Определение диастазного числа в меде: что это такое, как определить

Содержание

Как проверить диастазное число меда в домашних условиях

Главная » Разное » Как проверить диастазное число меда в домашних условиях

Диастазное число меда липового — Простые пошаговые рецепты с фотографиями

Продуктами пчеловодства люди пользуются с незапамятных времен. Наскальные рисунки процесса медосбора датируются каменным веком. Доподлинно известно, что большими любителями сладкого, в том числе и меда, были египетские фараоны. Первые летописные упоминания о меде в Древней Руси датируются IX веком.

Полезные свойства меда

Издавна мед считался не просто вкусным лакомством, но и лекарством от многих болезней. Им лечили заболевания бронхолегочной и желудочно-кишечной системы, болезни глаз, кожные недуги и цингу. До сих пор лечение пчелопродукцией является одним из эффективных методов народной медицины — медом излечивают простуды в сезон обострений и активно используют его в домашней косметологии. Сегодня научно доказано, что в состав пчелиного нектара входит огромное количество жизненно важных минералов, микроэлементов и витаминов.

Так что же такое мед?

Мед представляет собой вязкий, тягучий нектар, производителем которого являются пчелы. Чтобы накопить 100 грамм лакомства, этим трудягам нужно собрать цветочную пыльцу почти с миллиона цветов. Они собирают вкусную пыльцу с различных соцветий, смешивая ее с собственными ферментами, выработанными слюнной железой. В результате их жизнедеятельности и получается этот питательный и полезный продукт.

Качество продукта

Безусловно, целебные свойства меда неоспоримы, но только при условии, что это действительно натуральный продукт. Пчелиный мед – одно из сложных органических веществ, качество которого можно определить несколькими способами. Считается, что наиболее точную оценку плотности, зрелости и состава продукта можно выяснить лишь в лабораторных условиях, где специалисты определяют диастазное число меда.

Тем не менее опытные пчеловоды и настоящие гурманы не просто умеют отличать натуральный продукт от подделок, но и угадывают места сбора пчелиного нектара и растения, которые опылялись пчелами. Знатоки определяют э

что это такое, таблица, в чем измеряется диастаза

В чем измеряется

Все необходимые замеры следует делать по инструкции ГОСТ Р 54386-2011 «Мед. методы определения активности сахаразы, диастазного числа, нерастворимого вещества». Настоящий стандарт распространяется на мед и устанавливает:

  • метод определения диастазного числа в диапазоне измерений от 3,0 до 40,0 ед. Готе;
  • метод определения диастазного числа по Шаде в диапазоне измерений от 0 до 40,0 ед. Шаде;
  • метод определения диастазного числа по Фадебазу в диапазоне измерений от 0 до 40,0 ед. Шаде;

Ещё в 1914 году во Франции исследователь Готе нашёл способ, как определить диастазное число меда. Единицу измерения назвали в его честь. Этим способом, в основном и пользуются до сих пор, как наиболее удобным для вычисления диастазного числа.

Как определить диастазное число меда

Наличие и количество диастазы замерить легче, чем других ферментов, поэтому в лабораториях делают именно этот анализ. Только в лаборатории возможно точное определение диастазного числа как по методу Готе, так и по методам Шаде или Фодебаза.

Но есть способ, приближенный к лабораторному (по Готе), чтобы сделать это вне лаборатории в домашних условиях нужно:

  1. Поместить в колбу 4,5 мл 10 % раствора мёда,
  2. 5,5 мл дистиллированной воды,
  3. 0,5 мл 0,58 % раствора соли
  4. 5 мл 1 % раствора крахмала.

Крепко закупорить крышкой, смешать и подержать в водяной бане при 40 градусах. Спустя 1 час пробирку охладить до средней температуры. Затем капнуть 1-2 капли йода и вновь размешать.

Цвет прозрачный, или светло-жёлтый, покажет, что диастазное число проверяемого мёда не меньше 11,1 ед. Готе. Значит, продукт свежий, натуральный, его ещё можно хранить и использовать. Если при этих пропорциях остальных ингредиентов мёда взять 2,2 мл и окажется тот же результат, то диастазное число более 22,2 ед. Готе.

Обратите внимание! При окрашивании в синий оттенок число меньше 11,1 ед. , следовательно, мёд более низкого качества.

Мед. Методы определения активности сахаразы, диастазного числа, нерастворимого вещества

отменён Настоящий стандарт распространяется на мед и устанавливает:
– метод определения активности сахаразы в диапазоне измерений от 20,0 до 200,0 ед./кг;
– метод определения диастазного числа в диапазоне измерений от 3,0 до 40,0 ед. Готе;

– метод определения диастазного числа по Шаде в диапазоне измерений от 0 до 40,0 ед. Шаде;

Диастаза меда, или иначе ферментативная активность — это показатель способности ферментов расщеплять крахмал, при котором определяется натуральность и степень «зрелости» продукта.

Пчёлы набирают нектар с цветов в зобик, потом «загружают» его в восковые ячейки и неоднократно насыщают цветочный сок выработанными ферментами из глотки и слюны. Эти ферменты — живые биологические компоненты, с помощью них нектар «консервируется» в сотах. Они разделяются на пероксидазу, каталазу, инвертазу и диастазу, подразделяющуюся на альфа-амилазу и бета-амилазу.

Качество мёда определяется числом диастазных ферментов. Оно показывает количество и активность альфа-амилазы и бета-амилазы в единице объёма и равняется количеству миллилитров однопроцентного раствора крахмала, который могут расщепить за 1 час ферменты диастазы, находящиеся в 1 грамме мёда.

Если ферментов будет мало, то диастаза мёда низкая, а много — значит, насекомые постарались ферментировать сбор и обеспечить себя запасами на зиму.

Фермент диастаза есть у всех животных, он необходим для разложения крахмала и превращения его в мальтозу для улучшения пищеварения. По насыщенности мёда ферментами оценивают степень его биологической активности.

По насыщенности мёда ферментами оценивают степень его биологической активности.

Важнее всего для насекомых запасти еду на зиму. В регионах с короткими и тёплыми зимами насекомым не требуется большое количество ферментов. Поэтому диастазное число южного мёда 5-9 ед. Готе; иногда диастазное число меда белой акации приближалось к нулю. Алтайский и башкирский мёд — около 30 ед.; в Сибири и северных районах — 25-45 и выше ед. Готе.

Важно! Чем выше диастазное число, тем натуральнее и качественнее продукт.

Установлены допустимые границы числа от 5 до 50 единиц Готе. Низкие показатели говорят о примесях воды, сахара, сока, сахарной патоки, крахмала, желатина, мела, пищевых ароматизаторов. Или он перегретый, что намного снижает активность ферментов и лечебные свойства. Долгое (3 и более лет) и неправильное хранение также уменьшает ферментативную активность с каждым годом на 20-25 %.

Обратите внимание! Допускается лишь один раз нагреть мёд до 45-50 градусов, последующие нагревы «убьют» все оставшиеся ферменты.

Поэтому хранить нужно при температуре от 0 до 10 градусов только в эмалированной, керамической или стеклянной посуде. С алюминием, медью и цинком происходят реакции, при которых образуются ядовитые соединения. При разливе в ёмкости для розничной торговли есть риск вовсе потерять ферменты диастазы.

Получается обычное лакомство.

Определённый сорт меда имеет индивидуальное диастазное число. Климат, сроки сбора, сорта медоносов, породы пчел, условия хранения, тепловая обработка — эти факторы уменьшают или увеличивают показатель. При проверках установлено, что:

  • мёд липы содержит малое число − 11,5-20 ед. Готе;
  • эспарцет — до 14,6 ед.;
  • гречиха — до 60 ед.;
  • белая акация −6,3-7 ед.;
  • подсолнечник −17,8-19 ед.;
  • донник — 20,4-21,5 ед.;
  • вереск — 27,9-29 ед.;
  • луговой клевер — 9,6-11ед.

Северный мед хранится дольше. Чем многочисленнее и крепче семья пчёл, тем значительнее диастазное число, потому, что ферментов вводится в цветочный сок больше, чем слабыми насекомыми. С одного и того же поля сильные пчёлы дадут около 50 ед Готе; а слабые — около 10 ед.

Дополнительная информация! Чем холоднее и продолжительнее зима, тем выносливее пчёлы и тем лучше насыщают запасы полезными веществами. Коренная русская порода пчёл в прошлом веке производила мёд более 60 ед. Готе, но с невысокой продуктивностью. Сейчас её вытеснили пчёлы зарубежных пород, с большой мёдоотдачей, но со сниженным диастазным числом.

Есть версия, что насекомые сами «умеют» вычислять, сколько крахмала в нектаре и вносят туда диастазу ровно необходимую, для того, чтобы полностью его разложить. Потому, что крахмал в нектаре — это плохой корм для пчёл, следовательно, природа наделила их способностью исправлять эту ситуацию.

Обратите внимание! Низкое число будет и у качественного меда, сделанного пчелами слабой семьи и при плохих климатических условиях.

Цифры диастазного числа более 55-60 ед. Готе говорят о присутствии добавок или воды, что приводит к брожению, закисанию биопродукта. О пользе и употреблении уже речь идти не может.

Низкое число будет и у качественного меда, сделанного пчелами слабой семьи

Названия областей и регионов Диастазное число ед. Готе
Амурская5,0
Алтайский край10,0
Башкирская10,0
Белгородская18,0
Брянская14,0
Бурятия18,7
Владимирская11,0
Вологодская10,0
Волгоградская10,0
Воронежская12,0
Нижегородская8,0
Дагестан10,0
Ивановская6,0
Иркутская16,0
Кабардино-Балкария10,0
Калужская16,0
Калининградская17,0
Калмыцкая6,4
Карельская15,0
Кемеровская17,0
Костромская10,0
Кировская12,9
Свердловская14,4-31,8
Северная Осетия14,6
Смоленская20,0
Ставропольский край13,7
Тамбовская10,0
Томская23,0
Тульская18,0
Тюменская19,0
Удмуртия12,0
Ульяновская6,4
Хабаровский край8,3
Челябинская10,5
Ингушетия6,0
Читинская10,0
Чувашская обл.5,0
Красноярский край6,4
Курганская10,8
Ленинградская10,8
Марийский авт. округ6,5
Мордовия10,8
Московская17,9
Омская10,0
Новосибирская8,0
Оренбургская10,0
Орловская13,0
Пензенская18,7
Пермская10,0
Приморский край8,3
Псковская10,2
Ростовская17,9
Рязанская10,0
Саратовская1,1-4,4
Липецкая1,1-4,4
Башкирия14,4-31,8
Сахалин14,0
Киргизия20,0-30,7
Одесская6,8-8,7
Донецкая6,8-8,7
Павлодарская9,0
Казахстан10,0
Белоруссия10,0
Прибалтика5,0-10,0
Молдавия10,8
Таджикистан12,8
Армения10,8
Туркмения6,5

В заключение, невозможно уверенно утверждать, что число диастазы — это свидетельство высокого качества и хороших лечебных свойств пчелиного сбора. Диастаза мёда только показывает, что это натуральный продукт, свежий, без примесей, правильно хранящийся и пригодный к употреблению.

DIN 10759-1:1998 Analysis of honey — Determination of saccharase activity — Part 1: Siegenthaler method

DIN 10750:2006 Analysis of honey — Determination of diastase activity (NEQ)

Издание официальное

Москва Стандартмнформ 2013

ГОСТ Р 54386—2011

Предисловие

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены в ГОСТ 1.0-2015 “Межгосударственная система стандартизации. Основные положения” и ГОСТ 1.2-2015 “Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены”Сведения о стандарте

1 РАЗРАБОТАН Федеральным государственным бюджетным научным учреждением “Научно-исследовательский институт пчеловодства” (ФГБНУ “НИИ пчеловодства”) и Обществом с ограниченной ответственностью “Аналитический центр Апис”

2 ВНЕСЕН Межгосударственным техническим комитетом по стандартизации МТК 531 “Пчеловодство”

Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97

Код страны по
МК (ИСО 3166) 004-97

Сокращенное наименование национального органа по стандартизации

Армения

AM

Минэкономики Республики Армения

Беларусь

BY

Госстандарт Республики Беларусь

Казахстан

KZ

Госстандарт Республики Казахстан

Киргизия

KG

Кыргызстандарт

Россия

RU

Росстандарт

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 9 ноября 2017 г. N 1715-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 19792-2017 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2019 г.

4 Классификация

Мед. Методы определения активности сахаразы, диастазного числа, нерастворимого вещества

ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО ТЕХНИЧЕСКОМУ РЕГУЛИРОВАНИЮ И МЕТРОЛОГИИ

НАЦИОНАЛЬНЫЙ

СТАНДАРТ

РОССИЙСКОЙ

ФЕДЕРАЦИИ

DIN 10759-1:1998

Analysis of honey — Determination of saccharase activity — Part 1: Siegenthaler

method DIN 10750:2006 Analysis of honey — Determination of diastase activity (NEQ)

Издание официальное

Москва

Стандартинформ

2013

Предисловие

Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от 27 декабря 2002 г. № 184-ФЗ «О техническом регулировании», а правила применения национальных стандартов Российской Федерации — ГОСТ Р 1.0-2004 «Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения»

Сведения о стандарте

1    РАЗРАБОТАН Обществом с ограниченной ответственностью Центром исследований и сертификации «Федерал» (ООО Центр «Федерал»)

2    ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 432 «Пчеловодство»

3    УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 25 августа 2011 г. № 241-ст

4    В настоящем стандарте учтены основные нормативные положения национальных немецких стандартов: DIN 10759-1:1998 «Исследование меда. Определение активности сахаразы. Часть 1. Метод Зигенталера» (DIN 10759-1:1998 «Analysis of honey — Determination of saccharase activity — Part 1: Siegenthaler method») (аутентичный перевод, per. № 3432/DIN от 30.05.2008 г), DIN 10750:2006 «Анализ меда. Определение активности диастазы» (DIN 10750:2006 «Analysis of honey — Determination of diastase activity») (аутентичный перевод, per. № 2875/DIN от 30.04.2007 г.)

5    ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок — в ежемесячно издаваемых информационных указателях «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет

© Стандартинформ, 2013

Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

7.6 Обработка и представление результатов испытаний

7. 6.1 Значение диастазного числа медаХ, ед. Готе, в пересчете на 1 г безводного вещества, вычисляют по формуле

X = 100 • 80(DK — Оисп) ■ D”1 • (100 — Щ~\    (3)

где 80 — коэффициент пересчета;

DK — оптическая плотность контрольного раствора;

Оисп — соответствующая оптическая плотность испытуемого раствора;

W — массовая доля воды в меде, найденная по 7.4.5, %.

7.6.2 За результат испытаний принимают среднеарифметическое значение двух параллельных определений диастазного числа, полученных в условиях повторяемости, если абсолютное расхождение между параллельными определениями не превышает предела повторяемости г по ГОСТ Р ИСО 5725-6. Значение предела повторяемости г приведено в таблице 4.

Таблица 4

Диапазон измерений

Предел повторяемости г, при Р = 0,95, ед. Готе

Критический диапазон

Предел воспроизводи-

Границы абсолютной

диастазного числа X,

при трех измерениях

мости R, при Р= 0,95,

погрешности ± А,

ед. Готе

СР095(3), ед. Готе

ед. Готе

при Р = 0,95, ед. Готе

От 3,0 до 20,0 включ.

0,07Х

0,1 ОХ

0,15Х

0,11Х

Св. 20,0 до 40,0 включ.

0,03Х

0,05Х

0,1 ОХ

0.07Х

При превышении предела повторяемости г целесообразно провести дополнительное определение значения диастазного числа и получить еще один результат. Если при этом абсолютное расхождение (‘*макс”’*мин) результатов трех определений не превышает значения критического диапазона С/?0 95(3), то в качестве окончательного результата принимают среднеарифметическое значение результатов трех определений диастазного числа. Значение критического диапазона С/?095(3) приведено в таблице 4.

При невыполнении этого условия проводят повторные испытания.

7.6.3    Абсолютное расхождение между результатами испытаний диастазного числа, полученными в двух лабораториях в условиях воспроизводимости, не должно превышать предела воспроизводимости R по ГОСТ Р ИСО 5725-6. При выполнении этого условия приемлемы оба результата испытания и в качестве окончательного результата может быть использовано их среднеарифметическое значение. Значение предела воспроизводимости R приведено в таблице 4.

7.6.4    Результат испытаний, округленный до первого десятичного знака, в документах, предусматривающих его использование, представляют в виде:

(X7± А), ед. Готе, при Р= 0,95,

где х — среднеарифметическое значение результатов определений диастазного числа по 7.6.2, ед.

Готе;

± А — границы абсолютной погрешности результатов определений по 7.7, ед. Готе.

7.7 Характеристика погрешности испытаний

Границы абсолютной погрешности результатов испытаний, получаемых согласно данному методу, ± А, при доверительной вероятности Р = 0,95, приведены в таблице 4.

8 Метод определения диастазного числа по Шаде

8.1    Отбор и подготовка пробы — по 6.1.

8.2    Сущность метода

Метод основан на колориметрическом определении времени окончания ферментативной реакции расщепления заданного количества субстрата по достижению раствором оптической плотности, соответствующей активности диастазы меда, и последующем вычислении диастазного числа.

8

ГОСТ Р 54386-2011

Единица диастазной активности определяется количеством ферментов, содержащихся в 1 г меда и расщепляющих 0,01 г крахмала за 1 ч при температуре 40 °С.

Диастазное число характеризует активность амилолитических ферментов меда.

8.3 Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы

8.3.1    Спектрофотометр или колориметр фотоэлектрический, снабженный светофильтром с максимумом пропускания при длине волны 660 нм и кюветами с четырьмя прозрачными стенками и длиной оптического пути 10 мм.

8.3.2    Весы по ГОСТ Р 53228 высокого класса точности с пределами допускаемой абсолютной погрешности не более ± 0,1 мг.

8.3.3    Термометр ртутный стеклянный лабораторный с диапазоном значений от 0 °С до 100 °С и ценой деления шкалы 1 °С по ГОСТ 28498.

8.3.4    Термостат, водяная баня или другое устройство, позволяющее производить равномерный нагрев до температуры 40 °С.

8.3.5    рН-метр/иономер с пределами допускаемой основной абсолютной погрешности прибора при преобразовании измеренного значения ЭДС в рХ (pH) ± 0,02 ед. рХ (pH).

8.3.6    Сито из нержавеющей стали, диаметр отверстий 0,5 мм по ГОСТ Р 51568.

8.3.7    Секундомер механический СОСпр-26-2-000.

8.3.8    Шпатель лабораторный ШЛ.

8.3.9    Шкаф сушильный любого типа, обеспечивающий температуру нагрева до 250 °С с пределами абсолютной погрешности ± 2 °С.

8.3.10    Электроплитка по ГОСТ 14919.

8.3.11    Палочки стеклянные лабораторные оплавленные длиной от 15 до 20 см.

8.3.12    Эксикатор по ГОСТ 25336.

8.3.13    Стаканы В 1-50 ТС по ГОСТ 25336.

8.3.14    Цилиндры мерные 1-100-2 по ГОСТ 1770.

8.3.15    Колбы мерные 1(2)-50(100,250,500)-2(ПМ) по ГОСТ 1770.

8.3.16    Колбы конические Кн-1(2,3)-25(50,250)-29/32(34) ТС по ГОСТ 25336.

8.3.17    Пробирки П-2-20-14/23 ХС по ГОСТ 1770.

8.3.18    Стаканчики для взвешивания СН-45/13(60/14) по ГОСТ 25336.

8.3.19    Пипетки 1-2-1-1(2,5,10,25) по ГОСТ 29227.

8.3.20    Натрий хлористый по ГОСТ 4233, х.ч.

8.3.21    Натрий уксуснокислый 3-водный по ГОСТ 199, ч.д.а.

8.3.22    Кислота уксусная по ГОСТ 61, х.ч. ледяная.

8.3.23    Крахмал растворимый по ГОСТ 10163, ч.д.а.

8.3.24    Йод по ГОСТ 4159, ч.д.а., дважды возогнанный.

8.3.25    Калий йодистый по ГОСТ 4232, х.ч.

8.3.26    Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Допускается использование других средств измерений, вспомогательного оборудования по метрологическим, техническим характеристикам не хуже указанных в настоящем стандарте.

Допускается использование других реактивов по качеству и чистоте не ниже вышеуказанных.

8.4 Подготовка к испытаниям
8.4.1    Приготовление раствора хлористого натрия

Хлористый натрий по ГОСТ 4233 массой (2,90 ± 0,01) г растворяют в дистиллированной воде по ГОСТ 6709 в мерной колбе вместимостью 100 см3 по ГОСТ 1770. Объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают.

8.4.2    Приготовление ацетатного буферного раствора (pH = 5,3)

Натрий уксуснокислый 3-водный по ГОСТ 199 массой (43,50 ± 0,01) г растворяют в дистиллированной воде по ГОСТ 6709 в мерной колбе вместимостью 250 см3 по ГОСТ 1770. Добавляют 5 см3 ледяной уксусной кислоты по ГОСТ 61 для установления значения pH раствора (5,3 ± 0,1) ед. pH по рН-метру по 8.3.5. Объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают.

8.4.3    Раствор крахмала

8.4.3.1 Высушивание крахмала

(3,0000 ± 0,0001) г растворимого крахмала по ГОСТ 10163 распределяют равномерным тонким слоем по дну бюксы по ГОСТ 25336, предварительно высушенной с крышкой до постоянной массы

9

при температуре (130 ± 2) °С (результат взвешивания в граммах записывают с точностью до четвертого десятичного знака). Крахмал сушат при температуре (130 ± 2) °С в течение 90 мин, охлаждают в эксикаторе по ГОСТ 25336 и взвешивают (результат взвешивания в граммах записывают с точностью до четвертого десятичного знака). Высушивание повторяют по 30 мин до достижения постоянной массы.

Примечание —Для приготовления раствора необходимо использовать только растворимый крахмал, образующий при процедуре калибровки (см. 8.4.7) прозрачный раствор голубого цвета с оптической плотностью в диапазоне от 0,745 до 0,770.

8.4.3.2    Приготовление раствора крахмала

Высушенный крахмал, подготовленный по 8.4.3.1, массой (2,000 ± 0,001) г помещают в коническую колбу вместимостью 250 см3 по ГОСТ 25336. Добавляют 90 см3 дистиллированной воды по ГОСТ 6709, перемешивают. Содержимое колбы доводят до кипения и кипятят в течение 3 мин. Горячий раствор переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3 по ГОСТ 1770, быстро охлаждают под струей холодной воды до комнатной температуры. Объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают.

Раствор следует использовать в день приготовления.

8.4.3.3    Приготовление рабочего раствора крахмала

В коническую колбу вместимостью 25 см3 по ГОСТ 25336 помещают 10 см3 дистиллированной воды по ГОСТ 6709 и 5 см3 раствора крахмала, приготовленного по 8.4.3.2. Смесь перемешивают.

Раствор готовят непосредственно перед проведением испытания.

8.4.4    Приготовление исходного раствора йода

Йод, дважды возогнанный, по ГОСТ 4159 массой (11,00 ± 0,01) г и калий йодистый по ГОСТ 4232 массой (22,00 ± 0,01) г растворяют в 30—40 см3 дистиллированной воды по ГОСТ 6709 в мерной колбе вместимостью 500 см3 по ГОСТ 1770. Объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают.

Раствор хранят в склянке из темного стекла при комнатной температуре не более 12 мес.

8.4.5    Приготовление рабочего раствора йода

Калий йодистый по ГОСТ 4232 массой (10,00 ± 0,01) г растворяют в дистиллированной воде по ГОСТ 6709 в мерной колбе вместимостью 250 см3 по ГОСТ 1770. Добавляют 1 см3 исходного раствора йода, приготовленного по 8.4.4. Объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают.

Свежеприготовленный раствор следует использовать в течение 24 ч, оберегая от попадания воздуха, быстро и плотно закрывать емкость после отбора необходимого количества раствора.

8.4.6    Калибровка раствора крахмала

8.4.6.1    При калибровке устанавливается объем дистиллированной воды, при добавлении которого получившийся йодно-крахмальный раствор имеет оптическую плотность от 0,745 до 0,770.

8.4.6.2    Необходимый объем дистиллированной воды должен быть от 10 до 25 см3.

8.4.6.3    В четырнадцать конических колб вместимостью по 50 см3 по ГОСТ 25336 помещают 12; 13; 14; 15; 16; 17; 18; 19; 20; 21; 22; 23; 24; 25 см3 дистиллированной воды по ГОСТ 6709 и по 5 смрабочего раствора йода, приготовленного по 8.4.5. В первую колбу добавляют 0,5 см3 рабочего раствора крахмала, приготовленного по 8. 4.3.3, хорошо встряхивают. Затем быстро измеряют оптическую плотность раствора по отношению к дистиллированной воде на спектрофотометре по 8.3.1 при длине волны 1 = 660 нм.

Последовательно таким же образом поступают с остальными колбами до тех пор, пока не будет найден раствор с оптической плотностью от 0,745 до 0,770. Соответствующий объем дистиллированной воды следует считать стандартным для всех последующих испытаний, проводимых с раствором крахмала.

Примечание — Качество и чистота крахмала могут быть различными и зависят от партии и производителя. Объем дистиллированной воды следует устанавливать для каждой упаковки реактива. Время между добавлением рабочего раствора крахмала и определением оптической плотности должно быть, по возможности, одинаковым как при калибровке раствора крахмала, так и при проведении испытания пробы меда.

8.4.7    Приготовление раствора меда

(10,00 ± 0,01) г меда, подготовленного по 6.1, растворяют в 15 см3 дистиллированной воды по ГОСТ 6709 и 5 см3 ацетатного буферного раствора, приготовленного по 8. 4.2, в стакане вместимостью 50 см3 по ГОСТ 25336. Раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50 см3 по

ГОСТ Р 54386-2011

ГОСТ 1770, добавляют 3 см3 раствора хлористого натрия, приготовленного по 8.4.1. Объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают.

Раствор готовят непосредственно перед проведением испытания.

8.5 Проведение испытаний
8.5.1    Испытание раствора пробы

8.5.1.1    В пробирку вместимостью 20 см3 по ГОСТ 1770 помещают 10 см3 раствора меда, приготовленного по 8.4.7. В другую пробирку — 10 см3 раствора крахмала, приготовленного по 8.4.3.3. Обе пробирки закрывают пробками и помещают в термостат или на водяную баню по 8.3.4 с регулятором температуры, установленным на (40,0 ± 0,2) °С. Через 15 мин выдерживания при температуре (40,0 ± 0,1) °С из второй пробирки отбирают 5 см3 раствора крахмала и переносят в первую пробирку с раствором меда. Реакционную смесь перемешивают и начинают отсчет времени по секундомеру по 8.3.7.

8.5.1.2    Через периодические промежутки времени At (первый раз через 5 мин) из пробирки отбирают по 0,5 см3 реакционной смеси, приготовленной по 8.5.1.1, и быстро добавляют к 5 см3 рабочего раствора йода, приготовленного по 8.4.5, в коническую колбу вместимостью 50 см3 по ГОСТ 25336. Добавляют дистиллированную воду объемом, установленным по 8.4.6.3, перемешивают.

8.5.1.3    Затем быстро измеряют оптическую плотность каждого раствора из 8.5.1.2 (Df) по отношению к дистиллированной воде на спектрофотометре по 8.3.1 при длине волны X = 660 нм.

Таблица 5

Значение оптической плотности раствора Dt

Следующий промежуток времени At, мин

От 0,456 до 0,523 включ.

От 2 до 5

Св. 0,523 до 0,658 включ.

От 5 до 10

Св. 0,658

10 и более

8.5.1.4    Если измеренное значение оптической плотности раствора ниже 0,350, то проведение испытания начинают снова по 8.5.1 с новой порцией раствора меда, сократив время первого промежутка времени выдерживания.

8.5.1.5    Периодические промежутки времени после первого отбора реакционной смеси следует отмерять таким образом, чтобы три-четыре измеренных значения оптической плотности растворов укладывались в диапазон значений от 0,155 до 0,456. Примерные рекомендуемые значения промежутков времени между отборами реакционной смеси приведены в таблице 5.

8.5.2    Испытание контрольного раствора

Определяют значение оптической плотности контрольного раствора (Dx) по 8.5.1, заменив объем

раствора крахмала на соответствующий объем дистиллированной воды.

8.5.3    При анализе каждой пробы выполняют два параллельных определения.

8.6 Обработка результатов

8.6.1    Значение оптической плотности каждого раствора D вычисляют по формуле

D = Dt— Dx,    (4)

где Dt — оптическая плотность каждого раствора пробы с определенным промежутком времени выдерживания;

Dx — соответствующая оптическая плотность каждого контрольного раствора.

8.6.2    Строят градуировочный график, откладывая на оси ординат значение оптической плотности каждого раствора (D), а на оси абсцисс — соответствующее этому значению время реакции (f) в минутах. Градуировочный график должен быть линейным

ГОСТ Р 54386-2011 Мед. Методы определения активности сахаразы, диастазного числа, нерастворимого вещества

Текст ГОСТ Р 54386-2011 Мед. Методы определения активности сахаразы, диастазного числа, нерастворимого вещества

>

ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО

ПО ТЕХНИЧЕСКОМУ РЕГУЛИРОВАНИЮ И МЕТРОЛОГИИ


НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

МЕД

Методы определения активности сахаразы, диастазного числа, нерастворимого вещества

DIN 10759-1:1998 Analysis of honey — Determination of saccharase activity — Part 1: Siegenthaler method

DIN 10750:2006 Analysis of honey — Determination of diastase activity (NEQ)

Издание официальное

Москва Стандартмнформ 2013

ГОСТ Р 54386—2011

Предисловие

Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от 27 декабря 2002 г. Ns 184-ФЗ «О техническом регулировании», а правила применения национальных стандартов Российской Федерации — ГОСТ Р 1.0—2004 «Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения»

Сведения о стандарте

  • 1 РАЗРАБОТАН Обществом с ограниченной ответственностью Центром исследований и сертификации «Федерал» (ООО Центр «Федерал»)

  • 2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 432 «Пчеловодство»

  • 3 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 25 августа 2011 г. № 241-ст

  • 4 В настоящем стандарте учтены основные нормативные положения национальных немецких стандартов: DIN 10759-1:1998 «Исследование меда. Определение активности сахаразы. Часть 1. Метод Зигенталера» (DIN 10759-1:1998 «Analysis of honey — Determination of saccharase activity — Part 1: Siegenthaler method») (аутентичный перевод, per. № 3432/DIN от 30.05.2008 r), DIN 10750:2006 «Анализ меда. Определение активности диастазы» (DIN 10750:2006 «Analysis of honey — Determination of diastase activity») (аутентичный перевод, per. № 2875/DIN от 30.04.2007 г.)

  • 5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок — в ежемесячно издаваемых информационных указателях «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет

© Стандартинформ, 2013

Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

Содержание
  • 1 Область применения

  • 2 Нормативные ссылки

  • 3 Термины и определения

  • 4 Требования безопасности проведения работ

  • 5 Условия измерений

  • 6 Метод определения активности сахаразы

  • 7 Метод определения диастазного числа

  • 8 Метод определения диастазного числа по Шаде

  • 9 Метод определения диастазного числа лоФадебазу

  • 10 Метод определения нерастворимого вещества

ГОСТ Р 54386—2011

НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

МЕД

Методы определения активности сахаразы, диастазного числа, нерастворимого вещества

Honey. Methods for determination of succharase activity, diastase value, insoluble matter

Дата введения — 2013—01—01

1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на мед и устанавливает:

  • — метод определения активности сахаразы в диапазоне измерений от 20,0 до 200,0 ед./кг;

  • • метод определения диастазного числа по Фадебазу в диапазоне измерений от 0 до 40.0 ед. Шаде;

  • • метод определения массовой доли нерастворимых веществ в диапазоне измерений от 0 % до 0,500%.

Требования к контролируемым показателям установлены в ГОСТ 19792, ГОСТ Р 52451.

2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ Р ИСО 5725-1—2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения

ГОСТ Р ИСО 5725-6—2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике

ГОСТ Р 51568—99 (ИСО 3310-1—90) Сита лабораторные из металлической проволочной сетки. Технические условия

ГОСТ Р 52001—2002 Пчеловодство. Термины и определения

ГОСТ Р 52451—2005 Меды монофлорные. Технические условия

ГОСТ Р 53126—2008 Мед. Рефрактометрический метод определения воды

ГОСТ Р 53228—2008 Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания

ГОСТ 12.1.004—91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования

ГОСТ 12.1.007—76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ 12.1.019—79 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты

ГОСТ 12.4.009—83 Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание

ГОСТ 12.4.021—75 Система стандартов безопасности труда. Системы вентиляционные. Общие требования

ГОСТ 61—75 Реактивы. Кислота уксусная. Технические условия

ГОСТ 199—78 Реактивы. Натрий уксуснокислый 3-водный. Технические условия

Издание официальное

ГОСТ 1770—74 (ИСО 1042—83, ИСО 4788—80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 3118—77 Реактивы. Кислота соляная. Технические условия

ГОСТ 4159—79 Реактивы. Йод. Технические условия

ГОСТ 4198—75 Реактивы. Калий фосфорнокислый однозамещенный. Технические условия

ГОСТ 4232—74 Реактивы. Калий йодистый. Технические условия

ГОСТ 4233—77 Реактивы. Натрий хлористый. Технические условия

ГОСТ 4328—77 Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия

ГОСТ 6709—72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 10163—75 Реактивы. Крахмал растворимый. Технические условия

ГОСТ 11773—76 Реактивы. Натрий фосфорнокислый двузамещенный. Технические условия

ГОСТ 14919—83 Электроплиты, электроплитки и жарочные электрошкафы бытовые. Общие технические условия

ГОСТ 19792—2001 Мед натуральный. Технические условия

ГОСТ 21241—89 Пинцеты медицинские. Общие технические требования и методы испытаний

ГОСТ 25336—82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 28498—90 Термометры жидкостные стеклянные. Общие технические требования. Методы испытаний

ГОСТ 29227—91 (ИСО 835-1—81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования

ГОСТ 29251—91 (ИСО 385-1—84) Посуда лабораторная стеклянная. Бюретки. Часть 1. Общие требования

Примечание — При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодно издаваемому информационному указателю «Национальные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим ежемесячно издаваемым информационным указателям, опубликованным в текущем году Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3 Термины и определения

В настоящем стандарте применены термины по ГОСТ Р 52001, ГОСТ Р ИСО 5725-1.

4 Требования безопасности проведения работ

При проведении измерений необходимо соблюдать требования пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, требования безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, инструкцию по эксплуатации жидкостного хроматографа, иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009.

5 Условия измерений

Помещение лаборатории должно соответствовать санитарным правилам проектирования, оборудования, эксплуатации и содержания производственных и лабораторных помещений, предназначенных для проведения работ с веществами 1-го и 2-го классов опасности, органическими растворителями. Аналитическая лаборатория должна быть оснащена вентиляционной системой согласно ГОСТ 12. 4.021.

При выполнении измерений следует соблюдать следующие условия: температура окружающей среды…………………от 15 °C до 25 ФС;

относительная влажность воздуха при температуре 25 °C .. не более 80 %: атмосферное давление………………………..от 97 до 101 кПа (730—760 мм рт. ст.).

6 Метод определения активности сахаразы

Пробу меда массой не менее 200 г отбирают по ГОСТ 19792.

Закристаллизованный мед размягчают в термостате или на термостатируемой водяной бане по

Мед с примесями процеживают при комнатной температуре через сито по 6.3.6. Закристаллизованный мед продавливают через сито шпателем по 6.3.8. Крупные механические частицы удаляют вручную.

Сотовый мед (без перговых ячеек) отделяют от сот при помощи сита без нагревания.

Пробу интенсивно и тщательно перемешивают не менее 3 мин. При гомогенизации следует обратить внимание на то, чтобы меньше воздуха попало в мед.

Метод основан на фотометрическом определении количества продукта расщепления субстрата в условиях проведения ферментативной реакции и последующем вычислении активности сахаразы (а-глюкозидазы. РСу по ГОСТ 4198 массой (11.66 ± 0,01) г и натрий фосфорнокислый двузамещенный (Na2HPO4) по ГОСТ 11773 массой (2,04 ± 0,01) г растворяют в 3

дистиллированной воде по ГОСТ 6709 в мерной колбе вместимостью 1000 см3 по ГОСТ 1770. Объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают.

л-Нитрофенил-а-О-глюкопиранозид по 6.3.16 массой (3.0126 ± 0,0001) г растворяют в буферном растворе, приготовленном по 6.4.1, нагревая до температуры не выше (60 ± 1) °C. в мерной колбе вместимостью 500 см3 по ГОСТ 1770. Раствор быстро охлаждают до комнатной температуры и доводят до метки буферным раствором, перемешивают.

Раствор хранят в склянке из темного стекла при температуре 4 °C в течение 30 сут.

Соляную кислоту по ГОСТ 3118 объемом 270 см3 осторожно, при перемешивании, приливают к 300 см3 дистиллированной воды по ГОСТ 6709 в мерную колбу вместимостью 1000 см3 по ГОСТ 1770. Объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают.

7рос-(гидроксиметил)аминометан по 6.3.17 массой (36,34 ± 0,01) г растворяют в дистиллированной воде по ГОСТ 6709 в мерной колбе вместимостью 100 см3 по ГОСТ 1770. Добавляют раствор соляной кислоты молярной концентрацией 3 моль/дм3, приготовленный по 6.4.3, в объеме, достаточном для установления значения pH раствора (9.5 ± 0,1) ед. pH (по pH-метру по 6.3.5). Объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают.

В стакан вместимостью 50 см3 по ГОСТ 25336 взвешивают навеску меда, подготовленного по 6.1, массой (4,00 ± 0,01) г. К навеске приливают 5 см3 буферного раствора, приготовленного по 6.4.1, мед тщательно растирают стеклянной палочкой и переносят жидкость в мерную колбу вместимостью 25 см3 по ГОСТ 1770. Обработку пробы повторяют два-три раза до полного растворения меда, затем стакан несколько раз обмывают небольшими порциями буферного раствора, которые также сливают в мерную колбу. Объем раствора в колбе доводят до метки буферным раствором, перемешивают. (3)

От 0,101 до 1,007 включ.

0.02D

6.5.3 При анализе каждой пробы выполняют два параллельных определения.

S = 794,70 — иг1, (1)

где 794,7 — коэффициент, учитывающий разбавление (в пересчете на 1 кг меда), объем рабочего рас* твора, пересчет времени реакции на 1 мин, молярную концентрацию продукта разложения субстрата;

О — оптическая плотность рабочего раствора по 6.5.2;

т — масса навески меда, г.

6 .6.2 Значение инвертазного числа IN вычисляют по формуле

IN = 21,640, (2)

где 21,64 — коэффициент линейной зависимости инвертазного числа от оптической плотности;

О — оптическая плотность рабочего раствора по 6.5.2.

  • 6.6.3 За результаты испытаний принимают среднеарифметические значения двух параллельных определений активности сахаразы и инвертазного числа, полученных в условиях повторяемости, если абсолютные расхождения между параллельными определениями не превышают пределов повторяемости г по ГОСТ Р ИСО 5725-6. Значения пределов повторяемости г приведены в таблицах 2, 3.

Таблица 2

Диапазон измерений активности сахаразы S, ед./кг

Предел повторяемости г, при Р = 0,95, ед./кг

Критический диапазон при трех измерениях С*0.§б<3>- ед /кг

Предел воспроизводимости R, при Р- 0,95, ед./кг

Границы абсолютной погрешности ± л, при Р = 0,95, ед./кг

От 20.0 до 200,0 включ.

0,07 S

0.10S

0.13S

0.12S

Таблица 3

Диапазон измерений инвертазного числа IN

Предел повторяемости

г. при Р = 0.95

Критический диапазон при трех измерениях CRq 95(3)

Предел воспроизводимости R, при Р = 0.95

Границы абсолютной погрешности t Л, при Я = 0,95

От 2,2 до 21,8 включ

0. — /Л/мин) результатов трех определений не превышают значений критических диапазонов CRQ 95(3), то в качестве окончательных результатов принимают среднеарифметические значения результатов трех определений активности сахаразы и инвертного числа. Значения критических диапазонов С/?095(3) приведены в таблицах 2, 3.

При невыполнении этого условия проводят повторные испытания.

  • 6.6.4 Абсолютные расхождения между результатами испытаний активности сахаразы, инвертазного числа, полученными в двух лабораториях в условиях воспроизводимости, не должны превышать пределов воспроизводимости R по ГОСТ Р ИСО 5725-6. При выполнении этого условия приемлемы оба результата испытания каждого показателя и в качестве окончательного результата может быть использовано их среднеарифметическое значение. Значения пределов воспроизводимости R приведены в таблицах 2, 3.

  • 6.6.5 Результаты испытаний, округленные до первого десятичного знака, в документах, предусматривающих их использование, представляют в виде:

(S ± Л), ед. /кг, при Р = 0,95,

где S — среднеарифметическое значение результатов определений активности сахаразы по 6.6.3, ед./кг;

± Д — границы абсолютной погрешности результатов определений по 6.7, ед./кг.

(IN ± Л), при Р = 0,95,

где in — среднеарифметическое значение результатов определений инвертазного числа по 6.6.3;

± д — границы абсолютной погрешности результатов определений по 6.7.

Границы абсолютной погрешности результатов испытаний, получаемых согласно данному методу, ± Л, при доверительной вероятности Р — 0,95, приведены в таблицах 2, 3.

7 Метод определения диастазного числа

Метод основан на колориметрическом определении количества субстрата, расщепленного в условиях проведения ферментативной реакции, и последующем вычислении диастазного числа.

Диастазное число характеризует активность амилолитических ферментов меда.

Диастазное число выражают количеством кубических сантиметров раствора крахмала массовой долей 1 %, которое разлагается за 1 ч амилолитическими ферментами, содержащимися в 1 г безводного вещества меда.

1 см3 раствора крахмала массовой долей 1 % соответствует 1 ед. активности.

Метод применяется при возникновении разногласий.

  • 7.3 Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы

    • 7.3.1 Колориметр фотоэлектрический, снабженный светофильтром с максимумом пропускания при длине волны 590 нм и кюветами с четырьмя прозрачными стенками и длиной оптического пути 10 мм.

    • 7.3.2 Весы по ГОСТ Р 53228 высокого класса точности с пределами допускаемой абсолютной погрешности не более ± 0,1 мг.

    • 7.3.3 Термометр ртутный стеклянный лабораторный с диапазоном значений от 0 ”С до 100 °C и ценой деления шкалы 1 °C по ГОСТ 28498.

    • 7.3.4 Термостат, водяная баня или другое устройство, позволяющее проводить равномерный нагрев до температуры 40 °C.

    • 7.3.5 рН-метр/иономер с пределами допускаемой основной абсолютной погрешности прибора при преобразовании измеренного значения ЭДС в рХ (pH) 10,02 ед. рХ (pH).

    • 7.3.6 Сито из нержавеющей стали, диаметр отверстий 0,5 мм по ГОСТ Р 51568.

    • 7.3.7 Секундомер механический СОСпр-26-2-000.

    • 7.3.8 Шпатель лабораторный ШЛ.

    • 7.3.9 Палочки стеклянные лабораторные оплавленные длиной от 15 до 20 см.

    • 7.3.10 Стаканы В 1-50 ТС по ГОСТ 25336.

    • 7.3.11 Цилиндры мерные 1-50(100)-2 по ГОСТ 1770.

    • 7.3.12 Колбы мерные 1(2)-50(100)-2(ПМ) по ГОСТ 1770.

    • 7.3.13 Колбы конические Кн-1(2,3)-250-29/32(34) ТС по ГОСТ 25336.

    • 7.3.14 Пробирки П-2-20-14/23 ХС по ГОСТ 1770.

    • 7.3.15 Пипетки 1-2-1-1 по ГОСТ 29227.

    • 7.3.16 Бюретки 1-2-25(50)-0,1 по ГОСТ 29251.

    • 7.3.17 Натрий хлористый по ГОСТ 4233, ч. д. а., раствор молярной концентрацией 0.1 моль/дм3.

    • 7.3.18 Натрий уксуснокислый 3-водный по ГОСТ 199, х.ч., раствор молярной концентрацией 0,2 моль/дм3.

    • 7.3. 19 Кислота уксусная по ГОСТ 61, х.ч.. ледяная, раствор молярной концентрацией 0,2 моль/дм3.

    • 7.3.20 Крахмал растворимый по ГОСТ 10163, ч.д.а.

    • 7.3.21 Йод по ГОСТ 4159, ч.д.а., раствор молярной концентрацией 0,015 моль/дм3.

    • 7.3.22 2,4-динитрофенол, ч. д. а.

    • 7.3.23 Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Допускается использование других средств измерений, вспомогательного оборудования по метрологическим, техническим характеристикам не хуже указанных в настоящем стандарте.

Допускается использование других реактивов по качеству и чистоте не ниже вышеуказанных.

(0,250 ± 0,001) г крахмала по ГОСТ 10163 растворяют в 10—15 см3 дистиллированной воды по ГОСТ 6709 в стакане вместимостью 50 см3 по ГОСТ 25336. Раствор осторожно количественно переносят в коническую колбу вместимостью 250 см3 по ГОСТ 25336 с 50 см3 кипящей дистиллированной воды. Кипячение смеси продолжают в течение 2—3 мин. Колбу охлаждают до температуры (20 ± 1) °C. Содержимое количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3 по ГОСТ 1770. Объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают.

Смешивают восемь объемных частей раствора крахмала, приготовленного по 7.4.2, пять объемных частей ацетатного буферного раствора, приготовленного по 7.4.1, и одну объемную часть раствора хлористого натрия по 7.3.17. Полученную смесь тщательно перемешивают.

Реактив хранят при комнатной температуре не более 3 мес.

(5.00 ± 0,01) г меда, подготовленного по 6.1, растворяют в 15—20 см3 дистиллированной воды по ГОСТ 6709 в стакане вместимостью 50 см3 по ГОСТ 25336. Раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50 см3 по ГОСТ 1770. Объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают.

Раствор готовят непосредственно перед проведением испытания.

Определение массовой доли воды в меде, подготовленном по 6. исл — соответствующая оптическая плотность испытуемого раствора;

I/V — массовая доля воды в меде, найденная по 7.4.5, %.

  • 7.6.2 За результат испытаний принимают среднеарифметическое значение двух параллельных определений диастазного числа, полученных в условиях повторяемости, если абсолютное расхождение между параллельными определениями не превышает предела повторяемости г по ГОСТ Р ИСО 5725-6. Значение предела повторяемости г приведено в таблице 4.

Таблица 4

Диапазон измерений диастазного числа X, ед. Готе

Предел повторяемости г, при Р = 0,95, ед. Готе

Критический диапазон при трех измерениях СЯ095(3). ед. Готе

Предел воспроизводимости R. при Р = 0.95, ед. Готе

Границы абсолютной погрешности ± д, при Р « 0,95. ед. Готе

От 3,0 до 20,0 включ.

0.07Х

0,1 ОХ

0.15Х

0.11Х

Св. макс»\|им) результатов трех определений не превышает значения критического диапазона CR0dS(3). то в качестве окончательного результата принимают среднеарифметическое значение результатов трех определений диастазного числа. Значение критического диапазона CR0 9S(3) приведено в таблице 4.

При невыполнении этого условия проводят повторные испытания.

  • 7.6.3 Абсолютное расхождение между результатами испытаний диастазного числа, полученными в двух лабораториях в условиях воспроизводимости, не должно превышать предела воспроизводимости R по ГОСТ Р ИСО 5725-6. При выполнении этого условия приемлемы оба результата испытания и в качестве окончательного результата может быть использовано их среднеарифметическое значение. Значение предела воспроизводимости R приведено в таблице 4.

  • 7.6.4 Результат испытаний, округленный до первого десятичного знака, в документах, предусматривающих его использование, представляют в виде:

(Х± Л), ед. Готе, при Р= 0,95,

гдех — среднеарифметическое значение результатов определений диастазного числа по 7.6.2, ед. Готе;

± Л — границы абсолютной погрешности результатов определений по 7.7, ед. Готе.

Границы абсолютной погрешности результатов испытаний, получаемых согласно данному методу, ± д, при доверительной вероятности Р = 0,95, приведены в таблице 4.

8 Метод определения диастазного числа по Шаде

Метод основан на колориметрическом определении времени окончания ферментативной реакции расщепления заданного количества субстрата по достижению раствором оптической плотности, соответствующей активности диастазы меда, и последующем вычислении диастазного числа.

Единица диастазной активности определяется количеством ферментов, содержащихся в 1 г меда и расщепляющих 0,01 г крахмала за 1 ч при температуре 40 °C.

Диастазное число характеризует активность амилолитических ферментов меда.

  • 8.3 Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы

    • 8.3.1 Спектрофотометр или колориметр фотоэлектрический, снабженный светофильтром с максимумом пропускания при длине волны 660 нм и кюветами с четырьмя прозрачными стенками и длиной оптического пути 10 мм.

    • 8.3.2 Весы по ГОСТ Р 53228 высокого класса точности с пределами допускаемой абсолютной погрешности не более ± 0,1 мг.

    • 8.3.3 Термометр ртутный стеклянный лабораторный с диапазоном значений от 0 °C до 100 °C и ценой деления шкалы 1 °C по ГОСТ 28498.

    • 8.3.4 Термостат, водяная баня или другое устройство, позволяющее производить равномерный нагрев до температуры 40 °C.

    • 8.3.5 рН-метр/иономер с пределами допускаемой основной абсолютной погрешности прибора при преобразовании измеренного значения ЭДС в рХ (pH) ± 0,02 ед. рХ (pH).

    • 8.3.6 Сито из нержавеющей стали, диаметр отверстий 0,5 мм по ГОСТ Р 51568.

    • 8.3.7 Секундомер механический СОСпр-26-2-000.

    • 8.3.8 Шпатель лабораторный ШЛ.

    • 8.3.9 Шкаф сушильный любого типа, обеспечивающий температуру нагрева до 250 °C с пределами абсолютной погрешности ± 2 ФС.

    • 8.3.10 Электроплитка по ГОСТ 14919.

    • 8.3.11 Палочки стеклянные лабораторные оплавленные длиной от 15 до 20 см.

    • 8.3.12 Эксикатор по ГОСТ 25336.

    • 8.3.13 Стаканы В 1-50 ТС по ГОСТ 25336.

    • 8.3.14 Цилиндры мерные 1-100-2 по ГОСТ 1770.

    • 8.3.15 Колбы мерные 1(2)-50(100,250,500)-2(ПМ) по ГОСТ 1770.

    • 8.3.16 Колбы конические Кн-1(2,3)-25(50,250)-29/32(34) ТС по ГОСТ 25336.

    • 8.3.17 Пробирки П-2-20-14/23 ХС по ГОСТ 1770.

    • 8.3.18 Стаканчики для взвешивания СН-45/13(60/14) по ГОСТ 25336.

    • 8.3.19 Пипетки 1-2-1-1(2,5,10,25) по ГОСТ 29227.

    • 8.3.20 Натрий хлористый по ГОСТ 4233, х.ч.

    • 8.3.21 Натрий уксуснокислый 3-водный по ГОСТ 199, ч.д.а.

    • 8.3.22 Кислота уксусная по ГОСТ 61. х.ч. ледяная.

    • 8.3.23 Крахмал растворимый по ГОСТ 10163, ч.д.а.

    • 8.3.24 Йод по ГОСТ 4159, ч.д.а., дважды возогнанный.

    • 8.3.25 Калий йодистый по ГОСТ 4232, х.ч.

    • 8.3.26 Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Допускается использование других средств измерений, вспомогательного оборудования по метрологическим, техническим характеристикам не хуже указанных в настоящем стандарте.

Допускается использование других реактивов по качеству и чистоте не ниже вышеуказанных.

Хлористый натрий по ГОСТ 4233 массой (2,90 ± 0,01) г растворяют в дистиллированной воде по ГОСТ 6709 в мерной колбе вместимостью 100 см3 по ГОСТ 1770. Объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают.

Натрий уксуснокислый 3-водный по ГОСТ 199 массой (43,50 ± 0,01) г растворяют в дистиллированной воде по ГОСТ 6709 в мерной колбе вместимостью 250 см3 по ГОСТ 1770. Добавляют 5 см3 ледяной уксусной кислоты по ГОСТ 61 для установления значения pH раствора (5,3 ± 0,1) ед. pH по рН-метру по 8.3.5. Объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают.

(3,0000 ± 0,0001) г растворимого крахмала по ГОСТ 10163 распределяют равномерным тонким слоем по дну бюксы по ГОСТ 25336, предварительно высушенной с крышкой до постоянной массы при температуре (130 ± 2) “С (результат взвешивания в граммах записывают с точностью до четвертого десятичного знака). Крахмал сушат при температуре (130 ± 2) °C в течение 90 мин, охлаждают в эксикаторе по ГОСТ 25336 и взвешивают (результат взвешивания в граммах записывают с точностью до четвертого десятичного знака). Высушивание повторяют по 30 мин до достижения постоянной массы.

Примечание —Для приготовления раствора необходимо использовать только растворимый крахмал, образующий при процедуре калибровки (см. 8 4.7) прозрачный раствор голубого цвета с оптической плотностью в диапазоне от 0,745 до 0,770.

Высушенный крахмал, подготовленный по 8.4.3.1, массой (2,000 1 0,001) г помещают в коническую колбу вместимостью 250 см3 по ГОСТ 25336. Добавляют 90 см3 дистиллированной воды по ГОСТ 6709. перемешивают. Содержимое колбы доводят до кипения и кипятят в течение 3 мин. Горячий раствор переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3 по ГОСТ 1770, быстро охлаждают под струей холодной воды до комнатной температуры. Объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают.

Раствор следует использовать в день приготовления.

В коническую колбу вместимостью 25 см3 по ГОСТ 25336 помещают 10 см3 дистиллированной воды по ГОСТ 6709 и 5 см3 раствора крахмала, приготовленного no 8.4.3.2. Смесь перемешивают.

Раствор готовят непосредственно перед проведением испытания.

Йод, дважды возогнанный, по ГОСТ 4159 массой (11,00 ± 0,01) г и калий йодистый по ГОСТ 4232 массой (22,00 ± 0,01) г растворяют в 30—40 см3 дистиллированной воды по ГОСТ 6709 в мерной колбе вместимостью 500 см3 по ГОСТ 1770. Объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают.

Раствор хранят в склянке из темного стекла при комнатной температуре не более 12 мес.

Калий йодистый по ГОСТ 4232 массой (10,00 ± 0,01) г растворяют в дистиллированной воде по ГОСТ 6709 в мерной колбе вместимостью 250 см3 по ГОСТ 1770. Добавляют 1 см3 исходного раствора йода, приготовленного по 8.4.4. Объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают.

Свежеприготовленный раствор следует использовать в течение 24 ч, оберегая от попадания воздуха, быстро и плотно закрывать емкость после отбора необходимого количества раствора.

Последовательно таким же образом поступают с остальными колбами до тех пор, пока не будет найден раствор с оптической плотностью от 0,745 до 0,770. Соответствующий объем дистиллированной воды следует считать стандартным для всех последующих испытаний, проводимых с раствором крахмала.

Примечание — Качество и чистота крахмала могут бьггь различными и зависят от партии и производителя Объем дистиллированной воды следует устанавливать для каждой упаковки реактива Время между добавлением рабочего раствора крахмала и определением оптической плотности должно быть, по возможности, одинаковым как при калибровке раствора крахмала, так и при проведении испытания пробы меда.

(10,00 ± 0,01) г меда, подготовленного по 6.1, растворяют в 15 см3 дистиллированной воды по ГОСТ 6709 и 5 см3 ацетатного буферного раствора, приготовленного по 8.4.2, в стакане вместимостью 50 см3 по ГОСТ 25336. Раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50 см3 по ГОСТ 1770, добавляют 3 см3 раствора хлористого натрия, приготовленного по 8.4.1. Объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают.

Раствор готовят непосредственно перед проведением испытания.

Определяют значение оптической плотности контрольного раствора (Ох) по 8.5.1, заменив объем раствора крахмала на соответствующий объем дистиллированной воды.

8.6 Обработка результатов

D = Dt — Dx, (4)

где Dt — оптическая плотность каждого раствора пробы с определенным промежутком времени выдерживания;

Dx — соответствующая оптическая плотность каждого контрольного раствора.

  • 8.6.2 Строят градуировочный график, откладывая на оси ординат значение оптической плотности каждого раствора (О), а на оси абсцисс — соответствующее этому значению время реакции (0 в минутах. Градуировочный график должен быть линейным в заданном диапазоне.

  • 8.6.3 Для каждой пробы по градуировочному графику находят значение времени реакции (Гх), соответствующее значению оптической плотности D = 0,301.

  • 8.6.4 Значение диастазного числа X, ед. Шаде, вычисляют по формуле

х = зоог;1. (5)

где 300 — коэффициент пересчета;

tx — время реакции, найденное по 8.6.3, мин.

  • 8.6.5 За результат испытаний принимают среднеарифметическое значение двух параллельных определений диастазного числа, полученных в условиях повторяемости, если абсолютное расхождение меящу параллельными определениями не превышает предела повторяемости г по ГОСТ Р ИСО 5725-6. Значение предела повторяемости г приведено в таблице 6.

При превышении предела повторяемости г целесообразно провести дополнительное определение значения диастазного числа и получить еще один результат. Если при этом абсолютное расхождение (\йкс”\|ин) результатов трех определений не превышает значения критического диапазона СТ?095(3), то в качестве окончательного результата принимают среднеарифметическое значение результатов трех определений диастазного числа. Значение критического диапазона CRq 95(3) приведено в таблице 6.

При невыполнении этого условия проводят повторные испытания.

Таблица 6

Диапазон измерений диастазного числа X. ед Шаде

Предел повторяемости г, при Р — 0,95, ед. Шаде

Критический диапазон при трех измерениях CRos6<3>- еД ШаДе

Предел воспроизводимости Р, при Р — 0,95, ед Шаде

Границы абсолютной погрешности t Л, при Р — 0.95. ед. Шаде

От 0 до 40,0 в ключ

0,05Х

0,06 X

0.15Х

0.11Х

  • 8.6.6 Абсолютное расхождение между результатами испытаний диастазного числа, полученными в двух лабораториях в условиях воспроизводимости, не должно превышать предела воспроизводимости R по ГОСТ Р ИСО 5725-6. При выполнении этого условия приемлемы оба результата испытания и в качестве окончательного результата может быть использовано их среднеарифметическое значение. Значение предела воспроизводимости R приведено в таблице 6.

  • 8.6.7 Результат испытаний, округленный до первого десятичного знака, в документах, предусматривающих его использование, представляют в виде:

(X ± Д), ед. Шаде, при Р = 0.95,

где X — среднеарифметическое значение результатов определений диастазного числа по 8.6.5, ед. Шаде;

± д — границы абсолютной погрешности результатов определений по 8.7, ед. Шаде.

Границы абсолютной погрешности результатов испытаний, получаемых согласно данному методу, ± д, при доверительной вероятности Р = 0,95, приведены в таблице 6.

9 Метод определения диастазного числа по Фадебазу

Метод основан на фотометрическом определении оптической плотности раствора меда, окрашенного в голубой цвет продуктами ферментативной реакции расщепления определенного количества субстрата (таблетки теста «Фадебаз» на амилазу), прямо пропорциональной активности диастазы меда, и последующем вычислении диастазного числа.

Единица диастазной активности определяется количеством ферментов, содержащихся в 1 г меда и расщепляющих 0,01 г крахмала за 1 ч при температуре 40 °C.

Диастазное число характеризует активность амилолитических ферментов меда.

  • 9.3 Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы

    • 9.3.1 Спектрофотометр или колориметр фотоэлектрический, снабженный светофильтром с максимумом пропускания при длине волны 620 нм и кюветами с четырьмя прозрачными стенками и длиной оптического пути 10 мм.

    • 9.3.2 Весы по ГОСТ Р 53228 среднего класса точности с пределами допускаемой абсолютной погрешности не более ± 0,01 г.

    • 9.3.3 Термометр ртутный стеклянный лабораторный с диапазоном значений от 0 °C до 100 °C и ценой деления шкалы 1 °C по ГОСТ 28498.

    • 9.3.4 Термостат, водяная баня или другое устройство, позволяющее проводить равномерный нагрев до температуры 40 °C.

    • 9.3.5 рН-метр/иономер с пределами допускаемой основной абсолютной погрешности прибора при преобразовании измеренного значения ЭДС в рХ (pH) ± 0,02 ед. рХ (pH).

    • 9.3.6 Сито из нержавеющей стали, диаметр отверстий 0,5 мм по ГОСТ Р 51568.

    • 9.3.7 Секундомер механический СОСпр-26-2-000.

    • 9.3.8 Шпатель лабораторный ШЛ.

    • 9.3.9 Микросмеситель ППЭ-3 по НД.

    • 9.3.10 Палочки стеклянные лабораторные оплавленные длиной от 15 до 20 см.

    • 9.3.11 Пинцет по ГОСТ 21241.

    • 9.3.12 Фильтры обеззоленные, марка «синяя лента».

    • 9.3.13 Воронки В-56-80 ХС по ГОСТ 25336.

    • 9.3.14 Стаканы В 1-50 ТС по ГОСТ 25336.

    • 9.3.15 Колбы мерные 1(2)-100(1000)-2(ПМ) по ГОСТ 1770.

    • 9.3.16 Пробирки П2Т-10 ТС по ГОСТ 25336.

    • 9.3.17 Пипетки 1-2-1-1(2,5,10) по ГОСТ 29227.

    • 9.3.18 Натрия гидроокись по ГОСТ 4328. х.ч.

    • 9.3.19 Натрий уксуснокислый 3-водный по ГОСТ 199, ч.д.а.

    • 9.3.20 Кислота уксусная по ГОСТ 61. х.ч. ледяная.

    • 9.3.21 Таблетки теста «Фадебаз» на амилазу с содержанием крахмала 45,0 мг.

    • 9.3.22 Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Допускается использование других средств измерений, вспомогательного оборудования по метрологическим. техническим характеристикам не хуже указанных в настоящем стандарте.

Допускается использование других реактивов по качеству и чистоте не ниже вышеуказанных.

Натрий гидроокись по ГОСТ 4328 массой (20,00 ± 0,01) г растворяют в дистиллированной воде по ГОСТ 6709 в мерной колбе вместимостью 1000 см3 по ГОСТ 1770. Объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают.

Натрий уксуснокислый 3-водный по ГОСТ 199 массой (13,60 ± 0,01) г растворяют в дистиллированной воде по ГОСТ 6709 в мерной колбе вместимостью 1000 см3 по ГОСТ 1770. Добавляют 1—2 см3 ледяной уксусной кислоты по ГОСТ 61 для установления значения pH раствора (5,2 ± 0.1) ед. pH по pH-метру по 9.3.5. Объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают.

В стакан вместимостью 50 см3 по ГОСТ 25336 взвешивают навеску меда, подготовленного по 6.1, массой (1,00 ±0,01) г. К навеске приливают 10 см3 ацетатного буферного раствора, приготовленного по 9.4.2, мед тщательно растирают стеклянной палочкой и переносят жидкость в мерную колбу вместимостью 100 см3 по ГОСТ 1770. Обработку пробы повторяют два-три раза до полного растворения меда, затем стакан несколько раз обмывают небольшими порциями буферного раствора, которые также сливают в мерную колбу. Объем раствора в колбе доводят до метки буферным раствором, перемешивают.

Раствор готовят в течение 1 ч непосредственно перед проведением испытания.

D = Dt — Dx, (6)

где Dt — оптическая плотность рабочего раствора;

Dx — оптическая плотность холостого раствора.

  • 9.6.2 Если найденное по формуле (6) значение D > 1,0, то для приготовления раствора меда по

X = 28.20D ■ Q + 2,64, (7)

где 28.20 и 2,64 — коэффициенты линейной зависимости;

D — оптическая плотность пробы меда по 9.6.1;

Q — фактор разбавления раствора меда по 9.6.2.

  • 9.6.4 За результат испытаний принимают среднеарифметическое значение двух параллельных определений диастазного числа, полученных в условиях повторяемости, если абсолютное расхождение между параллельными определениями не превышает предела повторяемости г по ГОСТ Р ИСО 5725-6. Значение предела повторяемости г приведено в таблице 7.

Таблица 7

Диапазон измерений диастазного числа X. ед. Шаде

Предел повторяемости г при Р = 0.95. ед Шаде

Критический диапазон при трех измерениях СЯ095(3),ед Шаде

Предел воспроизводи-мости R при Р = 0.9S, ед Шаде

Границы абсолютной погрешности ± л при Р — 0.95, ед Шаде

От Одо 40,0 включ

0.05Х

0,06Х

0,12Х

0.15Х

При превышении предела повторяемости г целесообразно провести дополнительное определение значения диастазного числа и получить еще один результат. Если при этом абсолютное расхождение (Хмаксмин) результатов трех определений не превышает значения критического диапазона СЯ095(3), то в качестве окончательного результата принимают среднеарифметическое значение результатов трех определений диастазного числа. Значение критического диапазона CR0 95(3) приведено в таблице 7.

При невыполнении этого условия проводят повторные испытания.

  • 9.6.5 Абсолютное расхождение между результатами испытаний диастазного числа, полученными в двух лабораториях в условиях воспроизводимости, не должно превышать предела воспроизводимости R по ГОСТ Р ИСО 5725-6. При выполнении этого условия приемлемы оба результата испытания, и в качестве окончательного результата может быть использовано их среднеарифметическое значение. Значение предела воспроизводимости R приведено в таблице 7.

  • 9.6.6 Результат испытаний, округленный до первого десятичного знака, в документах, предусматривающих его использование, представляют в виде:

(X ± Д), ед. Шаде. при Р = 0.95.

где X — среднеарифметическое значение результатов определений диастазного числа по 9.6.4, ед. Шаде;

± Д — границы абсолютной погрешности результатов определений по 9.7, ед. Шаде.

9.7 Характеристика погрешности испытаний

Границы абсолютной погрешности результатов испытаний, получаемых согласно данному методу, ± д. при доверительной вероятности Р = 0,95, приведены в таблице 7.

10 Метод определения нерастворимого вещества

Метод основан на гравиметрическом определении массовой доли нерастворимых в воде веществ меда.

  • 10.3 Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы

    • 10.3.1 Весы по ГОСТ Р 53228 высокого класса точности с пределами допускаемой абсолютной погрешности не более ±0,1 мг.

    • 10.3.2 Термометр ртутный стеклянный лабораторный с диапазоном значений от 0 °C до 100 °C и ценой деления шкалы 1 °C по ГОСТ 28498.

    • 10.3.3 Термостат, водяная баня или другое устройство, позволяющее производить равномерный нагрев до температуры 80 °C.

    • 10.3.4 Сито из нержавеющей стали, диаметр отверстий 0.5 мм по ГОСТ Р 51568.

    • 10.3.5 Шкаф сушильный любого типа, обеспечивающий температуру нагрева до 250 °C с пределами абсолютной погрешности ± 2 °C.

    • 10.3.6 Секундомер механический СОСпр-26-2-000.

    • 10.3.7 Шпатель лабораторный ШЛ.

    • 10.3.8 Тигель типа ТФ с фильтром класса ПОР-40 по ГОСТ 25336.

    • 10.3.9 Палочки стеклянные лабораторные оплавленные длиной от 15 до 20 см.

    • 10.3.10 Эксикатор по ГОСТ 25336.

    • 10.3.11 Стаканы В 1-500 ТС по ГОСТ 25336.

    • 10.3.12 Цилиндры мерные 1-500-2 по ГОСТ 1770.

    • 10.3.13 Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Допускается использование других средств измерений, вспомогательного оборудования по метрологическим, техническим характеристикам не хуже указанных в настоящем стандарте.

Допускается использование других реактивов по качеству и чистоте не ниже вышеуказанных.

В стакан вместимостью 500 см3 по ГОСТ 25336 помещают навеску меда, подготовленного по 6.1, массой (20,0000 ±0,0001) г. К навеске приливают 200 см3 дистиллированной воды по ГОСТ 6709, нагретой до температуры не выше (80 ± 1) °C. Пробу тщательно растирают стеклянной палочкой до полного растворения меда, раствор перемешивают.

X = Ю0(т3 — т2) • (8)

где т1 — масса навески меда, г;

П72 — масса высушенного фильтра до проведения испытания, г;

т3 — масса высушенного фильтра после проведения испытания, г.

  • 10.6.2 За результат испытаний принимают среднеарифметическое значение двух параллельных определений массовой доли нерастворимых веществ меда, полученных в условиях повторяемости, если абсолютное расхождение между параллельными определениями не превышает предела повторяемости г по ГОСТ Р ИСО 5725-6. Значение предела повторяемости г приведено в таблице 8.

Таблица 8

Диапазон измерений массовой доли нерастворимых веществ меда X. %

Предел повторяемости при Р = 0,95, г.%

Критический диапазон при трех измерениях СЯо -йР), %

Предел воспроизводимости при Р = 0.95,

Границы абсолютной погрешности при Р= 0,95, t А, %

От 0 до 0,500 включ.

0.07Х

0.08Х

0.14Х

0.10Х

При превышении предела повторяемости г целесообразно провести дополнительное определение значения массовой доли нерастворимых веществ меда и получить еще один результат. Если при этом абсолютное расхождение (Хмакс — Хмин) результатов трех определений не превышает значения критического диапазона CR095(3), то в качестве окончательного результата принимают среднеарифметическое значение результатов трех определений массовой доли нерастворимых веществ меда. Значение критического диапазона СЯ0 95(3) приведено в таблице 8.

При невыполнении этого условия проводят повторные испытания.

  • 10.6.3 Абсолютное расхождение мемщу результатами испытаний массовой доли нерастворимых веществ меда, полученными в двух лабораториях в условиях воспроизводимости, не должно превышать предела воспроизводимости R по ГОСТ Р ИСО 5725-6. При выполнении этого условия приемлемы оба результата испытания, и в качестве окончательного результата может быть использовано их среднеарифметическое значение. Значение предела воспроизводимости R приведено в таблице 8.

  • 10.6.4 Результат испытаний, округленный до третьего десятичного знака, в документах, предусматривающих его использование, представляют в виде:

(X ± Д), %. при Р = 0,95,

гдех — среднеарифметическое значение результатов определений массовой доли нерастворимых веществ меда по 10.6.2, %;

± д — границы абсолютной погрешности результатов определений по 10.7, %.

Границы абсолютной погрешности результатов испытаний, получаемых согласно данному методу. ±Д, при доверительной вероятности Р = 0,95, приведены в таблице 8.

УДК 638.16:006.354 С52 ОКС 67.180.10

Ключевые слова: мед. активность сахаразы, диастазное число, диастазное число по Шаде, диастазное число по Фадебазу, единица Готе, нерастворимое вещество, метрологические характеристики

Редактор Л.В. Коретникоеа

Технический редактор В.Н. Прусакова Корректор М.И. Першина Компьютерная верстка А В. Бестужевой

Сдано в набор 11.12.2012. Подписано в печать 18.02.2013. Формат 60«841/в. Гарнитура Ариал

Усп. печ. л. 2,32. Уч.-изд. л. 2,10. Тираж 180 экэ. Зак. 186.

, 123995 Москва, Гранатный пер . 4. Набрано во на ПЭВМ.

Отпечатано в филиале — тип. «Московский печатник». 105062 Москва. Лялин пер.. 6.

Диастазное число. Пчеловодство для начинающих

Диастазное число

В лабораторных условиях это число помогает определить качество меда, а одно лишь его упоминание очень заморачивает перекупщиков меда на рынке. Что за диастазное число такое?

Как вы уже знаете, мед содержит ферменты, один из наиболее активных – диастаза, которая разлагает крахмал. Активность его и определяется по диастазному числу, которое используется как показатель его натуральности. Считается, что чем оно выше, тем лучше мед. У разных сортов меда оно разное. Самое низкое – у акациевого. В среднем 6–7, и эти цифры допустимы только для него. У всех остальных от 9 до 35–40. Хотя иногда ходят невероятные истории и о цифрах за 70. Одна из основных причин, влияющих на это число, – сила пчелиной семьи. Чем больше пчел принимает участие в переработке нектара, тем и диастазы больше.

Все еще непонятно, что такое диастазное число? Хотите еще глубже разобраться в этом вопросе? Так вот, точная формулировка. Сколько миллиметров однопроцентного раствора крахмала разложится за один час диастазой, содержащейся всего в одном грамме меда, это и есть диастазное число. Не я сказал, источники сообщают!

Но не им одним определяется качество меда. Для большей точности исследований нужна приличная лаборатория. Где ее взять? А где взять деньги на все эти расходы?

Полноценный выход один – собственная пасека. Там точно пчелы вас не обманут. Свой мед в сотни раз целебнее и вкуснее того, что можно купить на рынке, а уж тем более того, что долгое время лежит на свету на прилавке какого-нибудь супермаркета. Пастеризованная субстанция в прозрачных баночках так мало напоминает мед из улья, что лучше и не разгадывать, мед ли это, или только его название.

Данный текст является ознакомительным фрагментом.

Продолжение на ЛитРес

Колориметрический метод определения диастазного числа


Метод основан на колориметрическом определении количества субстрата, расщепленного в условиях проведения ферментативной реакции, и последующем вычислении диастазного числа.

Диастазное число выражают количеством кубических сантиметров раствора крахмала массой долей 1%, которое разлагается за 1 час амилолитическими ферментами, содержащимися в 1г безводного вещества меда. 1см ³ раствора крахмала соответствует 1 единице активности.

Приготовление комбинированного реактива.Комбинированный реактив готовят из 8 объемных частей раствора крахмала, пяти объемных частей буферного раствора с 2,4- динитрофенолом и одной объемной части раствора хлористого натрия.

При приготовлении комбинированного реактива в количестве, равном или большем 1 дм3 объем соответствующих растворов отмеривают с погрешностью не более 0,5 см3.

Полученную смесь тщательно встряхивают.

Реактивы хранят при комнатной температуре не более 3 мес. Приготовление раствора меда

5г меда, взвешенного с погрешностью не более 0,01г растворяют в дистиллированной воде в мерной колбе вместимостью 50 см3.

1см3 такого раствора содержит 0,1г меда.

Приготовление раствора крахмала

0,25г крахмала взвешенного с погрешностью 0,001г размешивают в стаканчике вместимостью 50 см3 с 10-20 см3 дистиллированной воды и количественно переносят в коническую колбу, где не сильно кипит 80-90 см3 дистиллированной воды. Кипение продолжают 2-3 минуты. Колбу охлаждают до 20°С, содержимое количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3 и доводят до метки.

Проведение испытания

В сухую пробирку отмеривают из бюретки 14,0 см3 комбинированного реактива. Пробирку закрывают резиновой пробкой и помещают на 10мин в водяную баню при температуре 40°С. Затем в пробирку вносят пипеткой 1,0 см3 раствора меда. Содержимое перемешивают пятикратным перевертыванием, и пробирку вновь помещают на водяную баню, одновременно включая секундомер. Пробирку выдерживают на водяной бане в течении 15 мин при температуре (40 ± 0,02)°С.



Пипеткой отбирают 2,0 см3 реакционной смеси, которую вносят при перемешивании в мерную колбу вместимостью 50 см3, содержащую 40 см3 воды и 1 см3 раствора йода, имеющих температуру 20°С. Раствор доводят водой до метки. Колбу закрывают пробкой, содержимое хорошо перемешивают и выдерживают на водяной бане при 20°С в течение 10 мин.

Одновременно проводят контрольный опыт, заменяя раствор меда дистиллированной водой.

Оптическую плотность измеряют на фотоэлектроколориметре против воды при светофильтре с длиной волны 582 или 590 нм, используя кювету с рабочей длиной 10 нм. Колориметрируя растворы, определяют значение оптической плотности испытуемого раствора (Оисп.) и контрольного опыта (Дк)с точностью отсчета 0,001.

Обработка результатов

Диастазное число меда (Х4) в пересчете на I г безводного вещества вычисляют по формуле:

(Д к — Д исп.) х 100×80

Х4= ——— ——————,

Д к (100-W)

где Д к — оптическая плотность раствора, определенная в контрольном опыте;

Д исп. — оптическая плотность испытуемого раствора;

80 — коэффициент пересчета;

W -массовая доля воды в мёде, %.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать 0,5 ед. Готе в интервале величин менее 10 ед.

 

7.3.6. 1. Определение инвертированного сахара.Суммарное содержание в меде моносахаридов (в основ­ном глюкозы и фруктозы) принято называть инвертированным сахаром. Содержание его в меде менее 70 % сви­детельствует о фальсификации продукта сахарным си­ропом или другими веществами.

Количество инвертированного сахара определяют феррицианидным методом, основанным на окислении сахара в щелочном растворе красной кровяной соли. Индикатором служит метиленовая синь. Существует 2 метода оп­ределения инвертированного сахара: качественный (пре­дельный) и количественный.

1. Предельное (качественное) содержание инвертированного сахара
определяют следующим образом: в колбочку наливают
10 мл 1 %-ного раствора красной кровяной соли; 2,5 мл 10_%-ного раствора едкого натра и 5,8мл 0,25% водного раствора меда. Для получения 0,25%-ного раствора берут 5 мл 10%-ного раствора меда и в мерной
колбе на 200мл доводят до метки водой. Содержимое
колбочки нагревают, кипятят в течение минуты и прибав-­
ляют одну каплю 1 %-ного раствора метиленовой сини.

Если жидкость не обецвечивается (синяя окраска),то в исследуемом меде инвертированного сахара менее 70%; такой мед фальсифицирован и в продажу не допускается. Если же жидкость обесцвечивается — в меде ин­вертированного сахара больше 70%. Однако нормальное количество инвертированного сахара не гарантирует на­туральность продукта.

Реакцию читают сразу же после добавления к иссле­дуемому раствору метиленовой сини. Появление в даль­нейшем синего цвета во внимание не принимают.

7.3.6. 1. Количественный метод определения инвертированного сахара

Ход реакции: вколбу наливают 10мл 1% — ного раствора красной кровяной соли, 2,5 мл 10% — ного раствора едкого натра, 0,5мл 0,25% — ного раствора меда и 1 каплю 1% — ного раствора метиленовой сини. Смесь перемешивают. Титруют при постоянном слабом кипении 0,25%-ным раствором меда до исчезновения синей, а концу слегка фиолетовой окраски.

Восстановление метиленовой сини редуцирующими веществами меда происходит с некоторым запозданием, поэтому титрование ведут со скоростью не более 1 капли в 2 секунды.

Содержание инвертированного сахара в меде определяют по таблице 10.

 
 

 

Таблиця 10. Содержание инвертированного сахара в меде, %

Количество 0,25%-ного раствора меда, пошедшее на титрование, мл Количество инвертированного сахара, % Количество 0,25%-ного раствора меда, пошедшее на титрование, мл Количество инвертированного сахара, %
5,0 81,2 7,4 55,1
5,1 79,6 7,5 54,3
5,2 78,0 7,6 53,6
5,3 76,6 7,7 53,0
5,35 75,9 7,8 52,3
5,4 75,2 7,9 51,6
5,45 74,5 8,0 51,0
5,5 73,8 8,1 50,4
5,6 72,5 8,2 49,8
5,7 71,3 8,3 49,2
5,75 70,7 8,4 48,6
5,85 69,5 8,5 48,0
5,9 68,9 8,7 46,9
6,0 67,8 8,8 46,4
6,1 66,6 8,9 45,9
6,2 65,6 9,0 45,4
6,3 64,5 9,1 44,9
6,4 63,5 9,2 44,4
6,5 62,6 9,3 43,9
6,6 61,6 9,4 43,5
6,7 60,7 9,5 43,0
6,8 59,8 9,6 42,6
6,9 59,0 9,7 42,2
7,0 58,2 9,8 41,7
7,1 57,3 9,9 41,3
7,2 56,6 10,0 40,9
7,3 55,8    

 

Определение сахарозы

Примесь сахарного сиропа к меду может быть определена по содержанию в нём сахарозы. Содержание сахарозы в цветочном меде должно быть не более 6% (исключение составляет мед с белой акции — не более 10%, с хлопчатника -не более 5%). Количество тростникового сахара повышено и в сахарном (подкормочном )меде.

Сущность метода заключается в искусственной инверсии (превращении), содержащейся в меде сахарозы в моносахара — глюкозу и фруктозу. По содержанию инвертированного сахара до инверсии и после неё определяют количество сахарозы.

В колбу на 200 мл отмеряют 5 мл 10% — ного раствора меда и 45 мл воды. Затем колбу помещают в водяную баню (80°). Доводят температуру содержимого колбы до 68 — 70°С и быстро прибавляют 5 мл соляной кислоты в разведении 1:5, перемешивают и выдерживают 5 минут. Инверт нейтрализуют 10% -ным раствором едкого натра при индикаторе метилоранже (1 -2 капли) до оранжево-желтой окраски.

Объем инверта доводят до 200 мл дистиллированной водой и тщательно перемешивают. Инвертированный сахар в данном растворе определяют по описанной выше методике. Содержание сахарозы в меде (С,%) вычисляют по формуле:

С = (Х -V) х 0,95,где

X — содержание инвертированного сахара после инверсии, %;

V -содержание инвертированного сахара до инверсии, %;

 


Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском гугл на сайте:

Определение восстанавливающих сахаров методом Нельсона-Сомоги


Сахара с восстанавливающими свойствами (возникающие из-за наличия потенциальной альдегидной или кетогруппы) называются восстанавливающими сахарами. Некоторые из восстанавливающих сахаров — это глюкоза, галактоза, лактоза и мальтоза. Метод Нельсона-Сомоджи — один из классических и широко используемых методов количественного определения редуцирующих сахаров.

ПРИНЦИП

Редуцирующие сахара при нагревании с щелочным тартратом меди восстанавливают медь из двухвалентного меди в одновалентное и, таким образом, образуется закись меди.Когда закись меди обрабатывают арсеномолибденовой кислотой, происходит восстановление молибденовой кислоты до молибденового синего. Проявленный синий цвет сравнивается с набором стандартов в колориметре при 620 нм.

МАТЕРИАЛЫ

Щелочной тартрат меди

(i) Растворите 2,5 г безводного карбоната натрия, 2 г бикарбоната натрия, 2,5 г тартрата калия-натрия и 20 г безводного сульфата натрия в 80 мл воды и доведите до 100 мл.

(ii) Растворите 15 г сульфата меди в небольшом объеме дистиллированной воды.Добавьте одну каплю серной кислоты и доведите до 100 мл.

Перед использованием смешайте 4 мл B и 96 мл раствора A.

Реагент арсеномолибдата: растворите 2,5 г молибдата аммония в 45 мл воды. Добавьте 2,5 мл серной кислоты и хорошо перемешайте. Затем добавляют 0,3 г гидрокарсената динатрия, растворенного в 25 мл воды. Хорошо перемешайте и инкубируйте при 37 ° C в течение 24–48 часов.

Стандартный раствор глюкозы: Исходный раствор: 100 мг в 100 мл дистиллированной воды.

Рабочий стандарт: 10 мл маточного раствора, разбавленного до 100 мл дистиллированной водой [100 мкг / мл].

ПРОЦЕДУРА

1. Взвесьте 100 мг образца и дважды экстрагируйте сахара горячим 80% этанолом (по 5 мл каждый раз).

2. Соберите супернатант и выпарите его на водяной бане при 80 ° C.

3. Добавьте 10 мл воды и растворите сахар.

4. Внесите пипеткой аликвоты по 0,1 или 0,2 мл в отдельные пробирки.

5. Внесите пипеткой 0,2, 0,4, 0,6, 0,8 и 1 мл рабочего стандартного раствора в несколько пробирок.

6. Довести до 2 мл дистиллированной воды объем пробирок для образцов и стандартных пробирок.

7. Внесите пипеткой 2 мл дистиллированной воды в отдельную пробирку, чтобы получить бланк.

8. Добавьте 1 мл реактива щелочного тартрата меди в каждую пробирку.

9. Поместите пробирки в кипящую воду на 10 минут.

10. Охладите пробирки и добавьте во все пробирки по 1 мл реагента арсеномолиболовой кислоты.

11. Довести объем воды до 10 мл в каждой пробирке.

12. Считайте оптическую плотность синего цвета при 620 нм через 10 мин.

13. По построенному графику рассчитайте количество редуцирующих сахаров, присутствующих в образце.

РАСЧЕТ

Абсорбция соответствует 0,1 мл пробы = x мг глюкозы

10 мл содержит = x / 0,1 × 10 мг глюкозы

=% редуцирующих сахаров

ССЫЛКИ

1. Сомоги, М. (1952). J. Biol. Chem., 200, 245.

2. Krishnaveni, S .; Онимоли Баласубраманиан и Садасивам, С. (1984). Food Chem., 15, 229.

3. Источники Интернета

Определение общего кислотного числа в нефтепродуктах

ph: Измерение и использование

ph: Измерение и использование Одним из наиболее важных свойств водных растворов является концентрация иона водорода.Концентрация H + (или H 3 O +) влияет на растворимость неорганических и органических

Подробнее

ph Щелочность воды

ph Щелочность воды DOC316.52.93085 На основе стандарта ISO 9963-1: 1994 ph-метрическое титрование от 0,4 до 20 ммоль / л общей щелочности 1. Введение Щелочность воды — это ее способность нейтрализовать кислоту.

Подробнее

Потенциометрическое титрование GA / 7

Ред.7/99 7-1 ВВЕДЕНИЕ GA / 7 Потенциометрическое титрование Потенциометрическое титрование — это полезный способ определения характеристик кислоты. PH раствора измеряется как функция количества титранта

. Подробнее

ph и кислотность в томатном соусе

pH и кислотность в томатном соусе DOC316.52.93100 Потенциометрическое титрование по конечной точке Область применения и применение: Томатный соус 1. Введение Эта рабочая процедура относится к определению титруемой кислотности

Подробнее

Кислотно-основное титрование

Кислотно-щелочное титрование Введение Часто химики должны ответить на вопрос, сколько чего-либо присутствует в образце или продукте.Если продукт содержит кислоту или основание, этот вопрос обычно

. Подробнее

ВЛАГА (Карл Фишер, с буфером)

ВЛАЖНОСТЬ 03-1 ВЛАЖНОСТЬ (Карл Фишер, забуференная) ПРИНЦИП ОБЪЕМА Образец растворяют в смеси метанола и формамида (50:50 об. / Об.) И затем титруют стандартизованным реактивом Карла Фишера. Титрование

Подробнее

Эксперимент по закону пива

Эксперимент по закону пива Введение Есть много способов определить концентрацию вещества в растворе.Пока что единственный опыт, который у вас может быть, — это кислотно-основное титрование или, возможно, определение

Подробнее

Кинетика фенолфталеин-NaOH

Кинетика фенолфталеина-NaOH Фенолфталеин — один из наиболее распространенных кислотно-основных индикаторов, используемых для определения конечной точки кислотно-основного титрования. Он также является активным ингредиентом некоторых слабительных средств.

Подробнее

Дополнительная лекция: ОСНОВЫ ТИТРАЦИИ

Дополнительная лекция: ОСНОВЫ ТИТРАЦИИ 1 Определение и применение Титрование — это постепенное добавление раствора реагента (называемого титрантом) к аналиту до завершения реакции. Общие приложения:

Подробнее

Формулы, уравнения и родинки

Глава 3 Формулы, уравнения и моли. Интерпретация химических уравнений. Вы можете интерпретировать сбалансированное химическое уравнение разными способами.На микроскопическом уровне две молекулы H 2 реагируют с одной молекулой

Подробнее

CHM1 Отзыв к экзамену 12

Темы Решения 1. Аррениусовы кислоты и основания a. Кислота увеличивает концентрацию H + в b. Основание увеличивает концентрацию ОН — в 2. Сильные кислоты и основания полностью диссоциируют 3. Слабые кислоты и

Подробнее

18 Кондуктометрическое титрование

Лабораторная работа 18 КОНДИЦИОНЕРНОЕ ТИТРОВАНИЕ ЛАБОРАТОРНАЯ ДЕЯТЕЛЬНОСТЬ 18 Кондуктометрическое титрование Фоновое титрование — это метод определения концентрации неизвестного раствора (аналита) посредством реакции

Подробнее

Практическое занятие № 4 ТИТРАЦИИ

Практическое занятие №4 ТИТРОВАНИЕ Реагенты: 1.Стандартный раствор NaOH 0,1 моль / л 2. Раствор H 2 SO 4 неизвестной концентрации 3. Фенолфталеин 4. Стандартный раствор Na 2 S 2 O 3 0,1 моль / л 5. Раствор крахмала

Подробнее

Тамсулозин гидрохлорид в капсулах

. Последняя редакция Бюллетеня Официальный 1 октября 2011 г. Стандартный раствор тамсулозина 1 и хорошо встряхните. Центрифугируйте при 1500 об / мин в течение 10 минут и используйте супернатант, пропуская его, если капсулы гидрохлорида тамсулозина

Подробнее

Автоионизация воды

2H 2 O H 3 O + + OH Ион гидроксония гидроксид-ион В: Но как часто это происходит? Это фундаментальная концепция всей кислотно-щелочной химии. Сколько в чистой воде воды и сколько ионов?

Подробнее

ПРОЦЕДУРА DR / 4000.ХЛОРИН, свободный

DR / 4000 ПРОЦЕДУРА ХЛОР, свободный метод 10069 Метод DPD * UHR (0,1 10,0 мг / л как Cl 2) Область применения и применение: Для тестирования более высоких уровней свободного хлора (хлорноватистой кислоты и гипохлорит-иона) в питьевой воде

Подробнее

Дивергентное определение PoE 3.12 Ограбление

1. Дивергентное определение

Дивергентное определение является драгоценным камнем альтернативного качества Определение .

за 1% качества: Вы и ближайшие союзники получаете 0,5% уклонения в виде дополнительной брони

Создает ауру, дающую броню вам и вашим союзникам.

Требуется Уровень 24, 58 Стр. Тег: Аура, Чары, Область, Физический

  • Вы и ближайшие союзники получаете на (32-51)% больше брони
  • + (0-19) к радиусу

Купить валюту PoE дешево

  • Купите дешевую валюту PoE с мгновенной доставкой, используя купон на скидку 5%: ВАЛЮТА .Mulefactory — это надежный веб-сайт с валютой PoE, который предлагает дешевые Сферы Возвышения, Сферы Хаоса, Элементы PoE и т. Д. Платежи: PayPal, Skrill, BitCoin.
  • Купите валюту PoE быстро и безопасно, используя купон на скидку 3%: AOE . Aoeah — одно из лучших мест для покупки Exalted Orbs. Зарегистрируйте новую учетную запись и получите дополнительную скидку 1%.

2. Расхождение в определении Альтернативное качество

Самоцвет альтернативного качества 20% статистика качества Вес
Определение (0–40)% увеличение области действия 50
Аномальное определение У вас и ближайших союзников есть (0–20)% шанс избежать оглушения 100
Дивергентное определение Вы и ближайшие союзники получаете (0–10)% уклонения в виде дополнительной брони 10

Prime Regrading Lens валюта изменяет тип качества камня умения Дивергентная решимость на другое случайное качество.

3. Как получить расходящееся определение?

Его можно получить в следующих чертежах ограбления:

Необычные камни — камни другого качества. У драгоценного камня может быть до трех альтернативных качеств: аномальное, расходящееся, призрачное.

Целевым предметом на дисплее экспонатов будет набор необычных драгоценных камней. Вы можете взять только одну до начала Lockdown.

Связанная валюта PoE, драгоценный камень, руководство по развитию навыков
.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *