Пролин в меде » ФГБУ Саратовская МВЛ
За текущую неделю в отдел химических исследований поступило 8 проб меда,для определения его качества.
Пчелиный мед — один из сложнейших естественных продуктов, в составе которого обнаружено более четырехсот различных компонентов. Следует отметить, что химический состав меда непостоянен и зависит от вида медоносных растений, с которых собран нектар; почвы, на которой они произрастают; погодных и климатических условий; времени, прошедшего от сбора нектара до извлечения меда из сотов; сроков хранения меда. Однако основные группы веществ в составе меда постоянны. Мед состоит из воды (16—21%) и сухих веществ, среди которых преобладают сахара (до 75%).
Содержание аминокислот в меде весьма незначительно, однако их соотношение может играть важную роль в составе меда. Многими исследователями установлено, что в самом большом количестве в составе меда наиболее распространенной медоносной пчелы содержится аминокислота пролин.
Пролин — признак подлинности меда!
В последние годы стало очевидно, что методы анализа меда не всегда позволяют адекватно оценить качество этого продукта.
Например, основное внимание при определении химического состава меда уделяют содержанию углеводов, их соотношению, а также количеству азотистых веществ. На аминокислоты и амины внимание практически не обращают, хотя они являются важной составляющей натурального меда. Набор свободных аминокислот и аминов (аминосоединений) в меде зависит от региона и типа медосбора.
По данным ряда исследователей, 10–15% азотистых веществ в меде приходится на аминосоединения. Небелковые аминосоединения этого продукта представлены в основном аминокислотами — от 6 до 5000 мг/кг [1]. В меде обнаружено 23 свободные аминокислоты и амина, в большинстве случаев это аланин, аргинин, аспарагиновая кислота, валин, пролин, метионин, фенилаланин и т.д. Спектр свободных аминосоединений в натуральном меде зависит от его природы (цветочный, падевый или смешанный), ботанического и географического происхождения. Кроме того, содержание свободных аминосоединений зависит от условий медосбора и переработки нектара или пади пчелами (В.П.Наумкин, 1995). Свободные аминосоединения входят в состав различных видов меда (табл. 1).
Таким образом, основу свободных аминокислот цветочных медов составляют фенилаланин и пролин — 969 и 548 мг/кг соответственно. К примеру, мед с шалфея отличается повышенным содержанием фенилаланина — от 1600 до 2300 мг/кг. В то же время в испытанных образцах цветочных медов количество свободного пролина варьировало от 256 до 6520 мг/кг. В натуральных цветочных медах на пролин приходится 45–85% общего содержания свободных аминокислот (в среднем 67%) [2].
Анализируя представленные данные, можно сделать вывод, что пролин в натуральном меде — одна из самых важных, если не самая важная, свободная аминокислота. По количеству пролина можно судить о подлинности и зрелости меда.
Р.Т.КЛОЧКО, С.Н.ЛУГАНСКИЙ,
А.В.БЛИНОВ
ВНИИ ветеринарной санитарии,
гигиены и экологии РАН
Аннотация. В статье приведены данные о содержании аминосоединений в меде. Отмечено, что для натуральных медов характерно большое количество свободного пролина. Многие специалисты предлагают использовать этот показатель в медах в качестве таких критериев, как зрелость, подлинность, свежесть.
Ключевые слова: натуральный мед, зрелость меда, пролин, аминокислоты, фенилаланин, продукты пчеловодства, анализ меда.
ЛИТЕРАТУРА
1. Русакова Т.М. А что такое мед… // Пчеловодство. — 1998. — №2.
2. Чудаков В.Г. Технология продуктов пчеловодства. — М., 1979.
3. Bogdanov S., Martin P., Lullman C. Harmonised methods of the European Honey Commission // Apidology (1997) Extra issue. 1–59.
4. Brouers E.V.M. Measurement of hypopharyngeal gland activity in the honeybee // J. of Apicultural Research. — 1982. — V. 21 (4).
5. Brouers E.V.M. Activation of hypopharyngeal glands of honeybees in winter // J. of Apicultural Research. — 1983. — V. 22 (3).
6. Carlsheim K. Alternative energy carrier — Amino acid as a fuel for honey bees // internet resource.
8. Harmonised methods of the European Honey Comission, 1997.
9. Meda A., Lamien C.E., Millogo J., Romito M., Nacoulma O.G. Physicochemical analyses of Burkina fasan honey // Acta Vet. Brno. — 2005. — 74.
Поделиться с друзьями
Читайте также
авг 15, 2017июль 23, 2019апр 6, 2015сен 4, 2015
Пролин. И ты, Брут,……….
Пролин. И ты, Брут,……….
09.12.2020
0 комментариев
Началось все со звонка руководителя Аналитического центра Апис через неделю после сдачи образцов мёда на анализ. «Что такое сотворили с мёдом, что лаборант не может подсчитать пыльцевые зерна из-за их зашкаливающего количества в образце? Не помогает даже пятикратное вместо двухкратного разбавление меда водой при подготовке препарата для рассмотрения его под микроскопом». «Ничего особенного,» — робко промямлил я, не желая долго объяснять методику получения образца мёда из незапечатанных сотовых ячеек. Не имея возможности откачать на медогонке исключительно незапечатанный мед, я вырезал соты с этим медом, размял их толкушкой и пропустил полученное месиво из меда, перги и воска через сетчатый фильтр. Примерно так давили мед наши предки до изобретения рамок и центрифужной медогонки. Оказывается, что при таком способе «откачки» меда его состав обогащается пыльцой перги и искажается истинный пыльцевой состав собственно меда. Вот вам и еще один метод фальсификации натурального меда: берете кукурузную глюкозно-фруктозную патоку и добавляете в нее размолотые кусочки пчелиной перги, а еще лучше – пыльцевой обножки. Зная результаты пыльцевого анализа перги, можно получить любой пыльцевой состав «монофлерного» меда по заказу. Но удивило меня не это. В полученном протоколе испытаний образца с незапечатанным медом содержание пролина оказалось в два раза выше содержания пролина в образце с запечатанным медом. Учитывая, что существующие методики подсчета пролина в меде не предполагают такое высокое его содержание, протокол испытаний этого образца мне выдали в двух частях. В основном протоколе указано содержание пролина «более 770 мг/кг». В дополнительном протоколе – точное значение 1143 мг/кг. Норма по ГОСТ – не менее 180мг/кг.
Получается, что и содержанию пролина в меде не гарантирует его натуральную зрелость. При желании, добавляя в мед размолотую пергу, можно искусственно повысить значение этого показателя до приемлемых уровней. Остается только один надежный критерий истинности натурального пчелиного меда – совесть пчеловода.
Определение пролина — TURC Laboratuvar
Соединение пролина является одной из аминокислот 20, которая образует белки. Мед содержит 20 из этой известной аминокислоты 15. Но самым важным и самым важным из них является пролин. Пролин передается меду пчелами во время формирования меда.
Качество анзерского мёда известно во всем мире. Анзер мед 1335 имеет пролиновое значение. Базовое значение пролина 300 определяется Министерством продовольствия, сельского хозяйства и животноводства как значение качества в производстве пчел. Этот предел до недавнего времени составлял 1 мг на килограмм 180. Однако после недавнего мошенничества эта величина была увеличена до 1 мг на килограмм 300.
Это ограничение накладывается и подделка мёда, чтобы предотвратить смешивание другого вещества в мёде. Определение белков в мёде важно знать, искусственный или натуральный мёд, а также знать его питательную ценность.
Турецкое продовольственное коммюнике Кодекса о меде (Коммюнике №: 2012 / 58) было опубликовано Министерством продовольствия, сельского хозяйства и животноводства в 2012. В этом коммюнике описываются принципы производства, приготовления, обработки, хранения, транспортировки и размещения на рынке меда с соответствующими методами и гигиеническими условиями. Коммюнике включает цветочный мед, железистый мед и смесь меда. В Коммюнике содержание пролина в этих сортах меда было определено как самое низкое значение 300 мг / кг, тогда как для цветочных медов этот предел был объяснен как 180 мг / кг в мёде канолы, липы, цитрусовых, лаванды и эвкалипта и 120 мг / кг в мёде розмарина и акации.
В авторизованных лабораториях, Цветочный мёд, секреционный мёд и их смесь с мёдом при определении пролиновых исследований сделаны. В этих аналитических исследованиях используются стандарты и методы анализа, опубликованные в нашей стране и за рубежом, и обеспечивается надежное и беспристрастное обслуживание. Стандарт, рассматриваемый для определения пролина:
Изучение аминокислотного состава разных сортов меда из Восточно-Казахстанской области
Библиографическое описание:Омаргалиева, Н. К. Изучение аминокислотного состава разных сортов меда из Восточно-Казахстанской области / Н. К. Омаргалиева. — Текст : непосредственный // Молодой ученый. — 2017. — № 6.1 (140.1). — С. 39-42. — URL: https://moluch.ru/archive/140/39419/ (дата обращения: 14.09.2021).
Растительные компоненты мёда являются ценными источниками пищи для пчёл и содержат широкий спектр биологически активных веществ, включая аминокислоты, ферменты, витамины, флавоноиды и др. В процессе созревания в мёде снижается содержание воды, происходит относительная концентрация органических и минеральных соединений. Кроме того, из желез пчел в мёд поступает дополнительное количество биологически активных веществ, главным образом ферментов. Углеводы, содержащиеся в мёде, в сочетании с минеральными элементами и биологически активными веществами обусловливают высокую пищевую ценность и целебные (функциональные) свойства мёда [1].
Аминокислотный состав меда зависит от многих экологических факторов, особенно от ботанического происхождения. Свободные аминокислоты относятся к обязательным компонентам нектара и пыльцы растений и служат в качестве источника запаха для насекомых –опылителей. Целебные свойства меда обусловлены содержанием в них: витаминов, аминокислот, макро и микроэлементов, флавоноидов и т.д. Количество аминокислот в меде, является одним из главных показателей зрелости и натуральности. Аминокислоты являются одним из важных показателей меда, так как он содержит огромное количество ферментов, белков пыльцевых зерен и свободных аминокислот. Среди аминокислот в меде доминирует пролин, также содержатся аланин, аргинин, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота, валин, лейцин, лизин, треонин, фенилаланин [2]. Содержание пролина является важным критерием для определения качества меда. Количество пролина является показателем зрелости меда. Если мед отобран незрелым или содержит сахарную подкормку, то содержание пролина в нем очень низкое. В Германии установлена граница между мёдом и сахаросодержащими продуктами — минимальное содержание пролина 160 мг/кг. Следующая важная аминокислота, фенилаланин, принимает участие в образовании ароматических компонентов [3].
Цель исследования – изучить аминокислотный состав меда отобранного из разных регионов ВКО и дать сравнительную характеристику по содержанию аминокислот в сортах меда: подсолнечниковый, донниковый, гречишный и разнотравье.
Материал и методы исследования. Было исследовано содержание аминокислот в водных растворах меда: разного сорта. Исследовано 4 образца меда: подсолнечникового, гречишного, донникового меда и разнотравья. Образцы меда были отобраны из Урджарского района, Катон-Карагайского и Бородулихинского районов.
Определение аминокислот проводили на жидкостном хроматографе SHIMАDZU LС-20 Prominenсe (Япония) с флуориметрическим и спектрофотометрическим детектором. Использовали хроматографическую колонку размером 25см*4,6мм SUPELСO С18 (США) с предколонкой для защиты основной колонки от примесей. Хроматографический анализ проводили в градиентном режиме при расходе элюента 1,2 мл/мин и температуре термостата колонки 25ºС. Измерение выполнялось методом высокоэффективной жидкостной хроматографии на колонке с обращённой фазой с спектрофотометрическим и флуориметрическими детекторами на длинах волн 246 нм и 260 нм с использованием водного гидролиза и модификации аминокислот раствором фенилизотиоционата в изопропиловом спирте с получением фенилтиогидантоинов. В качестве подвижной фазы использовали: фосфатный буфер (25 мМ раствора Кh3РО4 с рН 5,5) (компонентА) и ацетонитрил (о.с.ч. для ВЭЖХ). Оптимизированы условия водного гидролиза образцов при проведении процедуры пробоподготовки.
Использовали стантартные образцы аминокислот производство Sigmа Аldriсh, ацетонитрил о.с.ч., изопропиловый спирт о.с.ч., для жидкостной хроматографии, ФИТЦ производство Sigmа Аldriсh, ацетат натрия о.с.ч., соляную кислоту о.с.ч., и гидроксид натрия о.с.ч.
Пробоподготовка. Содержание аминокислот исследовали в водных растворах меда. Для проведения гидролиза в стеклянные ампулы с оттянутым концом помещали пробу меда. Далее добавляли 10 мл деионизованной воды. Смесь тщательно перемешивали и обдували током азота в течение 2 мин. Стеклянные ампулы запаивали и помещали в термостат. Гидролиз проводили при температуре 110ºС в течение 24 часов. После охлаждения, гидролизаты фильтровали через мембранные фильтры диаметром пор 0,45 мкм, и отбирали аликвоты 0,5 мл. Аликвоты высушивали при 65ºС в токе воздуха. К высушенным аликвотам добавляли 0,10 мл расвора NаOH 0,15 М и тщательно перемешивали. Затем приливали 0,35 мл раствора фенилизотиоционата в изопропиловом спирте, перемешивали и добавляли 0,05 мл дистиллированной воды и фильтровали через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм. Полученные растворы подвергали хроматографическому анализу. Концентрация аминокислот в пробах вычислялась на 100 грамм продукта.
Расчёт содержания аминокислот осуществляли по формуле 1:
(1)
Где, СS – концентрация аминокислот в рабочем стандартном растворе, мг/мл
Vp – объем экстракта пробы, (гр.,мл, мг)
Sx, Ss – площади пиков аминокислот на хроматограмме пробы и стандарта
m – масса навески продукта, г.
Рис.1. Хроматограмма аминокислот в пробе меда
Sample Name: aminokislota
Method Filename: с 15.06.16г
Vial:1
Date Acguired:05:03:2013 12:07:10
Date Processed: 15:06:2016 10:15:02
Результаты и обсуждение. Данные по содержанию аминокислот в пробах меда представлены в таблице 1.
Таблица 1
Содержание аминокислот в различных сортах меда
Сорта меда | Сумма аминокислот | Незаменимые аминокислоты | Заменимые аминокислоты |
Подсолнечниковый | 273,62 | 115,24 | 158,38 |
Гречишный | 266,17 | 94,12 | 174,41 |
Донниковый | 334,88 | 148,7 | 186,18 |
Разнотравье | 281,07 | 281,07 | 138,78 |
Из таблицы 1 наибольшая общая сумма аминокислот отмечается у донникового меда – 334,88 мг/100 гр, из них незаменимых — 148,7 мг/100 г. В подсолнечниковом меде – 273,62мг/100г, незаменимых — 142,29мг/100г; разнотравном — 281,07мг/100г, незаменимых — 115,24мг/100г; гречишном — 266,17мг/100г, незаменимых — 94,12 мг/100гр.
По полученным данным рассчитан аминокислотный состав меда по сортам (табл. 2).
Таблица 2
Аминокислотный состав по сортам меда
Сорта меда | Незаменимые | Заменимые | ||||||||||||
валин | изолейцин | лейцин | лизин | треонин | фенилаланин | аланин | аргинин | аспаргаиновая кислота | гистидин | глицин | глутамин.к-та | пролин | тирозин | |
Подсолнеч-никовый | 20,8±2,86 | — | 15,1±2,10 | 52,37±1,11 | 26,97±0,87 | 26,95±4,84 | 18,53±0,84 | 47,65±0,62 | 35,25±0,57 | 30±3 | ||||
Гречишный | 9,73±1,97 | 18,13±0,64 | 28,57±1,20 | 37,69±2,16 | 21,49±1,3 | 14,27±1,2 | 6,91±0,7 | 39,4±1,9 | 60,34±2,5 | 32±2,1 | ||||
Доннико-вый | 24,43±4,15 | 27,37±1,58 | 35,14±2,14 | 43,84±2,68 | 17,92±6,80 | 28,17±3,26 | 18,33±2,51 | 56,1±4,7 | 15,57±2,4 | 23,75±4,3 | 44,26±1,6 | |||
Разнотравье | 15,58±1,07 | 5,94±0,61 | 12,36±0,71 | 13,24±1,28 | 41,02±1,21 | 54,15±2,87 | 27,97±1,36 | 12,17±0,76 | 13,86±0,78 | 11,52±0,90 | 15,37±0,75 | 22,95±1,1 | 34,94±1,36 | |
Из данных таблицы 2 следует, что в подсолнечниковом меде содержание треонина, глутаминовой кислоты больше, чем в других сортах меда, гречишный мед богат по содержанию пролина и тирозина, донниковый мед является лидером по содержанию валина, лейцина, аланина, гистидина, а в меде сорта разнотравье в отличие от других сортов меда содержится изолейцин и высокое содержание фенилаланина. Прочие аминокислоты с исследуемых сортах меда занимают промежуточное положение.Таким образом, мы видим, что в разных сортах меда есть свой лимитирующии показатель аминокислоты, что обусловлено прежде всего его ботаническим происхождением и свидетельствует о высокой питательной ценности сортов меда – природного источника аминокислот, необходимых организму человека.
Литература:
- Кайгородов Р. В., Шилова А. В., Самовольникова С. А. Влияние ботанического происхождения меда на содержание витаминов // Журнал Вестник Пермского университета, 2012. – С.45-46
- Кайгородов Р. В., Кулешова Т. С., Семенова Е. А. Влияние ботанического происхождения меда на содержание свободных аминокислот гистидина, фенилаланина, и триптофана // Журнал Вестник Пермского университета, 2013. – С.22
- Химический состав меда [Электр. источник] URL: http://www.salkova.ru/Product_bee/Honey/chemistry.php (Дата обращ. 30.01.17 г.)
Основные термины (генерируются автоматически): сорт меда, содержание аминокислот, аминокислота, аминокислотный состав меда, донниковый мед, изопропиловый спирт, проба меда, содержание пролина, ботаническое происхождение, хроматографический анализ.
Что нашли эксперты в мёде и почему он может быть опасен — SmolNarod.ru
Эксперты Росконтроля заявили, что в магазинах может продаваться поддельный, невкусный и даже опасный мёд. Что показала проверка, читайте в нашем материале.
Эксперты Росконтроля закупили в магазинах липовый мёд следующих брендов: «Берестов А.С. / Башкирхан», «Медовая долина», «Пчелкин мед», «Медовая Кубань», «Призвание — пчеловод», Darbo.
Одним из показателей безопасности для меда является массовая доля 5-гидроксиметилфурфураля.
Специалист экспертного центра Союза потребителей «Росконтроль» Елена Менячихина пояснила, что гидроксиметилфурфурал — это промежуточный продукт химического разложения сахаров. Он образуется при хранении (в том числе, в сотах), нагревании меда, обработке пчел от болезней. Это вещество обладает токсичными свойствами, в больших дозах может вызвать паралич, в малых — угнетает нервную систему. Его повышенное содержание говорит о нарушении технологического процесса переработки или длительном хранении меда.
В меде «Призвание — пчеловод» уровень гидроксиметилфурфурала оказался повышен. Этот образец отправили сразу же в Черный список «Росконтроля».
Еще одна опасность, которая может таиться в мёде — это антимикробные препараты нутрифуранового ряда, которые могут использоваться в пчеловодстве. Их остаточные количества, точнее, метаболиты, также были найдены в образце «Призвание пчеловод».
Что касается лабораторных испытаний на натуральность и качество мёда, то в образце опять же «Призвание пчеловода» глюкозы оказалось больше, чем фруктозы, что не характерно для меда. А в образцах «Пчелкин мед», «Медовая Кубань» и снова в «Призвании пчеловода» диастазное число оказалось слишком низкое. А это основной показатель натуральности мёда, который означает степень его ценности как лечебного продукта. Чем он выше, тем лучше мед. Еще один параметр, на который ориентировались эксперты при вынесении вердикта натуральности и качества — это массовая доля пролина. Она является важным показателем зрелости и фальсификации меда. Если мед отобран незрелым или содержит сахарную подкормку, то содержание пролина в нем низкое. Из проверенных образцов, только в одном пролина совсем мало — это «Медовая Кубань». Больше всего пролина оказалось в образце Darbo.
Что касается самого названия «липовый», то и это экспертам под силу проверить. На основе диастазного числа и содержания в мёде пыльцевых зёрен специалисты сделали вывод о том, что «Медовая Кубань» и «Призвание пчеловод» не отвечают требованиям к натуральному липовому меду.
Остальные протестированные образцы показали средние, но в целом укладывающиеся в требования стандарта, результаты (должно быть не менее 30% липы).
По результатам испытаний эксперты «Росконтроля» рекомендовали к покупке мед «Берестов А.С. / Башкирхан», «Медовая долина», Darbo. Образец «Пчёлкин мед» отправили в список с замечаниями, а «Медовая Кубань» и «Призвание пчеловод» оказались в Черном списке «Росконтроля».
Ранее мы сообщали, что в этом году Россия потеряет половину пчелопоголовья. Почему умирают пчёлы? Оказалось из-за пестицидов, которыми агрокомплексы поливают свои поля, и мобильной связи. Все подробности читайте в нашем материале ЗДЕСЬ. Кстати, смоленские пчеловоды также отмечают гибель пчёл вблизи животноводческих предприятий.
Свои новости, фото и видео вы можете прислать на WhatsApp редакции по номеру +79107850457
Beecool — Про мед🐝🍯 | Facebook
Физиология и мед .
Главные составные части натурального меда — моносахариды: глюкоза (30–39%) и фруктоза (33–43%). Они имеют наибольшее значение для человека как энергетические компоненты пищи. Так, съедаемый ежедневно сахар (дисахарид — сахароза) в пищеварительной системе должен расщепиться на простые сахара: глюкозу и фруктозу. Только в таком состоянии он усваивается организмом. Таким образом, медовый сахар — собственно глюкоза и фруктоза — практически без предварительной переработки в пищеварительной системе сразу всасывается в кровь.
Отсюда понятны те терапевтические и профилактические эффекты у людей с ослабленной или нарушенной функцией кишечника при питании медом. Есть у меда еще одно преимущество — наличие в нем фруктозы. Известно, что для прохождения глюкозы из крови в клетки тканей необходимы гормон инсулин и энергия АТФ. Фруктоза проходит через мембрану в клетку пассивно, без затраты энергии.
Кроме того, глюкоза, поступившая в клетку, перед тем как стать субстратом для получения из него энергии АТФ (анаэробного гликолиза и окислительного фосфорилирования), должна присоединить фосфор и превратиться в глюкозо-6-фосфат, а далее — во фруктозо-6-фосфат, то есть в фосфорилированную фруктозу. Фруктоза меда, минуя стадию метаболизма, сразу поступает в циклы биохимических превращений. Неслучайно в процессе эволюции теплокровных организмов закрепилось это ее преимущество. Например, семенная жидкость, окружающая сперматозоиды (сперма) и служащая им для форсированного снабжения энергией, содержит исключительно фруктозу.
Из рассмотренного очевиден ответ на вопрос о возможности углеводного обеспечения организма у больных сахарным диабетом за счет потребления меда. Разумеется, многое зависит от типа и степени тяжести заболевания. Поскольку инсулина нет он или не работает, чаще всего диета таких больных должна содержать фруктозу. Они получают ее, потребляя инулин — полисахарид девясила, топинамбура и некоторых других растений, содержащий только фруктозу. Следовательно, мед, содержащий 40% фруктозы, может быть важным составляющим пищи больных при диабете.
Однако было бы далеко не полным характеризовать мед только в качестве поставщика глюкозы и фруктозы. Известно, что нектар цветов содержит большой набор биологически активных веществ. Кроме простых сахаров в нем есть ди- и трисахара, аминокислоты и другие азотистые соединения, ферменты, органические кислоты, ароматические вещества, практически все микроэлементы, необходимые организму человека, витамины.
Разумеется, их не так много, чтобы полностью удовлетворить суточную потребность человека, но разнообразие и количественное сочетание позволяют нормализовать многие процессы обмена веществ в целом. Например, создаваемая органическими кислотами (всего 0,1% от состава меда) кислотность меда (рН натурального меда от 3,2 до 4,8) при нахождении его еще во рту может нормализовать рефлекторные реакции соко- и желчеотделения. Поэтому рекомендуется проглатывать мед не сразу, а подержав во рту. Тем более что простые вещества этого продукта пчел могут всасываться в кровь уже в нем.
Большое значение в диетологии и питании медом имеет его микроэлементный состав. Хотя самой золы (остатка при сжигании меда) в нем обычно не более 1%, там содержится значительное по сравнению с другими продуктами питания количество калия, серы, меди, железа и некоторых других необходимых организму элементов. Этим, в частности, можно объяснить эффективность медолечения у больных с нарушениями ритма сердца, где очень важную роль играет калий.
Содержание аминокислот в меду весьма незначительно, однако их соотношение имеет важное значение. Многими исследователями установлено, что пролина в меду самое большое количество. В то же время известно, что нектар не отличается его высоким содержанием. Следовательно, пчелы вводят в мед пролин собственного метаболизма. Целесообразность этого заключается в том, что эта аминокислота, так же как и ферменты, катализирует превращение сахаров. Повышение содержания пролина сопровождается понижением рН, то есть повышается кислотность меда, а следовательно, его стабильность, устойчивость к брожению. Содержание пролина указывает на его качество. Кстати, меды с высоким содержанием этой аминокислоты описаны как меды ясно-желтого цвета, тогда как меды с низким его содержанием имеют темно-коричневый цвет.
Еще одно важное свойство меда — антибиотическое. Сочетание литических (то есть разрушающих мембрану клетки) ферментов, органических кислот и высокой концентрации сахаров создает в нем среду, в которой гибнут и теряют способность к размножению практически все патогенные бактерии. Так, часть глюкозы меда переводится ферментом пчел ингибином (один из видов пероксидаз) в глюкуроновую кислоту и перекись водорода, которые вместе с указанной выше антигрибковой активностью пролина создают мощную антимикробную защиту готового продукта.
В нектаре растений имеется еще целый ряд собственных антибиотиков, которые, концентрируясь, обеспечивают высокую антибиотическую активность. Укажем на известную консервирующим действием бензойную кислоту, широко применяющуюся с этой целью в пищевой и парфюмерной промышленности. Присутствуя в смолах многих растений, она в значительном количестве присутствует и в нектаре, переходя затем в мед.
Одно из важных свойств нектара, а следовательно, и меда — присутствие в них ингибиторов и стимуляторов роста. У высших растений эти вещества выполняют важную задачу своевременного усиления роста тканей (весна—лето) или торможения (осень—зима). Они же регулируют и выработку нектара. Есть в меду и биорегуляторы: абсцизовая кислота (ингибитор роста) и индолилуксусная кислота, ауксин, стимулятор роста. Очевидно, что указанные компоненты создают уникальное сочетание (констелляцию) свойств, позволяющих подавлять метаболизм одних организмов и тканей, и стимулировать другие. Отсюда понятно, почему мед с успехом применяют при обработке инфицированных ран, ожогов и т.д.
Как пример использования антибиотических и биостимулирующих свойств меда можно привести официальное лекарственное средство в Фармакопее России — мазь Конькова, в которой вместе с химическими антисептиками (этакридин, риванол) или дегтем содержится около 60% меда. Мазь классифицируется как антисептическое, стимулирующее регенерацию средство и применяется при лечении вяло заживающих ран, пиодермий, ожогов.
Наконец, известно, что мед широко используется для лечения простудных заболеваний. Рассмотрим, как это происходит с физиологических позиций. При потреблении меда (форсированного поступления в кровь больших количеств моносахаров: глюкозы и фруктозы) скорость окислительных реакций, приводящих к их усвоению и проходящих с выделением тепла, резко возрастает. Наиболее активно это происходит в печени. От ее перегрева, как, впрочем, и других органов, организм защищается так: расширяются кровеносные сосуды, расположенные на границе организм — внешняя среда (легкие, кожа). Сюда устремляется перегретая в печени кровь, которая, отдав тепло в окружающую среду, в меру охлажденная, возвращается обратно в органы и ткани. При простуде легкие работают с напряжением именно из-за затруднения кровообращения в них.
Прием меда в силу причин, описанных выше, интенсифицирует кровообращение, в том числе и в легких. С повышенным током крови в них более интенсивно поступают необходимые элементы защиты — ферменты, бактерицидные вещества и клетки белой крови. Именно для этих целей обычно и применяют компрессы, банки, прогревания и т.п. Как мы видим, их с успехом может заменить натуральный пчелиный мед. Более того, применение его как энергизирующего средства в этот период форсированно предоставит энергию для синтеза собственных средств защиты (лейкопоэз, синтез интерферона, иммуноглобулинов и т.п.).
Итак, пчелиный мед для человека прежде всего источник легкодоступной энергии (моносахара меда), микроэлементов (минералы меда) с одновременными свойствами антибиотика (кислоты меда). Эта природная совокупность (констелляция) создает множество физиологических эффектов: от возрастания общей активности организма, аппетита, повышения или нормализации иммунного статуса до создания состояния комфорта и успокоения.
Следует сказать также и о косметических свойствах меда. Издавна он входит или самостоятельно, или в комплексе с другими веществами в состав средств (кремы, маски и др.) для очищения и лечения кожи. Существует практика его применения в бане (нанесение на распаренную кожу тела для ее очищения и повышения тонуса). В этой ситуации мед не только источник питательных веществ для кожи, но и сила для выведения из организма шлаков. Нанесенные на кожу моносахара благодаря высокой осмотичности меда притягивают к себе воду со шлаками из подкожной клетчатки на поверхность, где и смываются водой.
В.КРЫЛОВ,
профессор
Нижегородский госуниверситет
Характеристика китайского однотонного меда на основе содержания пролина и фенолов в качестве маркеров ботанического происхождения с использованием многомерного анализа
Реферат
Содержание фенолов и пролина определяли в образцах меда различного цветочного происхождения (рапс, подсолнечник, гречиха и кодонопсис ). ) из пяти разных регионов Китая. Фенольный и пролиновый профиль этих образцов был использован для построения статистической модели, чтобы отличить мед от разного цветочного происхождения.Существенные различия были выявлены среди исследованных образцов меда с помощью многомерных хемометрических методов. Содержание пролина варьировало среди четырех типов меда, при этом значения уменьшались в следующем порядке: гречиха> Codonopsis > подсолнечник> рапс. Рапсовый мед содержал высокий уровень бензойной кислоты, в то время как рутин, p -кумаровая кислота, p -гидроксибензойная кислота присутствовали в относительно высоком уровне в гречишном меде. Анализ основных компонентов (PCA) показал, что рапсовый мед можно отличить от трех других однотонных медов, а бензойная кислота, пролин и кемпферол могут служить потенциальными цветочными маркерами.Используя 18 фенольных соединений и пролин, образцы меда были удовлетворительно классифицированы в соответствии с цветочным происхождением с 94% правильным предсказанием с помощью линейного дискриминантного анализа (LDA). Результаты показали, что фенольные соединения и пролин были полезны для идентификации цветочного происхождения меда четырех типов.
Ключевые слова: ботаническое происхождение, фенольные соединения, пролин, хемометрия, однотонный мед
1. Введение
Мед популярен благодаря своим питательным и лечебным свойствам.В качестве натурального подсластителя мед употребляется напрямую, широко применяется в пищевой промышленности, а также используется в качестве пищевого консерванта [1]. Недавние исследования показывают, что мед обладает многими преимуществами для здоровья, включая противомикробные и противовоспалительные эффекты, а также снижает риск сердечных заболеваний и рака [2,3]. Мед имеет сложный состав, состоящий из высокой концентрации сахаров в сочетании с минералами, свободными аминокислотами, ферментами, витаминами, фенольными соединениями и многочисленными летучими соединениями [4].Эти компоненты подчеркивают как физические свойства, так и нутрицевтические характеристики самого продукта [5]. Разные однотонные меды могут иметь разные функциональные свойства из-за разных составляющих.
В целом мед однотонный считается более ценным из-за их хорошего качества и чистого вкуса. Следовательно, рыночные цены определяются его ботаническим происхождением, а повышенная стоимость некоторых видов меда стимулирует фальсификацию меда определенного ботанического происхождения.Фальсификация меда не только вводит потребителей в заблуждение, но и влияет на экспорт продуктов пчеловодства страны. Таким образом, идентификация одноцветного меда привлекла большое внимание исследователей. Идентификация производителей медовых цветов путем анализа физико-химических параметров, таких как содержание сахара, диастазная активность, аминокислоты или фенольная кислота, флавоноиды или летучие вещества, использовались для некоторых однотонных медов [6,7].
Фенольные соединения, в основном фенольные кислоты и флавоноиды, являются одним из наиболее важных компонентов меда и считаются индикаторами его антиоксидантной активности.Фенольные соединения меда образуются как вторичные метаболиты растений, и их содержание в растениях варьируется в зависимости от вида растений, разновидности, физиологической стадии и факторов окружающей среды, таких как климат [4]. Фенольные соединения использовались для определения ботанического происхождения однотонного меда [8,9,10,11]. В предыдущих исследованиях сообщалось, что несколько фенольных соединений служат маркерами цветочного происхождения для различных однотонных медов. Например, кверцетин был предложен в качестве цветочного маркера подсолнечного меда [12]; галловая кислота была основной фенольной кислотой в меде Манука [13]; хлорогеновая кислота и эллаговая кислота были возможными маркерами акации и рапсового меда соответственно [14]; феруловая кислота, морин и кемпферол могут отличить целомудренный мед от рапсового меда [15].
Пролин является доминирующей аминокислотой в меде и считается индикатором качества меда [16]. Содержание пролина в меде зависит от времени обработки нектара пчелами. Косвенно уровни пролина также отражают ботаническое происхождение [17]. Предыдущие исследования показали, что содержание пролина в меде связано с его цветочным и географическим происхождением [18]. Некоторые исследования показали, что подсолнечный мед содержит немного более высокий уровень пролина по сравнению с рапсовым и акациевым медом [18,19].
Китай имеет долгую историю пчеловодства благодаря своей обширной географии, подходящим климатическим условиям и богатому изобилию нескольких видов растений. В Китае производят множество видов меда. Наиболее распространенными видами меда в Китае являются рапсовый, акациевый, Vitex и мед из мармелада. Другие особые виды меда, такие как гречишный, подсолнечный и Codonopsis , используются в основном в коммерческих целях. Несмотря на то, что Китай является одним из крупнейших мировых экспортеров меда, химический состав китайского меда не изучен всесторонне.Предыдущие исследования китайского однотонного меда были сосредоточены в основном на содержании минералов, аминокислот и фенолов [11,14,20,21,22], однако данных о фенольном и пролиновом профиле некоторых китайских однотонных медов, таких как подсолнечник, не сообщалось. и Codonopsis .
По этим причинам основной целью настоящего исследования было изучение пролинового и фенольного состава четырех различных видов меда (рапса, подсолнечника, гречихи и меда Codonopsis ), собранных из разных регионов Китая.Кроме того, были применены хемометрические методы для идентификации потенциальных цветочных маркеров различных образцов меда с использованием фенольных соединений и пролина в качестве переменных. Эти результаты дают представление о составе основных фенольных соединений и профиле пролина китайского меда и могут помочь улучшить восприятие китайского меда рынком, придавая уверенность их заявлениям о подлинности.
2. Результаты и обсуждение
2.1. Профиль пролина различных видов меда однотонного происхождения
Измеренное содержание пролина в меде различного цветочного происхождения показано в.Из четырех видов однотонного меда гречишный мед показал самое высокое содержание пролина (в среднем 610,16 мг / кг) ( p <0,05), за ним следуют мед Codonopsis (494,49 мг / кг), мед подсолнечника (400,75 мг / кг). ) и рапсовый мед (201,61 мг / кг). Наблюдение за тем, что содержание пролина варьировалось в зависимости от типа однотонного меда, согласуется с предыдущим анализом одноцветных европейских и сербских медов [18]. Наши результаты подтвердили, что рапсовый мед демонстрирует низкий уровень пролина [17,18].Кроме того, мы наблюдали большие вариации пролина для разных образцов однотонного меда, что связано с региональными различиями в источниках цветков. Например, диапазон содержания пролина в рапсовом меде составлял от 122,50 до 336,02 мг / кг, в меде подсолнечника от 214,06 до 601,11 мг / кг, в меде гречихе от 412,56 до 874,62 мг / кг и в меде Codonopsis от 380,37 до 699,53 мг / кг. Эти результаты согласуются с другими сообщениями о вариациях в образцах уровней пролина из однотонного меда из различных географических источников [21,23].Содержание пролина в трех образцах многоцветкового меда (S17, C10, C11) составляло 612,55, 497,74 и 219,77 мг / кг по отдельности (дополнительная таблица S1). Хотя уровни пролина считались полезным параметром для классификации однотонного меда, наблюдаемая дисперсия свидетельствует о том, что различение пролина не является полным, и это измерение следует использовать вместе с другими параметрами, включая содержание сахара и минералов, а также уровни фитохимических веществ [24]. Содержание пролина в меде было предложено в качестве индикатора качества меда [16], и это существенное различие в содержании пролина для разных ботанических типов меда может указывать на различия в качестве.
Ящичная диаграмма содержания пролина в пробах рапса, гречихи, подсолнечника и Codonopsis . Горизонтальные линии в поле обозначают значения 25-го, 50-го и 75-го процентилей. Планки ошибок обозначают значения 5-го и 95-го процентилей. Высота коробки является мерой допуска.
2.2. Фенольные соединения в четырех различных типах меда
Распределение и уровни восемнадцати фенольных соединений в исследованных образцах меда были перечислены в.Фенольное содержание трех образцов многоцветкового меда (S17, C10, C11) показано в дополнительной таблице S1. Фенольные кислоты, включая протокатеховую кислоту, кофейную кислоту, галловую кислоту, p -куаровую кислоту, p -гидроксибензойную, феруловую и бензойную кислоты, а также флавоноиды, такие как кверцетин, кемпферол, пиноцембрин, фенэтиловый эфир кофейной кислоты (CAPE). и рутин показали разные количества в четырех типах однотонного меда. Морин, мирицетин и нарингенин были обнаружены только в рапсовом меде в относительно высоком уровне.Галангин обнаружен в рапсовом и подсолнечном меде. Морин ранее был обнаружен в рапсовом меде Zhou et al. [15]. Низкие уровни апигенина и CAPE были обнаружены в четырех однотонных медах. Наш анализ выявил преобладающие фенольные соединения для четырех унифлоровых медов: p -гидроксибензойная, p -кумариновая, кофейная, феруловая и протокатеховая кислоты. Доминирующими идентифицированными флавоноидами были кверцетин, кемпферол, хризин. Эти результаты согласуются с предыдущими сообщениями [25,26,27].
Таблица 1
Диапазон содержания фенольных соединений в четырех типах однотонного меда (мг / кг).
| Соединения | Рапсовый мед ( n = 27) | Подсолнечный мед ( n = 19) | Гречишный мед ( n = 11) | Мед из кодонопсиса ( n = 10) | ||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Макс | Мин. | Среднее ± SD | Макс | Мин. | Среднее ± SD | Макс | Мин. | Среднее ± SD | Макс | Мин. | Среднее ± SD | |||||||||||||||
| Галловая кислота | 0.Б Протокатеховая кислота | 0,118 | 0,033 | 0,066 ± 0,021 b | 0,262 | 0,082 | 0,133 ± 0,050 b | 1,314 | 0,017 | 0,361 ± 0,324 a | 1980,042 | 0,096 ± 0,051 b | ||||||||||||||
| p -Гидроксибензойная кислота | 1,220 | 0,431 | 0,726 ± 0,169 b | 1,912 | 0,103 b | 1,912 | 0,103 b | 7,967 ± 3,764 a | 0,715 | 0,376 | 0,513 ± 0,111 b | |||||||||||||||
| Кофейная кислота | 0,465 | 0,015 | 0,122 ± 0,095 b | 1.023 | 0,017 | 0,460 ± 0,195 a | 0,872 | 0,004 | 0,202 ± 0,223 b | 0,348 | 0,015 | 0,145 ± 0,110 b | 0,145 ± 0,110 b | 25 | 0,188 ± 0,054 b | 0,272 | ND | 0,138 ± 0,067 b | 3,188 | 0,022 | 2,101 ± 1,061 a | 0,051 | 0,002 | 0,017 ± 0.019 b | ||
| Феруловая кислота | 0,066 | 0,013 | 0,032 ± 0,015 b | 0,449 | 0,067 | 0,217 ± 0,114 a | 0,100 | 0,016 | 0,038 0,01 | 0,005 ± 0,003 b | ||||||||||||||||
| Бензойная кислота | 18,108 | 1,800 | 9,475 ± 4,479 a | 0,176 | 0,006 | 0,097 ± 0,031 b | 0,478 0,124 | 0180,228 ± 0,121 b | 1,369 | 0,078 | 0,611 ± 0,364 b | |||||||||||||||
| Рутин | 0,248 | ND | 0,077 ± 0,049 b | 0,187 D | 0,3040,159 | 0,225 ± 0,095 a | 0,018 | ND | 0,018 ± 0,005 c | |||||||||||||||||
| Мирицетин | 0,507 | ND | 0,116 ± 0,097 ND | 0,116 ± 0,097 ND | 0,116 ± 0,097 90D | ND | ND | ND | ND | ND | ||||||||||||||||
| Morin | 11.115 | ND | 0,607 ± 2,133 a | 0,007 | ND | 0,004 ± 0,002 a | 0,015 | ND | 0,015 ± 0,004 a | ND | ND | 903 5,184 | 0,022 | 0,402 ± 0,989 a | 0,659 | 0,002 | 0,280 ± 0,215 a | 0,154 | 0,001 | 0,046 ± 0,043 a | 0,016 | 0,004 | 0,004092 ± 0,039 a | |||
| Нарингенин | 0,032 | 0,001 | 0,013 ± 0,008 a | ND | ND | ND | ND | N. b | ||||||||||||||||||
| Кемпферол | 1,897 | 0,012 | 0,214 ± 0,367 a | 0,077 | ND | 0,026 ± 0,019 a | 0,026 | 0,011 | 0.019 ± 0,008 a | 0,019 | 0,008 | 0,014 ± 0,006 a | ||||||||||||||
| Апигенин | 0,036 | ND | 0,009 ± 0,007 a | 0,015 | 0,00123 | ND | 0,003 ± 0,002 a | 0,005 | ND | 0,003 ± 0,002 a | ||||||||||||||||
| Пиноцембрин | 0,119 | ND | 0,046 ± 0,030 a | 0,029 | 024 ± 0,013 b0,035 | ND | 0,035 ± 0,010 c | 0,024 | ND | 0,024 ± 0,007 c | ||||||||||||||||
| CAPE | 0,087 | ND | 9021 ND | 0,016 ± 0,014 a | 0,026 | ND | 0,014 ± 0,008 a | 0,027 | ND | 0,008 ± 0,008 a | ||||||||||||||||
| Хризин | 0,096 | 035 ± 0,021 b1,384 | ND | 0,700 ± 0,461 a | 0,762 | 0,016 | 0,277 ± 0,208 b | 0,175 | ND | 0,059 ± 0,057 b | 0,194 ± 0,064 a | 0,042 | ND | 0,034 ± 0,014 b | ND | ND | ND | ND | ND | ND | ND | ND | отдельные уровни могут быть индивидуальными зависит от цветочного и географического происхождения.Например, галловая кислота была обнаружена в самых высоких концентрациях в меде Codonopsis по сравнению с тремя другими типами меда ( p <0,05). Количество галловой кислоты в подсолнечном меде было ниже, чем в сербском подсолнечном меде [28]. Количества p -гидроксибензойной кислоты и p -кумаровой кислоты, определенные в наших образцах гречишного меда, были выше, чем в предыдущих исследованиях [25,29]. Определенное количество p -гидроксибензойной кислоты было ниже, чем зарегистрированное для гречишного меда из провинции Шаньси в Китае [30], что, возможно, отражает региональные различия в источниках растений.Самый высокий уровень бензойной кислоты был обнаружен в рапсовом меде. Среднее содержание бензойной кислоты в рапсовом меде (9,475 мг / кг) было в десятки раз выше, чем в подсолнечном меде, гречишном меде и меде Codonopsis ( p <0,05). Сообщается, что вересковый мед содержит высокий уровень бензойной кислоты, которая, как считается, способствует аромату верескового меда [31]. Наибольшее среднее содержание кофейной кислоты и феруловой кислоты было обнаружено в подсолнечном меде ( p <0.05). Рутин (флавонол 3- O -рутинозид), который, как предполагалось, отвечает за антиоксидантную активность гречихи [32], был обнаружен в самых высоких концентрациях в гречишном меде (0,225 мг / кг) по сравнению с тремя другими типами мед. Рутин также был обнаружен в польском рапсе и многоцветковом меде [29], но не был обнаружен в исследованиях гречишного меда [25,33]. Рутин никогда не был обнаружен в гречишном меде, что объясняется тем, что фенольный образец гречишного нектара и соответствующего меда может сильно отличаться от такового в других растительных тканях [25,33].Однако рутин был обнаружен в наших образцах гречишного меда впервые, что может быть связано с разнообразием и региональными различиями цветочных источников или различиями в методах анализа. Метод анализа фенольных соединений (хроматография — мониторинг множественных реакций — масс-спектрометрия) был подтвержден по множеству параметров [15]. Хризин был обнаружен во многих типах меда, включая рапсовый мед и многоцветковый мед [34], и здесь мы обнаружили высокие уровни хризина в подсолнечном меде и гречишном меде.||||
| Переменные | PC1 | PC2 | PC3 | |||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Кемпферол | 0.856 | 0,089 | 0,258 | |||||||||||||||||||||||
| Мирицетин | 0,722 | 0,247 | 0,435 | |||||||||||||||||||||||
| Кверцетин | 0,713 | 0,589 | 0,713 | 0,589 | 0,182 | 0,589 | 0,182 | |||||||||||||||||||
| Протокатеховая кислота | −0,509 | 0,509 | 0,109 | |||||||||||||||||||||||
| Бензойная кислота | 0,457 | −0,802 | −0.143 | |||||||||||||||||||||||
| Кофейная кислота | -0,147 | 0,729 | -0,469 | |||||||||||||||||||||||
| Галангин | 0,607 | 0,715 | 0,146 | |||||||||||||||||||||||
| Феруловая кислота | −0,145 | 0,56 | −0,396 | |||||||||||||||||||||||
| Пролин | −0,435 | 0,519 | −0,392 | |||||||||||||||||||||||
| CAPE | 0.136 | 0,462 | -0,225 | |||||||||||||||||||||||
| p -Кумаровая кислота | -0,454 | 0,051 | 0,752 | |||||||||||||||||||||||
| p -Hyd12124 | ||||||||||||||||||||||||||
| Рутин | −0,372 | 0,216 | 0,652 | |||||||||||||||||||||||
| Галловая кислота | −0,19 | 0 | −0,164 | |||||||||||||||||||||||
| Пиноцембрин | 0.355 | 0,004 | −0,403 | |||||||||||||||||||||||
| Нарингенин | 0,535 | −0,32 | −0,244 | |||||||||||||||||||||||
| Апигенин | 0,294 | 0,447 −0126 | 0,406 | Иерархическая кластеризация (HCA) Иерархическая кластеризация использовалась, чтобы показать фенольные и пролиновые различия медов различного цветочного происхождения. Дендрограммы результатов иерархической кластеризации и тепловой карты показаны в.Очевидно, что образцы меда были разделены на две основные группы. Одна группа включала в основном рапсовый мед, а другая группа включала гречиху, подсолнечник и мед Codonopsis , что указывает на сходство между этими тремя типами меда, что согласуется с результатами анализа PCA. Все образцы четырех типов меда были собраны в однородные кластеры, что указывает на то, что меды цветочного происхождения можно различить на основе их фенольных профилей и содержания пролина. Иерархическая кластеризация и визуализация тепловой карты фенольных соединений в образцах меда из рапса, гречихи, подсолнечника и Codonopsis .Строки представляют собой фенольные соединения, а столбцы — образцы меда. Данные представляют собой среднее трех значений для каждого образца. Данные нормализованы по строкам с помощью функции «масштаб». Клетки окрашены в зависимости от концентрации в образцах меда, красный цвет означает высокую концентрацию, а синий — низкую концентрацию. Рядная дендрограмма показывает корреляцию между группами фенольных соединений; дендрограмма столбца указывает на корреляцию между различными типами образцов меда. Визуализация фенольных соединений на тепловой карте показала, что образцы гречишного меда можно сгруппировать вместе, показывая высокие концентрации p -гидроксибензойной кислоты, p -кумаровой кислоты и рутина.Образцы рапсового меда были сгруппированы вместе и показали высокие концентрации бензойной кислоты, кемпферола, нарингенина и пиноцембрина. Образцы подсолнечника и меда Codonopsis показали высокие концентрации галангина, CAPE и кофейной кислоты и были сгруппированы близко. Образцы меда подсолнечника и Codonopsis были расположены отдельно с заметным уровнем кверцетина и хризина в меде подсолнечника и относительно высоким уровнем галловой кислоты в меде Codonopsis . 2.4. Дискриминация образцов меда на основе линейного дискриминантного анализа (LDA)LDA использовалась для категоризации образцов меда. Группирующими переменными были шестьдесят семь образцов меда разных типов (рапс, подсолнечник, гречиха и Codonopsis ), а независимыми переменными были 18 фенольных соединений и пролин. Результаты показали, что были сформированы три статистически значимые дискриминантные функции (Ламда Вилка = 0, X2 = 462,611, df = 57, p value = 0 <0.05) для первой функции (Ламда Вилка = 0,011, X2 = 244,139, df = 36, p значение = 0 <0,05) для второй и (Ламда Вилка = 0,176, X2 = 94,630, df = 17, p = 0 <0,05) для третьего. Первая дискриминантная функция составила 73,8% от общей дисперсии, а вторая - 19,8%. На оба приходилось 93,6% общей дисперсии. показывает диаграмму разброса образцов меда, определяемую дискриминантными функциями. Было показано, что рапсовый и гречишный меды хорошо дифференцируются от меда подсолнечника и Codonopsis .В частности, первая дискриминантная функция четко отделила гречишный мед от всех других типов меда, в то время как вторая дискриминантная функция четко отделила рапсовый мед от всех других типов меда. Общий уровень правильной классификации составил 98,5% и 94,0% отдельно при использовании как оригинального метода, так и метода перекрестной проверки. Правильная классификация (100,0%) была получена для образцов меда Codonopsis , за которыми следуют образцы меда из подсолнечника, рапса и гречихи (правильная классификация 94.7%, 92,6% и 90,9% по отдельности). Ботаническая дифференциация четырех однотонных медов на основе LDA на фенольных соединениях и пролине. Эти результаты согласуются с результатами Zhao et al. которые указали, что фенольные соединения могут быть использованы для определения цветочного происхождения [11]. А в сочетании с другими физико-химическими параметрами предсказанные результаты будут более надежными при использовании многомерного статистического анализа [6,8,24]. 3. Материалы и методы3.1. Образцы меда и анализ пыльцыВсего было собрано семьдесят образцов меда четырех различных цветочных типов (рапсовый мед, подсолнечный мед, гречиха и мед Codonopsis ) в провинциях Хубэй, Цзянсу, Сычуань, Внутренняя Монголия и Синьцзян, Китай ( отмечены) в период цветения 2015 года. Образцы меда были собраны пчеловодами в сопровождении нашего исследователя. До анализа образцы меда хранили в темноте при 4–5 ° C. Информация о сезоне, местонахождении улья и доступных цветочных источниках была собрана пчеловодами с просьбой удостовериться в подлинности ботанического происхождения.Подробная информация об образцах меда представлена в дополнительной таблице S2. Более того, их цветочное происхождение подтверждено мелиссопалинологическим анализом [35]. Вкратце, десять граммов каждого меда растворяли в 20 мл теплой воды (40 ° C). Раствор центрифугировали в течение 5 мин при 4000 об / мин, надосадочный раствор декантировали и дважды повторяли стадию центрифугирования для удаления избытка воды. Осадки были смешаны с глицерином. Из каждого образца готовили два предметных стекла и фотографировали под световым микроскопом DM2500 (Leica, Гейдельберг, Германия).Типы пыльцы были идентифицированы путем сравнения с эталонными слайдами пыльцы, собранной непосредственно с растений в исследовании, и эталонными изображениями пыльцы и пчеловодческих растений в литературе [36]. В каждом образце было подсчитано около 500 пыльцевых зерен. Была рассчитана процентная частота четырех характерных типов пыльцы в образцах меда. Двадцать семь рапсовых и одиннадцать гречишных медов были классифицированы как одноцветные согласно мелиссопалинологическому анализу, с Brassica campestris L.доля пыльцы находится в диапазоне от 74 до 96%, а доля пыльцы Fagopyrum esculentum находится в диапазоне от 66 до 96% соответственно; девятнадцать образцов меда подсолнечника были одноцветными с содержанием пыльцы Helianthus annuus L. в диапазоне от 48 до 80%; и десять образцов меда Codonopsis были одноцветными с долей пыльцы Codonopsis pilosula в диапазоне от 50 до 65% (дополнительная таблица S2). Три образца меда (S17 и C10, C11), которые пчеловоды определили как подсолнечный мед и мед Codonopsis , были классифицированы как многоцветковые (характерный тип пыльцы <45%) [35,36], согласно анализу пыльцы. , и были исключены из статистического анализа. Места сбора образцов меда на карте Китая. Синие точки, рапсовый мед; желтые точки, подсолнечный мед; зеленые точки, гречишный мед красные точки, Codonopsis мед. 3.2. Химические веществагалловая (99%), протокатеховая (99%), p -гидроксибензойная (99%), кофейная (98%), p -куаровая (98,0%) и феруловая кислота (99,0%) были приобретены в J&K Scientific (Пекин, Китай). Бензойная кислота (99,5%) и флавоноиды, то есть рутин (95,0%), мирицетин (96.0%), апигенин (95,0%), кемпферол (97,0%), кверцетин (98,0%), морин (95,0%), пиноцембрин (95,0%), нарингенин (98,0%), хризин (97,0%), галангин (95,0%). ) фенэтиловый эфир кофейной кислоты (CAPE, 97,0%) и 4-фтор-7-нитро-2,1,3-бензоксадиазол (NBD-F, чистота ≥ 98,0%) были поставлены компанией Sigma – Aldrich (Сент-Луис, Миссури, США, США). СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ). l-Proline (Pro) был поставлен компанией Aladdin (Шанхай, Китай). Метанол и ацетонитрил (степень чистоты для ВЭЖХ) были приобретены в MREDA (MREDA Technology Inc., Колумбия, Теннесси, США). Сверхчистую воду получали с использованием системы Milli-Q (Millipore, MA, США).Исходные растворы отдельных фенольных соединений (1 ~ 10 мг / мл) были приготовлены растворением соответствующих количеств фенольных стандартов в метаноле. Смешанные промежуточные растворы готовили путем смешивания соответствующих исходных растворов и растворения в метаноле. Серии рабочих стандартных растворов разводили непосредственно до требуемых концентраций чистой водой в день использования, исходя из чувствительности обнаружения и диапазона линейности исследования. 3.3. Твердофазная экстракция и анализ ВЭЖХ – ESI-MS / MSМетод твердофазной экстракции (ТФЭ) был использован для извлечения фенольных соединений из меда в соответствии с предыдущим методом с небольшими изменениями [15].Образцы меда (10,0 г) смешивали с 30 мл подкисленной воды (pH = 2,0) и встряхивали до полного перемешивания. Затем раствор центрифугировали 10 мин при 10000 об / мин для удаления примесей. Перед экстракцией картриджную колонку Oasis HLB (Waters, Wexford, Ирландия) активировали метанолом (10 мл) и подкисленной водой (pH 2,0, 10 мл). После загрузки супернатанта колонку промывали дистиллированной водой и фенольные соединения элюировали метанолом в колбу на 10 мл. Растворитель выпаривали досуха при 40 ° C и остаток растворяли в 1.0 мл 0,1% муравьиной кислоты: ацетонитрил (70:30, v / v ). Затем образец перемешивали на вортексе в течение 2 минут и фильтровали через фильтрующую мембрану с размером пор 0,25 мкм. Все измерения были выполнены в трех экземплярах. Экстракты анализировали с использованием колонки Agilent C18 (100 мм × 2,1 мм, 2,7 мкм; Agilent, Wilmington, DE, USA) в течение 50 мин. Температура колонки поддерживалась на уровне 30 ° C. В качестве подвижной фазы использовали 0,1% муравьиную кислоту в воде (растворитель A) и метаноле (растворитель B), скорость потока составляла 0.2 мл / мин. Условия ВЭЖХ-МС были такими, как описано в нашем предыдущем исследовании [15]. Типичная хроматограмма TIC для стандартных фенольных соединений и образца гречишного меда приведена на рисунках A, B. Параметры МС, используемые для измерения фенольных кислот и флавоноидов, а также переходов от ионов-предшественников к ионам продукта показаны в дополнительной таблице S3. Идентификацию и количественное определение фенольных соединений проводили с помощью программного обеспечения MassHunter (Agilent Technologies). Подробное описание калибровочных кривых представлено в дополнительной таблице S4. ( A ) TIC-хроматограмма фенольного стандарта. ( B ) ТИЦ-хроматограмма гречишного меда. Названия соединений и время удерживания (мин) следующие: (A): пик 1, галловая кислота (2,74), пик 2, протокатеховая кислота (5,05), пик 3, p -гидроксибензойная кислота (8,73), пик 4, кофейная кислота (12,52), пик 5, p -куаровая кислота (16,88), пик 6, феруловая кислота (18,88), пик 6, бензойная кислота (18,92), пик 7, рутин (23,42), пик 8, мирицетин ( 24.41), пик 9, морин (25.47), пик 10, кверцетин (26,70), пик 11, нарингенин (26,82), пик 12, кемпферол (28,29), пик 13, апигенин (28,75), пик 14, пиноцембрин (29,95), пик 15, CAPE (30,77) , хризин (30,95), галангин (31,11). (B): пик 2, протокатеховая кислота (5,05), пик 3, p -гидроксибензойная кислота (8,73), пик 4, кофейная кислота (12,52), пик 5, p -куаровая кислота (16,88), пик 6 , феруловая кислота (18,88), пик 7, рутин (23,42), пик 11, нарингенин (26,82), пик 14, пиноцембрин (29,95), пик 15, CAPE (30.77), хризин (30,95), галангин (31,11). 3.4. ВЭЖХ-анализ пролина. Методы экстракции, дериватизации и хроматографического разделения пролина в образцах меда выполняли, как описано Li et al. [37]. Вкратце, двадцать миллилитров 0,1 М буфера борной кислоты добавляли к 1,0 г меда и подвергали ультразвуковой обработке в течение приблизительно 10 мин. После экстракции конечный объем разбавляли до 50 мл раствором боратного буфера (pH = 8,0). Раствор меда фильтровали через 0.Нейлоновая фильтрующая мембрана 25 мкм и переносится во флаконы для хранения в холодильнике перед дериватизацией. Все измерения были выполнены в трех экземплярах. 3.5. Статистический анализ данныхАнализ главных компонентов (PCA), иерархическая кластеризация (HCA) были выполнены с использованием MetaboAnalyst 2.0 с помощью инструмента «Статистический анализ» [38]. Перед статистическим анализом все данные были нормализованы с использованием «Автомасштабирования» в программе MetaboAnalyst, чтобы предотвратить преобладающий эффект более распространенных компонентов над компонентами, присутствующими в гораздо меньших количествах.Неконтролируемая иерархическая кластеризация с использованием метода агломерации Уорда и расстояний Пирсона для оценки сходства между образцами использовалась для обеспечения обзора кластеризации меда различного цветочного происхождения. Сравнение средних значений было достигнуто с помощью одностороннего дисперсионного анализа (ANOVA). Линейный дискриминантный анализ (LDA) был применен для изучения возможности классификации образцов меда по цветочному происхождению. Анализ ANOVA и LDA выполняли с использованием статистического программного обеспечения SPSS 20.0 (International Business Machines Corporation, Армонк, Нью-Йорк, США). 4. ВыводыЭто исследование охарактеризовало фенольные и пролиновые профили четырех типов монофлорового меда (рапсовый, подсолнечный, гречишный и Codonopsis ), собранного у пчеловодов в Китае. Содержание пролина и фенола в четырех типах меда существенно различается. Гречишный мед содержал наибольшее количество пролина, p -кумаровой кислоты и p -гидроксибензоновой кислоты; рапсовый мед имеет самое низкое содержание пролина и самое высокое содержание бензойной кислоты.Результаты PCA и иерархической кластеризации показали, что рапсовый мед можно отделить от гречихи, подсолнечника и меда Codonopsis выбранными фенольными соединениями и пролином. Результаты LDA показали, что фенольные соединения и пролин в сочетании с хемометрией могут дифференцировать цветочное происхождение четырех китайских медов с классификационным уровнем 94,0%. С другой стороны, определение химического состава китайского однотонного меда может привести к формированию базы данных, в которой можно будет классифицировать мед из разных источников. (PDF) Содержание пролина в различных типах меда0239–3006 / $ 20,00 © 2011 Akadémiai Kiadó, Будапешт Acta Alimentaria, Vol. 41 (1), pp. 26–32 (2012) DOI: 10.1556 / AAlim.2011.0002 Впервые опубликовано в Интернете 4 августа 2011 г. ПРОЛИН СОДЕРЖАНИЕ РАЗНЫХ ТИПОВ МЕДА Н. Чипа *, М. Борбели и З. Дьёри Институт пищевых наук, обеспечения качества и микробиологии Факультет сельскохозяйственных и пищевых наук и управления окружающей средой Центр сельскохозяйственных и прикладных экономических наук Университет Дебрецена, H-4032 Дебрецен, Böszörményi út 138.Венгрия (Получено: 4 июня 2010 г .; принято: 7 февраля 2011 г.) В этом исследовании мы исследовали содержание пролина в 143 образцах меда различного происхождения. Некоторые из образцов были получены в результате коммерческой торговли, другие — непосредственно от пчеловодов. Мы измерили содержание пролина в меде пчеловодов, и полученные результаты сравнили с результатами для коммерческого меда. Также было изучено влияние продуктов с добавлением сахара и нагревания на параметры качества. Ключевые слова: мед, пролин, инвертный сахар, сироп глюкозы, сироп сахарозы, нагревание. Мед определен ЕС (2002) как «натуральный сладкий продукт, произведенный Apis Mellifera. пчелы из нектара растений. или из выделений живых растений, которые собирают пчелы, трансформируют путем объединения со специфическими собственными веществами, откладывают, обезвоживают, хранят и оставляют в сотах для созревания и созревания ». Качество меда зависит от нескольких параметров, таких как сахар, влага, элементы, гидроксиметилфурфурол (HMF), ферменты, органические кислоты, витамины и т. Д.содержание и соотношение глюкозы и фруктозы, pH, кислотность, электропроводность, и т. д. (Zsidei, 1993; ACquaroNe et al., 2007). Основные компоненты меда не содержат белка (Croft et al., 1986). Этот материал происходит из животных или растительных (например, пыльцы) источников (Lee et al., 1985). Содержание белка в меде oral составляет около 1,0–1,5%, в то время как в меде пади это количество составляет около 3,0%. Количество аминокислот составляет 1,0%, а пролин является основным компонентом с 50–85% от общего количества аминокислот (Pawlowska & ArMstroNg, 1994; ANklaM, 1998).Профиль аминокислот может указывать на ботаническое происхождение образцов меда (ANklaM, 1998). Помимо пролина, мед содержит 26 аминокислот, и их количество зависит от происхождения меда (нектар или медовая роса ). Содержание пролина в меде постоянно снижается во время хранения, поэтому пролин может быть индикатором спелости меда (VoN der Ohe et al., 1991). Минимальное содержание пролина было определено ЕС (2002). Для пролина минимальное значение 180 мг / кг составляет , международно признанное (HerMosíN et al., 2003). В меде с добавлением сахара снижены некоторые параметры, такие как содержание пролина и HMF, электропроводность и активность ферментов. В отношении фальсификации сахара пролин был предложен в качестве критерия качества для меда (BogdaNov & MartiN, 2002). Мед — наша основная пища с древних времен. В Венгрии ежегодно производится около 20 000 тонн меда и большая часть этого продукта (около 80%) экспортируется в разные страны мира .Благодаря количеству, Венгрия играет важную роль в производстве меда в мире . Согласно статистике ФАО, в 2008 году наша страна занимала восемнадцатое место среди производителей в мире , а Венгрия заняла второе место среди стран Европейского Союза (Таблица 1). * Кому адресовать корреспонденцию. Телефон: + 36-30-366-2383; факс: + 36-52-417-572; e-mail: [email protected] Флуорометрическое определение пролина в меде с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии после предколоночной дериватизации с 7-фтор-4-нитробензо-2-окса-1,3-диазолом (NBD -F)Был разработан метод оптимизации дериватизации NBD-F для определения пролина в меде с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с детектированием флуоресценции.Для определения свободного пролина в различных образцах меда проводили ультразвуковую экстракцию с использованием 0,1 М боратного буферного раствора в качестве экстракционного растворителя. Хроматографическое разделение проводили на колонке XDB C18 (внутренний диаметр 150 × 4,6 мм), используя 0,1 М буферный раствор ацетата натрия (pH 7,2): метанол: тетрагидрофуран (900: 95: 5, соответственно, об / об / об) в качестве подвижной фазы А. и метанол в качестве подвижной фазы В при скорости потока 1,0 мл мин. -1 при продолжительности пробега 10 мин. Анализ был линейным в диапазоне 0.От 15 мкг мл -1 до 100,00 мкг мл -1 с нижним пределом обнаружения 3,00 мг / кг -1 , и степень извлечения превышала 90%. Внутрисуточная и межсуточная точность была менее 4%. Этот метод оказался успешным при определении свободного пролина в меде в диапазоне от 80,5 мг / кг -1 до 426,4 мг / кг -1 в различных образцах меда. У вас есть доступ к этой статье Подождите, пока мы загрузим ваш контент… Что-то пошло не так. Попробуйте снова?Анализ аминокислот в меде МанукаМед, натуральный продукт, производимый пчелами, имеет сложную матрицу сахаров, белков, минералов, витаминов, ферментов и свободных аминокислот.Аминокислоты, полученные из нектара растений, составляют 50-30 мг / кг меда, наиболее распространенным из которых является пролин, вторичная аминокислота, происходящая в основном из гемолимфы пчел. Были исследованы три метода анализа аминокислот в меде. В первом использовалась ВЭЖХ-УФ с дериватизацией до колонки, во второй ВЭЖХ-МС с хроматографией гидрофобного взаимодействия и, наконец, ВЭЖХ-МС с дериватизацией aTRAQ ™. Метод ВЭЖХ-УФ включает дериватизацию аминокислот с помощью OPA-MPA и FMOC.Полностью автоматизированная программа инъекции проанализировала семнадцать первичных аминокислот за 19 минут. В конечном итоге обнаружение УФ-излучением имело недостаточную чувствительность, и вторичная аминокислота пролин не могла быть обнаружена. Метод был отклонен по этим основным причинам. Хроматография ZIC-pHILIC в сочетании с LC-MS-MS дала высококачественное разделение двадцати одной аминокислоты, обнаруженной с помощью запланированного MRM, за 10 минут. Извлечение аминокислот из флакона в большинстве случаев было низким, так как это изменение связано с подготовкой образцов.Потери аминокислот во флаконе не могли быть восстановлены, поэтому было начато исследование последнего метода. В последнем методе использовался набор aTRAQ ™, который маркирует аминокислоты реагентом Δ8 для анализа, а также предоставляет внутренние стандарты, меченные Δ0, для сравнения. С помощью MRM можно точно определить 48 аминокислот и внутренних стандартов за 18 минут. Подготовка проб была оптимизирована для меда, и метод прошел валидацию. Содержание аминокислот в десяти медах сравнивали со значениями, полученными в Университете Мэсси.Наблюдались небольшие различия в большинстве аминокислот. Манука и клеверный мед из этого набора данных также сравнивались, было обнаружено, что фенилаланин и тирозин были в гораздо более высоких концентрациях в клеверном меде. Были проанализированы семь видов меда манука, хранившихся в разных условиях, теплых и холодных. Прикладной статистический анализ с гипотезой о том, что теплый мед будет иметь более низкую концентрацию аминокислот, чем холодный, показал, что это верно для семнадцати аминокислот. Глютамин, а затем лизин были в пониженных концентрациях после хранения в тепле в большинстве образцов меда.Содержание аминокислот в меде, проанализированное этим методом, можно использовать для исследования: ботанического происхождения меда, скорости производства / сбора меда, влияния на конверсию DHA, неточной маркировки и добавления сахарного сиропа.границ | Аминокислотный профиль и хемометрические отношения меда черных карликов и пчелиной пыльцыГрафический реферат . ВведениеЦветочная пыльца — это продукт цветков, который, по сути, представляет собой упакованные гаметы голосеменных и покрытосеменных цветковых растений (1).В процессе опыления растений такие насекомые, как медоносные пчелы, собирают пыльцу, которая необходима в их рационе (как основные источники белков, витаминов, минералов, насыщенных жирных кислот и масел, углеводов и других полезных соединений, таких как антиоксиданты) (2 , 3). После процесса агломерации с образованием небольших сфер или гранул пыльцы с комбинацией нектара и слюнного секрета пчела переносит пыльцу в грануле в сочетании с нектаром и слюнными секретами в корбикуле или корзине для пыльцы, расположенной на каждой задней лапе, что известно обычно как «пчелиная пыльца».Эти количества пыльцы могут быть собраны пчеловодом у входа в улей и считаются богатым питательными веществами здоровым продуктом пчеловодства, помимо меда, маточного молочка и прополиса для потребления человеком (4–6). Пчелиная пыльца используется в апитерапевтических процедурах, поскольку она демонстрирует лечебные свойства, включая противогрибковые, противомикробные, противовирусные, противовоспалительные и иммуностимулирующие. Он также используется в качестве местного анальгетика, а также способствует процессам заживления послеоперационных ран и ожогов (2, 4, 7).Аминокислоты составляют всего 1% (вес / вес) ингредиентов меда, а основным источником белка (до 50%) и аминокислот в меде является пчелиная пыльца (8). Пыльца и аминокислотный состав специфичны для отдельных пчелиных семей в одних и тех же географических точках, типах цветов и условиях окружающей среды; таким образом, они также используются для определения ботанического происхождения меда (8–12). Использование пчелиной пыльцы является обычным явлением в рационе человека и официально признано лекарственным средством Федеральным советом здравоохранения Германии.Он также известен как «единственно полноценная пища» (2, 13, 14). Рекомендуемая суточная доза пчелиной пыльцы в качестве пищевой добавки составляет 5–10 г / день (3). Продовольственная и сельскохозяйственная организация (ФАО) рекомендует, чтобы пчелиная пыльца состояла из более чем 16 незаменимых и заменимых аминокислот, включая, например, метионин (Met), лизин (Lys), треонин (Thr), гистидин (His), лейцин ( Leu), изолейцин (Ile), валин (Val) и фенилаланин (Phe), тогда как аргинин (Arg), His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Thr и триптофан (Trp) (7, 12, 15 –17).Такие ингредиенты стали рассматриваться как функциональные продукты в пищевых продуктах и кормовых добавках (18). Apis andreniformis (Hymenoptera: Apidae) — один из девяти видов меда, распространенных в тропической и субтропической Азии (19, 20). В Таиланде этот вид был обнаружен от прибрежных равнин (1–100 м над уровнем моря) на востоке (провинция Чантабури) до высокогорных и лесных районов на высоте около 1600 м в северных частях Таиланда (21). Поскольку пыльца считается основным источником аминокислот в меде, анализ ее содержания вместе с хемометрическими методами часто используется для оценки ботанического и географического происхождения меда (10, 22).С этой целью, A. andreniformis распространен неоднородно, поэтому было опубликовано очень мало исследований химического состава его меда и пыльцы, дающих информацию о питании (23). Целью этого исследования является определение белков, аминокислотного состава и пищевой ценности пыльцы карликовых пчел по сравнению с таковыми в меде из тех же источников. Предоставляя хемометрические соотношения аминокислотного профиля, это исследование можно также использовать для описания географической принадлежности этой экзотической медоносной пчелы.Насколько нам известно, это первый отчет черной карликовой пчелы о пищевых потребностях человека и пчел. Материалы и методыСбор пробПробы меда и пчелиной пыльцы были собраны в пяти колониях A. andreniformis с той же численностью популяции. Пробы были собраны в течение февраля – марта 2019 г. в пределах 5 км 2 в открытом высокогорном лесу (18 ° 53,086 ′ с.ш., 98 ° 50,8208 ′ в.д.), район Мае Рим, Чиангмай.Район был выбран как высокогорный (800 м над уровнем моря), который благоприятствует произрастанию A. andreniformis и удален от промышленного сельского хозяйства. Колонии были возвращены в исследовательскую лабораторию Мелипонини и Апини, пыльца была немедленно собрана из пыльцевого соты, а затем их хранили при -21 ° C до анализа (24). Мед также собирали из тех же колоний. Все образцы меда были извлечены, непастеризованы и хранились при 4 ° C перед анализом (25). Морфология пыльцыМорфологическую идентификациюобразцов пчелиной пыльцы проводили под микроскопом Primo Star (Carl Zeiss, Германия).Каплю 20% раствора фруктозы, содержащего 0,5 г кристаллизованного фенола, добавляли поверх образца на предметное стекло для облегчения переноса и распространения пыльцы и ускорения их набухания (25). Затем слайды обезвоживали на горячей плите при 40 ° C и помещали в глицериновый желатин перед просмотром под увеличением. Аминокислотный анализАминокислотный составопределяли с помощью аминокислотного анализатора ARACUS (mbraPure GmbH, Боденхайм, Германия), оборудованного колонкой C18 и детектором показателя преломления (RI).Высокоэффективная жидкостная хроматография была соединена с масс-спектрометром, оборудованным электрораспылением ионизации для разделения аминокислот с последующей реакцией нингидрина и фотометрическим детектированием. Детектор был установлен на 570 и 440 нм, и в качестве инертного газа использовался N 2 . Экстракцию кислотного гидролизата проводили согласно адаптированному методу Vanderplanck et al. (26), а также для связанных аминокислот 10 мл экстрагирующего раствора, содержащего 6 н. HCl и 0,1% фенола, добавляли к 30 мг пыльцы (сухой вес) или 300 мг меда.Гидролизат обрабатывали в установке для микроволнового разложения TANK PRO (Sineo, Китай) в течение 2 часов и оставляли охлаждаться при комнатной температуре под вытяжным шкафом. Образец фильтровали через ватман № 1 фильтровальная бумага. Прозрачный гидролизат (1 мл) разделяли на аликвоты и упаривали досуха в ротационном вакууме. После этого добавляли 1 мл буфера для образца для растворения высушенного образца. Образец фильтровали через микрофильтр с размером пор 0,45 мкм, и чистый экстракт вводили (20 мкл) в анализатор аминокислот с условиями, установленными в соответствии с инструкциями производителя. Оценка качества белкаСодержание белкаСырой белок (% N × 6,25) определяли по методу Кьельдаля с использованием прибора для сжигания азота (FP828, LECO, США) (27, 28). Индекс незаменимых аминокислотИндекс незаменимых аминокислот (EAAI) был рассчитан с использованием метода Oser et al. (29), используя соотношение относительных незаменимых аминокислот в тестируемом белке по сравнению с соответствующими значениями в цельном яичном белке (30). EAAI = nLysa × Tyra ×… .. × HisaLysb × Tyrb ×…. × Hisb (1), где a — это аминокислота в исследуемом образце, а b — это аминокислота в контрольном образце белка; n — количество незаменимых аминокислот. Биологическая ценностьБиологическая ценность (BV) была рассчитана в соответствии с уравнением, используемым Oser et al. (29). BV = 1,09 × Индекс незаменимых аминокислот-11,7 (2)Коэффициент эффективности белкаСогласно совместному отчету консультации экспертов Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) / ФАО, он был рассмотрен и предложен заменить метод определения коэффициента эффективности белка с использованием роста крыс и был признан неудовлетворительным.Таким образом, отношения эффективности белков (PER) на основе взаимодействия между Leu-пролином (Pro) и Leu-тирозином (Tyr) были рассчитаны с использованием модифицированных уравнений регрессии, как описано Alsymer et al. (31). PER-1 = -0,684 + 0,456 (Leu) -0,047 (Pro) (3) PER-2 = -0,468 + 0,454 (Leu) -0,105 (Tyr) (4)Показатель аминокислотПоказатели аминокислот (%) для младенцев (дошкольные учреждения) и взрослых были рассчитаны как отношение наблюдаемого количества аминокислоты (г / 100 г белка) к эталонному образцу, предоставленному ФАО / ВОЗ (32). In vitro Тест на усвояемостьВысушенный образец (1,5 г) смешивали с 0,002% пепсином в 0,0075 н. Растворе HCl (150 мл). Образцы инкубировали при непрерывном перемешивании в течение 16 ч при 45 ° C. После фильтрации через ватман нет. 5 прозрачный раствор анализировали на содержание белка (1). Усвояемость рассчитывали как отношение содержания белка в супернатанте к исходному содержанию белка в образце (1,5 г). Результаты выражаются как содержание переваренного белка (г) / 100 г общего белка (пыльцы) пчелиного хлеба (18). Приблизительный анализПредварительные анализы были выполнены в соответствии с методами Ассоциации официальных химиков-аналитиков (33). Общее содержание углеводов рассчитывали по следующей формуле: Содержание углеводов (%) = 100 — (% влажности +% общего белка +% зольности +% общего содержания жиров) (5)Общая энергия одной порции образца (100 г свежего веса) была рассчитана в соответствии со следующим уравнением (34): Общая энергия = (содержание энергии в 1 г белка × г белка в образце) + (содержание энергии в 1 г жира × г жира в образце) + (содержание энергии в 1 г углеводов × г углеводов в образце) (6)Где энергетическая ценность 1 г белка = 4 ккал, энергетическая ценность 1 г жира = 9 ккал и энергетическая ценность 1 г углеводов = 4 ккал. Статистический анализДанные были собраны из трех независимых повторов и проанализированы с использованием дисперсионного анализа (ANOVA) с SPSS (версия 23). Анализ главных компонентов (PCA) использовался для объяснения и интерпретации взаимозависимости данных (1, 35). PCA и кластерный анализ всех типов образцов и содержания аминокислот были выполнены с использованием XLSTAT (пробная версия, XLSTAT.com). Результаты и обсуждениеМорфология пыльцыНесмотря на то, что таксономическое описание базы данных пыльцы в Юго-Восточной Азии недостаточно документировано, три партии пыльцы (а именно., принадлежащие к монофлоральным, бифолоральным и гетерофлоровым) обычно определялись (3). Несколько структур прироста пыльцы были идентифицированы из отобранных колоний, а именно: монолет (рисунок 1A), неапертурат (рисунок 1B), тризоноколпат (рисунок 1C), диколпат (рисунок 1D), монолат (рисунок 1E) и трилете (рисунок 1F). . Поверхности изгнания были псилатными (Рисунки 1A, C, D), чешуйчатыми (Рисунок 1B), булавовидными (Рисунок 1E) и эхинатными (Рисунок 1F). Очевидно, что поверхности монолета, возможно, происходят из Fabaceae, таких как мимоза или Anacardiaceae. семейство, такое как Tapirira видов (3), тогда как тризоноколпат был подобен таковым, принадлежащим к цветкам лонган (11, 36).Типы пыльцы варьировались в зависимости от вида пчел, что в значительной степени связано с размером тела и расстоянием полета. Более крупная пчела может посещать больше видов растений и переносить больше пыльцы (37). В случае A. andreniformis переменные пищевые ресурсы кажутся меньше, чем у других Apis spp. так как они могли собирать корм позже, но в небольшом количестве, предположительно используя ресурсы, превышающие продуктивное время (38). Морфология пыльцы также указывает на то, что типы пыльцы, обнаруженной в колонии 3, менее изменчивы, чем в остальных колониях (Таблица 1).Это подтверждает ограничение источников пыльцы для этого вида пчел. Пыльца и нектар являются двумя основными источниками пищи, такими как сахар, белок, минералы, витамины, жирные кислоты и небольшой процент других компонентов для медоносной пчелы (39). Морфология пыльцы помогает в идентификации пчелиного корма, который может быть полезен для повышения эффективности и коммерции пчеловодства. Пыльца, хранящаяся в улье, наследует мутуалистический микроб или небольшое сообщество микробов в очень кислых условиях, что вызывает разрушение структуры пыльцы из-за биохимического разложения пыльцы, что приводит к легкому высвобождению питательных веществ для пчел.Также наблюдалась деформационная структура (рисунки 1D – F), что указывает на деградацию клеточной стенки, что в значительной степени способствует значимости содержания белка в пыльце после переваривания (1). Рисунок 1 . Морфология пыльцевых зерен A. andreniformis ; монолет (A) , инапертурат (B) , тризоноколпат (C) , диколпат (D) , монолат (E) и трилете (F) . Таблица 1 .Частота типов пыльцы, идентифицированных из колоний A. andreniformis . Аминокислотный анализАминокислотные хроматограммы пчелиной пыльцы из разных семей и соответствующего меда представлены в качестве дополнительных. Как показано в Таблице 2, общее содержание аминокислот в пыльце черной карликовой пчелы (~ 150 мг / г) было выше, чем в меде (~ 15 мг / г) из той же колонии. Thr, Phe и Leu были одними из самых высоких обнаруженных типов незаменимых аминокислот. Удивительно, но количество этих типов аминокислот было одинаковым как в пыльце, так и в меде, при этом Thr был немного выше (~ 3 мг / г), чем у других.Пыльца, однако, содержала больше заменимых аминокислот, чем мед с глицином (Gly), гамма-аминомасляная кислота (ГАМК) и аспарагиновая кислота (Asp) были одними из самых высоких (~ 50 мг / г). Pro обычно являются основными аминокислотами пыльцевых зерен и меда (8, 25, 41). Однако наши открытия предполагают, что для этого типа зерен мультифлоры, собранных черной карликовой пчелой и медом, было гораздо меньше Pro, чем в других типах аминокислот. В других исследованиях более низкое содержание Pro утверждалось, что пчелы собирали пыльцу и нектар в начале сезона цветения (8, 42).Это также указывает на незрелость меда, особенно для меда Apis mellifera и Apis cerana (42, 43). Pro — это доминирующая аминокислота, которая считается важным показателем для определения качества меда. Было обнаружено, что содержание Pro в меде постоянно уменьшается во время хранения, и его концентрация может использоваться в качестве индикатора спелости меда, как сообщалось ранее Berger et al. (44). Все проанализированные образцы меда и пыльцы, за исключением меда CL2, показали значения, превышающие международно признанное минимальное значение 180 мг / кг для Pro (45, 46).Таким образом, мед CL2 можно рассматривать как незрелый мед. Медоносные пчелы — исключительные пользователи углеводов в качестве метаболического топлива для высокой интенсивности полета в воздухе. Они также обладают способностью окислять аминокислоту Pro, но вклад этой аминокислоты незначителен по сравнению с углеводами. Ферментативная активность, участвующая в окислении Pro, самая низкая у медоносных пчел и, следовательно, не может окислять его с высокой скоростью (46). Таблица 2 . Аминокислотные композиции A.andreniformis пчелиная пыльца разных колоний из естественной среды обитания в агролесах Северного Таиланда. С точки зрения питания известно, что Thr влияет на развитие мозга и считается второстепенной незаменимой аминокислотой, необходимой для поддержания человеческого организма (18, 47). Точно так же с Thr повышенные концентрации Phe, которые встречаются в белковой диете млекопитающих, за исключением грудного молока, могут вызывать расстройство мозга в раннем возрасте человека (48).Лей играет важную роль в развитии мышц и ускорении выработки гормона роста (49). Gly и ГАМК являются основными нейротрансмиттерами, которые помогают в развитии центральной нервной системы человека у взрослых млекопитающих (50). Gly действует не только как мощный тормозной нейротрансмиттер, но также парадоксальным образом как коагонист или модулятор возбуждающего нейромедиатора глутамата на его рецепторах (51). ГАМК функционирует как тормозные синапсы в головном мозге, связываясь со специфическими рецепторами плазматической мембраны, вызывая там гиперполяризацию, действуя как противосудорожные, анксиолитические и седативно-снотворные средства (52, 53).Помимо обогащающих аминокислот, пчелиная пыльца показывает высокое содержание сахаров, ненасыщенных и насыщенных жирных кислот и минералов, которые могут быть потенциальными источниками пищевых добавок (3). Помимо этого, пчелиная пыльца также обладает биоактивностью, включая противомикробные, антимутагенные, антиоксидантные и противовоспалительные. Эта биоактивность пыльцевых зерен зависит от наличия активных фитоконструкций (13, 54). Мы также использовали двусторонний дисперсионный анализ для анализа значительных вариаций аминокислот в этих источниках и в образцах колоний, как показано в таблице 3.Данные также показали, что IIe была единственной незаменимой аминокислотой, которая значительно различалась между типами источников, тогда как количества заменимых аминокислот Ala, Asp, аспарагина (Asn), Gly, Pro, Glu и ГАМК были значительно различаются между медом и пыльцой. Незаменимые аминокислоты существенно не различались между собранными колониями. Тем не менее, Ala, GABA и Tau типов заменимых аминокислот были обнаружены в количестве, отличном от этих колоний. Взаимодействие между источниками и колонией показало, что ГАМК была ключевой аминокислотой, отличающей пыльцу и мед для этого конкретного типа дикого меда.Чтобы дополнительно объяснить хемотипические отношения в этих образцах, на основе этих наборов данных был проведен PCA. Таблица 3 . Уровни значимости в двухфакторном дисперсионном анализе источников аминокислот (пыльца и мед) в зависимости от колоний A. andreniformis . Хемометрический анализМноговариантный анализ (PCA) был использован для аминокислот, определенных в ходе исследования для дифференциации пыльцы и меда на основе их ботанического происхождения. Было обнаружено, что первый (PC1) и второй (PC2) основные компоненты составляют 60.87 и 19,80% дисперсии в случае незаменимых аминокислот (рис. 2). В первом компоненте с дисперсией 60,80% преобладали Met, Thr, Leu и Phe, тогда как во втором компоненте с дисперсией 19,80% преобладали Lys, Trp и Arg. PCA показал, что на первые четыре фактора нагрузки приходилось 96,43% дисперсии незаменимых аминокислот, причем на первый, второй, третий и четвертый компоненты приходилось 60,87, 19,80, 10,69 и 5,58% дисперсии соответственно. Первый компонент, показывающий 60.Было обнаружено, что 87% вариабельности положительно коррелируют с Ile, Leu, Phe, Thr и Met, в то время как второй компонент составляет 19,80 вариации, демонстрируя положительную корреляцию с Leu, Trp и Val. Было обнаружено, что CL1 положительно коррелирует с CL4, показывающим коэффициент корреляции Пирсона 0,824, и с CL5, имеющим коэффициент 0,724. Это было связано с близостью кластера, образованного CL1, CL4 и CL5. Среди колоний, проанализированных с помощью PCA, было обнаружено, что CL3 показывает наименьшие коэффициенты корреляции, равные 0.07, 0,03, 0,14 и 0,12 с CL1, CL2, CL4 и CL5. Это объясняет отделение этой колонии от остальных колоний. Анализ заменимых аминокислот с помощью PCA выявил 99,84% совокупной дисперсии для первых четырех факторов нагрузки. Было обнаружено, что первый компонент с отклонением 90,19% показывает положительную корреляцию с Asn, Gly, Glu и GABA, тогда как второй компонент (PC2) обнаруживает положительную корреляцию с цистеином (Cys), Pro, серином (Ser), и ГАМК. Корреляция Пирсона показала, что CL2 больше коррелирует с CL1, показывающим коэффициент корреляции 0.95, а CL4 значительно больше коррелирует с CL5 (0,99), что позволило им сблизиться друг с другом на графике PCA. Рисунок 2 . Анализ основных компонентов составов незаменимой аминокислоты (A) и незаменимой аминокислоты (B) для различных пыльц из колоний A. andreniformis (CL1 – CL5) также был проведен с использованием кластерного анализа биплот с типами незаменимые аминокислоты (C) и заменимые аминокислоты (D) . В пыльце кластерный анализ состава незаменимых аминокислот в колониях (рис. 2A) предполагает, что состав CL3 отличался от других по уровням Leu, Lys, Trp и Val, тогда как для заменимых аминокислот составы, PCA сгруппированы (i) CL3, (ii) CL4, CL5 и (iii) CL1, CL2 классы. Очевидно, что внутри второго класса CL4 и CL5 связаны с содержанием аспарагина и ГАМК и связаны с третьим классом с Gly. Этот результат согласуется с типами структур пыльцы, указанными в Таблице 1, в которой установлено, что CL3 имеет меньшую вариабельность источников пыльцы по сравнению с другими.Чтобы не делать выводов, основанных на неопределенных образцах, CL3 был исключен для дальнейшего анализа. Взаимосвязь между аминокислотным составом как меда, так и пыльцы A. andreniformis показана на рисунках 3, 4. В этих образцах было четкое разделение аминокислотного состава. Между пыльцой и медом незаменимые аминокислоты, а именно Met, Phe, Leu и Thr внесли некоторые связи в эти два продукта пчеловодства (рис. 3B). Что касается заменимых аминокислот, образцы из каждой колонии анализировали PCA отдельно в соответствии с классами аминокислотного профиля из пыльцы, проанализированной ранее (Фигуры 2B, D).Результаты анализа показали, что результаты на рисунках 4C, D показали, что, несмотря на дискретное разделение, аминокислотные профили пыльцы в пределах классов образцов (CL1, 2 и CL3, 4), аспарагин, Cys, ГАМК и G, в основном, сыграли определенную роль. на связь заменимых аминокислот между пыльцой и медом A. andreniformis . Рисунок 3 . Анализ основных компонентов состава незаменимых аминокислот (A) и кластерный анализ двух графиков с типами незаменимых аминокислот (B) пыльцы (PL) и меда (HO) A.andreniformis . Рисунок 4 . Анализ основных компонентов незаменимых аминокислотных составов CL1–2 (A) и CL4–5 (B) и кластерный анализ двух графиков с типами незаменимых аминокислот CL1–2 (C) и CL3–4 (D) пыльцы (PL) и меда (HO) A. andreniformis . Аминокислотные профили использовались для выяснения происхождения меда разных типов (8, 10, 43), и пыльца могла в значительной степени способствовать формированию структуры аминокислот, поскольку пчелы собирали нектар и пыльцу из одних и тех же ботанических ресурсов (3, 6 ).Пыльца и мед известны как основные источники питательных веществ для пчел. Рабочие пчелы потребляли большое количество пыльцы, чтобы поддерживать рост и секреторную активность своих гипофарингеальных желез (ГГ), тогда как собиратели переваривают большое количество нектара и меда, чтобы обеспечить энергию для своих полетов (55). Пыльца собиралась, хранилась и смешивалась с выделениями рабочих пчел, а затем хранилась в сотах как перга; профиль питания пыльцы намного выше по способу хранения (56). де Гроот (40) и Taha et al.(12) проиллюстрировал десять аминокислот, которые необходимы для роста медоносной пчелы. Среди них наше исследование утверждало, что из этих конкретных ботанических ресурсов Met, Phe, Leu и Thr были в изобилии как в меде (нектаре), так и в пыльце для A. andreniformis . Тепловая карта была также выполнена для выяснения аминокислотного профиля меда и пыльцы медоносных пчел, а также их взаимосвязи (рис. 5). Очевидно, что аминокислоты меда и пыльцы пчел отличаются друг от друга. Рисунок 5 . Аминокислотное профилирование (тепловое картирование) пыльцы и меда, собранных из разных колоний A. andreniformis . Примерный составРезультаты приблизительного анализа состава как пыльцы, так и меда показаны в таблице 4. Пыльца нектарообразующих растений играет важную роль в определении спектрального процента пыльцы. Концентрация пыльцы в конкретном меде может служить ценным инструментом для подтверждения его одноцветной аутентичности.Выявлена достоверная разница в содержании влаги и углеводов среди параметров экспресс-анализа. Таблица 4 . Данные о питании пыльцы и медоносной пчелы A. andreniformis . Содержание влаги варьировалось от 21,52 (1) до 25,48% (3) в меде и от 16,38 до 18,66% в пыльце. Было обнаружено, что содержание влаги в проанализированных образцах меда превышает установленный Комиссией Codex Alimentarius предел <20%. Одно только содержание влаги в меде и пыльце считается важным компонентом, который служит стандартом для оценки их качества в международной торговле (57).Содержание влаги играет важную роль в определении качества меда, так как оно определяет срок его хранения и технологические свойства. Мед, содержащий больше влаги, может быть подвержен порче дрожжами (58). Низкое содержание влаги в образцах пыльцы служит достоверным показателем качества, защищающим ее от порчи, вызванной дрожжевым брожением. Было обнаружено, что содержание влаги в меде и пыльце определяется климатическими условиями, географическим регионом, периодом созревания, растительными источниками и температурой в зоне хранения, временем сбора урожая и условиями обработки (59).Содержание сырой клетчатки варьировалось от 3,03 до 3,46% в меде и от 5,16 до 5,85% в пыльце. Наличие более высокой доли клетчатки в пыльце может быть связано с ее регулирующим действием на функции кишечника, что подтверждается клиническими испытаниями. Было обнаружено, что клетчатка, содержащаяся в пыльце, облегчает проблемы с желудком, укрепляя его слизистую оболочку и мышцы, тем самым предотвращая расстройство желудка, колит, запор и язвы. Зольность меда варьировала от 0,56 до 0,65%, а в случае пыльцы — от 0.52 до 0,63%. Самый низкий процент содержания золы указывает на то, что пыльца содержит наименьшее количество минералов, поскольку содержание золы связано с содержанием минералов. Зольность анализируемых проб, за исключением меда из пыльцы колонии 3 и пыльцы колонии 1, находилась в пределах (<0,6%), установленных международными нормами (60). Таким образом, мед CL3 и пыльца CL1 могут рассматриваться как мед падевый или смесь меда из падевого меда с цветочным медом, тогда как другие образцы меда подпадают под категорию нектарного меда в соответствии со стандартами Комиссии Codex Alimentarius.Результаты по содержанию золы в настоящих образцах меда соответствуют значениям образцов меда из Северо-Восточной Нигерии, сообщенным Buba et al. (61). Несколько исследователей обнаружили, что зольность (содержание минералов) в меде зависит в основном от его ботанического происхождения и, таким образом, считается важной составляющей при определении цветочного происхождения меда (62). Было обнаружено, что содержание белка в меде колеблется от 1,73 до 2,61%, при этом мед из колонии 3 показывает максимальное содержание белка, а мед из колонии 1 — наименьшее.Было обнаружено, что содержание белка в образцах меда, использованных в исследованиях, выше, чем в тех, которые проанализировали Buba et al. (61) из Северо-Восточной Нигерии и в соответствии с образцами меда, проанализированными Agunbiade et al. (63). Более высокое количество белка в пыльце (12,3–14,5%) служит основным источником белка и аминокислот для пчел, способствующих развитию их желез (64). Белки в меде состоят из двух основных групп, включая ферменты углеводного обмена и белки, характерные для маточного молочка (65).Белки, в основном присутствующие в меде в виде ферментов, ответственны за преобразование его химического состава; в частности, сахарный спектр. Было обнаружено, что количество аминокислот в различных медах составляет 18, из которых Pro преобладает почти во всех типах меда. Белки в меде в основном выделяются из слюны и HG пчел, а не из нектара (66). Диастазы гидролизуют крахмал до мальтозы и используются в качестве индикатора для определения свежести меда. Кодекс Алиментариус и Европейская директива по меду оценили восемь единиц диастазы для измерения качества меда.Глюкозооксидаза и каталаза, присутствующие в меде, обладают противомикробным действием, поскольку они регулируют выработку перекиси водорода, которая действует как антибактериальный агент. Белки в меде обладают антимикробной активностью и действуют как потенциальные маркеры при определении географического и ботанического происхождения меда (67). Значительные различия, наблюдаемые между содержанием белка в проанализированных образцах меда, можно объяснить их разными растительными источниками и видами пчел, которые собирают пищу на одном и том же растительном источнике (68). Анализ содержания жира в пыльце, использованный в этом исследовании, не обнаружил значительных различий со значениями в диапазоне от 5,01 до 5,05%. Медоносные пчелы питаются пыльцой и нектаром растений для производства меда. Пыльца является важным источником белков, липидов, витаминов и минералов, тогда как нектар является основным источником углеводов (69). Качество пыльцевой диеты отражает количество питательных веществ, доступных пчелам, и влияет на физиологический метаболизм. Неудивительно, что мед, проанализированный в этом исследовании, не содержал жира.Считается, что пыльца с относительно более высоким содержанием жира содержит меньше белка и полезна для привлечения медоносных пчел, собирающих пищу (70). Исследователи обнаружили, что в меде практически нет жира, что коррелирует с результатами нашего исследования (71, 72). Было обнаружено, что содержание углеводов в образцах меда, исследованных в настоящем исследовании, значительно отличается друг от друга, при этом мед из колонии 1 показывает максимальное содержание (73,16%), тогда как самое низкое содержание углеводов было обнаружено в меде из колонии 3, имеющем значение из 67.80%. Углеводы составляют основную часть меда (около 82%), из которых 38,2% составляют моносахариды фруктозы и 31% глюкозы. Фруктоза и глюкоза производятся путем гидролиза дисахарида сахарозы, и относительное количество этих двух моносахаридов выступает в качестве важного критерия для классификации меда с одинарным цветком (73). Другие углеводы включают 25 различных сахаров, включая дисахариды, мальтозу и сахарозу (74). Полученный результат содержания углеводов соответствует работам нескольких исследователей (63, 75). Энергетическая ценность образцов меда колебалась от 281,64 до 299,54 Ккал, а образцов пыльцы — от 324,49 до 337,0 Ккал. Энергия в меде в первую очередь объясняется более высоким содержанием в нем сахара, который легко усваивается (76). Ферменты в меде превращают полисахариды в моносахариды и дисахариды, которые служат важными источниками энергии. Настоящее исследование показало положительный эффект in vitro на усвояемость как пыльцы, так и меда.Процент перевариваемости пыльцы колебался от 0,841 до 0,864, тогда как было обнаружено, что образцы меда имеют процент перевариваемости от 0,620 до 0,887. Метод in vitro — это точный и надежный метод, который отображает физиологически значимую меру усвояемости белков. Он играет важную роль в понимании способности высвобождения аминокислот и пептидов при переваривании белков и, таким образом, является одним из показателей качества белков (77). Профиль питания пыльцы и белков медаБыло обнаружено, что содержание заменимых аминокислот преобладает в общем аминокислотном профиле во всех проанализированных образцах меда и пыльцы каждой колонии.Пыльцевые зерна всех колоний показали более высокую концентрацию заменимых аминокислот, тогда как общее количество незаменимых аминокислот было самым высоким в образцах меда, как показано в таблице 2. Было обнаружено, что общее количество незаменимых аминокислот было самым высоким в меде колонии 3. , отображая значение 42,28, а наименьшее значение было показано пыльцой CL1. Медоносные пчелы не могут синтезировать 10 незаменимых для них аминокислот, которые необходимо получать из других источников пищи (57). Единственным источником аминокислот в рационе медоносных пчел является пыльца, и не все эти аминокислоты содержатся в отдельных типах пыльцы.Пчелы поглощают избыточное количество пыльцы, чтобы восстановить необходимое количество незаменимых аминокислот, если в пыльце отсутствуют сбалансированные аминокислоты (78). Наименьшее содержание (г / 100 г) незаменимых аминокислот в пыльце CL1, 2 и 5 соответствует самому низкому общему количеству незаменимых аминокислот в меде этих колоний. Было обнаружено, что пыльца CL3 содержит больше незаменимых аминокислот, чем требуется пчелам, за исключением Leu и Val, как показано в таблице 2. Это приводит к более высокой концентрации незаменимых аминокислот в меде, экстрагированном из CL3.Потребности пчел в питании зависят от состава незаменимых аминокислот в пыльце по сравнению с потребностями пчел, о чем ранее сообщал де Гроот (40). Было обнаружено, что по сравнению с минимальными требованиями для взрослых людей, незаменимый аминокислотный состав меда в CL3 превосходит все проанализированные образцы меда. Из расчетных значений общих незаменимых аминокислот более высокий процент был показан медом (42,28%) и пыльцой (4,48%) колонии 3, затем следуют CL4, 1, 2 и меньше всего — CL5.Было обнаружено, что общее содержание незаменимых аминокислот в проанализированных образцах пыльцы выше, чем в соответствующих образцах меда, причем пыльца CL1 показывает более высокий процент (97,82%), а пыльца CL3 — самый низкий (95,52%). Более высокие значения общих кислотных аминокислот в меде CL1 (6,04%) и CL2 (4,81) объясняют его чрезвычайно низкий pH и более высокий срок хранения из-за подавления роста бактерий и других микроорганизмов порчи (79). Аминокислоты с разветвленной цепью (BCCA) во всех проанализированных образцах меда оказались самыми низкими (> 1), за исключением меда из CL5 (11.33) и CL3 (7,89), что указывает на то, что потребление этих образцов меда (1, 2 и 4 колонии) не приводит к риску развития диабета 2 типа и безопасно для пациентов, страдающих диабетическими осложнениями. Сообщалось, что более высокое содержание BCAA вызывает у людей резистентность к инсулину, что приводит к развитию диабетических осложнений (80). EAAI среди проанализированных образцов пыльцы и меда оказался самым высоким для CL3 (27,989 и 61,44), что свидетельствует о наличии высококачественных белков по отношению к незаменимым аминокислотам.EAAI дает показатель качества белка, который определяет содержание всех незаменимых аминокислот по отношению к эталонному белку и потребности человека в соответствии со стандартами ФАО / ВОЗ (32). Поскольку каждая аминокислота важна для построения стабильной структуры белка, оценка белка для оценки качества питания должна учитывать весь вклад незаменимых аминокислот. Таким образом, EAAI представляет собой инструмент для представления всего спектра незаменимых аминокислот в соответствии со стандартами питания (29). BV указывает на то, что доля поглощенного белка, который становится включенным в белки клеток организма, была обнаружена наивысшей в пыльце и белках CL2 и CL3, соответственно. Самые низкие BV в образцах меда из CL1, 4 и 5 указали на их способность использоваться с наименьшей долей тестируемых белков в клетках организма. Самый низкий BV в этих образцах меда можно объяснить отсутствием некоторых незаменимых аминокислот. PER дает оценку сравнения пищевой ценности различных белков и рассчитывается на основе взаимодействия между Leu – Pro и Leu – Tyr (PER-1 и PER-2).Как сообщалось ранее Anand et al., Значения PER <1,5 для белков низкого качества и> 2 для белков высокого качества. (81). Показатели PER были самыми высокими в меде CL3 (> 2,0), что могло быть связано с более высоким содержанием незаменимых аминокислот. Оценка аминокислотОценка аминокислот — это индикатор для измерения эффективности белков и аминокислот, необходимых для различных групп населения. Он основан на том факте, что синтез белка клетками организма не происходит, если необходимые аминокислоты не поступают с пищей.Таким образом, оценка аминокислот отражает качество белка по отношению к пропорции незаменимых аминокислот, присутствующих в пищевом материале, и то, что аминокислоты, присутствующие в небольшом количестве, считаются ограничивающими аминокислотами (82). Иле был лимитирующей аминокислотой во всех проанализированных образцах меда, кроме меда из CL5 (Таблица 5). Lys был ограничивающей аминокислотой во всех образцах пыльцы и меда, однако мед из CL3, как было обнаружено, обладал чрезмерной концентрацией Lys по сравнению со стандартом ФАО / ВОЗ (32).Основываясь на показателях незаменимых аминокислот для младенцев и взрослых, Leu, Thr, Met + Cys и Phe + Tyr были наиболее распространенными незаменимыми аминокислотами в пыльце и меде всех колоний. Самые низкие значения химической оценки представляют меньшее количество аминокислот по сравнению с требуемым количеством. Таблица 5 . Оценка аминокислот для младенцев / дошкольников и взрослых. ЗаключениеСтруктуры прироста пыльцы, идентифицированные в отобранных колониях, показали формы монолета, неапертурата, тризоноколпата, дикольпата, монолата и трилета.Пыльца показала большее содержание заменимых аминокислот, чем в меде, причем Gly, GABA и Asp были одними из самых высоких. Было обнаружено, что основные компоненты отражают 60,87% и 19,80% дисперсии в случае незаменимых аминокислот. Между пыльцой и медом незаменимые аминокислоты, а именно Met, Phe, Leu, Thr внесли некоторые связи в эти два продукта пчелиного меда. Высокие значения энергии в проанализированных образцах меда в первую очередь объясняются более высоким содержанием в них углеводов.Настоящее исследование подтвердило, что морфология пыльцы вместе с аминокислотным профилем может быть ценным инструментом для различения пыльцы и меда из различных ботанических источников. Заявление о доступности данныхДанные, подтверждающие выводы статьи, не являются общедоступными, но могут быть предоставлены соответствующим автором по обоснованному запросу. Авторские взносыSS разработал концепцию этого исследования. SS, BC и MW разработаны методологии.SS, BC, MW, TS и PS провели формальный анализ и расследование. СС и ФБ написали первоначальный черновик рукописи. Написание-рецензирование и редактирование выполнялись руководителями проекта SS, FB, BC, MB, SS и MB. Финансирование Приобретение было SS. Все авторы внесли свой вклад в статью и одобрили представленную версию. ФинансированиеЭто исследование было частично поддержано Университетом Чиангмая. Мы также хотели бы поблагодарить CMU за порт-докторский исследовательский фонд для FB. Конфликт интересовАвторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов. СокращенияAS, оценка аминокислот; EAAI, индекс незаменимых аминокислот; Иль, изолейцин; Лей, лейцин; Phe, фенилаланин; Thr, треонин; Met, метионин; Лей, лейцин; Trp, триптофан; Вал, Валин; Асн, аспарагин; Гли, Глицин; Glu, глутаминовая кислота; ГАМК, гамма-аминомасляная кислота; Цис, цистеин; Pro, Proline; Сер, серин; Asp, аспарагиновая кислота; CL, колонии. Список литературы1. Бенавидес-Гевара Р.М., Киказан М.К., Рамирес-Торо К. Усвояемость и доступность питательных веществ в пчелиной пыльце при различных предварительных обработках. Ingenier í a Competitividad . (2017) 19: 119–28. DOI: 10.25100 / iyc.v19i1.2136 CrossRef Полный текст | Google Scholar 2. Родригес-Карраско Y, Font G, Mañes J, Berrada H. Определение микотоксинов в пыльце пчел с помощью газовой хроматографии и тандемной масс-спектрометрии. J. Agric. Food Chem . (2013). 61: 1999–2005. DOI: 10.1021 / jf400256f PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar 3. Чуттонг Б., Фонгфисуттинант Р., Срингарм К., Бергетт М., Барт О.М.Питательный состав горшечной пыльцы четырех видов пчел без жала (meliponini) в Юго-Восточной Азии. В: Вит П., Педро С.Р.М., Рубик Д., редакторы. Горшечная пыльца в мелитологии безжальных пчел . Базель: Springer International Publishing (2018). п. 313–24. DOI: 10.1007 / 978-3-319-61839-5_22 CrossRef Полный текст | Google Scholar 4. Девеза М.В., Келлер К.М., Лорензон MCA, Nunes LMT, Sales ÉO, Barth OM. Микотоксикологический и палинологический профили товарных марок сушеной пчелиной пыльцы. Braz J Microbiol . (2015) 46: 1171–76. DOI: 10.1590 / S1517-838246420140316 PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar 5. Кокот К., Келчиковска М., Лучовска-Кокот Д., Курзепа Дж., Мусик И. Антиоксидантный потенциал прополиса, пчелиной пыльцы и маточного молочка: возможное медицинское применение. Oxid Med Cell Longev. (2018) 2018: 7074209. DOI: 10.1155 / 2018/7074209 PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar 6.Sattler JAG, de Melo ILP, Granato D, Araújo E, da Silva de Freitas A, Barth OM и др. Влияние происхождения на биологически активные соединения и пищевой состав пчелиной пыльцы из южной Бразилии: скрининговое исследование. Food Res Int. (2015) 77: 82–91. DOI: 10.1016 / j.foodres.2015.09.013 CrossRef Полный текст | Google Scholar 7. Комосинская-Васев К., Ольчик П., Кафмерчак Дж., Менцнер Л., Ольчикл К. Пчелиная пыльца: химический состав и терапевтическое применение. Evid Based Complement Alternat Med .(2015) 2015: 297425. DOI: 10.1155 / 2015/297425 PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar 8. Ковальски С., Копунцова М., Цесарова З., Кукурова К. Профиль свободных аминокислот польского и словацкого меда на основе метода ЖХ-МС / МС без предварительной дериватизации. J food sci Technol. (2017) 54: 3716–23. DOI: 10.1007 / s13197-017-2838-7 PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar 9. Castiglioni S, Astolfi P, Conti C, Monaci E, Stefano M, Carloni P.Морфологические, физико-химические и FTIR-спектроскопические свойства нагрузок пчелиной пыльцы различного ботанического происхождения. Молекулы . (2019) 24: 3974. DOI: 10.3390 / молекулы24213974 PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar 10. Чен Х, Цзинь Л., Чанг Кью, Пэн Т., Ху Х, Фань С. и др. Определение ботанического происхождения китайского меда по содержанию свободных аминокислот с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с флуоресцентным детектированием с помощью хемометрических подходов.? J Sci Food Agric. (2017) 97: 2042–49. DOI: 10.1002 / jsfa.8008 PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar 12. Taha E-KA, Al-Kahtani S, Taha R. Содержание белка и аминокислотный состав пчелиной пыльцы из основных цветочных источников в Аль-Ахса, восточная Саудовская Аравия. Saudi J Biol Sci. (2019) 26: 232–7. DOI: 10.1016 / j.sjbs.2017.06.003 PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar 13. Паскоал А., Родригес С., Тейшейра А., Феас X, Эстевиньо Л.М.Биологическая активность товарной пыльцы пчел: антимикробное, антимутагенное, антиоксидантное и противовоспалительное. Food Chem Toxicol . (2014) 63: 233–9. DOI: 10.1016 / j.fct.2013.11.010 PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar 14. Weiner CN, Hilpert A, Werner M, Linsenmair KE, Blüthgen N. Аминокислоты пыльцы и цветочная специализация у одиночных пчел. Apidologie. (2010) 41: 476–87. DOI: 10.1051 / apido / 2009083 CrossRef Полный текст | Google Scholar 15.Моргано М.А., Мартинс МСТ, Рабонато Л.С., Милани Р.Ф., Йоцуянаги К., Родригес-Амайя Д.Б. Комплексное исследование минерального состава пыльцы бразильских пчел: географические и сезонные колебания и вклад в рацион человека. J Braz Chem Soc . (2012) 23: 727–36. DOI: 10.1590 / S0103-50532012000400019 CrossRef Полный текст | Google Scholar 17. Николсон С.В., Человек Х. Химический состав пыльцы «низкого качества» подсолнечника ( Helianthus annuus , Asteraceae). Apidologie. (2013) 44: 144–52. DOI: 10.1007 / s13592-012-0166-5 CrossRef Полный текст | Google Scholar 18. Гош С., Юнг К. Пищевая ценность собранной пчелами пыльцы выносливого киви, Actinidia arguta (Actinidiaceae) и дуба, Quercus sp. (Fagaceae). J Asia-Pac Entomol . (2017) 20: 245–51. DOI: 10.1016 / j.aspen.2017.01.009 CrossRef Полный текст | Google Scholar 19. Вонгсири С., Чанчао С., Деованиш С., Ампрапа С., Чайявонг Т., Петерсен С. и др.Разнообразие медоносных пчел и пчеловодство в Таиланде. Пчелиный мир. (2000) 81: 20–9. DOI: 10.1080 / 0005772X.2000.11099464 CrossRef Полный текст | Google Scholar 20. Ван А.Р., Ким М.Дж., Ли Дж.Й., Чой Ю.С., Тапа Р., Ким И. Митохондриальный геном черной карликовой медоносной пчелы, Apis andreniformis (Hymenoptera: Apidae). Митохондриальная ДНК. (2015) 26: 914–6. DOI: 10.3109 / 19401736.2013.863288 PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar 21.Wongsiri S, Lekprayoon C, Thapa R, Thirakupt K, Rinderer TE, Sylvester HA и др. Сравнительная биология Apis andreniformis и Apis florea в Таиланде. Пчелиный мир . (1997) 78: 23–35. DOI: 10.1080 / 0005772X.1997.11099328 CrossRef Полный текст | Google Scholar 22. Зелински Ł, Дея С., Ясицка-Мисиак И., Кафарски П. Хемометрия как инструмент определения происхождения польских одноцветных и многоцветковых медов. J Agric Food Chem .(2014) 62: 2973–81. DOI: 10.1021 / jf4056715 PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar 23. Раттанаванни А., Чанчао С. Разнообразие пчел в Таиланде и применение продуктов пчеловодства. В: Грилло О, редактор. Изменение разнообразия в меняющейся среде . Риека: InTech (2011). п. 134–62. DOI: 10,5772 / 23068 CrossRef Полный текст | Google Scholar 24. Taha E-KA, Taha RA, Al-Kahtani SN. Источники нектара и пыльцы для медоносных пчел в провинции Кафрелшейх на севере.Египет. Saudi J Biol Sci. (2017) 26: 890–6. DOI: 10.1016 / j.sjbs.2017.12.010 PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar 25. Sun Z, Zhao L, Cheng N, Xue X, Wu L, Zheng J, et al. Идентификация ботанического происхождения китайского однотонного меда с помощью профилей свободных аминокислот и хемометрических методов. J Pharm Anal. (2017) 7: 317–23. DOI: 10.1016 / j.jpha.2017.06.009 PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar 26.Vanderplanck M, Moerman R, Rasmont P, Lognay G, Wathelet B, Wattiez R и др. Как химический состав пыльцы влияет на развитие и пищевое поведение поллектичных пчел? PLoS ONE . (2014) 9: e86209. DOI: 10.1371 / journal.pone.0086209 PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar 27. Рулстон ТД, Кейн Дж. Х., Бухманн С.Л. Что определяет содержание белка в пыльце: предпочтения опылителей, взаимодействие пыльцы и пестиков или филогения ?. Ecol Monogr . (2000) 70: 617–43.DOI: 10.1890 / 0012-9615 (2000) 070 [0617: WGPCOP] 2.0.CO; 2 CrossRef Полный текст | Google Scholar 28. Stabler D, Power EF, Borland AM, Barnes JD, Wright GA. Метод анализа небольших образцов цветочной пыльцы на наличие свободных и связанных с белками аминокислот. Методы Ecol Evol. (2018) 9: 430–8. DOI: 10.1111 / 2041-210X.12867 PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar 29. Oser BL. Интегрированный индекс незаменимых аминокислот для прогнозирования биологической ценности белков.В: Альбанезе А.А., редактор. Protein and Amino Acid Nutrition . Нью-Йорк, Нью-Йорк: Academic Press (1959). п. 295–311. DOI: 10.1016 / B978-0-12-395683-5.50014-6 CrossRef Полный текст | Google Scholar 30. Cheftel JC, Cuq JL, Lorient D. Protéines alimentaires. Biochimie-Propriétés Fonctionnellesvaleur Nutritionnelle-Modifications Chimiques . Париж: Техника и документация-Лавуазье (1985). п. 1–295. Google Scholar 31. Alsmeyer RH, Каннингем AE, Happich ML.Уравнения, предсказывающие PER на основе аминокислотного анализа. Food Technol . (1974) 28: 34–40. Google Scholar 32. ФАО / ВОЗ. Состояние отсутствия продовольственной безопасности и питания в мире, 2017 г. . Рим: ФАО / ВОЗ (2017). Google Scholar 33. Ассоциация официальных химиков-аналитиков (AOAC). Официальные методы анализа . Вашингтон, округ Колумбия: AOAC (2000). 34. ФАО. Уведомление Министерства здравоохранения (№182) Маркировка пищевых продуктов . Рим: Продовольственная и сельскохозяйственная организация Объединенных Наций (1998). п. 165–203. 35. Bergamo G, Seraglio SKT, Gonzaga LV, Fett R, Costa ACO. Физико-химические характеристики меда падевого и цветочного меда, производимого в штате Санта-Катарина: подход к дифференциации меда. Food Res Int . (2019) 116: 745–54. DOI: 10.1016 / j.foodres.2018.09.007 PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar 36.Мин Чжо Т., Юлин Л., Цзяньцзюнь К., Чунчжэнь С., Нигариш М., Сюхань X и др. Типы цветов, морфология пыльцы и прорастание пыльцы in vitro лонган ( Dimocarpus longan Lour.). J Bot Res . (2017) 1: 50–6. DOI: 10.36959 / 771/560 CrossRef Полный текст | Google Scholar 37. Hu L, Wu X-W. Разница в урожае пыльцы между Apis mellifera и Apis cerana на тибетском альпийском лугу. J MT Sci. (2019) 16: 1598–605.DOI: 10.1007 / s11629-018-5245-2 CrossRef Полный текст | Google Scholar 38. Олдройд Б., Риндерер Т., Вонгсири С. Разделение ресурсов пыльцы с помощью Apis dorsata, A. cerana, A. andreniformis и A. florea в Таиланде. J Apic Res . (1992) 31: 3–7. DOI: 10.1080 / 00218839.1992.11101253 CrossRef Полный текст | Google Scholar 39. Суарес-Сервера М., Маркес Дж., Бош Дж., Сеоан-Камба Дж. Ультраструктурное исследование пыльцевых зерен, потребляемых личинками пчел осмии (Hymenoptera, Megachilidae). Грана. (1994) 33: 191–204. DOI: 10.1080 / 00173139409429000 CrossRef Полный текст | Google Scholar 41. Czipa N, Borbély M, Gyori Z. Содержание пролина в различных типах меда. Acta Aliment . (2012) 41: 26–32. DOI: 10.1556 / AAlim.2011.0002 CrossRef Полный текст | Google Scholar 43. Кечкеш Я., Трифкович Я., Андрич Ф., Йоветич М., Тешич Э., Милойкович-Опсеница Д. Аминокислотный профиль сербского однотонного меда. J Sci Food Agric. (2013) 93: 3368–76. DOI: 10.1002 / jsfa.6187 PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar 44. Бергер Б., Крайльсхайм К., Леонард Б. Пролин, метаболизм лейцина и фенилаланина у взрослых трутней медоносной пчелы ( Apis mellifica carnica Pollm). Insect Biochem Mol Biol. (1997) 27: 587–93. DOI: 10.1016 / S0965-1748 (97) 00034-9 CrossRef Полный текст | Google Scholar 46. Hermosín I, Chichón RM, Cabezudo MD. Свободный аминокислотный состав и растительное происхождение меда. Food Chem . (2003) 83: 263–8. DOI: 10.1016 / S0308-8146 (03) 00089-X CrossRef Полный текст | Google Scholar 47. Бем Дж., Сервантес Х., Георги Дж., Елинек Дж., Савацки Дж., Вермут Б. и др. Влияние увеличения потребления треонина с пищей на метаболизм аминокислот в центральной нервной системе и периферических тканях у растущих крыс. Pediatr Res. (1998) 44: 900–6. DOI: 10.1203 / 00006450-199812000-00013 PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar 48.Глушаков А.В., Глушакова О., Варшней М., Байпай Л.К., Самнерс С., Лайпис П.Дж. и др. Долгосрочные изменения глутаматергической синаптической передачи при фенилкетонурии. Мозг . (2005) 128: 300–7. DOI: 10,1093 / мозг / awh454 PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar 49. Гао X, Тянь Ф, Ван Х, Чжао Дж., Ван Х, Чжан Л. и др. Добавка лейцина улучшает приобретенную устойчивость к гормону роста у крыс с белково-энергетической недостаточностью. PLoS ONE. (2015) 10: e0125023.DOI: 10.1371 / journal.pone.0125023 PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar 51. Кауфман Д.М., Гейер Х.Л., Мильштейн М.Дж. Глава 21 — Нейромедиаторы и злоупотребление наркотиками. В: Кауфман Д.М., Гейер Х.Л., Мильштейн М.Дж., редакторы. Клиническая неврология Кауфмана для психиатров. 8-е изд. Амстердам: Эльзевир (2017). п. 495–517. DOI: 10.1016 / B978-0-323-41559-0.00021-6 CrossRef Полный текст 52. Арбутнотт Г., Гарсия-Муньос М. 3-Нейрофармакология.В: Johnstone EC, Owens DC, Lawrie SM, McIntosh AM, Sharpe M, редакторы. Справочник по психиатрическим исследованиям. 8-е изд. Сент-Луис, Мичиган: Черчилль Ливингстон (2010) стр. 45–76. 53. Boonstra E, de Kleijn R, Colzato LS, Alkemade A, Forstmann BU, Nieuwenhuis S. Нейротрансмиттеры в качестве пищевых добавок: влияние ГАМК на мозг и поведение. Front Psychol. (2015). 6: 1520. DOI: 10.3389 / fpsyg.2015.01520 PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar 54.Fatrcová-Šramková K, Nôková J, Máriássyová M., Kačániová M. Биологически активные антимикробные и антиоксидантные вещества в пчелиной пыльце Helianthus annuus L. J Environ Sci Health B . (2016) 51: 176–81. DOI: 10.1080 / 03601234.2015.1108811 PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar 55. Корби-Харрис В., Снайдер Л., Мидор К., Айотт Т. Медсестры медоносных пчел ( Apis mellifera ) не употребляют пыльцу из-за ее питательных качеств. PLoS ONE . (2018) 13: e01 . DOI: 10.1371 / journal.pone.01 PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar 57. Богданов С., Люльманн С., Мартин П., фон дер Оэ В., Руссманн Х. Качество меда, методы анализа и международные нормативные стандарты: обзор работы международной комиссии по меду. Пчелиный мир . (1999) 80: 61–9. DOI: 10.1080 / 0005772X.1999.11099428 CrossRef Полный текст | Google Scholar 58.Fredes C, Montenegro G. Содержание тяжелых металлов и других микроэлементов в чилийском меде. Cienc Investig Agrar . (2006) 33: 50–8. DOI: 10.7764 / rcia.v33i1.328 CrossRef Полный текст | Google Scholar 59. Finola MS, Lasagno MC, Marioli JM. Микробиологическая и химическая характеристика меда из центральной Аргентины. Food Chem . (2007) 100: 1649–53. DOI: 10.1016 / j.foodchem.2005.12.046 CrossRef Полный текст | Google Scholar 60.Комиссия Кодекс Алиментариус. Стандарт Кодекса 12, Пересмотренный Стандарт Кодекса на мед, стандарты и стандартные методы . (2001). п. 11. 61. Буба Ф., Гиддо А., Шугаба А. Анализ биохимического состава образцов меда из Северо-Восточной Нигерии. Biochem Anal Biochem. (2013) 2: 139. DOI: 10.4172 / 2161-1009.1000139 CrossRef Полный текст 62. Гонсалес-Мирет М.Л., Терраб А., Эрнанц Д., Фернандес-Рекамалес М.А., Эредиа Ф.Дж. Многофакторная корреляция между цветом и минеральным составом меда и их ботаническим происхождением. J Agric Food Chem . (2005) 53: 2574–80. DOI: 10.1021 / jf048207p PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar 64. Lewkowski O, Mure? An CI, Dobritzsch D, Fuszard M, Erler S. Влияние диеты на состав и стабильность белков, выделяемых медоносными пчелами в мед. Насекомые . (2019) 10: 282. DOI: 10.3390 / насекомые100 |
| Компоненты | Идентификатор | 100 тестов |
|---|---|---|
| PicoProbe | Красный | 1 x 500 мкл |
| Буфер для анализа пролина | WM | 1 x 25 мл |
| Смесь кофакторов пролина | Пурпурный | 1 флакон |
| Proline Developer Mix | Оранжевый | 1 флакон |
| Proline Enzyme Mix | Geen | 1 флакон |
| Proline Standard | Желтый | 1 флакон |
Изображения
Стандартная кривая для пролина.
Специфичность обнаружения пролина
Специфичность определения пролина по сравнению с гидроксипролином и другими аминокислотами. Другие L-аминокислоты были протестированы при 40-кратном молярном избытке (каждая AA-10 нмоль) и пролина (250 пмоль).
Определение пролина в местном меде, сыворотке крови человека, лизате листьев шпината и лизате печени крысы.Концентрация пролина составляла 425,3 ± 48,9 мг / кг в местном меде, 282 ± 3,90 мкМ в сыворотке крови человека, 0,877 ± 0,015 мкмоль / г сырой массы в листьях спанча и 13,3 ± 1,4 пмоль / мкг белка в лизате печени крысы. Анализы проводили с использованием протокола Proline Assay Kit (флуорометрический).
Паспорта и документы
SDS скачать
Страна / регион Выберите страну / регион
Язык Выбор языка
Скачать брошюру
Список литературы (0)
ab282913 еще не упоминался в каких-либо публикациях.
Отзывы клиентов, вопросы и ответы
Что такое значение Proline? Как распознать поддельный мед?
Мед. Это одно из старейших питательных веществ от прошлого до настоящего. Мед, который благодаря своим чудесным эффектам на протяжении десятков тысяч лет использовался для поддержания здоровья человека, был важной частью экономики, а также здоровья. Мед настолько ценен, что Ибн-и Сина, мед «пища из пищи, питье из напитков и лекарство из лекарств».»Определяет как. Сегодня развитие науки и технологий подтвердило предсказания древних цивилизаций о меде, доказав, что мед является уникальным питательным веществом, поддерживающим здоровье человека.
В большинстве случаев невозможно понять настоящий, органический и качественный мед по его вкусу, цвету или консистенции. Самым важным фактором, показывающим качество меда, является количество пролина. Пролин; Это одна из 20 аминокислот, входящих в состав белка, и она содержится только в меде. Качественный мед содержит в среднем 300 мг пролина.Турецкий пищевой кодекс увеличил количество пролина, которое ранее определялось как 180 мг, до 300 мг в 2013 году. Значение пролина определяет качество меда. Ценность пролина связана с тем, насколько богата и качественна растительность того региона, где обитают пчелы. Количество пролина варьируется от меда до меда в зависимости от флоры региона. Сегодня поддельный мед можно продавать. Есть поддельный мед с добавлением сахара, консервантов или добавок или даже без пчел. В поддельном меде нет значения пролина или его почти нет.Органический и высококачественный мед производится в регионе, где обитают пчелы, без каких-либо пестицидов, без использования химикатов и добавок.
Самые плодородные равнины Турции, богатые пролином, наш мед получен в результате органического земледелия…. Вы можете безопасно употреблять наш мед, который регулярно анализируется и проверяется Министерством здравоохранения и соответствующими официальными учреждениями, и делиться целебными свойствами и вкусом настоящего меда со своими близкими.