД Акционерное общество Акционерное общество страховая медицинская компания «Сибирский Спас-Мед» 654007, Кемеровская область, г. Новокузнецк, пр. Кузнецкстроевский, 13 3270 XLS | XML
197 СИВ ЛАЙФ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания «СиВ Лайф» 117 485 г. Москва, ул. Обручева, д. 30/1, стр. 1 4105 XLS | XML
198 СИМАЗ-МЕД ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая медицинская организация «СИМАЗ-МЕД» 630007 г.Новосибирск, ул.Октябрьская,34 2444 XLS | XML
199 СК ДОМИНАНТА ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая Компания Доминанта» 117447,г.Москва, ул.Б.Черемушкинская, д.1 3803 XLS | XML
200 СК ЕВРОПЛАН ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания Европлан» 127051, г. Москва, Малая Сухаревская площадь, дом 12 3225 XLS | XML
201 СК СОГАЗ-ЖИЗНЬ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая Компания СОГАЗ-ЖИЗНЬ» 107078, г. Москва, проспект Академика Сахарова, дом 10 3825 XLS | XML
202 СКОР П.О. ООО Общество с ограниченной ответственностью «СКОР ПЕРЕСТРАХОВАНИЕ» 109012, Москва, ул. Никольская,10 4174 XLS | XML
203 СМП-СТРАХОВАНИЕ ООО Общество с ограниченной ответственностью «СМП-Страхование» 115035, г. Москва, ул. Садовническая, д. 71, стр. 3 3941 XLS | XML
204 СО ПОМОЩЬ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховое общество «Помощь» 191124, г. Санкт-Петербург, Синопская наб., д.50а, литер A 3834 XLS | XML
205 СОГАЗ Акционерное общество Акционерное общество «Страховое общество газовой промышленности» 107078, г.Москва, пр-т Академика Сахарова 10 1208 XLS | XML
206 СОГАЗ-МЕД Акционерное общество Акционерное общество «Страховая компания «СОГАЗ-Мед» 117420, г. Москва, ул. Наметкина, д. 16 3230 XLS | XML
207 СОГЛАСИЕ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая Компания «Согласие» 129110, г. Москва, ул. Гиляровского, д. 42 1307 XLS | XML
208 СОГЛАСИЕ-ВИТА ООО Общество с ограниченной ответственностью Страховая компания «Согласие-Вита» 129110, Москва, ул. Гиляровского, д.42 3511 XLS | XML
209 СОСЬЕТЕ ЖЕНЕРАЛЬ СТРАХОВАНИЕ ООО Общество с ограниченной ответственностью «СОСЬЕТЕ ЖЕНЕРАЛЬ Страхование» 105064, Россия, Москва, ул. Земляной вал, д. 9 1580 XLS | XML
210 СОСЬЕТЕ ЖЕНЕРАЛЬ СТРАХОВАНИЕ ЖИЗНИ ООО Общество с ограниченной ответственностью «СОСЬЕТЕ ЖЕНЕРАЛЬ Страхование Жизни» 105064, г. Москва, улица Земляной Вал, дом 9 4079 XLS | XML
211 СПАСЕНИЕ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховое Медицинское Общество «Спасение» 420059 г.Казань, ул.Хади Такташа,121,пом 1006 3528 XLS | XML
212 СПАССКИЕ ВОРОТА ОАО Акционерное общество Страховая группа «Спасские ворота» 629003, Россия, Ямало-Ненецкий АО, г. Салехард, ул. Маяковского, д.4 3300 XLS | XML
213 СПАССКИЕ ВОРОТА-М Акционерное общество Акционерное общество «Страховая группа «Спасские ворота-М» 117209,Москва,Болотниковская ул. д,53,корп.1 2354 XLS | XML
214 СТЕРХ Акционерное общество Акционерное общество «Региональная страховая компания «Стерх» 677010 Республика Саха (Якутия) г.Якутск ул.Лермонтова 152 3983 XLS | XML
215 СТРАХОВАЯ БИЗНЕС ГРУППА Акционерное общество Акционерное общество «Страховая бизнес группа» 394006, г.Воронеж, ул. Платонова, 16 3229 XLS | XML
216 СТРАХОВАЯ КОМПАНИЯ ЕКАТЕРИНБУРГ ООО Общество с ограниченной отвественностью «Страховая компания Екатеринбург» 620026 г. Екатеринбург, ул. Тверитина,34 574 XLS | XML
217 СТРАХОВАЯ КОМПАНИЯ КАРДИФ ООО Общество с Ограниченной Ответственностью «Страховая компания КАРДИФ» 127422, г. Москва, Тимирязевская, д.1 4104 XLS | XML
218 СТРАХОВАЯ КОМПАНИЯ ОПОРА ПРАВОПОРЯДКА ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания ОПОРА правопорядка» 111033, г. Москва, ул. Золоторожский вал, д.11, стр. 29 3857 XLS | XML
219 СТРАХОВАЯ КОМПАНИЯ УСПЕХ Акционерное общество Акционерное общество «Страховая компания Успех» 115477, г.Москва, ул.Кантемировская, д.59А 2359 XLS | XML
220 СТРАХОВАЯ КОМПАНИЯ ЧАББ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая Компания Чабб» 119034 г.Москва, Барыковский пер., д.2 3969 XLS | XML
221 СТРАХОВЫЕ ИНВЕСТИЦИИ ООО Общество с ограниченной отвественностью «Страховые инвестиции» 450005, Республика Башкортостан, г.Уфа, ул. Пархоменко, д. 101 3928 XLS | XML
222 СТРИЖ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компани я «СтрИж» 426057, Удмуртская Республика, г. Ижевск, ул. Свободы, 173 1149 XLS | XML
223 СУРГУТНЕФТЕГАЗ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховое общество «Сургутнефтегаз» ул.Лермонтова,9/1,г.Сургут,ХМАО-ЮГРА,Тюменская область,628418 3127 XLS | XML
224 ТАЛИСМАН Акционерное общество Акционерное общество «Страховое Общество «Талисман» 420061,РФ,Республика Татарстан,г.Казань,ул.Н.Ершова,д.18 1587 XLS | XML
225 ТИНЬКОФФ СТРАХОВАНИЕ Акционерное общество Акционерное общество «Тинькофф Страхование» 127287, Россия, г. Москва, 2-я Хуторская улица, дом 38А, строение 26 191 XLS | XML
226 ТИТ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания «ТИТ» 115088, г. Москва, 2-й Южнопортовый пр-д, д. 18, стр. 8 1182 XLS | XML
227 ТРАНСНАЦИОНАЛЬНАЯ СК ООО Общество с ограниченной ответственностью «Транснациональная страховая компания» 141070, Московская обл., г.Королев, ул.Богомолова, д.3А, пом.XXV 1688 XLS | XML
228 ТЮМЕНЬ-ПОЛИС ООО Общество с ограниченной ответственностью Страховая компания «Тюмень-Полис» г. Тюмень, ул. Малыгина, д.84 1623 XLS | XML
229 УГМК-МЕДИЦИНА ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая медицинская компания «УГМК — Медицина» 620075, г. Екатеринбург, ул. Первомайская, д. 15 3313 XLS | XML
230 УРАЛ-РЕЦЕПТ М ООО Общество с ограниченной ответственностью Страховая медицинская компания «Урал-Рецепт М» 620075, г. Екатеринбург, ул. Карла Либкнехта, д. 22, оф. 302 1457 XLS | XML
231 УРАЛСИБ Акционерное общество Акционерное общество «Страховая группа «УралСиб» 117342 г.Москва, ул Профсоюзная,65, корп.1 983 XLS | XML
232 УРАЛСИБ ЖИЗНЬ Акционерное общество Акционерное общество Страховая компания «УРАЛСИБ Жизнь» 117342 г. Москва, ул. Профсоюзная,65, корп.1 3987 XLS | XML
233 УРАЛСИБ СТРАХОВАНИЕ ООО ОБЩЕСТВО С ОГРАНИЧЕННОЙ ОТВЕТСТВЕННОСТЬЮ СТРАХОВАЯ КОМПАНИЯ «УРАЛСИБ СТРАХОВАНИЕ» 129226, г. Москва, ул. Сельскохозяйственная, д. 16А, 3 эт., пом. 1, комн. 21 667 XLS | XML
234 ФЕДЕРАЛЬНАЯ СТРАХОВАЯ КОМПАНИЯ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Федеральная страховая компания» 121467, г.Москва, ул.Молодогвардейская, д.2, стр.1 161 XLS | XML
235 ХОСКА Публичное акционерное общество Публичное акционерное общество «Страховая группа «ХОСКА» 680000, г. Хабаровск, ул. Пушкина 23 А 319 XLS | XML
236 ХОУМ КРЕДИТ СТРАХОВАНИЕ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Хоум Кредит Страхование» 125040 Москва, ул. Правды, д.8, к.1 3507 XLS | XML
237 ЦЕНТРАЛЬНОЕ СО ООО Общество с ограниченной ответственностью «Центральное Страховое Общество» Московская область, г. Мытищи, Шараповский пр-д, стр. 7 3517 XLS | XML
238 ЦЮРИХ НАДЕЖНОЕ СТРАХОВАНИЕ Акционерное общество Акционерное общество «Цюрих надежное страхование» 115054, г. Москва, Павелецкая площадь, д. 2, стр. 2 212 XLS | XML
239 ЧАББ ЖИЗНЬ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая Компания Чабб Жизнь» 119034, г.Москва, Барыковский пер., д.2 3998 XLS | XML
240 ЧРЕЗВЫЧАЙНАЯ СТРАХОВАЯ КОМПАНИЯ ОАО Открытое акционерное общество «Чрезвычайная страховая компания» 127006 г. Москва ул. Садовая-Триумфальная, д. 20, стр. 2 2708 XLS | XML
241 ЧУВАШИЯ-МЕД Акционерное общество Акционерное общество «Страховая компания «Чувашия-Мед» 428000, Чувашская Республика, г.Чебоксары, ул. Кооперативная, д.6 552 XLS | XML
242 ЧУВАШСКАЯ МСК Акционерное общество Акционерное общество «Чувашская медицинская страховая компания» 429955 Чувашская Республика, г.Новочебоксарск, ул. Комсомольская, 21 2136 XLS | XML
243 ЧУЛПАН Акционерное общество Акционерное общество Страховая компания «Чулпан» 423450, Российская Федерация, Республика Татарстан, г. Альметьевск, ул. Пушкина, д. 66, помещение 1 1216 XLS | XML
244 ЧУЛПАН-ЖИЗНЬ ООО Общество с ограниченной ответственностью Страховая Компания «Чулпан-Жизнь» 423450, РТ, г. Альметьевск, ул. Советская, дом 178 4001 XLS | XML
245 ЧУЛПАН-МЕД ООО Общество с ограниченной ответственностью Страховая медицинская организация «Чулпан-Мед» 423450, РТ, г. Альметьевск, ул. Пушкина, дом 66, пом.1 3957 XLS | XML
246 ЭКИП ООО Общество с ограниченной ответственностью Страховая компания «Экип» 119048,Москва, ул.Трубецкая, д.28, стр.1 3543 XLS | XML
247 ЭКОНОМСТРАХОВАНИЕ ООО 2621
248 ЭКСПРЕСС-СТРАХОВАНИЕ ООО Общество с ограниченной ответственностью «СК «Экспресс-страхование» 192012, г. Санкт-Петербург, 3-й Рабфаковский переулок, д.5, корпус 4, ЛИТ. А, пом. 4.11 3815 XLS | XML
249 ЭНЕРГОГАРАНТ Публичное акционерное общество Публичное акционерное общество «Страховая акционерная компания «ЭНЕРГОГАРАНТ» 115035, г. Москва, Садовническая наб., дом 23 1834 XLS | XML
250 ЭРГО Акционерное общество Страховое акционерное общество ЭРГО 191060, Санкт-Петербург, пер. Кваренги, д. 4 177 XLS | XML
251 ЭРГО ЖИЗНЬ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания «ЭРГО Жизнь» 129082 г.Москва, ул. Серебряническая наб. д.29, к.№ 47-71 3879 XLS | XML
252 ЭЧДИАЙ СТРАХОВАНИЕ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая компания «ЭчДиАй Страхование» 117485 г. Москва, ул. Обручева, д. 30/1 стр. 1 4133 XLS | XML
253 ЮГОРИЯ Акционерное общество Акционерное общество «Государственная страховая компания «Югория» Российская Федерация, Ханты-Мансийский автономный округ — Югра, г. Ханты-Мансийск, ул. Комсомольская, дом 61 3211 XLS | XML
254 ЮГОРИЯ-ЖИЗНЬ Акционерное общество Акционерное общество «Государственная страховая компания «Югория-Жизнь» 628011, Российская Федерация, Тюменская область, Ханты-Мансийский автономный округ-Югра, г.Ханты-Мансийск, ул.Комсомольская, д.61 4014 XLS | XML
255 ЮГОРИЯ-МЕД ОАО Открытое акционерное общество Страховая медицинская компания «Югория-Мед» 628012, ХМАО-Югра, г.Ханты-Мансийск, ул.Гагарина, 54 3204 XLS | XML
256 ЮЖУРАЛ-АСКО Акционерное общество Публичное акционерное общество «Страховая компания ЮЖУРАЛ-АСКО» 454091, г.Челябинск, ул.Красная, д.4 2243 XLS | XML
257 ЮЖУРАЛЖАСО Акционерное общество Страховое акционерное общество «ЮЖУРАЛЖАСО» г. Челябинск, ул. Комсомольская 18а 92 XLS | XML
258 ЮНИТИ РЕ ООО Общество с ограниченной ответственностью «Страховая и перестраховочная компания Юнити» 117105, г. Москва, Нагорный проезд, д. 6, стр.3 1643 XLS | XML
259 ЯКОРЬ Акционерное общество Cтраховое акционерное общество «ЯКОРЬ» 105062 г.Москва Подсосенский пер. д.5-7 стр.2 1621 XLS | XML

ЛПУ — Вышестоящие и контролирующие органы

Вышестоящие и контролирующие органы

Министерство здравоохранения Российской Федерации

Адрес: 127994, ГСП-4, г. Москва, Рахмановский пер, д. 3

многоканальный телефон: (495) 627-24-00

Телефон для информирования о фактах регистрации обращения граждан (495) 627-29-93

«Горячая линия» Росздравнадзора по соблюдению прав граждан в сфере охраны здоровья 88005001835

E-mail: [email protected]

 

Министерство здравоохранения Республики Татарстан

Адрес: 420111, г. Казань, ул. Островского, д. 11/6

Телефон: 8(843)231-79-98

Факс: 8(843)238-41-44

E-mail: [email protected]

 

Территориальный орган Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения

по Республике Татарстан

Адрес: 420021, г. Казань, ул. Нариманова, д. 63

Тел/факс: (843)292-54-37

Е-mail: [email protected]

 

Управление Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека по Республике Татарстан

Адрес: 420111, г. Казань, ул. Большая Красная, д. 30

Телефон: (843) 238-98-54

Факс: (843) 238-79-19

E-mail: [email protected]

 

Территориальный отдел Управления Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека по Республике Татарстан в Елабужском, Агрызском, Менделеевском районах

 

Адрес: 423601, г. Елабуга, ул. Большая Покровская д. 2

Телефон: 8 (85557) 7-53-33, 8(85557) 7-56-05

 

Федеральный фонд обязательного медицинского страхования

Адрес: 127994, ГСП-4, Москва, ул. Новослободская, 37, корп. 4А

Телефон для справок по личному приему: (499) 870-96-80

Справка по вопросу регистрации письменных обращений граждан:(495) 987-03-80, доб. 1521, 1522, 1514, 1517

Справка по рассмотрению письменных обращений граждан:(499) 973-31-86

 

Государственное учреждение «Территориальный фонд обязательного медицинского страхования Республики Татарстан»

Адрес: 420097, г. Казань, ул. Ветеринарная, 6

Телефон: (843) 291-77-00

Факс: (843) 238-38-12

E-mail: [email protected]

 

Филиал ТФОМС Республики Татарстан в г.Елабуге:

Адрес: 423603, РТ, г.Елабуга, пр.Мира,37
Телефон: (85557)3-45-72
Факс: (85557)3-87-54
e-mail: [email protected]

Страховые медицинские организации, заключившие договоры с ГАУЗ «ЕЦРБ» в 2020 году на предоставление лечебно-профилактической помощи по ОМС:

ООО СК «Ак Барс-Мед»

Адрес: 420124, РТ, г. Казань, ул. Меридианная, 1А

Телефон: (843)524-96-00,

Факс: (843)524-96-29

 

Филиал ООО СК «Ак Барс- Мед»

Адрес: 423603, г. Елабуга, ул. Разведчиков, 52, офис 102

Телефон: 4-60-69, 4-58-05

 

ООО «СМО «Чулпан- Мед»

Адрес:423450, РТ, г. Альметьевск, ул. Пушкина, 66

Телефон: (8553) 304-494

Факс: (8553) 304-485

г.Альметьевск, ул. Чернышевского, 1

т.(8553)43-90-00

 

Филиал ООО «СМО «Чулпан-Мед»

Адрес: 423603, г. Елабуга, ул. Нефтяников, 60а

Телефон: 7-18-61

 

ЗАО «СМО «Спасение»

Адрес: 420059, РТ г. Казань, ул. Хади Такташ, 121

Телефон: (843)570-07-17

Факс: (843)590-68-33


Федеральный фонд обязательного медицинского страхования

Адрес: 127994, ГСП-4, Москва, ул. Новослободская, 37, корп. 4А

Телефон для справок по личному приему: (499) 870-96-80

Справка по вопросу регистрации письменных обращений граждан:(495) 987-03-80, доб. 1521, 1522, 1514, 1517

Справка по рассмотрению письменных обращений граждан:(499) 973-31-86

 

Государственное учреждение «Территориальный фонд обязательного медицинского страхования Республики Татарстан»

Адрес: 420097, г. Казань, ул. Ветеринарная, 6

Телефон: (843) 291-77-00

Факс: (843) 238-38-12

E-mail: [email protected]

контакт-центр 8-800-200-51-51

 

Филиал ТФОМС Республики Татарстан в г.Елабуге:

Адрес: 423603, РТ, г.Елабуга, пр.Мира,37

Телефон: (85557)3-45-72 Факс: (85557)3-87-54

e-mail: [email protected]

Контакты медицинских центров Звезда

Адреса медцентров
Транспортные маршруты
Парковка

Медицинский центр Вахитовского района
ул. К. Маркса, 46


Тел.: (843) 291-00-19

Остановка: ул. Гоголя
Автобусы: 10, 22, 28, 30, 35а, 52, 54, 63, 89, 90, 91, 98, 99
Троллейбусы:7, 20, 21
Авиастроительный район: Автобус 89
Московский район: Автобус 22
Ново-Савиновский район: Автобусы 54, 28, 35а
Советский район: Автобусы 91, 35а
Кировский район: Автобус 10а, 22
Приволжский район: Автобусы 5, 30, 63, Троллейбус 7

Имеется бесплатная охраняемая закрытая парковка для посетителей на 25 машиномест.
Въезд на бесплатную парковку с улицы К.Маркса (по направлению из центра, заезд между домами).
Для въезда позвоните по телефону, указанному на шлагбауме перед парковкой или предупредите
оператора колл-центра при записи к специалисту, затем паркуйтесь и направляйтесь в клинику.

Если парковка для посетителей клиники занята, можно запарковаться на платных городских парковках
по улице Жуковского (от улицы К.Маркса до улицы Горького) в пределах 500 метров от клиники или на
платной городской возле «Площади свободы».

Медицинский центр Советского района
ул. Космонавтов, 16


Тел.: (843) 291-00-19

Остановка: ул. Космонавтов
Автобусы: 3, 5, 33, 34, 63, 71
Авиастроительный район: Автобус 33
Московский район: Автобус 18, 33
Ново-Савиновский район: Автобус 33, 18, 35
Советский район: Автобус 34, 33
Кировский район: Автобус 63
Приволжский район: Автобус 34
Вахитовский район: Автобус 63

Закрытой собственной парковки для посетителей нет.
Имеется большая площадка во дворе домов 12 и 14 по ул. Космонавтов.
Заед на парковку осуществляется между домами 12 и 14.
Также имеется открытая бесплатная парковка вдоль дома 41Б по улице Космонавтов (дом напротив клиники).
Также имеется открытая бесплатная парковка вдоль дома 26 по улице Космонавтов.
Если мест для парковки нет, можно припарковаться в близлежащих дворах.

Медицинский центр Кировского района
ул. Фрунзе, 17


Тел.: (843) 291-00-19

Остановка: ул. Фрунзе
Автобусы: 10, 10а, 22, 44, 45, 49, 53, 63, 72, 158
Троллейбусы:10
Авиастроительный район: Автобус 53
Московский район: Автобусы 44, 49
Ново-Савиновский район: Автобус 44, 45, 49
Советский район: Автобус 10
Приволжский район: Автобус 45, 63
Вахитовский район: Автобус 10а, 63

Закрытой парковки для посетителей нет. Имеется открытая бесплатная парковка вдоль здания
в котором находится клиника. Въезд на открытую парковку с улицы Фрунзе (вдоль дома со стороны
дороги). Парковаться можно в любом месте.

Медицинский центр Ново-Савиновского района
ул. Чистопольская, 38


Тел.: (843) 291-00-19

Остановка: ул. Мусина (Татнефть Арена)
Автобусы: 28, 44, 49, 54, 75
Троллейбусы: 1 Метро: ост.Козья Слобода
Авиастроительный район: Троллейбус 1
Московский район: Троллейбус 1
Ново-Савиновский район: Автобус 54, 28, 75
Советский район: Автобус 74
Приволжский район: Автобус 46
Кировский район: Автобус 49, Троллейбус 1 Вахитовский район: Автобус 75

Имеется закрытая бесплатная парковка вдоль здания, в котором находится клиника.
Парковочные места ограничены! Въезд на закрытую парковку с улицы Мусина (проезд
параллелен улице Чистопольская). Для въезда предупредите оператора колл-центра при
записи к специалисту, затем паркуйтесь и направляйтесь в клинику. Если свободных мест для
парковки не окажется, можно припарковаться вдоль дороги на улице Мусина (вдоль ЖК «Магеллан»)
или на бесплатной парковке возле «Бургер Кинга» (на противоположной стороне дороги от клиники).


МЦ Звезда по адресу: К. Маркса, 46

Лицензия № ЛО-16-01-007309 от 21.12.2018 г.

ООО «ЗВЕЗДА-МЕД»
Юр. адрес:
420015, Республика Татарстан, г. Казань, ул.Карла Маркса, д.46 пом.1000
ИНН 1655293374
КПП 165501001
ОГРН 1141690036575
Свидетельство о государственной регистрации юридического лица серия 16 №007010850, выдано 22/05/2014г. МрИ ФНС РФ №18 по РТ
Р/С 40702810700170024991 АКБ «ЭНЕРГОБАНК» (ПАО) в г. Казани
к/с 30101810300000000770
БИК 049205770

МЦ Звезда по адресам: Космонавтов, 16 и Фрунзе, 17

Лицензия № ЛО-16-01-006678 от 28.02.2018 г.

ООО «ЗВЕЗДА»
Юридический адрес: 420015, Республика Татарстан, Казань, ул.К.Маркса, дом № 46
Почтовый адрес: 420015, Республика Татарстан, г.Казань, ул.Карла Маркса, д.46, а/я 78
ИНН 1655163833
КПП 165501001
ОКПО 87871433
ОГРН 1081690055897
Свидетельство о государственной регистрации юридического лица серия 16 №005113661, выдано 09/09/2008г. МрИ ФНС РФ №18 по РТ
Р/С 40702810800170024998 АКБ «ЭНЕРГОБАНК» (ПАО) в г. Казани
к/с 30101810300000000770
БИК 049205770

МЦ Звезда по адресу: Чистопольская, 38

Лицензия № ЛО-16-01-007120 от 29.08.2018 г.

ООО «АКАДЕМИЯ ЗДОРОВЬЯ И КРАСОТЫ «ЗВЕЗДА»
Юр. адрес: 420015, Республика Татарстан, г. Казань, ул.Карла Маркса, д.46 пом.8
ИНН 1655304700
КПП 165501001
ОГРН 1141690083138
Свидетельство о государственной регистрации юридического лица серия 16 №007083965, выдано 14/11/2014г. МрИ ФНС РФ №18 по РТ
Р/С 40702810900170024995 АКБ «ЭНЕРГОБАНК» (ПАО) в г. Казани
к/с 30101810300000000770
БИК 049205770

Отдел медицинских проф. осмотров по адресу: К. Маркса, 46

Лицензия № ЛО-16-01-003721 от 22.10.2014 г.

ООО «Звезда-Эксперт»
Юр. адрес:
420015, Республика Татарстан,
г. Казань, ул. Карла Маркса, д.46 пом.5
ИНН 1655293416
КПП 165501001
ОГРН 1141690036740
Свидетельство о государственной регистрации юридического лица серия 16 №007011508, выдано 22/05/2014г. МрИ ФНС РФ №18 по РТ
Р/С 40702810400170024987 АКБ «ЭНЕРГОБАНК» (ПАО) в г. Казани
к/с 30101810300000000770
БИК 049205770


Виртуальный тур по мед.центрам

МЦ на К.Маркса 46

МЦ на Чистопольской 38

МЦ на Космонавтов 16

МЦ на Фрунзе 17


«Мы производим качественно, но об этом мало кто знает»: Татарстан вновь присоединился к конкурсу «Вкусы России»

Представить свои бренды на федеральном конкурсе могли все формы хозяйствования, включая небольшие фермерские и крестьянские хозяйства.

— У нас есть бренды, которые производят качественную продукцию, но у которых нет возможности тратить деньги на рекламу. Отдельно для небольших производителей и был в масштабе всей страны придуман этот конкурс, — об этом на пресс-конференции сообщил первый замминистра сельского хозяйства РТ Наиль Залаков.

В этом году в конкурсе участвуют 84 региона России. От республики Татарстан заявлено 17 производителей, среди которых «Татар балы», «Пищекомбинат», «Каусар», сырный завод «Каприно», «Камамбер», «ТД ЭМИЗ», «Агросила». Для производителей конкурс открывает не только широкие возможности по продвижению продукции, но и позволяет получить компетенции для расширения бизнеса, маркетинга и организации своего дела. 

Наиль Залаков отметил, что обязательным условием участия в конкурсе была привязка к месту производства в названии продукта. 

— Мы производим качественную и полезную продукцию, которую не стыдно продавать и рекламировать, и наши производители с удовольствием участвуют в этом конкурсе, — подытожил первый заместитель министра сельского хозяйства.

В рамках пресс-конференции производители объяснили, почему они решили принять участие в конкурсе, и рассказали о своих продуктах. 

Для руководителя предприятия «Пекарня №1» Рамиля Галеева участие в конкурсе — это в первую очередь расширение бренда и узнаваемости марки. Очень важно создать подспорье для того, чтобы начать сотрудничество с сетевыми магазинами. По словам Галеева, в условиях жесткой конкурентной борьбы малый предприниматель стоит перед выбором: с одной стороны, рынок идет в сторону расширения и глобализации, но важно также сохранить качество и традиционный вкус продукта. 

С помощью организованных Минсельхозом встреч удалось выйти на контакт с ретейлерами, в частности, сейчас у «Пекарни №1» на стадии подписания находится договор с группой компаний «Х5».

— Для нас это большая победа, потому что с ретейлерами очень сложно договориться, — признался Галеев. — Менеджеры постоянно ссылаются на оперативные регламенты, на которые никто не реагирует, а личных контактов очень тяжело добиться. Поэтому встречи, организованные Минсельхозом, нам очень помогли. 

Предприниматель уверен, что в погоне за глобализацией и расширением производства нельзя забывать о том, чтобы сохранить вкусовые качества и аутентичность продукта.

— Чак-чак позиционируется как угощение, многие туристы берут его в качестве сувенира. Конечно, потребитель хочет получить вкусную сладость, насыщенную медом, а не что-то похожее на печеньки, которыми завалены полки наших магазинов, — подытожил Галеев.

Основатель кооператива «Татар балы» Язиль Муллахазиев рассказал о производстве меда в Татарстане. В кооперативе состоит более 200 пчеловодов со всей республики. 

— «Татар балы» на первом месте по производству меда в РТ. На этом мы не останавливаемся — планируем запустить производство с применением новых мощностей, где будет перерабатываться мед. Максимальный предел мощности — 2 тысячи тонн, это очень большой объем для республики. Мы будем делать это в сотрудничестве с пчеловодами Татарстана, — сообщил Муллахазиев.

Он обратил внимание на нехватку каналов сбыта. Из-за специфики состава меда возникают определенные сложности с подготовкой документов для вывоза за рубеж. И чтобы решить эту проблему, кооператив начал сотрудничество с надзорными органами.

Производители серьезно нацелены на экспорт меда. Они уже сотрудничают с исламскими странами и недавно договорились о продаже меда в Венгрии.

— У нас около 130 рецептов чая. Мы располагаем большим ассортиментом чая: от простых фильтр-пакетиков до премиальных чаев, — рассказал директор по продажам и развитию ООО «Фабрика здоровых продуктов» Николай Дыньков

На конкурсе он представляет бренд «Татарский чай». В 2020 году предприятие получило сертификат «Халяль». 

— «Халяль» не значит, что мы просто не добавляем свинину. Это значит, что у нас чистое производство, прозрачный бизнес и такое же отношение к людям. Цель нашей компании — здоровый продукт каждый день, — сказал Николай Дыньков.

Наиль Залаков напомнил, что два производителя из Татарстана, победившие в прошлом году, автоматически попали в список поставщиков сетевых ретейлеров. В крупных магазинах сейчас стало модно продавать фермерскую продукцию, для них выделена отдельная полка.

— Чтобы попасть на эту полку, нужно пройти через все круги ада в виде переговоров и тестов, а с помощью конкурса производители получили это право сразу и смогли продвигать свою продукцию. Мы производим много, хорошо и качественно, но мало кто об этом знает. Поэтому наша главная задача — помочь реализовать продукцию. 

Народное голосование началось 20 октября и продлится до 7 ноября. Каждый татарстанец может проголосовать на официальном сайте конкурса, поддержав три любимых продукта. Тройка победителей в этой номинации будет определена большинством голосов.

Медоносные пчелы, пыльца, собранная пчелами, и мед как мониторы загрязнения окружающей среды на промышленном цементном участке в Саудовской Аравии, JSTOR

Абстрактный

Настоящее исследование проводилось в районе производства цемента в провинции Аль-Ахса в восточной части Саудовской Аравии. Исследование было направлено на изучение интенсивности содержания тяжелых металлов в 3, 6, 9, 12, 15, 18 и 21 км от цементного завода путем определения, количественной оценки и измерения содержания определенных тяжелых металлов в меде, собранной пчелами пыльце и пчелах-собирателях. образцы гибридной карниоланской медоносной пчелы, колоний Apis mellifera carnica Pollmann.Содержание железа (Fe), марганца (Mn), цинка (Zn), меди (Cu) и никеля (Ni) в меде, пчелиной пыльце и пчелах-собирателях было разным и существенно зависело от расстояния до цементного завода. Наибольшие значения тестируемых тяжелых металлов были получены в пробах, отобранных в 1-м месте (3 км), за исключением Cu в меде и Cu и Ni у пчел-фуражиров, собранных во 2-м месте (6 км). Кроме того, эти значения были переменными и существенно зависели от типа продукта. Наибольшие значения Mn, Zn и Cu были получены от пчел-собирателей, тогда как максимальные значения Fe и Ni были обнаружены в пчелиной пыльце.С другой стороны, вредные элементы, включая свинец (Pb), кобальт (Co) и хром (Cr), не были обнаружены ни в одном из образцов. Из результатов, полученных в этом исследовании, можно сделать вывод, что загрязнение тяжелыми металлами было наиболее интенсивным в зонах, ближайших к району цементной промышленности. Наконец, медоносные пчелы и продукты из них могут использоваться как индикатор загрязнения окружающей среды.

Информация о журнале

Журнал Канзасского энтомологического общества представляет собой форум для энтомологов и всех других исследователей, интересующихся насекомыми или другими наземными членистоногими, их эволюцией, экологией, поведением, систематикой, генетикой, физиологией, экономическим использованием или контролем, а также сохранением.

Информация об издателе

Общество представляет собой форум для энтомологов и приветствует в качестве членов всех лиц, интересующихся насекомыми или другими наземными членистоногими, их экологией, поведением, систематикой, физиологией, контролем, сохранением и т. Д. Его ежеквартальное издание, Журнал Канзасского энтомологического общества, выходит сейчас в 80-м ежегодном томе и содержит статьи местных авторов, а также людей из многих других частей мира. Общество проводит ежегодные собрания в Канзасе или близлежащих штатах, на которых студенты, а также известные энтомологи представляют результаты своих исследований или обзоры интересующих их тем.Нет одновременных сессий! Таким образом поощряется взаимодействие между людьми и их различными дисциплинами.

Распределительные панели с ручной росписью | Режущая кромка керамики


Эта конструкция панели переключателей может быть представлена ​​в нескольких конфигурациях (некоторые из них не показаны, обратитесь к продукту co…


Эта конструкция панели переключателей имеет несколько конфигураций (некоторые из них не показаны, см.


Эта конструкция панели переключателей может быть представлена ​​в нескольких конфигурациях (некоторые из них не показаны, обратитесь к продукту co…


Эта конструкция панели переключателей имеет несколько конфигураций (некоторые из них не показаны, см.


Эта конструкция панели переключателей может быть представлена ​​в нескольких конфигурациях (некоторые из них не показаны, обратитесь к продукту co…


Эта конструкция панели переключателей имеет несколько конфигураций (некоторые из них не показаны, см.


Эта конструкция панели переключателей может быть представлена ​​в нескольких конфигурациях (некоторые из них не показаны, обратитесь к продукту co…


Эта конструкция панели переключателей имеет несколько конфигураций (некоторые из них не показаны, см.


Эта конструкция панели переключателей может быть представлена ​​в нескольких конфигурациях (некоторые из них не показаны, обратитесь к продукту co…


Эта конструкция панели переключателей имеет несколько конфигураций (некоторые из них не показаны, см.


Эта конструкция панели переключателей может быть представлена ​​в нескольких конфигурациях (некоторые из них не показаны, обратитесь к продукту co…


Эта конструкция панели переключателей имеет несколько конфигураций (некоторые из них не показаны, см.


Эта конструкция панели переключателей может быть представлена ​​в нескольких конфигурациях (некоторые из них не показаны, обратитесь к продукту co…

Спасибо что связались с нами! Мы свяжемся с вами в ближайшее время. Спасибо за подписку

Скрининговая оценка привлекательности для опылителей декоративных питомников с использованием анализа кормодобывания медоносных пчел

Участки исследования и режим отбора проб

В текущем исследовании использовались пробы, которые ранее были проанализированы на остатки пестицидов и зарегистрированы в 38 .Участки исследования и схема отбора проб пыльцы подробно описаны в номере 38 и кратко описаны здесь.

Нашими исследовательскими участками были три оптовых питомника растений в Коннектикуте, США, удаленные друг от друга минимум на 42 км. Питомник A (48 га) расположен в южно-центральной части Коннектикута, в 2,4 км от пролива Лонг-Айленд, в окружении леса и пригородной застройки. Питомник B (183 га) расположен в северо-центральной части Коннектикута и окружен сельскохозяйственными полями, пригородными застройками и лесами.Питомник C (168 га) расположен в сельской местности на востоке Коннектикута, в окружении сельскохозяйственных полей и лесов. Все три питомника в значительной степени полагаются на рододендроны и азалии в своем бизнесе, но в остальном ассортимент их продукции различается. Мы получили инвентарные списки из питомников B и C, чтобы установить, какие роды культивировались на наших участках исследования (дополнительная информация). Нам не удалось получить инвентарь из питомника А, поэтому этот участок не был включен при сравнении наших образцов с инвентарными запасами в питомнике (рис.4).

Девять семей медоносных пчел ( Apis mellifera carnica L.) были созданы из 3-фунтовых упаковок, разрешены для выращивания на сельскохозяйственной экспериментальной станции CT Lockwood Farm (Хамден, Коннектикут), а затем перемещены на каждое из трех коммерческих декоративных растений. питомники 8 мая 2015 г., в результате чего на каждый питомник приходилось по три исследуемых колонии. Колонии инспектировались еженедельно во время сбора пыльцы для проверки присутствия матки-несушки, предотвращения роения и обеспечения надлежащего функционирования ловушек для пыльцы.Во время сбора проб не применялись средства против клещей или болезней. Заменяющие королевы (в случае отказа матки) и дополнительное оборудование улья (для обеспечения роста колонии) добавлялись по мере необходимости.

Все ульи были оборудованы нижними уловителями пыльцы Sundance I (Ross Rounds, Inc., Канандайгуа, штат Нью-Йорк), которые можно включать или выключать для улавливания пыльцы или обеспечения беспрепятственного прохождения пчелами соответственно. Образцы пыльцы собирали еженедельно с 8 мая по 23 сентября 2015 г.Чтобы уменьшить стресс, связанный с питанием, ловушки для пыльцы в каждом улье включались (улавливает пыльцу) на две недели, а затем отключались на третью неделю, чтобы пчелы могли восстановиться. Эта схема отлова и отдыха была распределена по трем ульям на каждом участке, так что в каждую дату отбора проб пыльцу можно было собрать с двух из трех ульев. Во время отбора проб пыльцу собирали отдельно из каждого улья с помощью центрифужных пробирок объемом 50 мл, а избыток пыльцы собирали в пластиковые мешки для опорожнения ловушек для следующего периода отбора проб.По возвращении в лабораторию пыльцу замораживали при -20 ° C до дальнейшей обработки. Объединение образцов по ульям в пределах каждого участка дало в общей сложности 47 образцов.

Подготовка образца

Для того, чтобы выделить небольшое количество пыльцы из образцов корбикулярной пыльцы, мы разделили корбикулярные гранулы пыльцы на однородную смесь отдельных пыльцевых зерен, процесс, который мы называем «грануляризацией». При работе в центрифужных пробирках объемом 50 мл 4 г каждого образца пыльцы корбикулярной пыльцы (объединенные по дате участка) суспендировали в 40 мл 70% EtOH.Затем образец встряхивали на высокой скорости в течение 30 секунд. После встряхивания пыльцу оставляли для осаждения перед повторным перемешиванием еще в течение 30 секунд и повторением по мере необходимости до полного диспергирования гранул пыльцы. Затем раствор центрифугировали (Eppendorf 5810 R, Гамбург, Германия) при 3000 G в течение 2 минут и супернатант отбрасывали. Затем осадок пыльцы ресуспендировали в 10 мл 100% EtOH, и этапы встряхивания и центрифугирования повторяли второй раз. Наконец, образец оставляли открытым на 24 часа, чтобы дать EtOH испариться и получить окончательный гранулированный образец пыльцы.

Экстракция ДНК

Из каждого гранулированного образца мы переносили аликвоту 10 мг в пробирку beadmill на 2 мл (BioSpec, Bartlesville, OK) и добавляли 1 мл буфера для лизиса (буфер AP1; QIAGEN, Венло, Нидерланды) и ~ 0,5 мл шариков из хромистой стали (диаметром 1,3 мм; BioSpec, Bartlesville, OK). Затем мы обработали образцы на бисерной мельнице Omni Bead Ruptor 24 Elite (Omni International, Kennesaw, GA), используя скорость 6 м / с и повторяя четыре цикла по 1 мин, охлаждая образцы на льду между циклами.Затем полученный лизат очищали с использованием Qiagen DNeasy Minikit в соответствии с протоколом производителя, и выход ДНК проверяли на спектрофотометре NanoDrop (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA). Важно отметить, что наш выбор размера шариков, материала шариков и параметров прогона бисерной мельницы был основан на предварительных испытаниях, в которых мы наблюдали, что гомогенизация на бисерной мельнице с другими комбинациями параметров необязательно приводит к лизису всех зерен и часто приводит к лизису зерен таксоноподобным образом.

Создание библиотеки и секвенирование

Для маркера штрих-кодирования мы выбрали ядерную область ITS2, которая обычно используется в качестве маркера штрих-кодирования пыльцы (например,грамм. 39 ). Для амплификации этой области мы использовали специфичные для покрытосеменных растений праймеры ITS2-An3 и ITS2-An4, описанные Cheng et al . 40 . Пластидные маркеры rbcL и trnL также были исследованы, но было обнаружено, что они не обеспечивают достаточного разрешения на уровне родов в нашей системе исследования, что заставляет нас полагаться на ITS2 как на штрих-код с одним маркером.

По Ричардсону и др. . 34 , библиотеки ампликонов были созданы с использованием протокола вложенной ПЦР, разработанного для минимизации систематической ошибки, вносимой специфическими для шаблона взаимодействиями индексированных праймеров. 41 .В ПЦР 1 область-мишень ITS2 амплифицировали с использованием праймеров, описанных выше. В ПЦР 2 были добавлены олигонуклеотиды Illumina, ориентированные на считывание. В ПЦР 3 добавляли специфичные для образца двойные индексы 39,42 и гибридизационные олигонуклеотиды Illumina. Затем мы очистили и нормализовали продукт ПЦР 3 с помощью набора SequalPrep (Thermo Fisher Scientific). Готовые библиотеки секвенировали в Penn State Genomics Core Facility на платформе Illumina MiSeq (Illumina, Inc) с использованием проточной кюветы Nano 2 × 250 циклов.Данные заархивированы в NCBI, инвентарный номер PRJNA548313.

Bioinformatics

Эталонные последовательности были загружены из GenBank с использованием eDirect API с использованием следующих условий поиска:

esearch -db нуклеотид -запрос «Viridiplantae [ORGN] И

(its2 OR внутренняя транскрибированная спейсер [ALL]) »|

efilter -query 100: 2000 [SLEN]

Таксономических линий для каждого загруженного образца было извлечено с помощью пакета R package taxonomizr 43 .Затем наборы эталонных последовательностей были обрезаны до точной интересующей области штрих-кода для каждого маркера с помощью MetaCurator 44 . В конвейере MetaCurator используются скрытые модели Маркова, созданные HMMER3 45 , для идентификации и вырезания интересующей области ампликона из всех доступных ссылок, включая длинные геномные контиги и целые пластидные геномы. Кроме того, используя метод 46 на основе VSEARCH, эта процедура удаляет повторяющиеся ссылочные последовательности с использованием таксономически осведомленного метода, в котором дубликат удаляется из данных только в том случае, если он принадлежит к той же таксономической линии, что и альтернативный дубликат.Наконец, кураторская база данных была географически отфильтрована на уровне родов с использованием базы данных USDA PLANTS 17 , записей для штатов Коннектикут, Массачусетс, Нью-Джерси, Нью-Йорк, Пенсильвания и Род-Айленд, а также родов, найденных в наших инвентаризациях питомников ( в некоторых из них отсутствуют записи Министерства сельского хозяйства США для нашего исследуемого региона). Окончательная база данных ITS2 содержала 43 844 последовательности, представляющих 1 183 из 1 994 родов в записях о растениях Министерства сельского хозяйства США (59%), плюс 211 из 247 родов из инвентаризаций наших питомников (85%).

Парные чтения MiSeq были сначала сопряжены с использованием PEAR 47 . Затем, используя функцию –usearch_global программы VSEARCH 46 , сопряженные чтения были запрошены по ссылочным библиотекам, описанным выше, и мы выбрали максимальное совпадение (то есть лучший процент идентичности) для каждой последовательности запросов после ограничения совпадений до минимума. 75% идентичности и 80% охвата запросов. Выходные данные выравнивания –usearch_global затем подвергались более строгому порогу идентификации 95% и порогу длины выравнивания 300 п.о.Все запрашиваемые последовательности с выравниванием ниже порога идентичности считались неклассифицированными.

Хотя в некоторых исследованиях сообщалось о таксономическом назначении на уровне видов с использованием метабаркодирования пыльцы, этот подход подходит только для исследовательских систем с региональной исчерпывающей справочной библиотекой, для которой разрешение на уровне видов было проверено для используемого маркера. Создание такой справочной библиотеки выходило за рамки данного исследования, поэтому мы выбрали более консервативный подход, приписывающий таксономию только уровню родов.Предполагаемый таксономический состав каждого образца был суммирован путем суммирования общего количества считываний по родам и исключения родов, составляющих менее 0,05% от общего количества считываний, как вероятных ложноположительных результатов.

Курирование справочной библиотеки и согласование VSEARCH были выполнены на высокопроизводительных вычислительных кластерах в Институте кибернаук штата Пенсильвания и суперкомпьютерном центре Огайо. Обработка данных после выравнивания была выполнена в R 48 , а аннотированные скрипты доступны на https: // github.ком / спонслердб / vsearchr.

Пыльцевая микроскопия

Тридцать один из наших 47 образцов был подвергнут перекрестной проверке с помощью микроскопии, чтобы предоставить вторую линию доказательств для вывода о роли декоративных растений в питании пыльцы медоносных пчел. Микроскопию пыльцы проводили в палеоэкологической лаборатории Института изменения климата Университета штата Мэн, Ороно, штат Мэн, как описано в 38 . Объемные образцы корбикулярной пыльцы (0,47–0,85 г) сначала гранулировали в 10% -ной соляной кислоте, промывали деионизированной водой для удаления избытка органических веществ, а затем промывали ледяной уксусной кислотой для удаления всей воды.Затем образцы подвергали ацетолизу после 49 , устанавливали и просматривали при 400-кратном увеличении на микроскопе Nikon Labophot-2 (Nikon Corporation, Tokyo). Пыльцевые зерна были идентифицированы до минимально возможного таксономического уровня с использованием эталонных образцов, собранных из исследовательских питомников, ранее собранных эталонных материалов в Институте изменения климата, опубликованных ключей 49,50,51 и изображений из базы данных PalDat (https: // www.paldat.org/). Пропорциональная численность каждого типа пыльцы была оценена объемным методом 52 .

Анализ данных

Чтобы упростить визуализацию данных и сфокусировать интерпретацию на наиболее важных компонентах диеты пыльцы медоносных пчел, мы создали подмножества наших данных метабаркодирования и микроскопии, включая только роды с максимальной пропорциональной численностью в пределах выборки на дату участка в не менее 5%, далее именуемые «основные роды». Эти подмножества основных родов использовались для оценки нашего центрального вопроса о том, какие декоративные растения были привлекательны для медоносных пчел, а также для оценки качественного (наличие / отсутствие) согласия между метабаркодированием и микроскопией.Для оценки количественной согласованности метабаркодирования и микроскопии мы использовали полные наборы данных.

Для подмножества родов в каждом образце, обнаруженного как с помощью метабаркодирования, так и с помощью микроскопии, мы использовали линейную регрессию для оценки количественной согласованности двух методов с использованием преобразования квадратного корня для улучшения однородности дисперсии. Вся обработка и анализ проводились в R 48 .

Специальный выпуск: достижения в исследованиях вируса медоносной пчелы

Уважаемые коллеги,

Внезапный крах колоний медоносных пчел в Калифорнии в 2005 году и тревожные сообщения о значительных потерях колоний в США.С. и Европа вновь привлекли внимание исследователей и широкой общественности к роли вирусов медоносных пчел в этом процессе. Таким образом, исследования были сосредоточены на выяснении геномных последовательностей ранее идентифицированных и новых вирусов, связанных с медоносными пчелами, их патогенности на индивидуальном уровне и уровне колоний, их структуры, их взаимодействия с другими патогенами и их взаимоотношений с хозяином, которые неоднократно возникали. от скрытых бессимптомных инфекций до явных симптомов инфекций после стрессовых испытаний.Эти усилия привели к получению новых и существенных знаний.

В этом специальном выпуске Viruses наша цель — осветить недавние значительные достижения в этой области вирусологии, чтобы предоставить обновленную интегрированную картину вирусов, связанных с медоносными пчелами, чтобы улучшить, облегчить и стимулировать дальнейшие инновационные исследования в этом увлекательном области, а также выделить избранные недавние достижения, которые могут способствовать расширению нашего понимания этой темы. Приглашаются исследователи, которые хотели бы поделиться своими взглядами и / или оригинальными исследованиями по вышеуказанным темам, включая молекулярные, структурные, геномные и биологические аспекты вируса-хозяина и появление / участие новых штаммов вирусов, а также новых вирусов. Сделай так.

Проф. Нор Чеяновский
Приглашенный редактор

Информация для подачи рукописей

Рукописи должны быть представлены онлайн по адресу www.mdpi.com, зарегистрировавшись и войдя на этот сайт. После регистрации щелкните здесь, чтобы перейти к форме отправки. Рукописи можно подавать до установленного срока. Все статьи будут рецензироваться. Принятые статьи будут постоянно публиковаться в журнале (как только они будут приняты) и будут перечислены вместе на веб-сайте специального выпуска.Приглашаются исследовательские статьи, обзорные статьи, а также короткие сообщения. Для запланированных статей название и краткое резюме (около 100 слов) можно отправить в редакцию для объявления на этом сайте.

Представленные рукописи не должны были публиковаться ранее или рассматриваться для публикации в другом месте (за исключением трудов конференции). Все рукописи проходят тщательное рецензирование путем слепого рецензирования. Руководство для авторов и другая важная информация для подачи рукописей доступна на странице Инструкции для авторов. Viruses — это международный рецензируемый ежемесячный журнал с открытым доступом, публикуемый MDPI.

Пожалуйста, посетите страницу Инструкции для авторов перед отправкой рукописи. Плата за обработку статьи (APC) для публикации в этом журнале с открытым доступом составляет 2200 швейцарских франков. Представленные статьи должны быть хорошо отформатированы и написаны на хорошем английском языке. Авторы могут использовать MDPI Услуги редактирования на английском языке перед публикацией или во время редактирования автора.

Новая эра безопасных нанотехнологий

С появлением нанотехнологий в недавнем прошлом быстро развились многие смежные отрасли.Как правило, нисходящий и восходящий подходы — это два основных процесса, используемых для синтеза наночастиц; для большинства из них требуются высокие температуры, вакуум и агрессивные / токсичные химикаты. Как следствие, неблагоприятные эффекты затронули организмы, в том числе человека. Некоторые методы синтеза дороги и требуют много времени. Как следствие, концепция «зеленых нанотехнологий» возникла с зеленым синтезом наночастиц, открыв новую эпоху в нанотехнологиях. Это включает синтез наноматериала из микроорганизмов, макроорганизмов и других биологических материалов.Мед задокументирован как старейший в мире источник продуктов питания с исключительной медицинской, химической, физической и фармацевтической ценностью. Опосредованный медом синтез зеленого цвета — относительно новая концепция, используемая в последние несколько лет для синтеза наночастиц золота, серебра, углерода, платины и палладия. Мед действует как стабилизирующий и восстанавливающий агент, а также как прекурсор в синтезе наночастиц. Этот метод обычно требует комнатной температуры и не дает токсичных побочных продуктов.В заключение, зеленый синтез наночастиц, опосредованный медом, обеспечивает простой, экономичный, биосовместимый, воспроизводимый, быстрый и безопасный метод. Особая активность функционализированных наночастиц меда может обеспечить ценные конечные продукты с множеством применений в различных областях.

1. Введение

За последнее десятилетие наноматериалы стали многообещающим товаром во многих областях, включая косметику, здравоохранение, биомедицину, продукты питания и корма, доставку генов лекарств, окружающую среду, здоровье, механику, оптику, химическую промышленность, электронику, космос. промышленность, энергетика, катализ, излучатели света, одноэлектронные транзисторы, нелинейные оптические устройства и фотоэлектрохимические приложения [1–10].

Теоретическая концепция нанотехнологии была впервые описана в 1959 году физиком Ричардом Фейнманом [11]. Нанотехнология — это способность понимать, контролировать и манипулировать материей на уровне отдельных атомов и молекул [12]. Приставка нано образована от греческого слова nannos . Нанотехнология относится к объектам, размер которых измеряется в нанометровом масштабе, где по крайней мере один из размеров частицы должен быть меньше 100 нм. Недавние исследования показали, что свойства и потенциальные области применения наночастиц зависят от фаз, размеров и морфологии этих частиц [13, 14].Таким образом, управляемый синтез наноматериалов с новой морфологией привлек большое внимание.

Синтез наночастиц можно разделить на подходы «сверху вниз» или «снизу вверх» [15]. Подход «сверху вниз» включает в себя процесс разрушения больших структур для создания небольших. Физические методы, такие как литография [16], лазерная абляция [17], напыление [18], импульсное электрохимическое травление [19] и осаждение из паровой фазы [20], являются одними из наиболее часто используемых методов сверху вниз.Подходы «снизу вверх», такие как золь-гель обработка [21], химическое осаждение из паровой фазы [22], синтез плазменным или пламенным напылением [23], лазерный пиролиз [24] и микроэмульсия [25], включают синтез материала, атом за атомом. , молекула за молекулой или кластер за кластером. На рисунке 1 показаны различные химические и физические методы синтеза наночастиц. Для большинства из них обычно требуются токсичные и агрессивные химические добавки, например диметилформамид, гидразин и боргидрид натрия, а также физические условия, такие как высокие температуры, вакуум и дорогостоящее оборудование.Эти методы могут привести к получению токсичных и агрессивных продуктов, которые могут представлять биологический риск для окружающей среды; из-за высокого поверхностного заряда и большой площади поверхности наночастиц агрессивные химические вещества могут оставаться адсорбированными на наночастицах. Выброс этих химикатов в окружающую среду может оказывать неблагоприятное воздействие на организмы, включая микроорганизмы, растения, беспозвоночных и позвоночных, включая людей, на различных трофических уровнях [26]. Поэтому очень важно оптимизировать экологически чистые методы синтеза наночастиц.


В этом обзоре мы сначала сосредоточимся на различных методах зеленого синтеза наночастиц. Кроме того, мы описываем физические и химические характеристики натурального меда. После этого делается акцент на зеленом синтезе различных типов наночастиц, опосредованном медом. Наконец, мы выделяем ключевые проблемы зеленого синтеза наночастиц.

2. Зеленый синтез

Последние разработки в области нанотехнологий сосредоточены на экологически безопасных и экономичных методах синтеза.Зеленый синтез наночастиц — это экологически чистый и безопасный способ синтеза наноматериалов с использованием биологических ресурсов. Этот зеленый подход открыл новую эру безопасных нанотехнологий. На рисунке 2 сравниваются традиционные методы синтеза, такие как физические и химические методы, с методами зеленого синтеза наночастиц. Кроме того, он иллюстрирует сравнение между синтезом зелени, опосредованным микроорганизмами, и более продуктивным синтезом зелени, опосредованным медом.


В таблице 1 перечислены различные методы зеленого синтеза наночастиц и особенности получаемых продуктов.В настоящее время они включают различные подходы, такие как использование микробных систем, систем растений и биологических методов. Бактерии были использованы для синтеза нескольких наночастиц, включая золото, серебро, оксид серебра, диоксид титана и сульфид кадмия [24–30], в то время как грибы были использованы для синтеза серебра [31–36], диоксида титана [29] и сульфида кадмия [30]. ]. Кроме того, такие актиномицеты, как Rhodococcus sp. были использованы для синтеза наночастиц золота [25]. Недавние эксперименты показали огромный потенциал водорослей, особенно в синтезе наночастиц серебра, золота, оксида цинка и оксида железа [37–43].Au-Co 3 O 4 наночастиц были синтезированы вирусопосредованным методом [44]. Кроме того, экстракты листьев, экстракты семян, экстракты корней, луковиц и латекс растений были использованы для синтеза наночастиц золота, серебра и палладия [45–56]. Биологические материалы, такие как мед, крахмал и аскорбиновая кислота, были использованы для синтеза наночастиц золота, серебра, палладия, углерода и платины [57–63].

до 20021 нм [30] Jania rubens mutic 9022

Биологический ресурс Типы синтезируемых наночастиц Организм / с Размер и особенности

902 902 902 902 902 902
Бактерии Au Acinetobacter sp. SW 30 20 ± 10 нм [27]
Rhodococcus sp. 5–15 нм [28]
Ag Bacillus subtilis 5–60 нм [29]
Pseudomonas stutzeri AG259
Ag 2 O Lactobacillus mindensis 2–20 нм [31]
TiO 2 Lactobacillus sp. 15–35 нм [32]
CdS Lactobacillus sp. 4,93 ± 0,23 нм [33]
Грибки Ag Aspergillus terreus 1–20 нм [34]
Штамм Saccharomyces 3 spp.MKY 2–5 нм [35]
Fusarium oxysporum 25–50 нм [36], ~ 50 нм [37], 10–20 нм [38]
Aspergillus niger 1 –20 нм [39]
TiO 2 Saccharomyces cerevisiae 8–20 нм [32]
CdS Saccharomyces cerevisiae .57 ± 0,21 нм [33]
Водоросли Ag Chlorella vulgaris 15–47 нм. [40]
Полисахарид, выделенный из Porphyra vietnamensis 13 ± 3 нм [41]
Полисахарид, экстрагированный из Pterocladia capillacea Полисахарид, 7–18 нм [42] Полисахарид, 7–18 нм [42] 5–20 нм [42]
Полисахарид, экстрагированный из Ulva fasciata 7–24 нм [42]
Полисахарид, экстрагированный из Colpomenia sinuosa

65


21
[42]
Turbinaria conoides 96 нм [43]
Au Sargassum wightii 8–12 нм [44]
ZassnO 35–57 нм (гексагональная структура вюрцита) [45]
Fe 3 O 4 Sargassum muticu m 18 ± 4 нм [46]
Вирус Au-Co 3 O 4 Вирус M13 Нанопроволоки [47]

Экстракты листьев Au Cassia auriculata 15–25 нм (треугольная и сферическая форма) [48]
Ag, Au 902 12 нм и 11 нм соответственно [49]
Au, Ag Алоэ вера 50–350 нм и 15.2 ± 4,2 нм соответственно [50]
Ag Vitex negundo L. экстракт 10–30 нм [51]
Argemone mexicana 30 нм [52]
Acalypha indica 20–30 нм [53]
Pelargonium graveolens 16–40 нм [54]
Pd Cinnamomum21 Camphora ]
Экстракты семян Ag Jatropha curcas 15–50 нм [56]
Латекс Ag 2 Jatropha curcas
21 902 902
Луковицы Ag Allium sativum 7.3 ± 4,4 нм [58]
Экстракты корней Au Zingiber officinale 5–20 нм [59]
Ag Zingiber officinale 10 ]

Биологический материал
Аскорбиновая кислота и крахмал Ag 17–30 нм треугольник 9066 902 [усеченный] Мед Au ~ 15 нм [61]
Ag 18.98–26,05 нм [62]
Pd 5–40 нм [63]
Pt 2,2 нм [64]
C — 902 7 нм [65]
Крахмал Ag 10–34 нм [66]

3. Натуральный мед

Натуральный мед мира старейший источник пищи, представляет собой отличную пищу с высокой энергетической и питательной ценностью [61].Он продуцируется Apis mellifera ( A. mellifera ; медоносная пчела) из нектара растений, секретов и экскрементов [67].

Мед натуральный издревле применялся в лечебных целях. Первые свидетельства использования меда в качестве лекарства относятся к 2100–2000 гг. До н.э., когда шумерская таблетка содержала мед как лекарство и мазь [68]. Кроме того, многие исследования на животных подтвердили применение меда при сердечно-сосудистых заболеваниях, где он влияет на факторы риска сердечно-сосудистых заболеваний, такие как гиперлипидемия и выработка свободных радикалов [69].

4. Физические характеристики меда

Натуральный мед представляет собой липкий и вязкий раствор, в зависимости от содержания в нем воды [70]. Он также обладает способностью поглощать и удерживать влагу из окружающей среды. Обычный мед с содержанием воды 18,8% или менее впитывает влагу из воздуха с относительной влажностью выше 60% [71].

Цвет жидкого меда варьируется от прозрачного и бесцветного (как вода) до темно-янтарного или черного. Цвет меда проявляется во всех оттенках желтого и янтарного; цвет зависит от ботанического происхождения, возраста и условий хранения, но прозрачность или прозрачность зависит от количества взвешенных частиц, таких как пыльца [72].

5. Химический состав меда

Мед с незапамятных времен является одним из самых здоровых источников пищи. Он состоит из 80–85% углеводов (в основном глюкозы и фруктозы), 15–17% воды, 0,1–0,4% белка, 0,2% золы и незначительного количества аминокислот, ферментов и витаминов, а также других веществ, таких как фенольные. антиоксиданты. Однако точный химический состав и физические свойства натурального меда различаются в зависимости от вида растений, на которых пчелы кормились, климатических условий и растительности [70].

Фруктоза (от 32,56 до 38,2%) и глюкоза (от 28,54 до 31,3%) как основные углеводы, присутствующие в меде, составляют 85–95% от общего количества сахаров и легко всасываются в желудочно-кишечном тракте. Другие сахара включают дисахариды, такие как мальтоза, сахароза, изомальтоза, тураноза, нигероза, мелибиоза, паноза, мальтотриоза и мелезитоза. Также присутствует несколько олигосахаридов. Мед содержит от 4 до 5% фруктоолигосахаридов, которые служат пробиотическими агентами [73].

Мед содержит 0 белков.1–0,5% количества, которые сильно различаются в зависимости от типа и происхождения меда [70]. Натуральный мед также богат витаминами, такими как C и B 1 (тиамин) и B 2 комплексных витаминов, включая рибофлавин, никотиновую кислоту, B 6 и пантотеновую кислоту [74].

Почти все натуральные сорта меда содержат флавоноиды (апигенин, пиноцембрин, кемпферол, кверцетин, галангин, хризин и гесперетин), фенольные соединения (эллаговая, кофейная, п-кумаровая и феруловая кислоты) и биоактивные соединения, такие как аскорбиновая кислота, токоферолы, каталаза (CAT), супероксиддисмутаза (SOD) и восстановленный глутатион (GSH) в качестве антиоксидантных ферментов [75].

Концентрация минеральных соединений колеблется от 0,1% до 1,0%. Калий является основным металлом, за ним следуют кальций, магний, натрий, сера и фосфор. Микроэлементы включают железо, медь, цинк и марганец [76].

Составляющими меда являются различные ферменты, например оксидаза, инвертаза, амилаза и каталаза; основные ферменты — инвертаза (сахараза), диастаза (амилаза) и глюкозооксидаза. Декстрин и мальтоза производятся из длинных цепей крахмала под действием фермента амилазы [70].Известно, что каждый из этих второстепенных компонентов обладает отличительными питательными или лечебными свойствами, и уникальная смесь объясняет разнообразие и разное применение натурального меда.

6. Зеленый синтез наночастиц, опосредованный медом

Особые химические свойства меда обусловливают его использование в зеленом синтезе наночастиц. Как следствие, опосредованный медом синтез предлагает несколько преимуществ по сравнению с методами, опосредованными микроорганизмами; это относительно быстрый процесс по сравнению с микробиологическим методом.Кроме того, микроорганизмы необходимо культивировать с особой осторожностью, и существует задержка по времени для преобразования наночастиц микроорганизмами. Кроме того, отделение наночастиц от микроорганизмов может быть сложной задачей.

На основании литературы [77], Рисунок 3 иллюстрирует предложенный механизм, а в Таблице 2 перечислены восстанавливающие и стабилизирующие агенты и конкретные температуры, используемые при опосредованном медом биосинтезе различных наночастиц. В то время как обобщенная процедура использовалась для наночастиц золота, серебра и палладия, для наночастиц углерода и платины использовались определенные условия.

902 O 2 и глюконовая кислота, полученные при разбавлении меда дистиллированной водой [61]]

Тип наночастиц Восстановитель Стабилизатор Удельная температура

Белки, присутствующие в меде RT [61, 78]
Серебро Мед Белки в меде [79] RT [62, 78–80]
Палладий Мед Мед RT [63]
Платина Мед Белки в меде 100 ° C [642


7.Золотые наночастицы

Филип синтезировал золотые наночастицы путем восстановления HAuCl 4 с различными объемами разбавленного меда, причем скорость восстановления золотых частиц возрастала с увеличением объема меда [55]. Соответственно, фруктоза в качестве основного ингредиента меда могла действовать как главный восстанавливающий агент вместе с витамином С, то есть как мягкий восстанавливающий агент. Кроме того, он предположил, что этому снижению может способствовать присутствие H 2 O 2 и глюконовой кислоты, образующиеся при разбавлении меда дистиллированной водой.Фруктоза считается возможным восстановителем реакции, в то время как белки, присутствующие в меде, отвечают за стабилизацию наночастиц [61].

Олайтан и его коллеги сообщили о зеленом синтезе наночастиц золота при комнатной температуре с использованием меда как в качестве восстановителя, так и в качестве стабилизатора [71]. Следовательно, размер частиц в нм наблюдали с помощью просвечивающей электронной микроскопии (ТЕМ), которая проявляла умеренную антибактериальную активность в отношении как грамположительных, так и грамотрицательных бактериальных штаммов . Наименьшая минимальная ингибирующая концентрация (МИК) была зарегистрирована против Staphylococcus aureus при 31,25 г / мл [78].

8. Наночастицы серебра

Бар и его коллеги синтезировали наночастицы серебра с использованием меда при комнатной температуре, где мед действовал как восстанавливающий, так и стабилизирующий агент [56]. Таким образом, он заменил токсичные и агрессивные восстановители, такие как диметилформамид, гидразин и борогидрид натрия, используемые ранее. Синтезированные наночастицы были стабильны в течение пяти месяцев без какого-либо стабилизатора.Размер и морфология наночастиц серебра зависели от концентрации используемого меда и pH, при этом размер частиц уменьшался с увеличением pH. Более того, исследования с помощью сканирующей электронной микроскопии (SEM) выявили обратную корреляцию между размером наночастиц серебра и концентрацией меда; размер наночастиц серебра находился в диапазоне 18,98–26,05 нм, когда использовалось 10 г меда, в то время как размер дополнительно уменьшался до диапазона 15,63–17,86 нм при увеличении концентрации меда до 40 г [62].

Сообщалось о методе синтеза наночастиц серебра с использованием солнечного света с использованием меда как в качестве восстанавливающего, так и в качестве стабилизирующего агента [72]. Эти покрытые медом наночастицы серебра были эффективными ингибиторами коррозии для мягкой стали и оставались стабильными при комнатной температуре более шести месяцев. Белки в меде, по-видимому, являются защитным агентом, который стабилизирует наночастицы, в то время как фруктоза действует как восстанавливающий агент [79].

Синтезированы почти сферические и монодисперсные наночастицы серебра размером ~ 4 нм при pH 8.5 при комнатной температуре [73]. Полученные наночастицы серебра были синтезированы в различных размерах путем регулирования pH раствора с использованием меда в качестве восстанавливающего и стабилизирующего агента. Исследования с помощью просвечивающей электронной микроскопии и рентгеновской дифракции (XRD) показали высококристаллическую гранецентрированную кубическую (ГЦК) структуру. Картины XRD соответствовали плоскостям (1 1 1), (2 0 0), (2 2 0), (3 1 1) и (2 2 2). Кроме того, спектр инфракрасной спектроскопии с преобразованием Фурье (FT-IR) показал, что белки связаны с наночастицами серебра через карбоксилатную группу [80].Кроме того, наночастицы серебра с размером частиц нм были синтезированы при комнатной температуре с использованием меда как восстановителя, так и стабилизатора. Эти наночастицы продемонстрировали значительную антимикробную активность против широкого спектра бактериальных и грибковых штаммов. Самая низкая минимальная ингибирующая концентрация (МИК) была продемонстрирована против Staphylococcus aureus при 2,81 г / мл [78].

9. Наночастицы палладия

Наночастицы палладия размером от 5 до 40 нм были синтезированы с использованием меда как восстановителя, так и стабилизатора [63].Этот нанокатализатор показал более высокую возможность повторного использования; Наночастицы Pd использовались в качестве катализатора кросс-сочетания Сузуки и при гидрировании сопряженных олефинов. Таким образом, наночастицы палладия, покрытые медом, обладают потенциалом применения в различных областях, включая нанобиотехнологию, органическую каталитическую трансформацию и сенсоры [63].

10. Углеродные наночастицы

В экологически чистом синтезе наноматериалов мед обычно используется как в качестве стабилизатора, так и в качестве восстановителя. Ву и колледжи, однако, использовали мед в качестве прекурсора при синтезе углеродных наночастиц для получения фотоакустических изображений в реальном времени [65].Эти наночастицы полисорбата и полиэтиленгликоля C с поверхностным покрытием были сравнительно меньше (~ 7 нм), чем ранее использовавшиеся частицы, такие как покрытые кремнеземом золотые наночастицы (20 нм) [81], одностенные нанотрубки (SWNT) и Cu, используемые для сторожевого лимфатического узла. (SLN) визуализация. Авторы заявили о быстром усилении сигнала (~ 2 мин) с этими углеродными наночастицами [65].

Два нм высоко флуоресцентных углеродных точки были синтезированы из меда для зондирования и визуализации с квантовым выходом (QY) приблизительно 19.8% [82]. Синтезированные зеленым цветом углеродные точки показали более высокую стабильность с другими преимуществами, включая нетоксичность, высокий квантовый выход флуоресценции и фотостабильность. Более того, эти углеродные точки использовались в качестве сенсора для обнаружения Fe 3+ и применялись для флуоресцентного окрашивания и визуализации клеток. Авторы предлагают множество потенциальных применений углеродных точек в биосенсорных исследованиях и биовизуализации [82].

11. Наночастицы платины

Venu и колледжи сообщили об опосредованном медом, новом, экономически целесообразном методе синтеза наночастиц и нанопроволок платины [64].Они синтезировали наночастицы Pt размером 2,2 нм при 100 ° C в водном растворе меда и, кроме того, нанопроволоки платины длиной 5–15 нм, сформированные при более длительной термообработке путем самосборки. Характеристики полученных наночастиц с помощью спектроскопических, морфологических и структурных исследований показывают, что мед играет важную роль в уменьшении количества наночастиц платины. Более того, функционализированные медом наночастицы платины были высококристаллическими, а структура имела гранецентрированную кубическую форму.Анализ FT-IR показал, что белки связаны с наночастицами платины через карбоксилатную группу. Эти наночастицы были стабильны в воде более четырех месяцев и показали каталитические свойства для образования антипирилхинониминового красителя из 4-аминоантипирина и анилина в кислой водной среде. Venu et al. предложили применение этого каталитического свойства для обнаружения и удаления анилинов из образцов почвы и воды [64].

Рисунок 4 иллюстрирует многочисленные текущие применения зеленого синтеза наночастиц золота, серебра, палладия, углерода и платины с помощью меда.Синтезированные медом зеленые наночастицы золота и серебра могут быть использованы в качестве сильнодействующих антибактериальных агентов [78]. Кроме того, наночастицы серебра проявляют противогрибковую и антикоррозионную активность [79]. Наночастицы палладия проявляют каталитическую активность и могут использоваться в сенсорных приложениях [63]. Синтезированные медом углеродные наночастицы используются во многих областях, включая биочувствительность, биоимиджинг, флуоресцентное окрашивание и фотоакустическую визуализацию в реальном времени [82]. Наночастицы платины проявляют каталитическую активность [64].


12. Проблемы

Зеленый синтез наночастиц с помощью меда — это новая концепция, которую еще предстоит полностью разработать и внедрить. На сегодняшний день проведено ограниченное количество исследований, ограниченных синтезом металлических и углеродных наночастиц. Для максимального использования очень важно синтезировать монодисперсные наночастицы. Методы должны быть оптимизированы для синтеза других сложных наночастиц, таких как Fe 3 O 2 , TiO 2, ZnO и CdS.Необходимы дальнейшие исследования для определения фактических ингредиентов, ответственных за восстановление ионов металлов. В некоторых исследованиях спектр FT-IR показал, что белки ответственны за стабилизацию. Однако дальнейшие исследования имеют решающее значение для определения соответствующих белков, ответственных за функционализацию этих наночастиц.

13. Заключение

В большинстве распространенных методов синтеза наночастиц часто используются агрессивные химические вещества, такие как гидразин, диметилформамид и боргидрид натрия, и высокие температуры, которые могут представлять биологическую опасность для окружающей среды.Напротив, опосредованный медом синтез зеленого требует относительно низких температур (обычно комнатной температуры) и не производит никаких токсичных продуктов. Зеленые методы синтеза могут быть использованы в качестве альтернативы применяемым в настоящее время химическим и физическим методам синтеза. Кроме того, зеленый синтез наночастиц с использованием медосодержащих методов продемонстрировал экологичность, экономичность, экономию времени и простоту обработки, в которых мед действует как восстанавливающий и стабилизирующий агент. Функционализированные наночастицы меда проявляют особую активность, такую ​​как каталитические свойства, антикоррозионная активность, антимикробная активность, а также способность к биочувствительности и биовизуализации.При дальнейшем усовершенствовании наночастицы, синтезированные с помощью экологически чистых методов с использованием меда, могут обеспечить потенциальные и ценные конечные продукты с многочисленными применениями во многих областях, обеспечивая превосходную, экологически чистую альтернативу суровым и токсичным процедурам, практикуемым до сих пор.

Аббревиатуры
XR-21 902 902 902 902 902 902 902 902 902 902 902 902 QY :
TEM: Просвечивающий электронный микроскоп
MIC: Минимальная ингибирующая концентрация
SEM: Сканирующий электронный микроскоп2
FCC: Гранецентрированная кубическая
ИК-Фурье: Инфракрасная спектроскопия с преобразованием Фурье
SLN: Часовые лимфатические узлы
Ультрафиолет.
Конкурирующие интересы

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих интересов. Благодарности

Границы | Каркас из нановекторов селена и фитохимикатов меда для ингибирования определения кворума Pseudomonas aeruginosa и образования биопленок

Введение

Появление бактерий с множественной лекарственной устойчивостью стимулировало исследования по отключению вирулентности преимущественно с помощью тактики ингибирования кворум-зондирования (QS), а не бактерицидных и бактериостатических стратегий (Singh et al., 2009a; Defoirdt et al., 2013; Ким и др., 2015; Lidor et al., 2015; Шривастава и др., 2015; Wang et al., 2015; Ян и др., 2015). P. aeruginosa , грамотрицательная бактерия, вызывающая муковисцидоз у пациентов с ослабленным иммунитетом, ожоговых отделений больниц и в имплантированных медицинских устройствах, включая интубационные трубки и стенты (Singh et al., 2012; Singh BR et al., 2015; Kalferstova и др., 2016). П . aeruginosa использует сигнальный каскад QS, опосредованный N -ацилгомосериновыми лактонами (AHL), для запуска экспрессии десятков генов вирулентности и образования биопленок при достижении достаточной плотности популяции (Chugani et al., 2012; Инь и др., 2016). В частности, он смертельный для пациентов с муковисцидозом (распространенное генетическое заболевание у кавказцев) из-за развития слизи в легочной ткани, что приводит к пневмонии. К счастью, были разработаны многочисленные ингибиторы QS растительного происхождения, и за последние несколько лет уровень инфицирования снизился (Hentzer et al., 2002; Hentzer and Givskov, 2003; Singh et al., 2009b; Singh BN et al., 2015). ). Однако современные методы лечения против QS часто не являются простыми из-за их более низкой биодоступности и недостаточного проникновения в бактериальную биопленку и, таким образом, приводят к значительным жертвам (Defoirdt et al., 2013). Разработка новой серии био-наноматериалов для эффективной доставки лекарств открывает новые возможности для решения этих проблем.

Сочетание биологии и нанотехнологии привело к созданию междисциплинарной области, бионанотехнологии, которая демонстрирует широкое применение в медицине для адресной доставки лекарств при многих заболеваниях и расстройствах (de la Zerda and Gambhir, 2007; Zhu et al., 2013 ; Butcher et al., 2016). Основное оправдание — превосходные оптические, магнитные или структурные физико-химические свойства, которые недоступны для молекул или сыпучих материалов.Выдающиеся характеристики би наноматериалов открывают новые возможности для доставки лекарств и лечения заболеваний, которые традиционно оказывались неэффективными с помощью традиционных методов, особенно в отношении микробных инфекций (Fernandes et al., 2010).

Ряд наносистем с различной структурой и составом, таких как металлы, полимеры, оксиды и полупроводники, были изготовлены для переноса противомикробных агентов (de la Zerda and Gambhir, 2007). Среди этих наноматериалов наночастицы селена (SeNP) привлекают большое внимание как эффективные носители лекарств (Liu et al., 2012; Ю. и др., 2014; Xia et al., 2015). Как особый вид Se, SeNP также признаны из-за их превосходных антиоксидантных свойств и профилактических эффектов (Torres et al., 2012; Liao et al., 2015). Множество доказательств также подтверждают лучшую биосовместимость, биоэффективность и более низкую токсичность SeNP по сравнению с неорганическими и органическими селеносоединениями (Husen and Siddiqi, 2014). Многие исследования показали, что SeNP могут подавлять рост патогенных микроорганизмов (Tran and Webster, 2011; Khiralla and El-Deeb, 2015).Исследователи использовали SeNP в качестве носителей фармацевтических агентов для повышения их биоэффективности (Liu et al., 2012; Yu et al., 2014). Эта стратегия открывает новые горизонты для биомедицинской терапии и открывает новое окно для применения SeNP. Но SeNP демонстрируют небольшую разницу между фармакологическими и токсикологическими эффектами. Кроме того, QS-активность нано-ингибиторов анти-QS на основе SeNPs остается неизученной. Однако дизайн нацеливания на QS посредством комбинации с ингибитором QS может быть хорошей тактикой для преодоления пагубных побочных эффектов SeNP.

Существует значительное количество исторических свидетельств, описывающих использование меда для лечения ран, поэтому с древних времен он стал противомикробным средством (Zumla and Lulat, 1989). Он привлек новое внимание в борьбе с лекарственно-устойчивыми бактериями за счет модуляции их передачи сигналов QS (Truchado et al., 2009; Jadaun et al., 2015). Исследования линейно коррелировали его активность против QS с общими и отдельными фенольными соединениями. Однако узкая биодоступность этих соединений ограничивает их эффективность как в системе in vitro , так и в системе in vivo .В настоящем исследовании мы надеемся разработать каркас из SeNPs (носителей) и фитохимических веществ меда (HP; анти-QS агенты), конъюгированных на поверхности SeNPs (SeNPs @ HP). В которых SeNP могут усиливать анти-QS активность HP против P. aeruginosa . In-vitro антивирулентная активность и механизмы, лежащие в основе SeNPs @ HP, также были исследованы.

Результаты

Биофабрика и характеристика SeNP @ HP

Добавление раствора HP восстановило селенит натрия с образованием SeNP.Появление красного цвета в водной среде после 30-минутного инкубационного периода (рис. 1А) свидетельствует о восстановлении Se (IV) до Se (0) (Klonowska et al., 2005). Изменение цвета может быть связано с поверхностным плазменным резонансом (SPR) с широким пиком (Estevez et al., 2014). Характерный пик поглощения при ~ 265 нм указывает на малый размер частиц SeNP (рис. 1B). Об аналогичном максимуме поглощения (λ max ) сообщалось в исследовании, проведенном Фешараки и его коллегами при длине волны 265 нм (Fesharaki et al., 2010).

Рисунок 1. Биофабрикация и характеристика SeNPs @ HP. (A) Фотографии результатов для 30-минутного хранения после окислительно-восстановительной реакции в отсутствие (a) и в присутствии (b) HP. (B) УФ-видимый спектр SeNPs @ HP. (C) SEM-изображение SeNPs @ HP, которое показывает образование агрегатов. (D) ТЕМ-изображение SeNPs @ HP. Частицы имели почти сферическую форму, а размер частиц составлял от 12 до 15 нм.

Электронно-микроскопический анализ был проведен для изучения структуры и размера SeNPs @ HP. Изображения, полученные с помощью сканирующей электронной микроскопии (SEM), показали, что наночастицы образовывали агрегаты (рис. 1C). После инкубации селенита натрия с HP в течение 30 минут раствор образца собирали для анализа просвечивающей электронной микроскопии (TEM). На рис. 1D показано ПЭМ-изображение SeNPs @ HP. Результаты показали, что SeNP существуют в виде хорошо диспергированных сферических частиц. Подсчитав ~ 200 наночастиц на многочисленных микрофотографиях ПЭМ, статистические данные показали, что средний размер частиц равен 13.5 нм и стандартное отклонение 1,10 нм.

Кристаллическая структура и фазовый состав SeNPs @ HP были определены с использованием метода дифракции рентгеновских лучей (XRD), показанного на рисунке 2A. Результаты подтвердили кристаллическую природу синтезированного наноматериала. Пики дифракции при 23,2 °, 27,6 °, 43,6 °, 56,8 ° и 62,3 ° могут быть отнесены к кристаллическим плоскостям (100), (101), (111), (200), (2 2 0) кристаллического Se. которые хорошо согласуются с JCPDS (файл № 06-0362). Расчетная средняя постоянная решетки составляла a = 4.363 A °, что очень хорошо согласуется с данными JCPDS. Расчетный средний размер частиц SeNPs @ HP составлял 12,4 нм.

Рис. 2. Характеристика SeNP @ HP. (A) XRD-диаграмма SeNPs @ HP. (B) FTIR-анализ SeNP @ HP, показывающий пики при 3420 см -1 , соответствующие отрезку O-H; 1375 см −1 , участок C-H и 1050 см −1 , участок C-O.

ОФ-ВЭЖХ SeNPs @ HP предполагают, что есть некоторые PP, связанные с NP.Высвобождение HP из SeNPs изучали в растворе абсолютного этанола при 40 ± 1 ° C и характеризовали с помощью ВЭЖХ через 1 ч. Хроматограмма ВЭЖХ выявила присутствие кофейной кислоты, кверцетина, кемпферола, акацетина, апигенина, хризина, пиноцембрина и пинобанксина (дополнительный рисунок 1). Таким образом, нано-Se можно использовать в качестве эффективных носителей для HP. Более того, анализ инфракрасной спектроскопии с преобразованием Фурье (FTIR) показал, что на поверхности SeNP были отложены некоторые функциональные группы.Большинство пиков представляли гидроксильные (ОН) группы: пик при 3420 см -1 , относящийся к отрезку ОН; пик при 1375 см -1 представляет фенольный ОН; а пик при 1050 см -1 представляет отрезок C-O (рис. 2B). Остальные пики средней интенсивности были связаны с группами -CH 3 и OCH 3 , связанными с биополимерами, присутствующими в меде. Результаты показывают, что мед действует как восстанавливающий и стабилизирующий агент для SeNP.

Определение минимальной ингибирующей концентрации (МИК)

SeNP, HP и SeNPs @ HP проявили сильную антимикробную активность в отношении бактерий, испытанных в ходе исследования, и значения МИК представлены в таблице 1. Значения МИК для Chromobacterium violaceum CV12472 составляли 20 мкг / мл (SeNP), 2% ( HP) и 10 мкг / мл (SeNPs @ HP), тогда как значения MIC для P. aeruginosa PAO1 составляли 25 мкг / мл, 5% и 15 мкг / мл соответственно. Чтобы обнаружить влияние суб-MIC HP на рост CV12472 и P.aeruginosa PAO1, использовали методы подсчета жизнеспособных клеток. 0,3 × МИК тестируемых образцов не проявляли антибактериальной активности против P. aeruginosa, PAO1 и CV12472. Эти данные показали, что SeNPs, HP и SeNPs @ HP при концентрациях ниже 7,5 мкг / мл, 0,6% и 4,5 мкг / мл соответственно не оказывали ингибирующего действия на скорость роста P. aeruginosa PAO1 и CV12472. (Таблица 1).

Таблица 1. Минимальная ингибирующая концентрация (МИК) и суб-МИК образцов против CV12472 и P.aeruginosa ПАО1 .

Прерывание QS SeNPs @ HP

Эффективность прерывания QS с помощью SeNPs @ HP была впервые исследована с использованием основанного на AHL in vitro конкурентного анализа QS против трех генетически модифицированных штаммов, C . violaceum (CV) 26 и Agrobacterium tumefaciens NT1. В текущем исследовании CV26 использовался для тестирования ингибирования QS, связанного с продукцией N, -бутаноил-L-гомосеринлактон (BHL), тогда как A.tumefaciens NT1 использовали для тестирования ингибирования QS, связанного с N — (3-оксододеканоил) -1-гомосеринлактон (OdDHL). Штамм CV026 является мутантом, который продуцирует рецептор AHL CviR, который может воспринимать экзогенные AHL с более короткой длиной углеродной цепи, включая BHL. Штамм A. tumefaciens NT1 продуцирует рецептор AHL TraR для обнаружения AHL, включая OdDHL. Хотя эти штаммы не продуцируют точные рецепторы LasR и RhlR, обнаруженные в P. aeruginosa , рецепторы TraR и CviR считаются адекватными индикаторами поведения LasR и RhlR соответственно.Анализ основан на сравнении конкурентного связывания молекул AHL P . aeruginosa (например, BHL и OdDHL) и HP к рецепторам AHL, в которых конкуренция была определена количественно с использованием спектрофотометра УФ-видимого диапазона (рис. 3A), а также путем измерения зоны ингибирования на твердой среде (рис. 3B). Фуранон С-30 использовали в качестве положительного контроля для эксперимента. В этом анализе появление цвета указывает на связывание AHL с их рецептором (AHL), тогда как отсутствие цвета указывает на отсутствие AHL и его связывания с рецептором.Как показано на фиг. 3C, культура CV12472 имела пониженное содержание пурпурного пигмента, виолацеина, при обработке SeNPs @ HP. Аналогичные результаты наблюдались для анализов ингибирования QS с использованием NT1, в которых голубой цвет уменьшался за счет увеличения уровней SeNPs @ HP (фиг. 3C). Эти результаты продемонстрировали, что SeNPs @ HP могут мешать взаимодействию между добавленными AHL (например, BHL и OdDHL) и их рецепторами (например, CviR для CV12472 и TraR для NT1).

Фигура 3. Ингибирование QS с помощью SeNP @ HP .Штаммы биоиндикаторов бактерий, C. violaceum CV12472 и A. tumefaciens NT1, использовали для анализа активности против QS. Ингибирование изменений цвета из-за обработки SeNP (7,5 мкг / мл), HP (0,6%), SeNPs @ HP (4,5 мкг / мл) и фуранона C-30 (10 мкМ) определяли количественно путем измерения OD при 590 нм для CV12472 и 545 нм для бактерий NT1. (A) Тестовые образцы — конкурс BHL и (B) тестовые образцы — конкурс OdDHL. Планки погрешностей указывают на стандартные отклонения 8 измерений.Ингибирование потенциала QS на основе ингибирования цвета было дополнительно исследовано на твердых питательных средах, и подробный протокол был описан в разделе «Материалы и методы». (C) Тестовые образцы — конкуренция BHL против CV12472 и (D) тестовых образцов — конкуренция OdDHL против NT1.

Ингибирование образования биопленок с помощью SeNP @ HP

Формирование биопленок регулируется сигналом QS у бактерий. Следовательно, влияние SeNPs @ HP на образование биопленок у P.aeruginosa PAO1 оценивали через 24 ч инкубации. Образование биопленок было уменьшено более чем на 90% обработкой 4,5 мкг / мл SeNPs @ HP, как показано на Фигуре 4A. Подавление образования биопленок с помощью SeNPs @ HP было также продемонстрировано на предметных стеклах под микроскопом. На рис. 4В показаны изображения, полученные с помощью конфокального лазерного сканирующего микроскопа (CLSM), образующихся биопленок P. aeruginosa PAO1. Биопленки, обработанные 4,5 мкг / мл SeNPs @ HP, были более мелкими и менее плотными, чем контрольная биопленка.Анализ окрашивания кристаллами (CV) дополнительно подтвердил мощное ингибирующее действие SeNPs @ HP на образование биопленок P. aeruginosa (фиг. 4C). Однако только SeNP и HP не смогли продемонстрировать многообещающий потенциал против биопленки. Затем влияние SeNPs, HP и SeNPs @ HP на рост PAO1 P. aeruginosa также оценивали путем регистрации оптической плотности пакетных культур при длине волны A595 нм (рис. 4D). Рост бактерий существенно не отличался между обработанными и необработанными партиями во время фазы задержки и экспоненциального роста.Кроме того, на эпителиальных клетках легких человека проводили анализы окрашивания живых и погибших клеток с использованием SYTO-9 и йодида пропидия соответственно. Цитотоксичность не наблюдалась в клетках, обработанных SeNPs и SeNPs @ HP (рис. 4E), что свидетельствует о нетоксическом эффекте обоих наноматериалов.

Рис. 4. Антибиотикопленочный потенциал SeNPs @ HP. (A) Ингибирующее действие SeNP (7,5 мкг / мл), HP (0,6%), SeNPs @ HP (4,5 мкг / мл) и фуранона C-30 (10 мкМ) на образование биопленки PAO1 P. aeruginosa было определяли с помощью анализа окрашивания CV в течение 24 часов в MTP.Планки погрешностей указывают на стандартные отклонения 8 измерений. (B) Флуоресцентные и (C) световые микроскопические изображения биопленок P. aeruginosa PAO1, проявленных на предметных стеклах в присутствии SeNP (7,5 мкг / мл), HP (0,6%), SeNP @ HP ( 4,5 мкг / мл) и фуранон С-30 (10 мкМ) и контроль, обработанный DW. Клетки биопленки окрашивали SYTO-9 и CV и анализировали наблюдаемую зеленую флуоресценцию и фазово-контрастное освещение соответственно. DW использовали для поддержания необработанного контроля.Масштабная линейка: 5 мкм. (D) Анализ кривой роста P. aeruginosa PAO1 в присутствии SeNP (7,5 мкг / мл), HP (0,6%) и SeNP @ HP (4,5 мкг / мл) в течение 40 ч в колбе. Планки погрешностей указывают на стандартные отклонения трех измерений. (E) Цитотоксическое действие SeNP (7,5 мкг / мл), HP (0,6%) и SeNP @ HP (4,5 мкг / мл) на эпителиальные клетки легких человека в течение 24 часов. Клетки, растущие на покровных стеклах, окрашивали зеленым SYTO-9 для живых клеток и красным PI для мертвых клеток и анализировали под флуоресцентным микроскопом при 20-кратном увеличении.Масштабная линейка: 50 мкм.

Ингибирование QS-регулируемой вирулентности с помощью SeNP @ HP

QS-зависимая продукция факторов вирулентности, а именно экзопротеаза, эластин-деградирующая эластаза, пиоцианин и рамнолипид, были проанализированы для оценки влияния SeNPs @ HP на вирулентность. Как показано на фиг. 5, SeNPs @ HP явно снижали продукцию факторов вирулентности в супернатанте обработанных SeNPs @ HP P. aeruginosa PAO1. При 4,5 мкг / мл SeNPs @ HP, 60,2% ингибирования протеазной активности, 52.Наблюдалось снижение активности эластазы на 7%, ингибирование содержания пиоцианина на 49,6% и подавление продукции рамнолипидов на 59,6% (Фигуры 5A – D). Однако секреция факторов вирулентности в SeNPs и только HP, обработанных P. aeruginosa PAO1, существенно не отличалась от необработанного контроля. Значительное ингибирование подвижности роения у P. aeruginosa PAO1 также наблюдалось при воздействии 4,5 мкг / мл SeNPs @ HP. В присутствии SeNPs @ HP бактерия была неспособна осуществлять роящуюся подвижность на чашках с агаром LB в точке инокуляции в центре с диаметром, не превышающим 5 мм (дополнительный рисунок 2), и образование усиков или другие признаки, указывающие на роение. моторики не наблюдалось.

Рис. 5. Влияние SeNPs @ HP на секрецию факторов вирулентности . Уровни факторов вирулентности, таких как экзопротеаза (A), , эластаза (B), пиоцианин (C) и рамнолипид (D), были измерены в SeNP (7,5 мкг / мл), HP (0,6%). , SeNPs @ HP (4,5 мкг / мл) и обработанные фураноном C-30 (10 мкМ) или необработанные культуральные фильтраты P. aeruginosa PAO1. Планки погрешностей указывают на стандартные отклонения 8 измерений.

SeNPs @ HP способствует заживлению ран и предотвращает

P.aeruginosa PAO1 Убийство мышей

Затем, чтобы определить, могут ли разработанные нами SeNPs @ HP снизить патогенность P. aeruginosa PAO1, мы использовали тест на инфицирование мышей. Кожные раны были сделаны на верхней стороне мыши, и бактериальная инфекция была инициирована применением 1 × 10 7 колониеобразующих единиц (КОЕ) / мл P. aeruginosa PAO1. Затем раны обрабатывали различными концентрациями SeNPs @ HP. Мышей, обработанных стерилизованной дистиллированной водой (DW), использовали в качестве необработанных контрольных.Через 2, 4 и 6 дней заражения определяли КОЕ / мл бактерии из ран. Статистически значимой разницы между всеми группами в первый день после инфицирования не было, однако количество бактерий в области раны в группе, обработанной SeNPs @ HP, значительно снизилось на 4 и 6 сутки после инфицирования по сравнению с контрольной группой, обработанной DW ( Таблица 2). В процессе заживления ран бактериальная инфекция кожных ран приводит к значительной задержке закрытия участков эксцизионных ран по сравнению с незараженными участками ран.Когда SeNPs @ HP использовался для обработки инфицированных участков кожи ран, процесс заживления ран резко улучшался. Площадь раны измеряли через 5, 10, 15 и 20 дней после инфицирования во всех группах. Значительная скорость закрытия раны наблюдалась между 15 и 20 днями после операции ( P <0,01). Процент заживления ран SeNPs @ HP по сравнению с днями после инфицирования представлен в таблице 3. Мыши, инфицированные PAO1 P. aeruginosa , начали умирать только через 10 часов инкубации, а 100% смертность регистрировалась через 35 часов.Хотя мыши, обработанные SeNPs @ HP, показали 82% выживаемость, но группы SeNP и HP не показали значительной защиты от убивающего эффекта P. aeruginosa PAO1 (таблица 3). Мыши, получавшие SeNPs @ HP, были живы в конце инкубации в течение 55 часов (фигура 6).

Таблица 2. Бактериальная нагрузка поста раневой зоны P. aeruginosa Инфекция PAO1 .

Таблица 3. Влияние SeNPs @ HP на заживление ран в ране, на которую капали P.aeruginosa ПАО1 .

Фигура 6. Определение in vivo активности SeNPs @ HP против QS с использованием анализа смертности мышей . Суспензию клеток (2,0 × 10 7 КОЕ / мл) готовили из выращенной в течение ночи культуры P. aeruginosa и вводили в брюшную полость самкам мышей в возрасте 4 недель, свободных от патогенов. Смертность измеряли в течение 45-часового периода для 12 мышей при каждой обработке. DW и SeNPs @ HP в DW вводили мышам в качестве отрицательного контроля.

Снижение регуляции генов вирулентности, связанных с QS, с помощью SeNP @ HP

Клетки P. aeruginosa с биопленкой PAO1 были проанализированы методом ОТ-ПЦР для идентификации генов, нацеленных на SeNPs @ HP, и для изучения молекулярного механизма, который снижает образование биопленок и вирулентность при добавлении SeNPs-HP. Как показано на Фигуре 7, QS-регулируемые гены P. aeruginosa PAO1 были восстановлены при обработке SeNPs @ HP. Гены, участвующие в производстве факторов вирулентности, таких как рамнолипид, эластаза и пиоцианин, были сильно подавлены.Многие QS-индуцируемые гены, такие как lasA, lasB, lasI, lasR, rhlA, rhlB, rhlR, rhlI, mvfR, pqsC, pqsD, phnB, pqsH, phzC1, phzE1, pslC и pslE, были целевыми. паттерн экспрессии этих генов был определен в P . aeruginosa клеток биопленки, обработанных SeNP, HP и SeNP @ HP. Все гены-мишени, регулируемые QS, были значительно снижены в клетках биопленки с SeNPs @ HP в диапазоне от 21 до 87% по сравнению с обработанным DW и необработанным контролем.Экспрессия генов lasA, lasB, lasI, lasR, rhlA, rhlB, rhlR, rhlI, phzB, phzC1 и pslC подавлялась сравнительно сильнее (61–87%), чем mvfR, pqsC, pqsD, phnB, phzE1, pqsH и pslE (21–46%). SeNPs @ HP не сильно влиял на экспрессию гена домашнего хозяйства proC . Интересно, что только SeNP и HP были неспособны изменять экспрессию вышеуказанных генов.

Фигура 7. Ингибирующее действие SeNPs @ HP на экспрессию QS-индуцибельных генов посредством анализа RT-qPCR .РНК экстрагировали и использовали для синтеза кДНК из обработанных и необработанных клеток биопленки с SeNP (7,5 мкг / мл), HP (0,6%) и SeNPs @ HP (4,5 мкг / мл) в течение 24 часов. Относительную величину уровня экспрессии гена определяли как число копий кДНК каждого гена в клетках биопленки, нормированное на число копий кДНК соответствующего гена в клетках биопленки без исследуемого образца. Планки погрешностей указывают на стандартные отклонения 3 измерений. ** p <0,001 по сравнению с контролем. * p <0.01 по сравнению с контролем.

Вычислительный молекулярный анализ докинга

При анализе экспрессии генов на основе ОТ-ПЦР мы обнаружили подавление экспрессии генов, связанных с QS, в клетках бактериальной биопленки. Чтобы исследовать возможность связывания интерференции между OdDHL и его родственным сигнальным рецептором, LasR, полифенолами меда, мы провели подробные компьютерные исследования стыковки молекул. Файл координат PDB LasR (идентификатор PDB: 2UVO) был загружен и использован для исследований стыковки.2UVO представляет собой рентгеновскую структуру N -концевых OdDHL связывающих доменов LasR в комплексе с OdDHL. Мы использовали инструменты стыковки AutoDock 4.2, чтобы увидеть взаимодействие между рецептором (LasR) и его лигандом (OdDHL). Благодаря воспроизводимости модуля AutoDock для правильной стыковки кристаллического лиганда для рецептора LasR, исследования стыковки HP были выполнены с теми же настройками по умолчанию. Докинг HP, включая кофейную кислоту, кверцетин, кемпферол, акацетин, апигенин, хризин, пиноцембрин и пинобанксин, в сайте связывания OdDHL белка LasR указывает на то, что все полифенолы образуют водородные связи и гидрофобные взаимодействия (рис. 8).Лучше всего стыкованный акацетин помещается в сайт связывания OdDHL белка LasR. Акацетин осуществляет водородные связи с Trp60, Arg61 и Thr75 и гидрофобные взаимодействия с Leu36, Tyr64, Ala50, Ile52 и Ala127. Trp60 и Arg61 были ключевыми аминокислотами, которые участвовали во взаимодействиях водородных связей с рентгеновским кристаллическим лигандом OdDHL. Расчетное значение связывания акацетина E оказалось равным -9,41 ккал / моль. На основании E , связывающего значений фитохимических веществ, порядок был определен как апигенин (-9.20 ккал / моль)> пиноцембрин (-8,90 ккал / моль)> хризин (-8,83 ккал / моль)> пинобанксин (-8,51 ккал / моль)> кверцетин (-8,21 ккал / моль)> кофейная кислота (-6,40 ккал / моль) )> кемпферол (-5,97 ккал / моль) (таблица 4). Взаимодействие HP с сайтом связывания OdDHL LasR может быть причиной ингибирования вирулентности P. aeruginosa PAO1.

Рисунок 8. In silico анализ молекулярного докинга для определения взаимодействия между HP и белком LasR .HP ограничены (черный цвет) в полости связывания белка LasR и окрашены в соответствии с характером водородной связи, при этом донор рецептора окрашен в розовый цвет, а акцептор рецептора — в зеленый. Трехмерное изображение ориентации связывания в белке LasR (A), кофейной кислоты, (B) кверцетина, (C) апигенина, (D) кемпферола, (E) хризина, (F) акацетин, (G) пиноцембрин и (H) пинобанксин. Также отображаются водородные связи и гидрофобные взаимодействия между окружающими аминокислотными остатками и лигандом.

Таблица 4. E привязка значений HP .

Обсуждение

P. aeruginosa признан одним из основных легочных бактериальных патогенов и основной причиной заболеваемости и смертности при муковисцидозе. Он может колонизировать поверхность легких, образуя биопленку, в которой бактериальные клетки соединяются и фиксируются внутри саморазвивающегося внеклеточного матрикса. Клетки биопленки P.aeruginosa , как сообщается, в несколько раз более устойчивы к антибиотикам, чем планктонные клетки, которые часто затрудняют их уничтожение у инфицированных пациентов. P. aeruginosa использует системы QS для производства факторов вирулентности и образования биопленок (Shirtliff et al., 2002; Gonzalez and Keshavan, 2006). Прерывание QS у P. aeruginosa рассматривается как новый подход к разработке потенциальной антипатогенной терапии. В текущем исследовании мы продемонстрировали, что обработка SeNPs @ HP клинически изолированного штамма PAO1 P.aeruginosa может ингибировать образование биопленок и вирулентность in vitro . Бактерия, подвергшаяся воздействию SeNPs @ HP, также проявляла пониженную вирулентность в модели инфицирования мышей.

SeNP действуют как эффективные переносчики HP, такие как кофейная кислота, кверцетин, кемпферол, акацетин, апигенин, хризин, пиноцембрин и пинобанксин, которые идентифицированы с помощью анализа ВЭЖХ. HP широко использует противомикробные препараты против различных патогенных бактерий, устойчивых к лекарствам, особенно против QS (Israili, 2014; Khan et al., 2014). Но плохая растворимость в воде, ограниченная биодоступность и низкая стабильность фитомолекул обычно препятствуют их полному анти-QS потенциалу (Munin and Edwards-Levy, 2011). Разработка наноразмерных систем доставки представляет собой значительный прогресс в научном подходе к улучшению биологических свойств фитохимических веществ (Munin and Edwards-Levy, 2011; Shakeri and Sahebkar, 2015). Это исследование представляет собой первый отчет о системе доставки наночастиц на основе селена для HP и ясно демонстрирует, что разработанные нами SeNPs @ HP обладают способностью ингибировать систему QS штамма дикого типа P.aeruginosa PAO1 более эффективно по сравнению с SeNP и только медом. Это может быть связано с эффективной доставкой, а также с повышенной биодоступностью HP. Этот результат хорошо согласуется с выводами других авторов. Подходы к доставке нанопрепаратов предоставляют широкий спектр преимуществ, таких как вспомогательный транспорт встроенных фитомолекул через клеточную мембрану, повышенный потенциал проникновения в биопленку бактерий и повышенную биодоступность, адресную доставку лекарств, защиту чувствительных лекарственных агентов от биологического разложения и разложения в окружающей среде и устойчивое высвобождение антивирулентного агента (de la Zerda and Gambhir, 2007; Fernandes et al., 2010; Чжу и др., 2013).

Ингибирование системы QS может быть достигнуто либо путем прерывания синтеза AHL, либо прерывания AHL для конъюгирования с сигнальным рецептором (Kim et al., 2015; Singh B. R. et al., 2015). Наши результаты показали, что анти-QS свойство HP на P. aeruginosa начинается со связывания с рецептором LasR, что подтверждается молекулярным докинг-анализом. In-silico стыковочные исследования HP, таких как кофейная кислота, кверцетин, апигенин, кемпферол, хризин, акацетин, пиноцембрин и пиноканксин, с LasR показали потенциальный способ связывания HP с активным сайтом лиганд-связывающего домена.Конъюгированный домен HP был аналогичен домену кристаллического лиганда OdDHL за счет комбинации водородных связей и гидрофобных взаимодействий. Недавние широкомасштабные исследования взаимосвязи сходства OdDHL между структурой и активностью показали, что замена гомосеринового лактонового фрагмента (присутствующего в OdDHL) замещенной ароматической системой может изменить агонистические свойства QS на антагонистические (Kim et al., 2015). Таким образом, замещенное фенильное кольцо HP может вносить вклад в его антагонистические свойства.В частности, фенольная гидроксильная группа HP, которая осуществляет прямые взаимодействия водородных связей с аминокислотами, наблюдалась в кристаллическом комплексе LasR и OdDHL. Более того, ослабление QS в C. violaceum и A. tumefaciens было связано не с уменьшением продукции AHL и деградацией AHL, а с блокированием рецепторов AHL со стороны HP. Чтобы получить прямые доказательства того, что LasR является мишенью для HP, мы также оценили ингибирование SeNPs @ HP образования биопленок в Escherichia coli , трансформированной плазмидой, сверхэкспрессирующей LasR.Трансформированная E. coli все еще демонстрировала образование биопленки при обработке SeNPs @ HP, что позволяет предположить, что HP нацелился на LasR в E. coli (дополнительная фигура 3). Более того, эффекты SeNPs @ HP на продукцию факторов вирулентности и активность против биопленки дополнительно оценивали на нуль-мутантном штамме lasR P . aeruginosa PAO1. Результаты показали, что обработка SeNPs @ HP индуцировала ингибирование VF (эластаза, протеаза, пиоцианин и раманолипид) и образование биопленок, но эти эффекты SeNPs @ HP могут быть значительно уменьшены у мутанта LasR (дополнительные рисунки 4, 5).Данные пришли к выводу, что SeNPs @ HP ингибируют P . aeruginosa QS-сигнализация через LasR.

Связывание SeNPs @ HP с сигнальным рецептором LasR заставляет его терять свою функцию активатора транскрипции. Уменьшение экспрессии lasA, lasB, lasI, lasR, rhlA, rhlB, rhlR, rhlI, mvfR, pqsC, pqsD, phnB, pqsH, phzC1 и phzE1 в результате RT-qPCR подтверждает наше предположение. P. aeruginosa секретирует токсичные соединения и разрушающие ферменты, такие как эластаза, протеаза LasA и пиоцианин, которые также способствуют патогенезу (Christensen et al., 2013; O’Loughlin et al., 2013). Мы обнаружили, что SeNPs @ HP могут снижать секрецию общей протеазы, эластазы, пиоцианина, образование биопленок и подвижность роя у P. aeruginosa PAO1 без подавления его роста. Снижение экспрессии этих генов может мешать нормальной секреции нескольких факторов вирулентности, включая экзопротеазу, рамнолипид, пиоцианин и подвижность роя, посредством действия оперонов lasAB, rhlAB, phzA1-G1 соответственно. Снижение секреции этих факторов вирулентности с помощью SeNPs @ HP подтвердило наши предположения.Экспрессия rhlR запускает выработку сигнального рецептора BHL, RhlR. Комплексы BHL и RhlR ответственны за активацию транскрипции оперона rhlAB и репрессора транскрипции гена mvfR . Следовательно, связывание HP с сигнальным рецептором LasR может вызвать снижение продукции RhlR, что может привести к снижению продукции оперона rhlAB и rhlI при устранении репрессии транскрипции mvfR .Связанные с более ранними исследованиями, катионный Se (Dutta and Willcox, 2014), кверцетин (Singh BN et al., 2015), кемпферол (Vikram et al., 2010), апигенин (Nazzaro et al., 2013) и кофейная кислота ( Borges et al., 2014) продемонстрировали значительный анти-QS эффект. Они могут значительно снизить секрецию факторов вирулентности и образование биопленок у патогенных бактерий человека. Все эти данные убедительно свидетельствуют о том, что антипатогенный эффект полифенолов обусловлен нарушением QS.

Тем не менее, поскольку все результаты, полученные из исследований in vitro , всегда нельзя воспроизвести в условиях in vivo .В этом контексте мы использовали модель инфекции с иссеченной раной крысы — P. aeruginosa для исследования антипатогенной способности SeNPs @ HP. В процессе заживления ран бактериальная инфекция кожных ран приводит к значительной задержке закрытия участков эксцизионных ран, поэтому антипатогенная тактика может играть важную роль в заживлении ран. В этом исследовании мы заметили, что КОЕ / мл P. aeruginosa PAO1 было значительно снижено в области раны на 10-й и 15-й день инфекции в группах, получавших SeNPs @ HP, по сравнению с контрольной группой, получавшей DW.Более того, было обнаружено, что SeNP @ HP снижает патогенность P. aeruginosa PAO1 в модельной системе in vivo , что подтверждено тестом на смертность мышей. Наши результаты были аналогичны Yin et al. их исследование показало, что местное применение полифенолов чая может снизить системное распространение P. aeruginosa Pa1 в модели мышей с иссеченной раненой инфекцией, о чем свидетельствует более низкое количество бактерий в области раны (Yin et al., 2016). Это могло быть результатом прерывания QS, которое привело к ингибированию секретируемых факторов вирулентности, что в конечном итоге задержало его заражение.Размер раны резко уменьшился при воздействии SeNPs @ HP, как показано в таблице 1. Полифенольные соединения меда значительно улучшили качество заживления ран и образование рубца в модели заживления послеоперационной раны у крыс (Kapoor et al., 2004). Другие многочисленные полифенолы растений также обладают многообещающим действием на сокращение и заживление ран (Gomathi et al., 2003; Mandal and Mandal, 2011; Muhammad et al., 2013; Suntar et al., 2013). Настоящее исследование ясно показывает, что HP в нано-форме при суб-МПК может стимулировать заживление ран, наряду с другой информацией о зеленом чае в литературе, настоятельно предполагает, что полифенолы меда могут быть полезны при заживлении ран благодаря их антиоксидантам, антисептикам и антисептикам. -воспалительные свойства и могут способствовать заживлению ожоговых ран и шрамов (Mandal and Mandal, 2011; Quideau et al., 2011; Singh et al., 2014).

Значимость этого исследования заключается в открытии того, что SeNPs @ HP может ингибировать продукцию QS-регулируемых факторов вирулентности и образование биопленок посредством LasR (Рисунок 9). SeNPs @ HP также помогает снизить вирулентность P. aeruginosa in vivo , что привело к снижению патогенности этого патогена в модели инфицирования мышей. Кроме того, это исследование дает представление о молекулярном механизме ингибирующих эффектов QS SeNPs @ HP в P.aeruginosa посредством конкурентного связывания с родственными рецепторами. Эти наблюдения предполагают, что нано-Se можно использовать в качестве многообещающих носителей для доставки фитохимических веществ меда для борьбы с инфекциями, вызываемыми бактериями P. aeruginosa в дыхательных путях.

Рис. 9. Наглядное представление биотехнологического изготовления каркаса SeNP и HP (SeNPs @ HP) и его анти-QS активности в P . aeruginosa ПАО1 .

Материалы и методы

Химические вещества, штаммы и условия культивирования

Мед индийской медоносной пчелы ( Apis cerana indica ) был получен на исследовательской станции (Banthra) Национального научно-исследовательского института ботаники CSIR, Лакхнау, Индия, а фуранон C-30, стандартное соединение против QS, был приобретен у Sigma Aldrich. (Св.Луис, Миссури, США). C. violaceum ATCC12472 и A. tumefaciens NT1 штаммы были щедро предоставлены профессором Kalai Mathee, США. Более того, P. aeruginosa PAO1 и LasR сверх экспрессирующего штамма E. coli (pSW196. lasR ) были получены от профессора E.P. Гринберг и М. Шустер, США соответственно. Каждый штамм поддерживали на склоне Лурия-Бертани (LB) при 37 ° C, и для любого эксперимента использовали активный рост в течение 24 часов при 37 ° C.

Разработка Nanoscaffold

Мед использовался как богатый источник окислительно-восстановительных полифенолов растений (PP) для синтеза SeNP.Для экстракции ПП готовили 10% раствор меда в 100 мл дистиллированной воды (DW) и интенсивно перемешивали при комнатной температуре (25 ± 1 ° C). Полученный раствор переносили в делительную воронку и подвергали экстракции с помощью двух объемов (об. / Об.) Этилацетата. Экстракционный раствор интенсивно перемешивали в течение 10 мин, а затем делительную воронку оставляли без перемешивания при 4 ° C в течение ночи. Верхнюю фазу, содержащую ПП, собирали из делительной воронки и сушили на роторном испарителе (BUCHI, США) при 30 ° C.Полученный экстракт PPs (PPE) повторно растворяли в 50% -ном водно-спиртовом растворителе и использовали для создания каркаса SeNP. Для разработки SeNP с каркасом PPE полученный экстракт PPE (5 мг / мл; 10 мл) добавляли в водный раствор селенита натрия (90 мл) для поддержания конечной концентрации 1 мМ. Раствор реакционной смеси выдерживали в течение 24 часов при 37 ° C, после чего появление красного цвета в культуральных колбах указывало на опосредованное PPE восстановление Se (VI) до Se (0) или SeNP и его успешное In-situ изготовление каркаса из СИЗ (обозначается как «SeNPs @ HP»).Разработанные SeNPs @ HP собирали центрифугированием при 12000 g в течение 12 мин и сушили в вакууме при 40 ° C. Полученный высушенный порошок хранили во флаконе янтарного цвета до дальнейшего использования.

Характеристика наноматериалов

SeNPs @ HP были охарактеризованы по размеру, форме и чистоте с использованием различных спектрофотометрических (УФ-спектр, запрещенная спектроскопия, XRD, FTIR) и микроскопических (SEM, TEM) методов. Синтез SeNPs контролировали с помощью анализа спектра УФ-поглощения (Perkin Elmer CT, США) в диапазоне длин волн от 200 до 800 нм.Образцы для ПЭМ были приготовлены путем диспергирования частиц энергии на медных сетках с углеродным покрытием. Микрофотографии были получены при 200 кВ на микроскопе JEOL, Tokyo TEM. Изображения SeNPs @ HP получали на сканирующем электронном микроскопе JEOL-JSM-6510LV (Токио, Япония) при ускоряющем напряжении 20 кВ. FTIR (PerkinElmer, CT, USA) анализ в диапазоне от 500 см -1 до 4000 см -1 с использованием метода KBr-диска был выполнен для определения накопления HP на SeNP путем идентификации функциональных групп.

Анализ MIC

МИК тестируемых образцов против выбранных бактериальных штаммов проверяли с использованием метода микроразбавления Института клинических и лабораторных стандартов, США (Институт клинических и лабораторных стандартов, 2009). Вкратце, тестируемые бактерии, имеющие 1–5 × 10 5 КОЕ / мл, высевали в 100 мкл бульонной среды LB, дополненной двукратно серийно разведенными SeNP, HP и SeNP @ HP для достижения конечных концентраций в диапазоне 20–10 мкг / мл. 2–0,6% и 10–4,5 мкг / мл соответственно в микротитровальном планшете (MTP; Thermo Fisher Scientific, США).После инкубации при 37 ° C в течение 24 ч значения MIC регистрировали как самую низкую концентрацию, которая показывала полное ингибирование видимого роста. Концентрации суб-МПК SeNP, HP и SeNPs @ HP были выбраны для всех дальнейших экспериментов в настоящем исследовании.

Анализ роста

Влияние SeNP, HP и SeNP @ HP на рост CV12472 и P . aeruginosa PAO1 определяли с использованием анализа с микроразбавлением. После инкубации планшетов LB в течение ночи при 37 ° C регистрировали КОЕ / мл каждой бактерии путем подсчета колоний.

QS Competition Assay

Анализ

Anti-QS, основанный на конкуренции на основе AHL, был проведен с использованием двух биоиндикаторных бактериальных штаммов, CV12472 и A.tumefaciens NT1, о которых ранее сообщалось в другом месте (Singh B. R. et al., 2015).

Анализы образования биопленок

Активность SeNPs @ HP против биопленки определяли с использованием анализа MTP с окрашиванием кристаллами (CV). Ночная культура P. aeruginosa PAO1, имеющая OD 1.0 при 600 нм, была разбавлена ​​свежей средой LB (1:10), содержащей тестовые образцы, аликвотирована в 96-луночный планшет и помещена в инкубатор BOD при 37 ° C на 24 часа без волнение.Образовавшуюся биопленку на дне планшета окрашивали 0,5% водным раствором CV (Sigma-Aldrich) в течение 30 мин при 37 ° C. После промывки DW, ограниченный CV элюировали абсолютным этанолом и считывали OD при 545 нм с помощью устройства для считывания микропланшетов (BioRad, Калифорния, США). Для нормализации записанных значений значение OD 545 было стабилизировано OD 595 .

Ингибирование образования биопленок было также проанализировано с помощью флуоресцентной и световой микроскопии, как описано недавно (Singh B.R. et al., 2015). Вкратце, P . aeruginosa PAO1 выращивали на покровных стеклах без и с SeNPs @ HP в течение 24 ч. Образовавшиеся биопленки окрашивали SYTO-9 (20 мМ) в течение 15 мин при комнатной температуре и анализировали с помощью флуоресцентной микроскопии (Nikon, Япония) при 480 нм (возбуждение). Биопленки P. aeruginosa PAO1 также окрашивали 0,5% раствором CV и наблюдали под световой микроскопией при 20-кратном увеличении.

Анализ фактора вирулентности

П . aeruginosa PAO1 выращивали в среде LB в отсутствие и в присутствии SeNPs @ HP в конической колбе на 100 мл на вращающемся шейкере-инкубаторе (200 об / мин). После инкубации в течение 24 часов супернатант (SN) собирали центрифугированием культурального бульона при 12000 об / мин в течение 7 минут и использовали для биохимических анализов. Экзопротеазную активность оценивали с использованием лазурной силы hide (Caballero et al., 2001). Вкратце, 50 мкл SN смешивали со 150 мкл 10% -ного порошка лазурного порошка (Sigma-Aldrich), который готовили в 20 мМ Трис / HCl (pH 8.0) буфер, состоящий из 1 мМ CaCl 2 . Реакционную смесь, содержащую MTP, инкубировали при 37 ° C в течение 60 мин. Супернатант центрифугировали при 6000 об / мин в течение 5 мин и переносили в новый MTP. Оптическую плотность образца регистрировали при 595 нм. Эластазную активность SN оценивали с использованием эластина конго красного (ECR; Sigma-Aldrich) в качестве субстрата. ECR (2,5%) в 140 мкл 10 Мм трис-HCl буфера (pH 7,2) без EDTA смешивали со 100 мкл раствора SN (Caballero et al., 2001). После инкубации реакционной смеси при 37 ° C в течение 1 дня оптическую плотность SN измеряли при 490 нм с использованием считывающего устройства для микропланшетов Bio-Rad.Для количественного определения содержания пиоцианина SN (5 мл) фракционировали хлороформом (3 мл), содержащим трихлоруксусную кислоту (MP, Biomedicals Inc.). Для повторной экстракции пиоцианина фракционированный слой снова экстрагировали 1 мл 0,2 н. HCl и регистрировали оптическую плотность при 520 нм в УФ-видимом спектрофотометре (Thermo Fisher Scientific, США) (Essar et al., 1990). Содержание рамнолипидов измеряли, регулируя pH SN (10 мл) с помощью HCl, и дважды фракционировали, смешивая 10 мл диэтилового эфира. Растворитель упаривали досуха на роторном испарителе (Buchi, США) и полученный образец растворяли в 10 мл DW.Затем образец (20 мкл) смешивали с 180 мкл 1% раствора орцинала, приготовленного в 15% H 2 SO 4 . Реакционную смесь кипятили в течение 30 минут и измеряли OD при 421 нм с использованием ридера для микропланшетов Bio-Rad (Boles et al., 2005).

Тесты на заживление ран и определение смертности мышей у крыс

Свойства SeNPs @ HP заживления ран оценивали с использованием моделей иссеченных ран (Mughrabi et al., 2011). Для исследования использовали швейцарских крыс-альбиносов массой 140 ± 5 г. Все исследования проводились в соответствии с руководящими принципами Руководства Национальных институтов здравоохранения по уходу и использованию лабораторных животных, и все экспериментальные протоколы были одобрены Комитетом по уходу за животными, CPCSEA, Индия (рег.№ 222/2000 / CPCSEA). Крыс анестезировали и сбривали спину. После дезинфекции области спины 75% этанолом делали иссеченную рану (4 × 4 см), а затем инфицировали ночной культурой P . aeruginosa PAO1, имеющий 2 × 10 7 КОЕ / рану путем инъекции бактерии непосредственно в рану. Были созданы четыре группы, и в каждой группе использовали по шесть крыс (таблица 3). Раны закрывали простой марлей и крыс помещали в отдельные клетки.Для измерения площади раны использовали миллиметровую бумагу, и результаты были выражены в виде процента сокращения раны с использованием следующего уравнения: Сокращение раны (%) = [Исходный размер раны в зависимости от дневного размера раны] / Начальный размер раны × 100.

Тест на смертность мышей также был проведен для изучения защитного действия SeNPs @ HP. Осадок клеток получали из ночной культуры P . aeruginosa PAO1 центрифугированием при 12000 об / мин в течение 8 мин при 4 ° C. После промывки DW осадок растворяли в PBS и 100 мкл клеточной суспензии (2.0 × 10 7 КОЕ / мл) вводили в брюшную полость самкам мышей в возрасте 4 недель, свободных от патогенов, массой 18 ± 2 г. Смертность измеряли в течение 55-часового периода для 12 мышей при каждой обработке. DW вводили мышам в качестве контроля.

Анализ ВЭЖХ

Для приготовления экстракта SeNPs @ HP смешивали с абсолютным этанолом в течение 2 ч при постоянном встряхивании при 100 об / мин. Растворитель удаляли с помощью ротационного испарителя при 40 ± 1 ° C. Присутствие фитохимических веществ подтверждено системой ВЭЖХ Shimadzu LC-10A (Киото, Япония) (Singh et al., 2010). Разделение соединений достигалось на фазе растворителя, состоящей из ацетонитрила / воды (1: 1, об. / Об.), Содержащей 1% уксусной кислоты в программе линейного градиента, начиная с 18% ацетонитрила, изменяясь до 32% за 15 мин и, наконец, до 50% за 30 мин. Соединения были получены путем сравнения площадей пиков (λmax 254 нм) экстракта с площадями стандартов.

Выделение общей РНК и анализ ОТ-ПЦР

Суммарная РНК была выделена из клеток биопленки P. aeruginosa PAO1 с использованием реагента для лизиса QIAzol (QIAGEN) в соответствии с инструкциями производителя.Реакционная смесь была приготовлена ​​путем добавления 2 мкл матричной РНК, 10 мкл мастер-смеси SYBR (Thermo Scientific, США), 0,8 мкл каждого из прямого и обратного праймеров (10 мМ), 0,4 мкл эталонного красителя и воды (без РНК). составляют общий объем 20 мкл. Анализ проводили при 50 ° C в течение 50 мин с последующей денатурацией в течение 10 с при 95 ° C, отжигом в течение 10 с при 55 ° C и удлинением в течение 35 с при 60 ° C. В конце концов, был также проведен анализ диссоциации (95 ° C в течение 15 с, 60 ° C в течение 1 минуты и 95 ° C в течение 15 с), чтобы подтвердить отсутствие неспецифических ампликонов.Полученные образцы кДНК хранили при -80 ° C. Наборы праймеров для генов были сконструированы с использованием Primer 3 (v 0.4.0) (дополнительная таблица 1).

Вычислительные исследования молекулярного докинга

Был проведен молекулярный докинг-анализ для выявления конформационных изменений в структуре белка из-за взаимодействия фитохимических веществ меда с белком рецептора LasR. Структуры лигандов были загружены из Pubchem NCBI в формате sdf, и все они были преобразованы в формат pdb с помощью онлайн-инструмента SMILE CONVERTER для дальнейшего анализа стыковки.Энергия была минимизирована с помощью AutoDock Tools за счет определения поворотного соединения, угла кручения и погружения неполярных водородов. Трехмерная структура белка рецептора LasR была получена из базы данных PDB RSCB (идентификатор PDB: 2UV0). Структура PDB 2UV0 включает четыре цепи (E, F, G и H), подтверждение которых было аналогичным, подтвержденным наложением с химерой. Поскольку H-цепь является самой длинной и содержит предпочтительный сайт связывания для природного лиганда, все молекулы воды и другие цепи были удалены из белка рецептора LasR.Расчеты стыковки проводились с использованием программы с графическим пользовательским интерфейсом «AutoDock Tools». Коллман объединил заряды атомов, параметры сольватации и полярные атомы водорода были добавлены в файлы рецептора PDB для приготовления белка при моделировании стыковки. Карте сетки было присвоено 70, 70 и 70 ° по отношению к осям X, Y и Z соответственно, чтобы включить все аминокислоты сайта связывания рецепторного белка для стыковки, а расстояние между точками сетки составляло 0,375 °. Генетический алгоритм Ламарка (LGA), который считается одним из лучших методов стыковки, доступных в AutoDock, был принят для проведения молекулярных исследований стыковки.Вычисления AutoGrid и AutoDock выполнялись на Cygwin. Окончательные стыкованные конформации были сгруппированы с использованием допуска 2 ° RMSD, а файлы журнала стыковки (dlg) были проанализированы с помощью AutoDock Tools, графического пользовательского интерфейса AutoDock. Пристыкованные конформации каждого лиганда были ранжированы в кластеры на основании энергии связывания, и конформации с наивысшим рангом были проанализированы визуально. Водородные связи и гидрофобные взаимодействия между пристыкованным лигандом и макромолекулами анализировали с помощью программного обеспечения Discovery Studio.

Авторские взносы

BNS и VG разработали и разработали эксперименты. PG, BRS, MS и SS выполнили большинство экспериментов. PG, BRS, MS, SS и AN. проанализировали экспериментальные данные. Рукопись написали VG и BNS.

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

BNS выражает благодарность за финансирование от Совета научных и промышленных исследований, Нью-Дели, Индия (OLP-089 и BSC-0106).VG хотела бы поблагодарить 7-ю рамочную программу ЕС за финансирование исследований, технологических разработок и демонстрационных мероприятий в рамках грантового соглашения № 621364 (TUTIC-Green).

Дополнительные материалы

Дополнительные материалы к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/article/10.3389/fcimb.2017.00093/full#supplementary-material

Список литературы

Болес Б. Р., Тхендель М. и Сингх П. К. (2005). Рамнолипиды опосредуют отделение Pseudomonas aeruginosa от биопленок. Мол. Microbiol. 57, 1210–1223. DOI: 10.1111 / j.1365-2958.2005.04743.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Борхес А., Серра С., Кристина Абреу А., Сааведра М. Дж., Сальгадо А. и Симоес М. (2014). Оценка влияния выбранных фитохимических веществ на ингибирование чувствительности кворума и цитотоксичность in vitro . Биообрастание 30, 183–195. DOI: 10.1080 / 08927014.2013.852542

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кабальеро, А.Р., Моро, Дж. М., Энгель, Л. С., Маркварт, М. Е., Хилл, Дж. М., и О’Каллаган, Р. Дж. (2001). Pseudomonas aeruginosa ферментные анализы протеазы IV и сравнение с другими протеазами псевдомонад. Анал. Biochem. 290, 330–337. DOI: 10.1006 / abio.2001.4999

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кристенсен, К. Х., Гроув, Т. Л., Букер, С. Дж., И Гринберг, Э. П. (2013). Высокопроизводительный скрининг ингибиторов кворума, нацеленных на ацил-гомосеринлактон-синтазы. Proc. Natl. Акад. Sci. США 110, 13815–13820. DOI: 10.1073 / pnas.1313098110

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Чугани, С., Ким, Б.С., Фаттарасукол, С., Бриттнахер, М.Дж., Чой, С.Х., Харвуд, С.С. и др. (2012). Штамм-зависимое разнообразие в регулоне, воспринимающем кворум Pseudomonas aeruginosa . Proc. Natl. Акад. Sci. США 109, E2823 – E2831. DOI: 10.1073 / pnas.1214128109

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Институт клинических и лабораторных стандартов (2009 г.). Методы испытаний на чувствительность к противомикробным препаратам при разведении бактерий, которые растут в аэробных условиях . M07-A8- Утвержденное стандартное восьмое издание . Уэйн, Пенсильвания. Доступно в Интернете по адресу: http://simpleshowoflove.weebly.com

Эссар Д. У., Эберли Л., Хадеро А. и Кроуфорд И. П. (1990). Идентификация и характеристика генов второй антранилатсинтазы в Pseudomonas aeruginosa : взаимозаменяемость двух антранилатсинтаз и эволюционные последствия. J. Bacteriol. 172, 884–900. DOI: 10.1128 / jb.172.2.884-900.1990

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Эстевес, Х., Гарсия-Лидон, Дж. К., Луке-Гарсия, Дж. Л., и Камара, К. (2014). Влияние наночастиц селена, стабилизированных хитозаном, на пролиферацию, апоптоз и структуру клеточного цикла в клетках HepG2: сравнение с другими селеновидами. Colloids Surf. B Биоинтерфейсы 122, 184–193. DOI: 10.1016 / j.colsurfb.2014.06.062

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Фернандес, Р., Рой В., Ву Х. С. и Бентли В. Э. (2010). Сконструированные биологические нанофабрики вызывают реакцию кворума у ​​бактерий-мишеней. Nat. Nanotechnol. 5, 213–217. DOI: 10.1038 / nnano.2009.457

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Фешараки П. Дж., Назари П., Шакибайе М., Резайе С., Баное М., Абдоллахи М. и др. (2010). Биосинтез наночастиц селена с использованием Klebsiella pneumoniae и их восстановление с помощью простого процесса стерилизации. Braz. J. Microbiol. 41, 461–466. DOI: 10.1590 / S1517-83822010000200028

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Гомати К., Гопинатх Д., Рафиуддин Ахмед М. и Джаякумар Р. (2003). Кверцетин включал коллагеновые матрицы для процессов заживления кожных ран у крыс. Биоматериалы 24, 2767–2772. DOI: 10.1016 / S0142-9612 (03) 00059-0

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хентцер М., Гивсков М.(2003). Фармакологическое подавление определения кворума для лечения хронических бактериальных инфекций. J. Clin. Инвестировать. 112, 1300–1307. DOI: 10.1172 / JCI20074

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Hentzer, M., Riedel, K., Rasmussen, T. B., Heydorn, A., Andersen, J. B., Parsek, M. R., et al. (2002). Ингибирование кворума у ​​бактерий биопленки Pseudomonas aeruginosa галогенированным фураноновым соединением. Микробиология 148, 87–102.DOI: 10.1099 / 00221287-148-1-87

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хусен, А., Сиддики, К.С. (2014). Наночастицы селена с участием растений и микробов: характеристика и применение. J. Nanobiotechnol. 12:28. DOI: 10.1186 / s12951-014-0028-6

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Джадаун, В., Пратикша Сингх, Б. Р., Палия, Б. С., Упрети, Д. К., Рао, К. В., Рават, А. К. С. и др. (2015).Мед усиливает антикворумную активность и антибиотикопленочный потенциал куркумина. RSC Adv. 5, 71060–71070. DOI: 10.1039 / C5RA14427B

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Калферстова Л., Дедецкова К. В., Антуськова М., Мелтер О., Древинек П. (2016). Как и зачем отслеживать инфекцию Pseudomonas aeruginosa в долгосрочной перспективе в центре кистозного фиброза. J. Hosp. Заразить. 92, 54–60. DOI: 10.1016 / j.jhin.2015.09.010

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Капур, М., Ховард Р., Холл И. и Эпплтон И. (2004). Влияние галлата эпикатехина на заживление ран и образование рубцов в модели заживления ран на полную толщину у крыс. Am. J. Pathol. 165, 299–307. DOI: 10.1016 / S0002-9440 (10) 63297-X

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хан, Ф., Хилл, Дж., Келер, С., Оллсопп, М., и Ван Вуурен, С. (2014). Антимикробные свойства и изотопные исследования южноафриканского меда. J. Appl.Microbiol. 117, 366–379. DOI: 10.1111 / jam.12533 ​​

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хиралла, Г. М., и Эль-Диб, Б. А. (2015). Антимикробное и антибиотикопленочное действие наночастиц селена на некоторые патогены пищевого происхождения. LWT — Пищевая наука. Technol. 63, 1001–1007. DOI: 10.1016 / j.lwt.2015.03.086

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ким, Х. С., Ли, С. Х., Бьюн, Ю., и Пак, Х. Д. (2015). 6-Гингерол снижает образование биопленок и вирулентность Pseudomonas aeruginosa за счет ингибирования кворума. Sci. Отчет 5: 8656. DOI: 10.1038 / srep08656

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Klonowska, A., Heulin, T., and Vermeglio, A. (2005). Восстановление селенита и теллурита с помощью Shewanella oneidensis . Заявл. Environ. Microbiol. 71, 5607–5609. DOI: 10.1128 / AEM.71.9.5607-5609.2005

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ляо, В., Ю, З., Лин, З., Лэй, З., Нин, З., Регенштейн, Дж.М., et al. (2015). Биофункционализация наночастиц селена полисахаридом dictyophora indusiata и его антипролиферативная активность через рецептор смерти и митохондриально-опосредованные пути апоптоза. Sci. Отчет 5: 18629. DOI: 10.1038 / srep18629

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лидор, О., Аль-Кунтар, А., Пеши, Э. К., и Стейнберг, Д. (2015). Механистический анализ синтетического ингибитора синтазы синтазы, воспринимающей кворум Pseudomonas aeruginosa LasI. Sci. Отчет 5: 16569. DOI: 10.1038 / srep16569

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лю В., Ли, X. Л., Вонг, Ю. С., Чжэн, В. Дж., Чжан, Ю. Б., Цао, В. К. и др. (2012). Наночастицы селена как носитель 5-фторурацила для достижения противоракового синергизма. ACS Nano 6, 6578–6591. DOI: 10.1021 / nn202452c

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Муграби, Ф. Ф., Хашим, Х., Амин, М., Халеди, Х., Али, Х. М., и Исмаил, С. (2011). Влияние производных бис [бензил-N ‘- (индол-3-илметилен) гидразинкарбодитиоато] цинка (II) на заживление ран у крыс Sprague Dawley. Ind. J. Exp. Биол. 49, 50–55. Доступно в Интернете по адресу: http://hdl.handle.net/123456789/10765

PubMed Аннотация | Google Scholar

Мухаммад А.А., Паузи Н.А., Арулсельван П., Абас Ф. и Факурази С. (2013). In vitro потенциал заживления ран и определение биологически активных соединений из Moringa oleifera Lam. Biomed. Res. Int. 2013: 974580. DOI: 10.1155 / 2013/974580

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

О’Лафлин, К. Т., Миллер, Л. К., Сириапорн, А., Дрешер, К., Земмельхак, М. Ф., и Басслер, Б. Л. (2013). Ингибитор кворума блокирует Pseudomonas aeruginosa вирулентность и образование биопленок. Proc. Natl. Акад. Sci. США 110, 17981–17986. DOI: 10.1073 / pnas.1316981110

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст

Кидо, С., Деффье, Д., Дуа-Казассус, К., и Пуисегу, Л. (2011). Полифенолы растений: химические свойства, биологическая активность и синтез. Angew. Chem. Int. Ed Engl. 50, 586–621. DOI: 10.1002 / anie.201000044

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Шакери А., Сахебкар А. (2015). Нанотехнологии: успешный подход к повышению биодоступности фитохимических веществ при пероральном введении. Последний Пат. Препарат Делив. Formul. 10, 4–6. DOI: 10.2174/1872211309666150611120724

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сингх, Б.Н., Сингх, Б. Р., Сингх, Р. Л., Пракаш, Д., Дхакарей, Р., Упадхья, Г. и др. (2009a). Защитная активность от окислительного повреждения ДНК, антиоксидантный и антикворумный потенциал чувствительности Moringa oleifera . Food Chem. Toxicol. 47, 1109–1116. DOI: 10.1016 / j.fct.2009.01.034

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сингх Б. Н., Сингх Б. Р., Сингх Р. Л., Пракаш Д., Сарма Б. К. и Сингх Х. Б. (2009b). Антиоксидантная и антикворумчувствительность зеленых стручков Acacia nilotica L. Food Chem. Toxicol. 47, 778–786. DOI: 10.1016 / j.fct.2009.01.009

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сингх Б. Н., Сингх Х. Б., Сингх А., Накви А. Х. и Сингх Б. Р. (2014). Пищевые фитохимические вещества изменяют эпигенетические события и сигнальные пути для подавления каскада метастазов. Метастаз рака Ред. 33, 41–85. DOI: 10.1007 / s10555-013-9457-1

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сингх, Б.Н., Сингх, Х. Б., Сингх, А., Сингх, Б. Р., Мишра, А., и Наутиял, К. С. (2012). Экстракт плодов Lagerstroemia speciosa модулирует производство фактора вирулентности, контролируемое кворумом, и образование биопленок у Pseudomonas aeruginosa . Микробиология 158, 529–538. DOI: 10.1099 / mic.0.052985-0

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сингх Б. Н., Упрети Д. К., Сингх Б. Р., Пандей Г., Верма С., Рой С. и др. (2015). Кверцетин сенсибилизирует устойчивый к флуконазолу Candida albicans , вызывая апоптотическую гибель клеток, модулируя чувствительность кворума. Антимикробный. Агенты Chemother. 59, 2153–2168. DOI: 10.1128 / AAC.03599-14

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сингх Б. Р., Сингх Б. Н., Сингх А., Хан В., Накви А. Х. и Сингх Х. Б. (2015). Наночастицы биосеребра, изготовленные микробами, нарушают работу систем распознавания кворума Pseudomonas aeruginosa . Sci. Отчет 5: 13719. DOI: 10.1038 / srep13719

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сингх, Х.Б., Сингх Б. Н., Сингх С. П. и Наутиял К. С. (2010). Твердотельное культивирование Trichoderma harzianum NBRI-1055 для модулирования природных антиоксидантов в матриксе семян сои. Биоресурсы. Technol. 101, 6444–6453. DOI: 10.1016 / j.biortech.2010.03.057

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Шривастава А., Сингх Б. Н., Дипак Д., Рават А. К. и Сингх Б. Р. (2015). Гексасахарид молозива, новый ингибитор кворума Staphylococcus aureus . Антимикробный. Агенты Chemother. 59, 2169–2178. DOI: 10.1128 / AAC.03722-14

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сунтар И., Купели Акколь Э., Келес Х., Есилада Э. и Саркер С. Д. (2013). Исследование потенциала заживления ран Helichrysum graveolens (Bieb.) Sweet: выделение апигенина как активного компонента. J. Ethnopharmacol. 149, 103–110. DOI: 10.1016 / j.jep.2013.06.006

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Торрес, С.К., Кампос, В. Л., Леон, К. Г., Родригес-Лламасарес, С. М., Рохас, С. М., Гонсалес, М. и др. (2012). Биосинтез наночастиц селена Pantoea agglomerans и их антиоксидантная активность. J. Nanoparticle Res. 14, 1–9. DOI: 10.1007 / s11051-012-1236-3

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Тручадо П., Лопес-Гальвес Ф., Хиль М. И., Томас-Барберан Ф. А. и Альенде А. (2009). Ингибирующая и противомикробная активность меда по чувствительности кворума и взаимосвязь с отдельными фенолами. Food Chem. 115, 1337–1344. DOI: 10.1016 / j.foodchem.2009.01.065

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Викрам А., Джаяпракаша Г. К., Йесудхасан П. Р., Пиллаи С. Д. и Патил Б. С. (2010). Подавление бактериальной клеточно-клеточной передачи сигналов, образования биопленок и системы секреции типа III флавоноидами цитрусовых. J. Appl. Microbiol. 109, 515–527. DOI: 10.1111 / j.1365-2672.2010.04677.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ван, М., Шефер, А. Л., Дандекар, А. А., и Гринберг, Э. П. (2015). Определение кворума и контроль за Pseudomonas aeruginosa социальных мошенников. Proc. Natl. Акад. Sci. США 112, 2187–2191. DOI: 10.1073 / pnas.1500704112

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ся Ю., Ю П., Сюй Ф., Лю Дж. И Син Ф. (2015). Новые функционализированные наночастицы селена для повышения активности против гепатокарциномы in vitro . Nanoscale Res.Lett. 10: 1051. DOI: 10.1186 / s11671-015-1051-8

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Янг, К., Аамдал Шейе, А., Беннече, Т., и Дефоирдт, Т. (2015). Удельная активность тиофенонов, нарушающая восприятие кворума (AQSI), и их терапевтический потенциал. Sci. Отчет 5: 18033. DOI: 10.1038 / srep18033

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Инь, Х., Дэн, Ю., Ван, Х., Лю, В., Чжуан, X., и Чу, В. (2016). Исправление: полифенолы чая в качестве антивирулентного соединения нарушают регулируемую кворум-чувствительность патогенность Pseudomonas aeruginosa . Sci. Реп. 6: 17987. DOI: 10.1038 / srep17987

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ю. Б., Ли, X. Л., Чжэн, В. Дж., Фэн, Ю. Х., Вонг, Ю. С., и Чен, Т. Ф. (2014). pH-чувствительные наночастицы селена, нацеленные на рак: трансформируемый лекарственный носитель с усиленными тераностическими эффектами. J. Mat. Chem. В 2, 5409–5418. DOI: 10.1039 / C4TB00399C

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Чжу, Л., Ван, Т., Перче, Ф., Тайгинд А., Торчилин В. П. (2013). Повышенная противораковая активность нанопрепарата, содержащего MMP2-чувствительный конъюгат ПЭГ-лекарственное средство и проникающий в клетки фрагмент. Proc. Natl. Акад. Sci. США 110, 17047–17052. DOI: 10.1073 / pnas.1304987110

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Зумла А. и Лулат А. (1989). Мед — средство, открытое заново. J. R. Soc. Med. 82, 384–385.

Google Scholar

Clinique Holiday 2020 Cheek Pop Trio Обзор и образцы

Праздник 2020

(29 долл.50 за 0,36 унции) — это новое трио, выпущенное ограниченным тиражом, в которое входят два румянца (оба из перманентной линии) и один хайлайтер (ранее выпущенный как оттенок ограниченного выпуска). Все три оттенка соответствовали предыдущим тестам, которые я тестировал. Формула Clinique больше похожа на гибрид геля и пудры, поэтому они более плотные, почти твердые на ощупь, но при этом порошок ложится без шва, легко смешивается и выглядит «растопленным» на коже; для этого просто требуется более плотная кисть (или более тяжелая рука), чтобы сначала подобрать продукт.

Я знаю, что в прошлый праздничный сезон было доступно два трио, так что я надеюсь на еще одно — хотя мне бы очень хотелось, чтобы Clinique расширила диапазон оттенков Cheek Pop, чтобы получить более глубокие и насыщенные оттенки (например, Cola Pop , но в других оттенках!), особенно в качестве второго трио. В качестве примечания, упаковка такая же, как и у предыдущих выпущенных трио, которые я считаю немного хрупкими по сравнению с большинством существующих палитр, хотя в прошлом году я слышал от читателей, что их упаковка хорошо держится!

Состав

Мы надеемся, что вы подумаете о поддержке Temptalia, совершив покупки по нашим ссылкам ниже.Спасибо!

Розовый медовый поп

Pink Honey Pop — это светло-розовый розовый цвет с сильным теплым оттенком и естественным послевкусием. Он не выглядел явно мерцающим, но у него было достаточно свечения, чтобы казаться на ступень выше полуматового. Текстура была гладкой, плотной и бархатистой, хотя ее нужно было использовать с умеренно плотной кистью (или рукой), чтобы равномерно подобрать продукт, что является характеристикой этого типа формулы. С другой стороны, не было пудры, и пудра красиво полировалась на моей коже и выглядела очень похоже на кожу.У него был хороший цветовой охват, который можно было построить до полного покрытия. Этот оттенок держался восемь с половиной часов, прежде чем немного потускнел.

ДАЛЬНЕЙШЕЕ ЧТЕНИЕ : Обзор формулы для получения подробной информации об общих характеристиках и характеристиках (например, о запахе).

  • Makeup Geek Spell Bound (DC, 9,99 долларов США) более блестящий и легкий (на 95% похоже).
  • MAC Fun Ending (LE, 24,00 $) менее блестящий (95% аналогичный).
  • Physists Formula Natural (P, 12,99 долларов США) более блестящий и легкий (на 95% похоже).
  • Chantecaille Bliss (LE, $ 44.00) легче, прохладнее (на 90% похоже).
  • Tarte Celebrated (LE, 29 долларов США) менее мерцающий, более теплый (на 90% похоже).
  • Dose of Colours Statemint (LE, 22,00 $) ярче (схожесть на 90%).
  • Tarte Prize (LE, 29,00 долларов США) менее мерцающий, более легкий и прохладный (на 90% похоже).
  • MAC Sweet Enough (P, 29 долларов США) круче (на 90% похоже).
  • Salt New York Rose (P, 16 долларов США) менее мерцающий, более темный, более прохладный (на 90% похоже).
  • Estee Lauder Lover’s Blush (P, 34 доллара.00) более мерцающий, теплый (похож на 90%).

Обзор формул

21,00 $ / 0,12 унции. — 175 долларов США за унцию

Формула описывается как «яркий, но естественный цвет щек, который выглядит практически без пудры». Текстура была гладкой, мягкой и плотной, поэтому она никогда не была пудрой на сковороде или на коже. У румян была хорошая цветопередача, которую легко растушевать (или вы можете нанести меньше, поскольку более плотная текстура позволяет легко контролировать).

Это такая текстура, которая почти сливается, как только вы начинаете наносить ее на кожу.Финиш стал более сияющим, когда я нанесла пудру на кожу, но она никогда не была блестящей или чрезмерно мерцающей, поэтому она всегда выглядела гладкой на моей коже и не подчеркивала поры или текстуру моей кожи. Большинство оттенков держалось на мне от восьми до девяти часов.

Просмотрите все наши образцы румян Clinique Cheek Pop Blush.

Состав

Hdi / триметилол, кросс-полимер гексиллактона, цетеарилэтилгексаноат, глицерин, дикальцийфосфат, сквалан, Ptfe, диметикон, лауроиллизин, этилгексилглицерин, хондрус криспус (каррагенан, цинколисорбат, стеарил-цинколидрилат, капколи-цинк-80, полисорбиталин 80 Пентаэритритил тетра-ди-Т-бутилгидроксигидро-циннамат, [+/- слюда, Red 7 Lake (Ci 15850), диоксид титана (Ci 77891), марганцевый фиолетовый (Ci 77742), Red 36 Lake (Ci 12085), оксиды железа. (Ci 77499), ультрамарины (Ci 77007), Red 6 (Ci 15850), Yellow 6 Lake (Ci 15985), Blue 1 Lake (Ci 42090) Orange 5 (Ci 45370), оксихлорид висмута (Ci 77163), кармин (Ci 75470), Red 30 Lake (Ci 73360), Yellow 5 Lake (Ci 19140), оксиды железа (Ci 77491), оксиды железа (Ci 77492)].

Заявление об отказе от ответственности : Списки ингредиентов доступны для бренда (или продавца) на момент публикации. Пожалуйста, всегда проверяйте упаковку продукта, если она есть, на предмет применимого списка ингредиентов. к продукту, который вы покупаете, или на веб-сайт бренда или продавца, чтобы получить самый последний список ингредиентов.

Посмотрите, используя этот продукт

Мы надеемся, что вы подумаете о поддержке Temptalia, совершив покупки по нашим ссылкам ниже. Спасибо!

Черный Мед Поп

Black Honey Pop — средне-темно-розовый с умеренным теплым оттенком и естественным блеском.Он имел непрозрачный цвет в одном слое, который равномерно наносился на голую кожу и растушевывался без особых усилий. Консистенция была гладкой на ощупь, плотной и твердой, но не жесткой, и хорошо воспринималась кистью средней плотности (я использовала Sonia G. Face Two). Он хорошо держался в течение девяти часов, прежде чем заметно потускнел.

ДАЛЬНЕЙШЕЕ ЧТЕНИЕ : Обзор формулы для получения подробной информации об общих характеристиках и характеристиках (например, о запахе).

  • Flesh Beauty Pulse (P, 26 долларов.00) более мерцающий, теплый (на 95% похоже).
  • NARS Out There (LE, 30 долларов США) менее блестящий, более легкий (на 90% похож).
  • MAC Sweet Samba (LE, 29 долларов США) более мерцающий (на 95% похож).
  • Viseart Enamored (Blush) (PiP,) менее мерцающий, более приглушенный (сходство на 90%).
  • Becca Nightingale (P, 32,00 $) темнее, ярче (аналогично на 85%).
  • Tom Ford Beauty Soleil d’Ambre (Blush) (LE, 60 долларов США) теплее (аналогично на 90%).
  • Bobbi Brown Sand Pink (DC, 30 долларов США.00) менее блестящий (на 90% похож).
  • Merit Mood (P, 28 долларов США) менее мерцающий, более яркий, теплый (на 90% похоже).
  • Dior Dolce Vita (555) (P, 46 долларов США) более мерцающий, теплый (на 90% похоже).
  • Too Faced Peach Berry (P, 30 долларов США) менее блестящий, более светлый (на 90% похож).

Обзор формул

21,00 $ / 0,12 унции. — 175 долларов США за унцию

Формула описывается как «яркий, но естественный цвет щек, который выглядит практически без пудры». Текстура была гладкой, мягкой и плотной, поэтому она никогда не была пудрой на сковороде или на коже.У румян была хорошая цветопередача, которую легко растушевать (или вы можете нанести меньше, поскольку более плотная текстура позволяет легко контролировать).

Это такая текстура, которая почти сливается, как только вы начинаете наносить ее на кожу. Финиш стал более сияющим, когда я нанесла пудру на кожу, но она никогда не была блестящей или чрезмерно мерцающей, поэтому она всегда выглядела гладкой на моей коже и не подчеркивала поры или текстуру моей кожи. Большинство оттенков держалось на мне от восьми до девяти часов.

Просмотрите все наши образцы румян Clinique Cheek Pop Blush.

Состав

Hdi / триметилол, кросс-полимер гексиллактона, цетеарилэтилгексаноат, глицерин, дикальцийфосфат, сквалан, Ptfe, диметикон, лауроиллизин, этилгексилглицерин, хондрус криспус (каррагенан, цинколисорбат, стеарил-цинколидрилат, капколи-цинк-80, полисорбиталин 80 Пентаэритритил тетра-ди-Т-бутилгидроксигидро-циннамат, [+/- слюда, Red 7 Lake (Ci 15850), диоксид титана (Ci 77891), марганцевый фиолетовый (Ci 77742), Red 36 Lake (Ci 12085), оксиды железа. (Ci 77499), ультрамарины (Ci 77007), Red 6 (Ci 15850), Yellow 6 Lake (Ci 15985), Blue 1 Lake (Ci 42090) Orange 5 (Ci 45370), оксихлорид висмута (Ci 77163), кармин (Ci 75470), Red 30 Lake (Ci 73360), Yellow 5 Lake (Ci 19140), оксиды железа (Ci 77491), оксиды железа (Ci 77492)].

Заявление об отказе от ответственности : Списки ингредиентов доступны для бренда (или продавца) на момент публикации. Пожалуйста, всегда проверяйте упаковку продукта, если она есть, на предмет применимого списка ингредиентов. к продукту, который вы покупаете, или на веб-сайт бренда или продавца, чтобы получить самый последний список ингредиентов.

Посмотрите, используя этот продукт

Мы надеемся, что вы подумаете о поддержке Temptalia, совершив покупки по нашим ссылкам ниже. Спасибо!

Gold Celebration Pop

Celebration Pop — это яркий поп светло-среднего золота с умеренным теплым желтым оттенком и гладким металлическим блеском.Он имел богатый цветовой охват и казался немного более податливым и мягким по сравнению с румянами в палитре, что облегчало использование более легкой рукой для более эффективного покрытия (что заявлял бренд). Хайлайтер нанесен равномерно на мою кожу и хорошо распространился, не подчеркивая естественную текстуру моей кожи. Он оставался красивым в течение девяти часов, прежде чем заметно потускнел.

  • ColourPop Mistress of All Evil (LE, 10,00 долл. США) теплее (аналогично на 95%).
  • Chanel Plisse Lumiere de Chanel (LE, 70 долларов.00) темнее (похоже на 95%).
  • Melt Cosmetics Stargazer (P, 39 долларов США) легче, теплее (аналогично на 90%).
  • Hourglass Champagne Flash (P, 42,00 $) легче (95% аналогично).
  • Tarte Exposed (P, 28,00 $) легче (на 95% похоже).
  • Dior Glowing Nude (002) (LE, 58,00 $) более мерцающий (на 95% похож).
  • Tom Ford Beauty Incandescent (Top) (PiP, 75 долларов США) легче (на 95% похоже).
  • ColourPop Strobe Globe (P, 7 долларов США) более мерцающий (схожий на 95%).
  • Charlotte Tilbury Filmstar Glow (Original) (PiP,) более мерцающий (на 95% похоже).
  • Charlotte Tilbury Highlighting Glow (LE,) круче (похоже на 95%).

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *