Са мед самозапись: Красносельский район | Самозапись к врачу в Санкт-Петербурге

Детская городская больница Святой Ольги

Уважаемые родители и законные представители детей!
С учетом сложившийся санитарно – эпидемиологической ситуации в городе Санкт – Петербурге и для решения вопросов, касающихся возможности осуществления плановой госпитализации в стационар для проведения того или иного вида стационарного лечения, родители и законные представители детей за 3 суток до предполагаемой даты плановой госпитализации в нашу больницу могут отправить копии или фотографии результатов анализов и обследования на почты лечебного учреждения: 5-e отделениe (ЛОР/Стоматология): E-mail: db4pr@yandex. ru

6-е отделение: Е-mail: [email protected]

7-8 отделения: E-mail: [email protected].
В присланных документах, большая просьба, обязательно указывать номер мобильного телефона и данные представителя ребенка для осуществления обратной связи по решению вопросов, касающихся присланных анализов и результатов обследования необходимых для проведения плановой госпитализации в отделения лечебного учреждения.
Сотрудники стационара, на следующий день с 13.00 до 15.00 (кроме субботы, воскресенья и праздничных дней) по представленному номеру мобильного телефона, указанного в присланных документах, будут готовы информировать родителей или законных представителей детей на основании присланных результатов анализов и обследований об допуске ребенка на плановую госпитализацию в клинические отделения больницы.
Кроме того, по вопросам соответствия результатов анализов для проведения планового оперативного вмешательства на ЛОР – органах и на стоматологическое лечение под анестезиологическим пособием, с понедельника по пятницу, с 13. 00 до 15.00 можно позвонить на телефон: +7(921)-785-40-43 (кроме субботы, воскресенья и праздничных дней)

НАПОМИНАЕМ, ЧТО ЗАКОННЫЕ ПРЕДСТАВИТЕЛИ ИЛИ РОДИТЕЛИ ДЕТЕЙ, А ТАК ЖЕ ДЕТИ, ПОСТУПАЮЩИЕ НА ПЛАНОВУЮ ГОСПИТАЛИЗАЦИЮ СТАЦИОНАР ИЛИ ПРИШЕДШИЕ, НА АМБУЛАТОРНЫЙ ПРИЕМ К ВРАЧУ – СПЕЦИАЛИСТУ АМБУЛАТОРНО – КОНСУЛЬТАТИВНОГО ОТДЕЛЕНИЯ — ОБЯЗАНЫ НАХОДИТСЯ В МАСКЕ!!!!!

Запись на плановую госпитализацию в оториноларингологическое отделение проводится по телефонам:
— Запись на плановое оперативное лечение заболеваний ЛОР – органов производится по четвергам, с 14.00 до 16.00, по телефону: 8(812)295-69-30. Начало проведения записи: 23.07.2020.
— Запись на госпитализацию в больницу для стоматологического лечения под анестезиологическим пособием производится по четвергам, с 11.00 до 13.00, по телефону: 8(812)295-93-02.

Основана в 1952 г. и с тех пор является единственной детской городской больницей в северной части города, подчиненной Комитету здравоохранению Правительства Санкт — Петербурга.

Мощность -370 коек. Дополнительно — 12 коек отделения анестезиологии и реанимации.

Стационар включает в себя 10 клинических и ряд диагностических отделений, в том числе клиническая и биохимическая лаборатория, отделения лучевой и функциональной диагностики.

Детская Городская Больница Святой Ольги многопрофильная, в её структуре функционируют:

• 2 инфекционно – боксированных отделения — для детей с ОРВИ и поражением бронхо-легочной системы.
• Оториноларингологическое отделение– для детей с острыми и хроническими заболеваниями ЛОР-органов, требующих консервативного и оперативного лечения.
• 4 психоневрологических отделений:

Здесь проводят полноценное обследование и лечение: детям в возрасте старше 28 дней жизни и до 18 лет. Пациенты психоневрологического профиля госпитализируются в стационар, как по экстренным показаниям, так и планово (этапное лечение детей с органическим поражением центральной нервной системы, нарушением психики и опорно-двигательного аппарата, диагностика и лечение судорожных состояний, эпилепсии, а так же других заболеваний неврологического профиля).

Только в нашем стационаре проводится плановое стоматологическое лечение под общим обезболиванием детям с заболеваниями центральной нервной системы и поливалентной аллергии, которые по роду своего заболевания не могут лечиться в городских стоматологических поликлиниках.

Отделение анестезиологии и реанимации: 9 реанимационных коек для новорожденных и недоношенных детей и 3 койки для детей старшего возраста.

Отделение патологии новорожденных и недоношенных детей

В структуре амбулаторно-консультативного отделения функционируют:

• Городской кабинет по лечению эпилепсии и пароксизмальных состояний
• Городской кабинет по наблюдению, лечению, реабилитации лечения с тяжелыми и сложными бронхо легочными заболеваниями и муковисцидозом.
• Городской консультативный неврологический кабинет
• Консультативный оториноларингологический кабинет

В сентябре 2014 года в амбулаторно-консультативном отделении начал работу – Кабинет головной боли, врачи Кабинета проводят консультации детей, имеющие жалобы на головные боли (цефалгии).

Среди постоянных сотрудников нашей больницы:

Доктор медицинских наук:

• врач — невролог высшей категории, Тадтаева З.Г.

Кандидаты медицинских наук:

• Заведующий инфекционным(боксированным)  отделением № 3, врач — пульмонолог высшей квалификационной категории Орлов А.В.
• Заведующая психоневрологическим отделением № 8, врач — невролог высшей квалификационной категории Романенко А. Е.
• Врач функциональной диагностики, врач — невролог высшей квалификационной категории Понятишин А.Е.
• Врач анестезиолог-реаниматолог высшей квалификационной категории  Гришманов В.Ю
• Врач анестезиолог-реаниматолог высшей квалификационной категории Кушнерик Л. А.
• Врач-рентгенолог высшей квалификационной категории Пестерева М. Л.
• Заведующий кабинетом МРТ, врач — рентгенолог Менькова И.С.
• Врач – оториноларинголог  Медведев Е.А
• Врач – офтальмолог  Ляненко Е. Н.

На базе нашей больницы работают кафедры высших учебных медицинских заведений Санкт — Пететрбурга:

• «Северо-Западный государственный медицинский университет имени И.И.Мечникова»,
• Государственный Педиатрический Медицинский Университет
• НИИ Гриппа.

Стационар тесно сотрудничает с НИИ Детских инфекций ФМБА Министерства Здравоохранения России.

В сложных случаях — пациентов стационара консультируют сотрудники кафедр и ведущие специалисты нашего города.

Отделение №3 | Женская консультация №22

	Ф.И.О., должность, № участка, каб.	Сведения об образовании (учебное заведение, год окончания и специальность по сертификату)	Часы приёма	Адреса
	Калинина Екатерина Сергеевна Заведующая отделением врач-акушер-гинеколог каб. №1	СПб государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова, лечебное дело, диплом КБ № 93875 от 22.06.2011 год; Интернатура «акушерство и гинекология», удостоверение 102 от 31.07.2012 г.; сертификат «акушерство и гинекология» до 25.04.2022 года	понедельник, вторник, пятница: 9.00-14.00 среда: 15.00-18.00	—
	Шарафутдинова Галина Юрьевна врач-акушер-гинеколог Участок №6, каб.№6	Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова, лечебное дело, диплом 107814 0008584 от 07.07.2017; Ординатура «акушерство и гинекология» от 13.08.2019 г.; сертификат «акушерство и гинекология» до 13.08.2024 года	четные: 14.00-20.00 нечетные: 8.00-14.00	пр. Лесной, д. 1-39 пр. Светлановский, д. 1-63 ул. Александра Матросова ул. Парголовская, д. 3-12 пр. Энгельса, д. 1-28 пр. Пархоменко ул. Кантемировская ул. Астраханская пр. Крапивный
	Мамутова Карина Темирбековна врач-акушер-гинеколог	Сибирский ГМУ лечебное дело, диплом 107008 0001206 от 03.07.2018; Ординатура «акушерство и гинекология» от 14.08.2020 г.;
	Омарова Шахризат Амировна врач-акушер-гинеколог	Северо-Западный ГМУ им. И.И. Мечникова лечебное дело, диплом 107819 0028547 от 25.06.2018; Ординатура «акушерство и гинекология» от 14.08.2020 г.;
	Рижинашвили Инна Абрамовна врач-акушер-гинеколог	СПб гос.педиатрич.мед.университет «педиатрия» диплом 107805 0075285 от 27.06.2018 г.; Ординатура по акушерству и гинекологии 2018-2020 г.; Аккредитация по акушерству и гинекологии от 10.12.2020 г.
	Багот Алёна Васильевна врач акушер-гинеколог	СПб ГУ «лечебное дело» диплом СА 14269 от 04. 07.2014; Ординатура по акушерству и гинекологии от 31.08.2016; сертификат «акушерство и гинекология» до 31.08.2021 года
	Бурангулова Елизавета Римовна врач акушер-гинеколог, репродуктолог каб.№16	Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова, лечебное дело, диплом 107814 0003264 от 21.06.2014 год; Ординатура «акушерство и гинекология», диплом 107827 000604 от 30.07.2016 г.; сертификат «акушерство и гинекология» до 30.07.2021 года; профессиональная переподготовка «ультразвуковая диагностика» , диплом 27 008795 от 09.12.2016 г.; сертификат «ультразвуковая диагностика» до 09.12.2021 года	понедельник: 14.00 — 20.00 четные: 14.00 — 20.00 нечетные: 8.00 — 14.00
	Селютина Ирина Андреевна врач-акушер-гинеколог первой квалификационной категории каб.№20	Кемеровский государственный медицинский институт, лечебное дело, диплом МВ № 216903 от 20. 02.1986 год; Интернатура «акушерство и гинекология», удостоверение 58 от 27.02.1987 г.; сертификат «акушерство и гинекология» до 13.03.2023 года	Дневной стационар
	Евстифеева Наталья Владимировна врач-акушер-гинеколог	СПб государственная медицинская академия им. И.И.Мечникова, лечебное дело, диплом ВСГ 5516213 от 25.06. 2010 год; Клиническая ординатура «акушерство и гинекология», удостоверение 0075 от 31.08.2012 г.; сертификат «акушерство и гинекология» до 29.09.2023 года	Дневной стационар
	Краснова Наталия Сергеевна врач-эндокринолог второй квалификационной категории каб.№16	Чувашский государственный университет, лечебное дело, диплом ВСГ 5187489 от 01.07.2010 год; Клиническая ординатура «эндокринология», удостоверение 3568 от 31.08.2012 г.; Сертификат «эндокринология» до 28.02.2022 года	Понедельник, пятница 8. 00-14.00	все участки 3 отделения
	Виноградова Наталия Алексеевна врач-эндокринолог	СПб государственный университет, лечебное дело, диплом ОСА № 02042 от 03.07.2013 г.; интернатура «терапия», диплом 027818019001 от 30.08.2014 г.; Ординатура «эндокринология», диплом 107818 021061 от 31.08.2016 г.; сертификат «эндокринология» до 31.10.2025 года
	Трейвус Виолетта Николаевна врач-терапевт первой квалификационной категории, каб.№9	1 Ленинградский медицинский институт им. акад. И.П. Павлова, лечебное дело, диплом П № 456200 от 26.06.1969 год; Интернатура по терапии удостоверение 692 от 26.06.1970 г.; сертификат «терапия» до 09.06.2021 года	понедельник, среда, пятница: 8.00 — 14.00 вторник: 14.00 — 20.00	все участки 3 отделения
	Ольховая Ирина Александровна врач-терапевт высшей квалификационной категории каб. №5	Московский медицинский институт, лечебное дело, диплом Г-I № 626252 от 23.06.1978 год; Интернатура по терапии от 31.08.1979 г.; сертификат «терапия» до 04.04.2025 года
	Харитонова Инна Викторовна врач ультразвуковой диагностики, каб.№9а	СПб медицинский институт им. акад. И.П. Павлова, лечебное дело, диплом ЭВ № 136766 от 27.06.1994 год; Клиническая ординатура «акушерство и гинекология», удостоверение 420 от 31.08.1999 г.; Профессиональная переподготовка «ультразвуковая диагностика», диплом 14 032174 от 22.12.2014 г.; сертификат «ультразвуковая диагностика» до 28.12.2024 года	Будни 08.00 – 14.00 по расписанию	все участки 3 отделения
	Сидоренко Юлия Александровна врач ультразвуковой диагностики	Ташкентская Медицинская академия, лечебное дело, диплом В № 636280 от 16.06.2012 год; Ординатура «акушерство и гинекология», диплом 017804 000257 от 03. 09.2014 г.; Профессиональная переподготовка «ультразвуковая диагностика», диплом 017827 0003293 от 09.12.2016 г.; сертификат «ультразвуковая диагностика» до 30.12.2025 года
	Рогозина Мария Георгиевна врач ультразвуковой диагностики Каб.№9а	Кировская государственная мед. академия, диплом ВСГ 5119585 лечебное дело от 19.06.2010; сертификат «ультразвуковая диагностика» до 07.10.2022 года	по расписанию	все участки 3 отделения
	Чечулова Анна Васильевна врач ультразвуковой диагностики, Кандидат Медицинских Наук	Крымский государственный медицинский университет, лечебное дело, диплом КР 32371646 от 22.06.2007 год; Профессиональная переподготовка «ультразвуковая диагностика», диплом ПП—I № 616331 от 29.06.2009 г.; сертификат «ультразвуковая диагностика» до 27.06.2024 года
	Сабич Марина Николаевна врач-стоматолог-терапевт высшей квалификационной категории каб. №19	1 Ленинградский медицинский институт им. акад. И.П. Павлова, стоматология, диплом ТВ № 024935 от 27.06.1990 год; Интернатура «стоматология терапевтическая», удостоверение 75 от 18.06.1991 г.; сертификат «стоматология терапевтическая» до 01.11.2022 года	нечётные: 10.00-12.00
	Журавлева Наталья Юрьевна врач-стоматолог-терапевт каб.№19	1 Ленинградский медицинский институт им. акад. И.П. Павлова, стоматология, диплом ТВ № 024229 от 26.06.1989 год; Интернатура «стоматология терапевтическая», удостоверение 5 от 11.06.1990 г.; сертификат «стоматология терапевтическая» до 30.01.2024 года	чётные: 11.00 – 12.30

Филиал 1 — ДГП №4

По приказу Департамента здравоохранения от 05.07.2012 №655 Детская городская поликлиника №4 переименована в Государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Детская городская поликлиника № 94 Департамента здравоохранения города Москвы» Филиал №1

Главный врач: Аристархова Елена Анатольевна, тел. 8 (495) 491-41-46

И.о. заведующего филиалом:
Холодов Дмитрий Игоревич, 
тел. 8 (916) 389-39-91

Прием населения:
Понедельник 15.00 — 19.00
Четверг 09.00 — 12.00
Дежурная 2-я суббота месяца 9.00 — 15.00

Лицензия № ЛО-77-01-019953 от 27.05.2020г., бессрочная,  выдана Департаментом здравоохранения города Москвы.

Дата государственной регистрации 14.02.2013г.

Адрес: ул. Планерная, дом 16 (с 18.01.2021 года находится в капитальном ремонте, прием врачами педиатрами и врачами-специалистами производится на базе ГБУЗ «ДГП № 94 ДЗМ» по адресу: ул. Вишневая, д. 20, корп. 2)

Телефоны:

Единая медицинская справочная служба города Москвы: 122

Телефон «Горячей линии»: 8 (916) 389-39-91

Платные услуги (495) 494-21-64

Телефон дежурного администратора: 8 (916) 389-39-91

Адрес электронной почты:   Адрес электронной почты защищен от спам-ботов. Для просмотра адреса в вашем браузере должен быть включен Javascript.; Адрес электронной почты защищен от спам-ботов. Для просмотра адреса в вашем браузере должен быть включен Javascript.

Официальный сайт:  www.94dgp.ru

Часы работы:
Рабочие дни 8.00 — 20.00
Выходные дни 9.00 -15.00

Прием вызовов до 14.00
Часы работы кабинета выдачи справок и направлений  пн.-пт. 8.00 – 20.00

Кабинет дежурного врача пн.-пт. 8.00 – 20.00, сб 9.00-15.00
Забор крови производится в будние дни с 8.00 до 12.00

Условия приема:  
Поликлиника работает в системе обязательного медицинского страхования (ОМС), а также оказывает платные медицинские услуги.
Принимаются дети района Северное Тушино до 18 лет, также принимаются жители Подмосковья и граждане РФ при наличии медицинского полиса и паспорта.

Прикрепление к поликлинике и льготное обеспечение.
Для прикрепления к поликлинике или постановки на учет льготной категории граждан нужно обратиться вресепшен. При себе необходимо иметь следующие документы:

Часы работы молочно-раздаточных пунктов: ежедневно с 6. 30 до 12.00

Молочно-раздаточный пункт № 3:
125480, ул. Планерная, д. 3, корп. 2
тел. (495) 490-74-26
Молочно-раздаточный пункт № 6:
125481, ул. Свободы, д. 71, корп. 2
тел. (495) 496-41-42

 

В нашей поликлинике работает кабинет выдачи справок и направлений Запишитесь на приём, если ваш ребёнок здоров, вам требуется оформить:
1. Медицинскую карту при поступлении ребёнка в дошкольное или школьное заведение.
2. Направление на лабораторные исследования и к специалистам второго уровня при наличии имеющихся показаний в амбулаторной карте.
3. Рецепт на получение бесплатных продуктов питания на МРП.
4. Санаторно- курортную карту.
5. Любые справки (например, справку в бассейн, в спортивные секции, в летние оздоровительные лагеря, справку о контактах, справку в дошкольные или школьные учреждения после отпуска)

6. Осмотр перед плановой госпитализацией или перед прививкой.
Кабинет выдачи справок и направлений работает с 8-00 до 20-00.
Теперь нет необходимости подолгу сидеть в очереди к участковому педиатру!
Для получения всех справок обращайтесь в кабинет выдачи справок и направлений

В нашей поликлинике работает кабинет Дежурного врача. Запись на приём осуществляется в следующих случаях:
1. Если вам необходимо оказание неотложной или экстренной помощи.
2. Если отсутствуют свободные интервалы для предварительной записи к участковому педиатру.
3. Если вы имеете право на внеочередное обслуживание в соответствии с законодательством Российской Федерации и города Москвы.
4. Если вашего ребёнка выписали из медицинской организации, оказывающей стационарную медицинскую помощь.

Кабинет Дежурного врача работает с 8-00 до 20-00.

Вызов врача на дом

Вызовы врача на дом принимают администраторы справочно-информационного отдела, с понедельника по пятницу – с 08.00 до 14.00, в субботние, выходные и праздничные дни – с 09.00 до 14.00.

Как только Вы соединитесь по телефону с администратором или обратитесь непосредственно к нему, придя в поликлинику, необходимо ответить на несколько вопросов, он запишет их и передаст эту информацию участковому врачу педиатру:
1. Адрес, на который Вы вызываете врача на дом.
2. Номер страхового полиса Вашего ребенка.
3. Наименование страховой компании, выдавшей страховой полис.
4. Фамилию, имя, отчество Вашего ребенка.
5. Дату рождения.
6. Адрес (улица, корпус или строение, дом, квартира, подъезд, этаж, код подъезда).
7. Ваш контактный телефон (домашний или мобильный).
8. Номер детского сада и группу или школы и класс.
9. Причину вызова врача на дом, температуру тела ребенка.
После того как вызов был принят, администратор назовет интервал времени, в течение которого можно ожидать прихода врача.
В случаях, если Ваш ребенок младшего возраста и у него отмечается внезапный подъем температуры до высоких цифр, медицинский регистратор назовет Вам номер телефона неотложной помощи, по которому Вы сможете вызвать срочно врача, который окажет Вашему ребенку всю необходимую медицинскую помощь, оставит рекомендации по лечению и наблюдению за ним.
В соответствии со своим расписанием, участковый врач педиатр в определенное время посетит Вашего ребенка на дому, установит диагноз, даст рекомендации, оформит все необходимые медицинские документы: выпишет рецепты на назначенные лекарственные препараты, оформит листок нетрудоспособности, по показаниям оставит активный вызов на следующий день или вызовет бригаду скорой помощи если потребуется госпитализировать ребенка в больницу.

Запись к врачам осуществляется:
1. Через раздел «Услуги и сервисы» на mos.ru (круглосуточно)
2. По общегородскому централизованному телефону 8-495-539-30-00 (круглосуточно)
3. Через инфоматы, в часы работы поликлиники
4. Через регистратуру, в часы работы поликлиники
5. С помощью мобильных приложений

Для самозаписи доступны следующие специалисты:
• врач-педиатр
• врач-педиатр участковый
• врач офтальмолог
• врач хирург
• врач оториноларинголог

Прием другими специалистами осуществляется по направлениям врачей-педиатров, дежурных врачей-педиатров, а также другим врачом-специалистом.
Самостоятельная запись осуществляется для планового приема, время ожидания приема специалиста не более 7 дней.
В случае необходимости экстренного приема, а так же приема льготных категорий населения (дети-инвалиды, дети из многодетных семей) запись осуществляется по талонам экстренного приема, выдаваемых дежурным врачом-администратором поликлиники в день обращения.

Головное учреждение
Детская городская поликлиника № 94

Специалисты:

• офтальмолог
• невролог
• травматолог-ортопед
• отоларинголог
• педиатры
• физиотерапевт
• детский хирург
• подростковый врач
• физиотерапевт
• врач ультразвуковой диагностики
• врач функциональной диагностики

Методы исследования и диагностики:

• рентгенография
• ЭКГ
• ЭЭГ
• УЗИ
• исследования в офтальмологии
• ЭХО – КГ
• лабораторная диагностика

Отделения и кабинеты:

• кабинет выдачи справок и направлений
• кабинет дежурного врача
• педиатрическое отделение
• прививочный кабинет
• процедурный кабинет
• кабинет функциональной диагностики (ЭКГ, ЭХО-КГ, ЭЭГ)
• кабинет лучевой диагностики (рентген)
• кабинет ультразвукового исследования
• кабинет забора анализов
• физиотерапевтическое отделение
• кабинет лечебного массажа
• отделение профилактики
• кабинет отоларинголога
• кабинет детского офтальмолога
• кабинет аппаратного офтальмологического лечения
• кабинет хирурга
• кабинет невролога
• кабинет детского травматолога-ортопеда
• комната здорового ребенка

Как делать очень длинные записи (пчел)

Я уже некоторое время думал о том, чтобы попытаться сделать действительно длинные записи.

Некоторое время назад я участвовал в кинопроекте о пчелах, и в рамках этого проекта мне очень хотелось бы записать звуки и вибрации внутри пчелиного улья. Меня также интересуют изменения в этих звуках в течение длительных периодов времени — семьи развиваются в течение сезона от почти бездействующих зимой до десятков тысяч пчел летом.Это заставило меня задуматься о том, как здорово было бы вести непрерывную запись годового цикла пчелиной семьи. Представьте себе спектрограмму.

Пчеловоды, о которых идет речь, не обязательно заинтересованы в вскрытии ульев для добычи меда, поэтому есть вероятность, что запись не будет иметь вмешательства человека. Но вопрос, как это сделать, — непростой. Я бы очень хотел, чтобы в улье было как минимум два микрофона, и я бы хотел записывать без сжатия. Быстрый расчет Stereo 48k 24bit на один год — 8.2 терабайта. В некотором смысле, я бы предпочел не полагаться на компьютер для этого, но не могу придумать другого пути. Можно построить RAID-массив такого размера (с избыточностью), и у вас может быть система ИБП на случай отключения электроэнергии, но мне все еще не нравится идея доверять это обычному компьютеру. Другой вопрос — это какое-то записывающее программное обеспечение для записи файлов, оно должно будет автоматически записывать и именовать файлы, чтобы они соответствовали максимальному размеру файла для ОС.

Еще вопросы, где и как крепить микрофоны? Я думаю о миниатюрных всенаправленных микрофонах, но, возможно, улей нужно будет спроектировать специально для них, поскольку пчелы заполняют весь улей гребешком и покрывают инородные предметы воском! Другой вариант — контактные микрофоны на самом улье — это на самом деле довольно интересный маршрут, поскольку пчелы общаются посредством вибрации через сам сот.

Я мог бы посещать сайт каждый месяц, чтобы проверить, что он все еще работает, но в промежутках между ними он должен быть самодостаточным.

Итак, этот проект действительно все еще находится в фазе идей, но я приветствую любые мысли или предложения.

Вопросы:

Знаете ли вы о каких-либо проверенных методах создания записей такой длины или у вас есть другие идеи, как это можно было бы сделать?

Есть ли оборудование, специально разработанное для этого?

Это было сделано раньше?

или что-нибудь еще, что вы считаете интересным.

Спасибо,

Марка

шт. Я думаю, что они постоянно записывают установку Longplayer, так что это уже в моем списке для изучения.

Редактировать 07.08.12

Спасибо за отзывы и интерес. Я думаю, что ясно, что мне нужно провести еще несколько исследований по этому поводу, и, поскольку это такое обязательство с точки зрения времени, оно того стоит. Мне также интересно, может ли это иметь научную ценность, если все сделано правильно, поэтому я попытаюсь исследовать это дальше.Точно так же необходимо обсудить с пчеловодами варианты микрофонов и т. Д., Чтобы выяснить, что приемлемо для пчел.

Записывающее устройство — это отдельная и интересная проблема, поскольку, похоже, нет специального недорогого варианта. Предложение Мэтта Гленна об использовании записывающего устройства Sound Devices, вероятно, является наиболее убедительной идеей, но я не думаю, что у этого проекта будут средства для этого решения. Но забывая на мгновение о моей конкретной проблеме с пчелами, я задавался вопросом, в чем причина? Люди не делают длинные записи, потому что им нет необходимости, или они не делают этого, потому что требуемый инструмент нелегко достать? Будет ли устройство вдохновлять на использование?

Мне нравится идея устройства, предназначенного для этого, которое можно собрать самостоятельно из готовых деталей, относительно дешево и легко адаптируется. Я думаю, что потенциально из него может получиться хороший проект с открытым исходным кодом. Я также некоторое время искал причину, чтобы поучаствовать в Raspberry Pi, и это может быть оно.

Таким образом, разбив это на компоненты системы, в основе будет гибкая система записи, управляемая редактируемым / настраиваемым программным обеспечением с открытым исходным кодом. Спецификация может быть примерно такой:

• Raspberry Pi с минимальным дистрибутивом Linux на SD
• Пользовательский патч PD для управления и записи
• USB-концентратор
• HDD 2 ТБ (Raid1 через USB?)
• Базовый аудиоинтерфейс USB
• Комплект предусилителей для микрофонов
• LAN или USB 3G модем для потоковой передачи и / или удаленного рабочего стола / управления
• Блок питания
• Сенсорный экран 4-5 дюймов для отображения / ввода

Я не уверен в этом на 100%, но при тщательном выборе, я думаю, вы могли бы питать его от батареи и заряжать батарею с помощью солнечной панели. Вложите это в корпус, и у вас будет система, которую можно установить и оставить работать независимо. Сделайте водонепроницаемый футляр, и вы можете оставить его где угодно (хотя я не уверен в защите микрофонов от дождя … есть идеи?). Адаптируя корпус и настройку микрофона, вы затем можете создавать разные конструкции для разных целей, например, вы можете добавить параболическую тарелку для сфокусированной записи одной точки или добавить два гидрофона и записывать весь сезон в пруду или даже построить все это внутри бинауральная голова…

Если вы используете PD для этого, есть потенциал для расширения системы, чтобы учитывать внешние факторы и реагировать на них. Добавьте Arduino, разговаривающий с PD, и вы можете использовать датчики для обнаружения дождя, температуры и солнечного света, перемещать части системы (например, позиционирование микрофона) с сервоприводами или другими двигателями, например. Даже записывайте другие данные в виде текста. Подумайте о записывающем роботе.

Я не могу сказать, что думаю, что смогу сделать это сам — у меня был некоторый опыт работы с Linux, PD и базовым интерфейсом Arduino, но мои знания электроники довольно базовые для одного.Но это может быть проект сообщества, запускаемый из Wiki, в который каждый может внести свой вклад. Возможно, заинтересует студентов-дизайнеров, а также звукозаписывающих компаний. Wiki может предлагать проверенные детали и конфигурации, предоставлять руководства по установке, программное обеспечение и т. Д.

Хорошо, я хотел бы услышать ваше мнение по этому поводу. Является ли это возможным? полезный? Вы видите какие-нибудь серьезные проблемы? решения? Вы бы внесли свой вклад?

Медоносные пчелы — обзор

Введение

Медоносные пчелы — это долгосрочные модели для поведенческих исследований.Это особенно верно для западной медоносной пчелы ( Apis mellifera L), но род медоносных пчел включает несколько других видов, которые довольно интересны в поведении и отличаются по некоторым фундаментальным аспектам от модели A. mellifera (Oldroyd and Wongsiri, 2006). ; Koeniger и др. , 2010). Медоносные пчелы делятся на виды, гнездящиеся в полости, которые являются промежуточными по размеру и обычно гнездятся внутри полых деревьев, а также на карликовых и гигантских медоносных пчел, которые открыто гнездятся на единственном восковом соте, подвешенном на ветках, скалах или подобных выступах.Последние демонстрируют отличия от хорошо изученных гнездовых гнезд в их танцевальном языке, защитном поведении, миграции, кастовых расхождениях и других аспектах (Oldroyd and Wongsiri, 2006; Koeniger et al. , 2010). Хотя все виды медоносных пчел эксплуатируются людьми, большинство видов обитает в дикой природе, и только A. mellifera и A. cerana , восточная медоносная пчела, активно управляются и в разной степени приручены. Для краткости мы ограничим это эссе A.mellifera и в дальнейшем будем называть этот вид медоносными пчелами.

Пчеловодческие практики восходят к древнему Египту, и продукты пчеловодства из меда долгое время использовались во многих культурах (Crane, 1999). В основном собирают запасы меда, но также собирают пчелиный воск, пыльцу, прополис и даже самих пчел в качестве пищи или основы для коммерческих продуктов. Что наиболее важно, медоносные пчелы служат важными опылителями во многих сельскохозяйственных экосистемах, повышая урожайность и рыночную стоимость более 100 различных культур, выращиваемых для производства продуктов питания, кормов и волокон.Только в США годовая стоимость опыления медоносными пчелами, по оценкам, превышает 14 миллиардов долларов в год (Calderone, 2012). Научный интерес к медоносным пчелам и их поведению также имеет давнюю традицию, ранней кульминацией которой стал проведенный Нобелевской премией поведенческий анализ танцевального общения и ориентации рабочих пчел (von Frisch, 1967). За последнее десятилетие медоносные пчелы испытали резкий рост общественного и научного интереса после сообщений о неустойчивых потерях населения и серьезных проблемах со здоровьем.Многие из этих исследований связаны с эффектами сублетального стресса, которые влияют на поведение и продолжительность жизни (Perry et al. , 2015), что дает изучение поведения медоносных пчел в последние годы весьма актуально.

Медоносное пчеловодство было оптимизировано на протяжении долгой истории пчеловодства и научных исследований. Семейства медоносных пчел могут содержаться в стандартных ульях Лангстрота, в которых содержится одна матка, сезонно несколько тысяч самцов (= трутней), выводок и до 60 000 рабочих. Большое количество легко доступных особей — одно из главных экспериментальных преимуществ изучения медоносных пчел.Однако для некоторых вопросов требуется репликация на уровне колонии вместо того, чтобы рассматривать каждого человека как независимую точку данных, что превращает преимущество большого количества пчел в одной колонии в недостаток. Часто желательны более экспериментально доступные варианты содержания медоносных пчел в поведенческих исследованиях. Эти варианты включают меньшие по размеру ящики, так называемые ядерные ульи и наблюдательные ульи со стеклянными стенками, которые обычно содержат гораздо меньшие популяции. В дополнение к прямым наблюдениям, автоматическая запись и отслеживание все чаще используются для одновременного отслеживания поведения множества людей.Для этого люди могут быть помечены миниатюрными радиочастотными идентификационными метками и даже QR-кодами. Семейства и особи медоносных пчел легко поддаются манипуляции, а их сложное поведение можно наблюдать в полуестественных условиях. Их промежуточный размер и сложность организма также являются преимуществом для механистических исследований, а их выраженная фенотипическая пластичность внутри и между двумя женскими кастами (рабочие и королевы) предлагает особые экспериментальные возможности для понимания непосредственной и окончательной причинной связи поведения животных.

Биология медоносных пчел в значительной степени сформировалась в результате социальной эволюции, в результате чего колония стала преобладающей единицей отбора. Несмотря на то, что в некоторых случаях инклюзивная приспособленность индивидов расходится с успехом колонии, колония является фундаментальной единицей отбора. Родственный отбор создает уникальное давление отбора, которое изменяет фундаментальные биологические предсказания обо всех аспектах поведения. Что наиболее важно, работники медоносных пчел демонстрируют широко распространенный репродуктивный альтруизм и проявляют полную родительскую заботу о своих братьях и сестрах, а в крайних случаях жертвуют собой ради колонии (Shorter and Rueppell, 2012).Таким образом, медоносных пчел можно рассматривать как одноразовую касту колонии, параллельную одноразовой соме многоклеточных организмов. Подразумеваемая структура суперорганизма рассматривает семьи медоносных пчел как «целенаправленного агента, который стремится максимизировать свой репродуктивный успех» (Gardner and Grafen, 2009). Функциональная интеграция индивидов в группы адаптации и петли гомеостатической обратной связи поддерживает концепцию суперорганизма и помогает понять пластичность жизненного цикла медоносных пчел, которая объясняет большую часть взаимосвязей между поведением и старением медоносных пчел.

Старение, определяемое как возрастные изменения, является повсеместным свойством живых систем и включает процессы развития, которые обычно происходят только в начале жизни. В некоторых случаях, в том числе у рабочих медоносных пчел, развитие к зрелости трудно четко отличить от возрастных изменений, которые приводят к снижению биологических функций из-за преклонного возраста. Это снижение здесь называется старением либо в функциональном (например, потеря сенсорной функции или снижение двигательной функции), либо в демографическом смысле (т. Е.е., повышенный риск смертности). Функциональное и демографическое старение обычно связано, но не обязательно, как это продемонстрировано работниками медоносных пчел (Rueppell et al. , 2007). Кроме того, старение не является повсеместным явлением, и его можно избежать и даже обратить вспять у некоторых видов и некоторых обстоятельств (Baudisch, 2012), и ярким примером этого снова является работа медоносных пчел.

Влияние нескольких Patrilines на JSTOR

В экспериментах с семействами медоносных пчел дважды осемененные пчелиные матки дали рабочие отряды, различающиеся по возрасту в начале кормодобывания. Это различие было обнаружено в колониях, подвергшихся сильной депривации парафина, или в колониях в бедных нектаром регионах. Необработанные и умеренно лишенные парафина колонии в богатой ресурсами среде не выражали этой разницы. Различия в поиске пищи между патрилинами (потомками разных самцов) были больше, чем между потомками сестринских маток. В наблюдаемой колонии медоносных пчел, содержащей шесть отрядов рабочих пчел с индивидуальной пометкой и известным возрастом (произведенные тремя дважды осемененными сестрами-сестрами), были очевидны различия в поведении отцов при выполнении примерно 10% обязанностей улья.Различия между патрилинами были столь же велики, как и различия между потомками разных королев или между тремя темными патрилинами и тремя светлыми патрилинами. Гаплодиплоидия у медоносных пчел приводит к уменьшению генотипической дисперсии в пределах каждого патрилина, и идентичный полугеном, которым обладают все члены данного патрилина (и 3/4 их генетического материала, разделяемого в целом), может помочь обеспечить генетический механизм, действующий для создания рабочего. сила изменчивых отцов с индивидуально различимыми поведенческими профилями.Эти результаты согласуются с мнением о том, что гибкость разделения труда в семьях медоносных пчел используется для решения экологических проблем.

Журнал Канзасского энтомологического общества представляет собой форум для энтомологов и всех других исследователей, интересующихся насекомыми или другими наземными членистоногими, их эволюцией, экологией, поведением, систематикой, генетикой, физиологией, экономическим использованием или контролем, а также сохранением.

Общество представляет собой форум для энтомологов и приветствует в качестве членов всех лиц, интересующихся насекомыми или другими наземными членистоногими, их экологией, поведением, систематикой, физиологией, контролем, сохранением и т. Д.Его ежеквартальная публикация, Журнал Канзасского энтомологического общества, в настоящее время выпускается 80-й ежегодный том, содержит статьи местных авторов, а также людей из многих других частей мира. Общество проводит ежегодные собрания в Канзасе или близлежащих штатах, на которых студенты, а также известные энтомологи представляют результаты своих исследований или обзоры интересующих их тем. Нет одновременных сессий! Таким образом поощряется взаимодействие между людьми и их различными дисциплинами.

Медоносные пчелы (Apis mellifera) неравномерно переносят вирусы по видам растений

Abstract

РНК-вирусы, которые когда-то считались специфическими для медоносных пчел, подозреваются в передаче от управляемых пчел к диким опылителям; однако пути передачи в значительной степени неизвестны. Широко принятая, но непроверенная гипотеза утверждает, что цветы служат мостами в передаче вирусов между пчелами. Здесь, используя серию контролируемых экспериментов с пчелиными семьями, содержащимися в неволе, мы исследовали роль цветов в передаче вируса пчелам.Сначала мы исследовали, переносят ли медоносные пчелы вирусы на цветы и заражаются ли шмели после посещения зараженных цветов. Затем мы изучили, различаются ли виды растений по своей склонности к переносу вирусов, и увеличивает ли посещаемость пчелами вероятность осаждения вируса на цветках. Наш эксперимент впервые продемонстрировал, что медоносные пчелы откладывают вирусы на цветках. Однако два исследованных нами вируса, вирус черной маточной клетки (BQCV) и вирус деформированного крыла (DWV), не были равномерно распределены по видам растений, что позволяет предположить, что различия в цветочных характеристиках, экологии вируса и / или поведении при кормлении могут опосредовать вероятность заражения. осаждение.Шмели не заразились после посещения цветов, которые ранее посещались медоносными пчелами, что позволяет предположить, что передача через цветы может быть редким явлением и зависеть от мультипликативных факторов и вероятностей, таких как инфекционность штамма вируса среди видов пчел, иммунокомпетентность, вирулентность вируса, вирусная нагрузка и вероятность контакта шмеля с частицей вируса на цветке. Наше исследование является одним из первых, в котором экспериментально исследуется роль цветов в передаче вируса пчелам, и открывает многообещающие направления для будущих исследований.

Образец цитирования: Alger SA, Burnham PA, Brody AK (2019) Цветы как горячие точки для вирусов: медоносные пчелы ( Apis mellifera ) неравномерно переносят вирусы по видам растений. PLoS ONE 14 (9): e0221800. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0221800

Редактор: Олав Руппелл, Университет Северной Каролины в Гринсборо, США

Поступила: 16 августа 2018 г .; Одобрена: 15 августа 2019 г .; Опубликовано: 18 сентября 2019 г.

Авторское право: © 2019 Alger et al.Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Доступность данных: Данные, лежащие в основе результатов, представленных в исследовании, доступны по адресу https://github. com/samanthaannalger/AlgerProjects/tree/master/PlantTransExp.

Финансирование: Финансирование было предоставлено за счет гранта для аспирантов SAA от Северо-восточного центра исследований и образования в области устойчивого сельского хозяйства (SARE) (GNE15-094; https: // www.nesare.org/), научную стипендию Национального научного фонда для аспирантов (DGE-1451866; https://www.nsfgrfp.org/) для SAA и стипендию Switzer Foundation по охране окружающей среды для SAA (https: //www.switzernetwork. org /). Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что конкурирующих интересов не существует.

Введение

Патогены относятся к числу основных угроз для пчел, вызывая гибель колоний, сокращение численности популяции и растущую озабоченность по поводу продовольственной безопасности и функционирования экосистем [1–4]. Хотя важность патогенов для пчел привлекла к себе большое внимание за последние два десятилетия, остается много безответных вопросов, касающихся механизмов распространения и динамики передачи патогенов пчелами [5]. Многочисленные патогены были обнаружены в широком диапазоне хозяев, включая одиночных пчел, шмелей, медоносных пчел, муравьев, ос и жуков [6–8]. Общие цветочные ресурсы, которые могут действовать как платформы для распространения между сближающимися видами опылителей, были задействованы в обеспечении путей передачи, через которые эти патогены могут быть приобретены [5,9–12].Однако несколько исследований непосредственно изучали этот путь для паразитов пчел. Crithidia bombi , трипаносомный паразит шмелей, передавался среди шмелей после посещения цветов, которые были инокулированы вручную или ранее посещались инфицированными шмелями [11]. Совсем недавно паразиты Apicysistis bombi , Nosema spp . И Crithidia bombi были перенесены от пчел-хозяев к цветкам и между видами пчел через общие цветы [10,13]. Хотя эта работа показывает, что цветы могут действовать как мосты для патогенов, перемещающихся между видами и / или популяциями, способ передачи множества РНК-вирусов, поражающих пчел, все еще неизвестен.

РНК-вирусы, которые когда-то считались специфичными для медоносных пчел, были обнаружены у ряда видов членистоногих-опылителей, включая жуков, мух, одиночных пчел и шмелей [6,9,14]. Эти одноцепочечные вирусы с положительным смыслом широко распространены среди медоносных пчел и обычно сохраняются в виде скрытых инфекций, способных реплицироваться при определенных условиях, таких как воздействие пестицидов и иммуносупрессия, вызванные клещами Varroa , эктопаразитом, переносящим РНК-вирусы [15,16].Двумя наиболее распространенными в США являются вирус деформированного крыла (DWV), который вызывает деформации крыльев как у медоносных пчел [17,18], так и у шмелей [19], и вирус черной матки (BQCV), вызывающий почернение и уничтожение маточников у медоносных пчел [20]; однако воздействие на шмелей неизвестно. У медоносных пчел клещи Varroa служат переносчиком РНК-вирусов с высоким уровнем заражения, обычно приводящим к высоким титрам вируса.

Управляемые пчелы, включая медоносных пчел и коммерческих шмелей, были причастны к распространению многочисленных патогенов и паразитов [21–25].Данные свидетельствуют о том, что вирусы РНК также переходят от управляемых медоносных пчел к диким пчелам. В Соединенном Королевстве (Великобритания) симпатрические пчелы имеют одни и те же штаммы вируса [23], и распространенность вируса у медоносных пчел является важным показателем распространенности вируса у диких шмелей [25]. Недавние исследования показывают, что управляемые пасеки медоносных пчел могут быть очагами распространения РНК-вирусов. Шмели с большей вероятностью являются переносчиками вирусов, если их собирают около пасек медоносных пчел, и было обнаружено, что только цветы, собранные около пасек, содержат вирусы пчел [12].Кроме того, глобальное распространение DWV тесно связано с перемещением клеща Apis mellifera и Varroa [26]. Однако другие виды пчел не являются известными хозяевами клеща Varroa . Необходимы дополнительные исследования для тщательного изучения принципиальной направленности передачи, а также путей передачи вирусов между видами.

Обнаруженные в фекалиях и выделениях желез рабочих медоносных пчел, а также в пыльце, которую переносят пчелы, РНК-вирусы, вероятно, остаются на цветах при поисках пищи посетителями [9,27,28].Предыдущая работа также показала, что вирусные частицы на пыльцевых зернах могут оставаться инфекционными в течение шести месяцев в условиях окружающей среды [9]. Таким образом, было высказано предположение, что цветы служат платформой для распространения РНК-вируса на посещающих членистоногих. Однако, насколько нам известно, только одно предыдущее исследование проверяло передачу РНК-вирусов между видами пчел в результате использования цветов. В эксперименте с контролируемой летной клеткой израильский вирус острого паралича (IAPV) передавался между колониями медоносных пчел и шмелей, которые кормились вместе в течение нескольких недель. Хотя общие цветы могли обеспечить путь передачи, пчелы также могли заразиться при прямом контакте либо в результате сближения, либо если пчелы проникли в ульи друг друга из-за ограбления ресурсов или дрейфа [9]. Кроме того, пока не известно, происходит ли передача при однократном или хроническом контакте с зараженными цветами. Хотя Singh et al. (2010) сыграли важную роль в демонстрации передачи между видами пчел, роль цветов в передаче РНК-вируса остается неясной.

Передача через цветы может быть опосредована многими факторами, такими как особенности растений и / или поведение опылителей. Например, способность цветов служить проводником для патогенов может быть облегчена или ограничена цветочными особенностями или морфологией [5,29]. В предыдущих исследованиях, посвященных передаче паразитов через цветы, паразиты были неравномерно распределены по морфотипам растений [11] и видам [10,29], что позволяет предположить, что цветочная архитектура может влиять на распространение и скорость передачи. Архитектура цветов может влиять на продолжительность посещения и физический контакт пчелы с цветком [30], что может повлиять на вероятность отложения или заражения вирусом. Склонность растений к переносу вирусов также может быть связана с частотой посещения опылителями, при этом очень привлекательные растения с большей вероятностью будут действовать как фомиты. Цветочные характеристики, такие как размер цветков, глубина венчика [31], цвет [32], а также скорость производства нектара и состав [33,34], могут влиять на частоту посещения опылителей. Разнообразие цветущих растений также может быть важным фактором, так как наличие ресурсов может повлиять на предпочтение цветков пчел, добывающих пищу [35,36].Необходимы дополнительные исследования, чтобы заполнить эти пробелы в знаниях о передаче вирусов [5,37].

Здесь мы провели серию экспериментов с управляемыми летными клетками, чтобы проверить, могут ли цветы действовать как мосты в передаче вируса между видами пчел. В частности, мы изучили, переносят ли медоносные пчелы вирусы на цветы и заражаются ли шмели после посещения зараженных цветов. Кроме того, мы изучили, зависит ли отложение вируса от видов растений и / или их разнообразия. Измеряя посещаемость цветов, мы выяснили, увеличивают ли количество посещений медоносными пчелами и / или продолжительность посещения вероятность заражения цветков вирусом.Для дальнейшего изучения роли цветов в передаче РНК-вирусов мы проверили, происходит ли передача вируса от медоносных пчел шмелям опосредованно через цветы, в том числе при хроническом контакте с зараженными цветами. Мы также проверили, происходит ли передача вируса при прямом контакте или сближении во время кормления цветов.

Материалы и методы

Обзор эксперимента

Для проверки осаждения вирусов на цветках медоносными пчелами и передачи вирусов между видами пчел с использованием общих цветочных ресурсов мы провели серию экспериментов (рис. 1).Во-первых, мы позволили инфицированным медоносным пчелам кормиться на массивах цветущих растений в защищенном вольере, а затем перенесли эти растения в вольеры, где неинфицированным шмелям разрешалось кормиться. Мы тестировали всех пчел и цветы после каждого эксперимента. Все опыты по поиску пищи проводились в Берлингтоне, штат Вермонт (44 ° 29’07,2 «с.ш., 73 ° 11’12,6» з.д.).

Рис. 1. Схема экспериментальных конструкций.

В серии из четырех экспериментов мы исследовали отложение вируса на цветках медоносными пчелами и / или передачу вируса между медоносными пчелами и шмелями.Чтобы изучить влияние видов растений и / или разнообразия растений, пчелам-кормушкам были предоставлены виды цветущих растений либо в виде отдельных видов растений (A), либо в виде различных групп, состоящих из всех трех видов (B). Чтобы проверить, является ли хроническое воздействие зараженных цветов необходимым для передачи вируса, микроколонии шмелей трижды подвергались воздействию цветов, посещаемых медоносными пчелами, в течение трех дней (C). Чтобы проверить, необходим ли прямой контакт или смешение для передачи вируса, медоносным пчелам и шмелям разрешили вместе кормиться в палатках (D).Синие прямоугольники на схеме представляют собой вольеры, обозначенные как палатка для медоносных пчел (где инфицированным медоносным пчелам разрешалось кормиться на цветах), открытая палатка для шмелей (где растения, подвергшиеся воздействию медоносных пчел, были перемещены в три птичника для кормления микроколонии шмелей) и контрольная палатка для шмелей (где микроколонии шмелей питаются «чистыми» растениями, привезенными непосредственно из теплицы). Красные полукруги представляют собой домики-кольца в палатках для шмелей, в каждом из которых находится одна микроколония шмелей.Зеленые стрелки показывают движение растений от палатки для медоносных пчел к открытой палатке для пчел после 15-часового периода регенерации нектара. В хроническом эксперименте использовались одни и те же три семьи шмелей в каждый из трех дней (показано красными стрелками, соединяющими дом с обручем во времени). В серии экспериментов использовали три вида растений: Trifolium repens , T . pratense и Lotus corniculatus . Фотографии соцветий и палаток (с домиками-обручами) предоставлены для визуализации (Д).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0221800.g001

Настройка и предварительная проверка

Чтобы сосредоточиться на цветочной архитектуре и уменьшить разнообразие других признаков растений, мы выбрали три вида бобовых (семейство Fabaceae), два из которых имеют сходную морфологию: Trifolium pratense (красный клевер), Trifolium repens (белый клевер) и Lotus corniculatus (трилистник с птичьей лапой) (рис. 1E). Два вида Trifolium похожи, но отличаются от Lotus corniculatus с точки зрения количества цветков и формы соцветий, характеристик, которые могут влиять на частоту посещения пчелами, продолжительность посещения и то, как пчелы контактируют с поверхностью цветка, и приводят к различиям в вирусном отложении. цветочным поверхностям.Соцветия Т . pratense и T . repens расположены на конце стебля и состоят из глобулозных гроздей из 20-40 трубчатых цветков. Соцветия л, . corniculatus — зонтиковидные кисточки, состоящие из восьми цветков, расположенных на концах пазушных ветвей. Мы выбрали три вида растений, которые, как мы обнаружили, наиболее часто посещаются в поле медоносными пчелами и дикими шмелями (неопубликованные данные) и широко выращиваются в сельском хозяйстве в качестве азотфиксирующих покровных культур и кормов.Мы выращивали растения из семян и содержали их в теплице до начала эксперимента. Начиная с середины мая, мы рассылаем семена (Сидвей, Нью-Йорк) T . pratense , T . repens и L . corniculatus диаметром 8 дюймов и глубиной 6,5 дюймов, наполненные смесью Miracle Grow Potting Mix для достижения ок. 100 семян в горшке. Чтобы стимулировать цветение, мы подрезали T . repens и T . pratense растений один и два раза, соответственно, и использовали лампы для выращивания, чтобы поддерживать 14 часов солнечного света.Чтобы убедиться, что растения не содержат вирусов в начале эксперимента, мы случайным образом собрали три составных образца по 1,5 грамма от каждого вида растений и протестировали их на DWV и BQCV с использованием протоколов RT-qPCR.

Чтобы убедиться, что наши экспериментальные колонии медоносных пчел были инфицированы обоими вирусами, мы собрали по 50 пчел из каждой из двух колоний медоносных пчел с пятью рамками (исследовательские колонии Университета Вермонта) и протестировали каждый составной образец на DWV и BQCV с помощью RT-qPCR. Таким образом, мы знали, что эти колонии инфицированы обоими вирусами.Мы получили семь семей шмелей от коммерческого поставщика (BioBest). Чтобы убедиться, что эти пчелы не были инфицированы DWV и BQCV, мы искоренили пыльцу 10 пчел из каждой колонии в течение 72 часов и протестировали каждую пчелу с помощью RT-qPCR. Пчелы нуждались в пыльце, чтобы избавить кишечник от пыльцы, которая могла содержать вирусные частицы. Все колонии шмелей дали отрицательный результат на DWV и BQCV. Из семи семей мы создали микроколонии из 12 взрослых пчел, снабдили их 30% раствором сахарозы ad libitum и дали им возможность акклиматизироваться в течение пяти дней в камере для выращивания, поддерживаемой при 26 ° C и 52–55% относительной влажности.Мы создавали новые микроколонии каждые три дня, чтобы гарантировать, что все микроколонии, использованные в эксперименте, были примерно одного возраста.

Мы провели все эксперименты в трех экземплярах размером 3 x 3 x 3 м. экранированные палатки с брезентовым дном. Каждой палатке назначалось одно лечение: палатка для медоносных пчел, контрольная палатка для шмелей или открытая палатка для пчел (рис. 1E). Мы использовали одну дополнительную палатку в качестве места для хранения растений, чтобы нежелательные насекомые не посещали растения во время эксперимента. Чтобы ограничить шмелей небольшой зоной кормодобывания, мы установили по три домика с кольцами в каждом из двух участков контроля шмелей и открытых палатках.Дома-кольца (1 x 1 x 0,7 м) были построены из белой ткани, натянутой и прикрепленной скобами к двум кускам дугообразных труб из ПВХ, которые были привинчены к деревянной раме.

Опытный образец

В каждый день эксперимента мы переносили растения из теплицы в палатку для растений и поливали их. Мы посчитали все соцветия, чтобы обеспечить стандартный диапазон для повторений и обработок, и назначили их соответствующим образом. Для акклиматизации медоносных пчел в вольере две колонии (состоящие из пяти рамок каждая) помещали в палатку для медоносных пчел за 24 часа до эксперимента. Чтобы заразить цветущие растения, мы поместили растения в экранированном вольере с двумя колониями медоносных пчел и позволили пчелам посещать цветы. После опытов по сбору пищи мы переместили растения в палатку для хранения, чтобы пополнить запас нектара. Через 15 часов мы перенесли растения, посещаемые медоносными пчелами, в открытую палатку для шмелей и равномерно распределили их по трем домикам с обручем, каждый из которых содержал одну микроколонию шмелей, всего в трех повторах на эксперимент. В то же время мы провели три повторных контроля для каждого эксперимента в трех домиках с обручами в контрольной палатке для шмелей.Шмели в контрольной палатке получали чистые цветущие растения, привезенные прямо из теплицы. Все испытания проводились в тени, чтобы уменьшить воздействие ультрафиолета на цветы и деградацию вирусной РНК. В каждый день испытаний на поиск пищи медоносным пчелам и шмелям позволяли кормиться на цветочных массивах в течение девяти и шести часов соответственно. В эксперименте с комсом, где медоносным пчелам и шмелям разрешалось кормиться вместе в одной палатке, пчелам разрешалось кормиться в течение семи часов. Это время кормодобывания было выбрано, чтобы максимально увеличить время кормодобывания в течение одного дня, чтобы увеличить вероятность обнаружения эффекта.

Для измерения посещений мы наблюдали за сборщиками шмелей до тех пор, пока не было посещено 50% цветков для каждой повторности. Чтобы внимательно изучить, как посещение медоносными пчелами может повлиять на отложение вируса на цветках, мы снимали каждое испытание в течение трех часов. Мы просмотрели видео и записали общее количество посещений медоносными пчелами каждого вида растений и вычислили продолжительность посещения каждой медоносной пчелой (в секундах) каждого соцветия во время съемок съемок посещений.

Для каждого испытания мы позволили микроколониям по 12 пчел в каждой кормиться цветами, которые были или не подвергались воздействию медоносных пчел. Через шесть часов мы собрали все соцветия и шмелей. Соцветия хранили при -80 ° C. Мы поместили микроколонии шмелей в новые контейнеры и скармливали 30% сахарозы ad libitum в течение одной недели в камере для выращивания. Если шмели подвергались воздействию инфекционного вируса во время эксперимента, недельный «инкубационный» период позволял начать вирусную инфекцию.Мы не кормили пчел пыльцой в этот период, чтобы очистить их кишечник от пыльцы, которая может содержать неактивные вирусные частицы, что привело к ложноположительным результатам во время вирусных анализов. Через неделю мы собрали всех пчел и хранили их при -80 ° C до выделения РНК и анализа вирусов.

Чтобы проверить, влияет ли вид растений на депонирование вируса и / или передачу вируса между видами пчел, мы провели описанные выше испытания кормодобывания с тремя повторностями для каждого вида растений: T . repens , T . pratense и L . corniculatus (эксперимент «одного вида») (рис. 1A). Мы стандартизировали количество соцветий, используемых в каждой повторности: 15–20 T . repens соцветий, 13–15 T . Pratense , соцветия 31–40 L . corniculatus соцветий. Потому что L . corniculatus соцветий содержат менее половины цветков, чем T . pratense и T . repens , соцветий мы использовали примерно вдвое больше.

Чтобы проверить, влияет ли разнообразие растений на депонирование и / или передачу вируса, мы разрешили пчелам кормиться на цветочных массивах, содержащих все три вида растений сразу (эксперимент «разнообразие») (рис. 1B). Каждый массив разнообразия был воспроизведен трижды, и каждый состоял из 7-8 T . repens соцветий, 6 T . Pratense соцветий и 15–21 соцветий L . corniculatus соцветий. Как для отдельных видов растений, так и для испытаний разнообразия, мы собрали отдельные образцы каждого вида растений после каждой репликации, всего по три образца цветов на вид на испытание для каждой из экспонированных и контрольных групп.

Чтобы проверить, необходимо ли хроническое воздействие зараженных цветов для передачи вируса, мы повторили эксперимент, используя T . repens (эксперимент с «хроническим воздействием») всего в трех повторах (рис. 1C).Шесть микроколоний шмелей были отнесены к группе подвергнутого лечению или контрольной группе, и им было разрешено кормиться на подвергнутых или необработанных T . repens растений три дня подряд (шесть часов каждый день). Как и в других экспериментах, мы позволяли растениям пополнять нектар между сборами медоносных пчел и шмелей. Новый T . repens растений использовались каждый день. После трех событий воздействия мы собрали всех шмелей, перенесли их в новые контейнеры, добавили 30% сахарозы ad libitum и «инкубировали» их в течение одной недели, как в предыдущих экспериментах, а затем перенесли их при -80 ° C.Мы также собирали цветы каждый день эксперимента с хроническим воздействием и хранили их при -80 ° C. Поскольку новые растения использовались каждый день, мы собрали в общей сложности девять образцов открытых цветов и девять контрольных образцов цветов.

Чтобы проверить, необходимо ли прямое воздействие или смешивание цветков для передачи вирусов между видами пчел, мы использовали колонии шмелей, состоящие из 75–100 рабочих и T . repens массивов, состоящих из 41–47 соцветий (эксперимент «смешивание») (рис. 1D).Мы разместили две семьи медоносных пчел, одну семью шмелей и горшки T . repens растений в палатку. Для контроля мы поместили одиночную колонию шмелей с растениями в отдельную палатку. Мы позволили всем пчелам кормиться на растениях в общей сложности в течение семи часов, в течение которых мы наблюдали, пока медоносные пчелы и шмели не посетили более 50% цветов, присутствующих в каждой копии. Через семь часов мы вернули всех кормящихся шмелей обратно в их колонию и переместили их обратно в камеру для выращивания.Это повторяли трижды в течение трех дней с использованием одних и тех же семей медоносных пчел, но разных семей шмелей. Мы скармливали колониям шмелей пыльцу и 30% сахарозу ad libitum в течение трех недель в камерах для выращивания, чтобы стимулировать распространение вирусов по всей колонии. Через три недели мы создали микроколонии из 12 пчел, лишенные пыльцы. После недельного голодания по пыльце мы собрали этих пчел и хранили при -80 ° C. Два образца цветов были собраны из каждой повторности, всего шесть открытых образцов цветов и шесть контрольных образцов цветов.

Извлечение РНК

Мы экстрагировали общую РНК в соответствии с протоколами мини-набора Qiagen RNeasy. Весь брюшко каждой отдельной шмели вскрывали и быстро замораживали на N ₂ и гомогенизировали в 600 мкл буфера RLT (10% -меркаптоэтанол), после чего для каждой отдельной шмели использовали протоколы Qiagen. Для предварительного отбора медоносных пчел образцы 50 пчел были объединены, мгновенно заморожены в N ₂ и гомогенизированы вместе в мешке для экстракции с 10 мл буфера GITC.Полученный гомогенат центрифугировали и 100 мкл лизата смешивали с буфером RLT (10% -меркаптоэтанол), после чего использовали протоколы Qiagen. Как для предварительно отобранных, так и для экспериментальных растений 1,5 г цветочного материала, состоящего из целых соцветий, переносили в мешок для экстракции (Bioreba, Швейцария) и мгновенно замораживали в N ₂ . Растительный материал измельчали ​​до порошка с помощью керамического пестика снаружи экстракционного мешка в течение 30 секунд. В мешок добавляли три мл буфера GITC, и снова использовали пестик снаружи мешка для смешивания гомогената с буфером в течение 2 минут.Полученный гомогенат центрифугировали и 200 мкл использовали для экстракции РНК в соответствии с протоколами мини-набора Qiagen RNeasy. Количество и качество всей РНК оценивали на спектрометре (Nanodrop, Thermo Scientific).

Обнаружение и количественная оценка вирусов

Для шмелей и медоносных пчел все экстракты РНК разводили до 20 нг / мкл перед вирусными анализами. РНК, выделенную из растений, не разбавляли перед дальнейшими анализами. Для обратной транскрипции РНК и абсолютного количественного определения для каждого образца проводили количественную полимеразную цепную реакцию с двойной обратной транскрипцией (RT-qPCR) с помощью одностадийного набора для RT-qPCR SYBR green в 10 мкл реакции с использованием следующей программы термоциклирования: 10 мин 50 ° C (RT), затем 1 мин при 95 ° C и 40 циклов амплификации при 95 ° C в течение 15 секунд, 60 ° C в течение 60 секунд. Наконец, кривую плавления получали, начиная с 65-95 ° C (с шагом 0,5 ° C, каждые 2 с). Мы использовали праймеры, специфичные для положительной цепи следующих мишеней РНК вируса: DWV и BQCV, а также гена домашнего хозяйства (ACTIN) в качестве положительного контроля эффективности экстракции РНК (таблица S1). Количественную оценку рассчитывали с использованием повторяющихся стандартных кривых фрагментов гена gBlocks, которые были разработаны с использованием двухцепочечных геномных блоков с подтвержденной последовательностью, состоящих из четырех представляющих интерес мишеней, разделенных десятью случайными парами оснований (дополнительная информация S1).Последовательности случайных пар оснований, состоящие не менее чем из 50% G и Cs, использовали в начале и на конце фрагмента. Эффективность составила 91,06% (DWV), 95,21% (BQCV) и 90,12% (актин) с коэффициентами корреляции (R ² ) в диапазоне 0,993–0,999.

Секвенирование

Чтобы подтвердить идентичность вирусов, мы секвенировали фрагменты вирусов шмелей, медоносных пчел и цветов. Продукт qPCR был очищен (ExoSAP-IT PCR Product Cleanup), и секвенирование было выполнено с использованием генетического анализатора 3130xl в центре Advanced Genome Technologies Core Университета Вермонта.Данные последовательности просматривали для оценки качества (FinchTV 1.4) и сравнивали на глаз со ссылками на геном с помощью Geneious v 6.0.6 (BQCV: GenBank: KY243932.1; DWV: GenBank: KJ437447.1).

Отчетность и анализ данных

Мы называем распространенность вируса на цветках как процент образцов цветов с вирусом в каждом экспериментальном испытании. Вирусные нагрузки представлены в виде количества копий генома на образец цветка или пчелы. Частота посещений рассчитывалась как общее количество посещений медоносной пчелы в час для каждого вида растений.Продолжительность посещения измерялась как количество времени, в течение которого пчелы-фуражиры наблюдались за посещением соцветий (в секундах). Поскольку растения в испытаниях хронического воздействия экспериментально обрабатывались так же, как растения в испытаниях одного вида, мы объединили эти данные вместе в анализах, изучающих отложение вирусов на растениях. Данные испытаний на приправе не были включены в анализ отложения вируса на растениях, поскольку эти испытания проводились только для изучения передачи через прямой контакт между видами пчел и имели разные экспериментальные условия, которые могли искажать результаты (количество соцветий, время кормления)

Чтобы изучить влияние видов растений, видов вирусов и их взаимодействия на распространенность вируса (здесь анализируется как наличие / отсутствие) на цветках, используемых в испытаниях отдельных видов, мы использовали обобщенную линейную модель смешанных эффектов (GLMM) с образцом цветов в качестве образца. случайный эффект.Чтобы изучить распространенность РНК-вирусов на цветках, модель была построена таким образом, что каждый образец цветка был включен дважды, по одному разу для каждого вируса. Чтобы изучить влияние взаимодействия разнообразия растений и видов растений на распространенность вирусов, мы провели отдельную GLMM-модель, тестируя взаимодействие разнообразия (один вид против смеси трех видов) и видов растений с образцами цветов в качестве случайного эффекта. Поскольку частота посещений и продолжительность посещения могут аддитивно влиять на осаждение вируса на цветках, мы провели третью GLMM, включая частоту посещений и продолжительность посещения как фиксированные эффекты, и включили образец цветов как случайный эффект.Все модели GLMM по распространенности вирусов были проведены с биномиальным распределением (ссылка = «logit»). Вирусные нагрузки зараженных цветов были log ₁₀ трансформированы для достижения нормального состояния перед анализом. Для вирусной нагрузки мы провели линейные смешанные модели (LMM) с идентичными структурами, условиями и случайными эффектами, что и GLMM. Взаимодействие разнообразия (один вид против сочетания трех видов) и видов растений не было включено в модель вирусной нагрузки, поскольку модель не имела ранга и не могла вычислить член взаимодействия [38].Поскольку в ходе испытаний шмели не были инфицированы, мы не смогли проверить влияние экспериментов по одному виду, разнообразию, хроническим или смешанным видам на распространенность или вирусную нагрузку у шмелей.

Все модели со смешанными эффектами были проведены с использованием пакета LME4 с использованием функции glmer () для определения распространенности вируса и функции lmer () для определения вирусной нагрузки [39]. Значимость для всех моделей была определена путем сравнения полной и сокращенной моделей с тестами отношения правдоподобия. Мы исследовали парные сравнения, используя контрасты Тьюки в пакете MULTCOMP, используя функции glht () и mcp () [40].Чтобы избежать ошибок, связанных с апостериорным тестированием взаимодействующих переменных, попарные сравнения проводились только по значимым основным эффектам с тремя или более уровнями факторов в моделях с незначительными эффектами взаимодействия. Все анализы мы проводили с использованием статистической программы «R» v 3.5.1 [41].

Результаты

В начале эксперимента все виды растений были отрицательными на DWV и BQCV. Нагрузки РНК-вируса в двух колониях медоносных пчел составляли 10 ⁴ и 10 ⁹ копий генома на пчелу для DWV и 10 ⁸ и 10 ⁶ копий генома на пчелу для BQCV. Все шмели были отрицательными на оба вируса в начале эксперимента (n = 70). Шмели не заразились ни в одном из экспериментов (отдельные виды растений, разнообразие, хроническое воздействие, смешивание) ни в контрольной группе (n = 192), ни в группе воздействия (n = 220).

Все цветы, которые посещали только шмели (контрольные группы), были отрицательными для обоих вирусов. Из цветов, которые посещали медоносные пчелы и шмели, мы обнаружили DWV и BQCV у 24,2% и 21,2%. Когда инфицированным медоносным пчелам предлагали один вид растений, мы обнаружили вирусы на всех трех видах (таблица 1).Однако мы обнаружили значительный эффект взаимодействия видов растений и видов вирусов (χ ₂ ² = 11,15, p = 0,004), так что DWV и BQCV не были равномерно распределены между видами растений (Таблица 2). Основные эффекты видов растений и вирусов не были значительными. В испытаниях разнообразия, где все три вида растений были предложены вместе, мы обнаружили вирусы только на T . pratense (таблица 1). Анализируя наборы данных из экспериментов с одним растением и разнообразием, мы обнаружили значительное взаимодействие видов растений и эксперимента (χ ₂ ² = 17.91, р <0,001; Таблица 2). Цветы, которые чаще всего посещали пчелы-сборщики меда, с большей вероятностью были заражены вирусами (χ ₂ ² = 4,076, p = 0,044, таблица 2). Однако мы увидели противоположную тенденцию с посещаемостью. Цветы, которые получили наименьшее количество посещений, с меньшей вероятностью были заражены вирусами (χ ₂ ² = 5,452, p = 0,020, Таблица 2).

Таблица 1. Сводная таблица, показывающая распространенность вируса деформированного крыла (DWV) и вируса маточников (BQCV) на трех видах растений во всех испытаниях кормодобывания, в которых кормились как медоносные пчелы, так и шмели.

Все растения, выращиваемые только шмелями, были отрицательными на вирусы и поэтому исключены из этой таблицы. Распространенность вируса указывается как количество образцов цветов с обнаруженным вирусом, деленное на общее количество образцов цветов, протестированных для каждого испытания (n), умноженное на 100. В столбце «Итого» представлена ​​распространенность вируса для каждого вида растений во всех экспериментах.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0221800.t001

Таблица 2. Сводная статистика для всех статистических моделей.

Для каждой модели переменная отклика и переменные-предикторы выделены с соответствующей сводкой статистики. Вирус пред. представляет собой распространенность вируса и выражается в виде числа образцов растений с обнаруженным вирусом, деленного на общее количество образцов растений в наборе данных, умноженное на 100. Вирусная нагрузка представлена ​​в виде копий генома вируса на образец цветка. Растение spp. относится к видам растений, использованных в экспериментах: Lotus corniculatus (трилистник Birdsfoot), Trifolium pratense (клевер красный) или Trifolium repens (клевер белый). Виды вируса — это вирус деформированного крыла (DWV) или вирус черной маточника (BQCV). Разнообразие — это либо «один вид», либо «смесь трех видов». В эксперименте «один вид» пчелы добывали пищу на массивах, состоящих только из одного вида за раз. В эксперименте «смесь видов» пчелы питались массивами, состоящими из всех трех видов растений одновременно. Посещаемость (скорость посещения) рассчитывалась как количество посещений пчелами цветов в час. Продолжительность (продолжительность посещения) рассчитывалась как количество времени, в течение которого каждый собиратель медоносной пчелы посещал соцветие (в секундах).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0221800.t002

Нагрузки вируса на цветы варьировались от 10 ³ −10 ⁵ копий генома (рис. 2). В исследованиях одновидового разнообразия вирусные нагрузки различались для разных видов растений (χ ₁ ² = 18,03, p <0,001, таблица 2) и были самыми низкими на T . repens по сравнению с T . pratense (p = 0,02) и L . corniculatus (p = 0.005), но не различались по видам вируса (χ ₂ ² = 2,367, p = 0,124). Взаимодействие видов растений и видов вирусов не влияло на вирусную нагрузку. Нагрузки вируса были разными в зависимости от разнообразия (отдельные виды растений по сравнению с сочетанием трех видов), при этом самые высокие вирусные нагрузки наблюдались на растениях в сочетании трех видов испытаний (χ ₁ ² = 9,968, p = 0,002). Цветы, которые посещали медоносные пчелы реже, имели самую высокую вирусную нагрузку (χ ₂ ² = 5.174, р = 0,023). Продолжительность посещения не повлияла на вирусную нагрузку, оставленную на цветках пчелами-собирателями (χ ₂ ² = 2,223, p = 0,136).

Рис. 2. Вирусная нагрузка для вирус-положительных образцов цветов по видам растений во всех испытаниях.

Ящички с цветовой кодировкой по видам растений. Усы представляют собой максимум и минимум, края прямоугольника — это 1-й и 3-й квартили, а средняя линия представляет собой медианное значение. Вирус деформированного крыла (DWV), вирус черной маточной клетки (BQCV). Виды растений: Lotus corniculatus (трилистник птичьей лапки), Trifolium pratense (красный клевер) или Trifolium repens (белый клевер).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0221800.g002

Обсуждение

Несмотря на то, что цветы были задействованы как мосты в распространении болезней пчел [5], роль цветов в передаче РНК-вирусов среди видов опылителей остается в значительной степени неизученной. Используя серию экспериментов по поиску пищи с содержащимися в неволе семьями медоносных пчел и массивами цветковых растений, мы экспериментально продемонстрировали, что медоносные пчелы откладывают вирусы на цветках. Мы также обнаружили доказательства того, что виды цветущих растений и / или поведение пчел могут влиять на вероятность заражения вирусом. Наше исследование является одним из первых, в котором внимательно изучается роль цветов в передаче вируса пчелами, и первым демонстрирует отложение вируса на цветках медоносными пчелами.

Вирус деформированного крыла и BQCV депонировались по-разному в трех видах растений, что указывает на то, что способы депонирования различаются для разных видов вирусов и что депонирование может быть опосредовано цветочными признаками. В нашем исследовании отложение вируса на L . corniculatus был уникален тем, что BQCV был обнаружен во всех образцах, но не был обнаружен DWV.Напротив, DWV и BQCV были обнаружены на обоих видах Trifolium в ходе исследования. По сравнению с видом Trifolium , соцветия L . corniculatus наименее похожи морфологически и состоят всего из восьми цветков (по сравнению с 20–40 у видов Trifolium ). Чтобы посетить нектарники Trifolium , опылители получают доступ к нектарникам, исследуя несколько трубчатых цветков, ползая по поверхности головки соцветия. Для L . corniculatus , нектарники можно получить через контакт только с передней частью пчелы. Если вирус откладывается с фекалиями, морфология цветков, которая способствует «парению», может снизить вероятность вирусного отложения [5]. Аналогичным образом, для вирусов, депонированных через выделения из полости рта, сложные соцветия с многочисленными соцветиями для исследования могут увеличить вероятность вирусного депонирования. В других системах патогенов пчел такие характеристики растений, как морфология цветков [10,11] или количество открытых цветов [29], считаются важными факторами, влияющими на передачу.Чтобы понять специфические особенности цветков, которые опосредуют отложение вируса, будущие исследования должны проводить количественные измерения цветочных атрибутов и управлять такими характеристиками, как количество цветков и глубина венчика. Singh et al. (2010) отметили, что виды вирусов, обнаруженные у медоносных пчел, и их соответствующие количества пыльцы значительно различаются; предполагая различия в вирусной экологии и / или различия в контакте опылителей с зараженной пыльцой [9]. Изучение различий в том, как разные РНК-вирусы выделяются при посещении опылителей, также поможет объяснить эффект взаимодействия.

Мы обнаружили, что цветы, которые дольше посещали медоносные пчелы, с большей вероятностью были переносчиками вирусов. Однако цветы с более высокой посещаемостью были менее подвержены вирусам, а также имели более низкую вирусную нагрузку. Эти результаты подчеркивают сложность этой системы исследования и необходимость понять, как вирусы передаются от пчел на цветы во время походов за кормом.

Мы наблюдали взаимодействие цветочного разнообразия и видов растений, которое не объясняется только разницей в продолжительности посещения.Когда пчелы кормились на цветочных массивах одного вида, вирусы откладывались на всех трех видах. Однако когда пчелам были предложены разнообразные наборы, состоящие из всех трех видов растений, мы обнаружили вирусы только на T . pratense , несмотря на отсутствие разницы в продолжительности посещения для T . pratense между испытаниями разнообразия (один вид против смеси трех видов) (S1, рис.). Наши результаты можно было бы объяснить, если бы в колониях медоносных пчел находились как инфицированные, так и неинфицированные особи, которые кормились по-разному в зависимости от статуса инфекции.Собирательство пчел, инфицированных паразитами, отличается от неинфицированных пчел, что позволяет предположить, что пчелы извлекают пользу из лекарственных свойств вторичных метаболитов растений [42–46]. По сравнению с T . repens , T . pratense содержит значительно более высокие концентрации изофлавоноидов [47], группы фенольных соединений, которые обладают противовирусными свойствами против широкого спектра вирусов [48]. Однако в начале эксперимента мы не смогли отличить инфицированных пчел от неинфицированных.В будущей работе следует изучить возможные различия в поведении людей, инфицированных РНК-вирусами, при поиске пищи.

В наших экспериментальных условиях у шмелей не развивалась инфекция после прямого контакта с медоносными пчелами через сближение или непрямого контакта через общие цветы. Эти результаты показывают, что передача вирусов между видами пчел через цветы является редким явлением, и экспериментальное обнаружение зависит от множества факторов. Например, такие факторы, как иммунокомпетентность, вирулентность вируса, вирусная нагрузка и вероятность контакта шмеля с вирусной частицей на цветке, могут способствовать обнаружению.Хотя передача через цветы может иметь низкую вероятность, высокая распространенность зараженных цветов и высокая посещаемость цветов пчелами в дикой природе могут быть отличительными чертами процесса, который часто происходит в природе, но его трудно зафиксировать в экспериментальных условиях. Мы также отмечаем, что мы не проверяли, были ли штаммы вируса наших медоносных пчел заразными для шмелей. Таким образом, хотя мы не продемонстрировали передачу вируса шмелям в нашем эксперименте, мы остаемся осторожными, чтобы исключить возможность в других экспериментальных условиях и с большим размером выборки.

Наши результаты открывают несколько многообещающих направлений для будущих исследований. Нам удалось продемонстрировать отложение вируса на цветках медоносными пчелами в экспериментальных условиях. Чтобы проверить, актуальны ли наши результаты для природы, в будущих исследованиях следует проверить цветы, собранные в полевых условиях, возле пасек медоносных пчел. Поскольку другие виды пчел также могут откладывать вирусы на цветочных ресурсах, выбор участков полей с различной плотностью медоносных пчел и измерение посещаемости цветков может пролить свет на важность медоносных пчел по сравнению с другими пчелами для отложения вирусов на цветках.Чтобы лучше понять направленность передачи, в будущих экспериментах следует проверить, будут ли инфицированные шмели и / или другие виды пчел также переносить вирусы на цветы [49]. Кроме того, в будущих экспериментах следует сосредоточить внимание на второй половине пути передачи и изучить, могут ли шмели и / или другие виды пчел приобретать вирусные частицы или инфицироваться после посещения инокулированных цветов. Наши результаты показывают, что виды цветковых растений могут различаться по своей склонности к переносу вирусов. Таким образом, тщательное изучение механизмов отложения вируса в сочетании с цветочными признаками может помочь объяснить наблюдаемые нами различия. Наконец, необходимы дополнительные поведенческие исследования, чтобы изучить, как вирусная инфекция может повлиять на пищевое поведение.

Дополнительная информация

S1 Рис. Продолжительность посещения медоносной пчелой и частота посещения по видам растений и экспериментам.

Коробчатые диаграммы показывают среднюю продолжительность посещений медоносными пчелами трех видов растений: Lotus corniculatus (птичий трилистник), Trifolium pratense (красный клевер) и T . repens (клевер белый). Цвета прямоугольных диаграмм представляют данные эксперимента по «разнообразию», где все виды растений были представлены одновременно, и «отдельные виды», где каждый вид растений был предоставлен индивидуально. Буквы над прямоугольными диаграммами показывают результаты попарных сравнений данных о продолжительности посещения. Красные линии показывают частоту посещений (количество посещений медоносной пчелы / час) каждого вида растений для каждого эксперимента. Данные о продолжительности посещения были преобразованы в журнал ₁₀ для достижения нормального состояния перед анализом.Мы изучили влияние видов растений на продолжительность посещения с помощью ANOVA, используя данные экспериментов с одним видом. Мы исследовали попарные сравнения с использованием контрастов Тьюки (R-библиотека multcomp, функции glht и mcp). В отдельном ANOVA с использованием данных испытаний отдельных видов и разнообразия мы исследовали влияние взаимодействия видов растений и эксперимента (отдельные виды в сравнении с разнообразием) на продолжительность посещения.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0221800.s003

(TIF)

Благодарности

Мы хотели бы поблагодарить Джозефа Шалла и Элизабет Уэлен за их помощь в лаборатории; Умберто Бонкристиани за советы по экспериментальному дизайну; Саре Хелмс Кахан, Тейлору Рикеттсу и Джозефу Шаллу за редакционные комментарии к рукописи. Финансирование было предоставлено за счет гранта для аспирантов, полученного от Северо-восточного исследовательского и образовательного центра по устойчивому сельскому хозяйству (SARE) (GNE15-094), стипендии для аспирантов Национального научного фонда (DGE-1451866) и стипендии Switzer Foundation по охране окружающей среды.

Список литературы

1. 1. Гоулсон Д., Николлс Е., Ботиас С., Ротери Э. Снижение численности пчел вызвано сочетанным стрессом от паразитов, пестицидов и отсутствия цветов. Sciencexpress. 2015; 2010: 1–16.
2. 2.Поттс С.Г., Бисмейер Дж.С., Кремен С., Нойман П., Швайгер О., Кунин В.Е. Уменьшение количества глобальных опылителей: тенденции, воздействия и движущие факторы. Trends Ecol Evol. 2010. 25: 345–353. pmid: 20188434
3. 3. Уильямс PH, Осборн JL. Уязвимость шмелей и их сохранение во всем мире. Apidologie. 2009. 40: 367–387.
4. 4. Эванс Дж. Д., Шварц Р. С.. Пчелы поставлены на колени: микробы, влияющие на здоровье медоносных пчел. Trends Microbiol. Elsevier Ltd; 2011; 19: 614–620. pmid: 22032828
5. 5.Макарт Ш., Кох Х., Ирвин Р. Э., Адлер Л.С. Составление букета болезней: цветочные признаки и передача патогенов растений и животных. Ecol Lett. 2014; 17: 624–636. pmid: 24528408
6. 6. Левитт А.Л., Сингх Р., Кокс-Фостер Д.Л., Раджотт Э., Гувер К., Остиги Н. и др. Межвидовая передача вирусов медоносных пчел ассоциированными членистоногими. Virus Res. 2013; 176: 232–240. pmid: 23845302
7. 7. Ravoet J, Smet L De, Meeus I, Smagghe G, Wenseleers T, Graaf DC De.Широкое распространение патогенов медоносных пчел среди одиночных пчел. J Invertebr Pathol. 2014; 122: 55–58. pmid: 25196470
8. 8. Ли Дж., Пэн В., Ву Дж., Стрэндж Дж. П., Бонкристиани Х., Чен Ю. Межвидовая инфекция вирусом деформированного крыла представляет новую угрозу для сохранения опылителей. J Econ Entomol. 2011; 104: 732–739. pmid: 21735887
9. 9. Сингх Р., Левитт А.Л., Раджотт Э. Г., Холмс Е.К., Остиги Н., Ваненгелсдорп Д. и др. РНК-вирусы у перепончатокрылых опылителей: данные о передаче вируса между таксонами через пыльцу и потенциальное воздействие на виды перепончатокрылых, не относящиеся к Apis.PLoS One. 2010; 5: e14357. pmid: 21203504
10. 10. Грейсток П., Гоулсон Д., Хьюз ВОН. Цветущие паразиты: цветы способствуют распространению и передаче паразитов-опылителей внутри и между видами пчел. Proc R Soc B Biol Sci. 2015; 282. Доступно: http://dx.doi.org/10.1098/rspb.2015.1371
11. 11. Дуррер С., Шмид-Хемпель П. Совместное использование цветов ведет к горизонтальной передаче патогенов. Proc R Soc B Biol Sci. 1994; 258: 299–302.
12. 12. Алджер С.А., Бернем П.А., Бонкристиани Х.Ф., Броди А.К.Распространение РНК-вируса от управляемых медоносных пчел (Apis mellifera) на диких шмелей (Bombus spp.). PLoS One. 2019; 14: e0217822. pmid: 31242222
13. 13. Purkiss T, Lach L. Распространение возбудителя от Apis mellifera на пчелу без жала. Proc R Soc B Biol Sci. 2019; 286.
14. 14. Мелатопулос А., Овинге Л., Вольф П., Кастильо С., Остерманн Д., Гувер С. Вирусы управляемых пчел-листорезов люцерны (Megachille rotundata Fabricus) и медоносных пчел (Apis mellifera L.) в Западной Канаде: распространенность, воздействие и перспективы скрещивания -видовая вирусная передача.J Invertebr Pathol. Эльзевир; 2017; 146: 24–30. pmid: 28400199
15. 15. Ян Х, Кокс-Фостер DL. Влияние эктопаразита на иммунитет и патологию беспозвоночных: доказательства иммуносупрессии хозяина и амплификации вируса. Proc Natl Acad Sci U S. A. 2005; 102: 7470–7475. pmid: 15897457
16. 16. Di Prisco G, Cavaliere V, Annoscia D, Varricchio P, Caprio E, Nazzi F. Неоникотиноидный клотианидин отрицательно влияет на иммунитет насекомых и способствует репликации вирусного патогена у медоносных пчел.Proc Natl Acad Sci. 2013; 110: 18466–18471. pmid: 24145453
17. 17. Чен Й., Петтис Дж. С., Коллинз А. , Фельдлауфер М. Ф. Распространенность и передача вирусов пчел. Appl Environ Microbiol. 2006. 72: 606–611. pmid: 16391097
18. 18. Боуэн-Уокер П., Мартин С., Ганн А. Передача вируса деформации крыла между пчелами (Apis mellifera L.) эктопаразитическим клещом varroa jacobsoni Oud. J Invertebr Pathol. 1999. 73: 101–106. pmid: 9878295
19. 19. Genersch E, Yue C, Fries I, De Miranda JR.Обнаружение вируса деформации крыльев, вирусного патогена медоносных пчел, у шмелей (Bombus terrestris и Bombus pascuorum) с деформациями крыльев. J Invertebr Pathol. 2006. 91: 61–63. pmid: 16300785
20. 20. Leat N, Ball B, Govan V, Davison S. Анализ полной последовательности генома вируса черной маточной клетки, пикорноподобного вируса медоносных пчел. J Gen Virol. 2000. 81: 2111–2119. pmid: 10
    1
21. 21. Otterstatter MC, Thomson JD. Угрожает ли распространение патогенов от коммерческих шмелей диким опылителям? PLoS One.2008; 3. pmid: 18648661
22. 22. Colla SR, Otterstatter MC, Gegear RJ, Thomson JD. Бедственное положение шмелей: распространение патогенов из коммерческих популяций в дикие. Биол Консерв. 2006. 129: 461–467.
23. 23. Фюрст М. А., МакМахон Д. П., Осборн Дж. Л., Пакстон Р. Дж., Браун М. Дж. Ф. Связь болезней между пчелами и шмелями как угроза диким опылителям. Природа. 2014; 506: 364–6. pmid: 24553241
24. 24. Грейсток П., Гоулсон Д., Хьюз ВОН. Взаимосвязь между управляемыми пчелами и распространенностью паразитов у шмелей.Пер Дж. 2014; 1–24. pmid: 25165632
25. 25. МакМахон Д.П., Фюрст М.А., Каспар Дж., Теодору П., Браун М.Дж., Пакстон Р.Дж. Укус в косе: широко распространенное перекрестное заражение множественными РНК-вирусами диких и управляемых пчел. J Anim Ecol. 2015; 84: 615–624. pmid: 25646973
26. 26. Wilfert L, Long G, Leggett HG, Schmid-Hempel P, Butlin R, Martin SJM и др. Вирус деформации крыльев — недавняя глобальная эпидемия среди медоносных пчел, вызванная клещами Варроа. Наука (80-). 2016; 351: 594–597.pmid: 26912700
27. 27. Маццей М., Карроцца М.Л., Луизи Э., Форзан М., Джусти М., Сагона С. и др. Инфекционность DWV, связанного с цветочной пыльцой: экспериментальные доказательства горизонтального пути передачи. PLoS One. 2014; 9: e113448. pmid: 25419704
28. 28. Чен Ю.П., Хиггинс Дж. А., Фельдлауфер М. Ф. Количественный анализ обратной транскрипции-ПЦР в реальном времени вирусной инфекции деформированного крыла у медоносной пчелы (Apis mellifera L.). Appl Env Microbiol. 2005. 71: 436–441.
29. 29.Адлер Л.С., Мишо К.М., Элльнер С.П., Макарт С.Х., Стивенсон П.С., Ирвин Р.Э. Болезнь, в которой вы обедаете: виды растений и цветочные особенности, связанные с передачей патогенов через шмелей. Экология. 2018; 99: 2535–2545. pmid: 30155907
30. 30. Генрих Б. «Мажорирование» и «миноринг» по добыче шмелей, Bombus vagans: экспериментальный анализ. Экология. 1979; 60: 246–255.
31. 31. Портлас З. М., Тетли-младший, Пришманн-Фольдсет Д., Халк Б.С., Прасифка-младший. Различия в размере цветков объясняют различия в посещении дикими пчелами культурных подсолнечников.Plant Genet Resour Characterization Util. 2018; 16: 498–503.
32. 32. Браман С.К., Квик Дж.С. Дифференциальное привлечение пчел среди сортов крепового мирта (Lagerstroemia spp .: Myrtales: Lythraceae). Environ Entomol. 2018; 47: 1203–1208. pmid: 30085015
33. 33. Эрнандес И.Г., Палоттини Ф., Макри I, Галмарини ЧР, Фарина В.М. Аппетивное поведение медоносной пчелы Apis mellifera в ответ на фенольные соединения, естественным образом содержащиеся в нектарах. J Exp Biol. 2019; 222. pmid: 30559301
34. 34.Аренас А, Кольмайер MG. Рентабельность источника нектара влияет на индивидуальные предпочтения кормления пыльцой и активность пчелиных семей по сбору пыльцы. Behav Ecol Sociobiol. Поведенческая экология и социобиология; 2019; 73.
35. 35. Газоул Дж. Цветочное разнообразие и облегчение опыления. J Ecol. 2006; 94: 295–304.
36. 36. Hegland SJ, Boeke L. Взаимосвязь между плотностью и разнообразием цветочных ресурсов и активностью цветочных посетителей в сообществе пастбищ умеренного пояса.Ecol Entomol. 2006; 31: 532–538.
37. 37. Мэнли Р., Бутс М., Уилферт Л. Риск возникновения новых вирусных заболеваний для насекомых-опылителей: экологические, эволюционные и антропогенные факторы. J Appl Ecol. 2015; pmid: 25954053
38. 38. Грэм, Джеймс М. Эффекты взаимодействия: их природа и некоторые стратегии постфактум. Ежегодное собрание Юго-западной ассоциации образовательных исследований. 2000.
39. 39. Бейтс Д., Махлер М., Болкер Б., Уокер С. Подбор линейных моделей со смешанными эффектами с использованием lme4.J Stat Softw. 2015; 67: 1–48.
40. 40. Hothorn T, Bretz F, Westfall P, Heiberger RM, Schuetzenmeister A, Scheibe S. одновременный вывод в общих параметрических моделях. Биометрический журнал, 2008; 50: 346–363. Доступно: https://cran.r-project.org/web/packages/multcomp/citation.html
41. 41. R Core Team. R: язык и среда для статистических вычислений. Вена: Фонд R для статистических вычислений; 2016.
42. 42. Ричардсон LL, Бауэрс MD, Ирвин RE.Химический состав нектара определяет поведение паразитированных пчел: последствия для приспособленности растений. Экология. 2016; 97: 325–337. pmid: 27145608
43. 43. Мэнсон Дж. С., Оттерштаттер М. С., Томсон Дж. Д.. Потребление алкалоида нектара снижает количество патогенов у шмелей. Oecologia. 2010. 162: 81–89. pmid: 19711104
44. 44. Симоне-Финстром, доктор медицины, Спивак М. Увеличение сбора смолы после заражения паразитами: случай самолечения у медоносных пчел? PLoS One. 2012; 7: 17–21. pmid: 22479650
45. 45.Ричардсон Л.Л., Адлер Л.С., Леонард А.С., Андикоечеа Дж., Реган К.Х., Энтони В.Е. и др. Вторичные метаболиты в цветочном нектаре уменьшают заражение шмелей паразитами. Proc R Soc London B Biol Sci. 2015; 282: 20142471. pmid: 25694627
46. 46. Анносиа Д., Занни В., Гэлбрейт Д., Квиричи А., Грозингер С., Бортоломеацци Р. и др. Выяснение механизмов, лежащих в основе благотворного воздействия пищевой пыльцы на медоносных пчел (Apis mellifera), зараженных эктопаразитами клеща Варроа.Научный сотрудник Springer США; 2017; 7: 1–13.
47. 47. Чанг К.Ф., Сузуки А., Кумай С., Тамура С. Химические исследования «болезни клевера»: Часть II. Биологические функции изофлавоноидов и родственных им соединений. Agric Biol Chem. 1969; 33: 398–408.
48. 48. Андрес А., Донован С.М., Кухленшмидт М.С. Изофлавоны сои и вирусные инфекции. J Nutr Biochem. Elsevier Inc .; 2009. 20: 563–569. pmid: 19596314
49. 49. Graystock P, Blane EJ, Mcfrederick QS, Goulson D, Hughes WOH.Паразиты и дикая природа Разве управляемые пчелы способствуют распространению и появлению паразитов у диких пчел? Int J Parasitol Parasites Wildl. Elsevier Ltd; 2016; 5: 64–75. pmid: 28560161

Гоапеле много молока и меда

Автор: Ронда Рача Пенрис

?
После двух лет отсутствия в Атланте певица из Окленда Гоапеле дважды за одно лето оказывалась в Атланте. Во-первых, она стала со-хедлайнером ONE MusicFest с Common и De La Soul, а теперь хедлайнером собственного шоу 4 сентября.С выходом нового альбома « Milk & Honey » на горизонте нет никаких сомнений в том, что Гоапеле, который раньше часто приходил в «А», вернется еще много раз.

?
Поскольку хорошая музыка продолжает возвращаться, Гоапеле, которая произвела достаточно шума своим самостоятельно выпущенным альбомом Closer в 2001 году, что год спустя он был переработан в Even Closer , чтобы охватить еще больше, уехала из турне сцена на минуту, в основном, чтобы обнять материнство. Хотя ее дебют на мейджор-лейбле Change It All, , выпущенный Columbia в 2005 году, не оправдал ожиданий отрасли, он не остановил стремление Goapele. Прямо сейчас она делает невероятные ходы, которые определенно увеличивают количество ее поклонников и узнаваемость имени. На праздновании чемпионата мира по футболу в Южной Африке, родине ее отца, она создала «Victory» с ведущим южноафриканским рэпером Hip Hop Pantsula. На своем последнем альбоме она даже встречается с необычными продюсерами, такими как Drumma Boy из Атланты, чтобы, в соответствии со значением ее имени «двигаться вперед», сохранять прогрессивность и удовлетворение своего искусства.

?
Теперь, вернувшись к своим независимым корням, красивая певица с прекрасным голосом, как никогда, творческая и выразительная.С матерью-еврейкой и отцом из Южной Африки, которые привили ей традицию правозащитной деятельности, Гоапеле не может не создавать провокационную музыку. Без сомнения, эта родословная сделала ее одной из немногих женщин-художников, которые на сто процентов вовлечены в свою карьеру и свое видение. CL встретился с ней, чтобы обсудить ее ремесло, музыкальную индустрию и почему технологии полезны для артистов.

?
Вы определенно художник, который выходит на рынок так же, как раньше, путем общения с людьми.Я предполагаю, что вы делаете это сознательно. Вы можете это обсудить?
Думаю, это действительно важно. Запись музыки — это процесс, который мне нравится как автор песен, но я определенно действительно могу увидеть, что творчество реализовано, когда я вижу людей, наслаждающихся музыкой. Живые выступления — способ добиться этого.

?
Как это влияет на вас, когда вы идете работать над новым материалом? Это не так сильно влияет на мой процесс записи. Я думаю, что после того, как я сочиняю песню, я пытаюсь представить, как публика ее почувствует, или как я могу ее исполнить, или каков наилучший сеттинг.Я просто думаю, что часть музыки, которую я делаю, более интимна, а часть музыки, которую я делаю, немного громче, поэтому я, вероятно, просто подстраиваю свои наборы под то, что делаю. Я даю какое-то шоу со всей своей живой группой, а иногда и с живой группой.

?
Довольны ли вы тем, как прошла ваша карьера? Цените ли вы на данном этапе своей карьеры независимость ?
Я ценю контроль. Я ценю творческую свободу, и всегда имела. И я скажу, что даже когда я был на специальности, у меня было то, что довольно необычно.Я хочу, чтобы альбом Change It All получил больше поддержки, чем он, но я чувствую, что сейчас нахожусь в хорошем месте, где я действительно чувствую, что я свободен принимать любые решения, которые я хочу, в любой временной шкале, которую я хотеть. Я действительно чувствую, что музыкальная индустрия сейчас действительно меняется. Что касается радио, то возможностей меньше. Но что касается Интернета, то здесь гораздо больше, поэтому существует больше прямой обратной связи и связи с фанатами. Я ценю это, потому что чувствую, что это дает таким артистам, как я, возможность по-настоящему увидеть, что люди чувствуют.

?
Вы предвидели мой вопрос. Я собирался спросить, любите ли вы технологии, тем более что в прошлом технологии были связаны с гибелью музыкальной индустрии.
Я думаю, что музыкальная индустрия и пострадала от этого, но не думаю, что артисты пострадали от этого. Для меня это был инструмент; это был способ оставаться на связи с поклонниками, что бы ни происходило. Мы только что перезапустили Goapele.com, и там всегда есть новая информация о шоу, новая музыка, разные мысли и идеи, которые у меня есть, и разные вещи, которые происходят.Я это оценил. И даже в Твиттере я контактировал с разными продюсерами и артистами, с которыми я мог бы столкнуться намного позже, поэтому я чувствую, что мир становится меньше и ближе.

Внутри вызывающего разногласия эксперимента с криптовалютой во всем Белом городе

По этой причине блокчейн — банальный, технический, глубоко несексуальный — стал идеологической точкой сплочения, особенно среди тех, кто стремится ниспровергнуть господствующий порядок. От Каталонии до Венесуэлы несогласные группы время от времени задавались вопросом, могут ли они, исчерпав свои возможности политического разъединения, согласиться на цифровой.

Рудт, однако, представляет себе нечто более расплывчатое. По его словам, с помощью правильной технологической платформы единомышленники могут быть связаны вместе, независимо от национальной принадлежности. Индивидуальные права останутся неприкосновенными; если одна сеть вам больше не нравилась, вы могли просто отказаться от нее и заменить ее на новую. Ваше экономическое сообщество может не иметь ничего общего с физической географией. Торговля продолжится, при этом обеспеченные государством валюты будут заменены криптовалютными альтернативами, свободно плавающими на открытом рынке.

Отшлифовав шашлык из баранины, Рудт приглашает меня в свою гостиную — пещерное пространство, в котором преобладают картины светотени, на которых изображены кукольные дети в пасторальных сценах. На одной стене находится аквариум с цихлидами из озера Танганьика. (По его словам, ему нравятся цихлиды, потому что они быстро развиваются, чтобы заполнить каждую конкурентную нишу.)

Рудт хочет, чтобы я увидел 100-триллионную купюру из Зимбабве, выпущенную в 2009 году, во время пика кризиса гиперинфляции в этой стране. Частично финансовый крах Зимбабве вызвал захват государством принадлежащих белым ферм, что делает его важным критерием для некоторых белых южноафриканцев, которые составляют менее десятой части населения, но контролируют почти три четверти частных сельскохозяйственных угодий.По словам Рудта, если южноафриканский ранд пойдет в том же направлении, что и доллар Зимбабве, защищенная от несанкционированного доступа информация о владении и торговле блокчейном может обеспечить защиту от такого «хищнического государства».

Идея Рудта не так безумна, как может показаться — по крайней мере, если интерес Южной Африки к криптовалюте хоть как-то измеряется. Когда я впервые встретился с ним в конце 2017 года, его страна была в эпицентре криптовалюты. Южноафриканцы гуглили «Биткойн» больше, чем кто-либо другой в мире. По пути к поместью Рудта я прошел мимо рекламных щитов в стиле Вегаса, рекламирующих биткойн-лотерею, и ведущие радиопередач рассказывали слушателям, что их дети хотят криптовалюты на Рождество.

Другими словами, Южная Африка может быть уникально подготовлена ​​к революции Рудта, основанной на блокчейне. И здесь, поясняет он, люди ищут не просто богатства, а альтернативы. Самая неравноправная страна в мире, Южная Африка уже является домом для забаррикадированных островов богатства, ничем не отличающихся от его собственного состояния, отмечает Рудт; государственная экономическая система, которая соединяет эти острова, неизбежна. «Боюсь, что остальная часть Южной Африки будет не очень хорошо», — говорит он.

(Вскоре после браай он появится как хедлайнер рок-звезды на конференции под названием Blockchain for Beginners, где он провозгласил под громовые аплодисменты почти полностью белой аудитории: «Я не думаю, что бюрократы и политики понимают, что их ждет дерьмовая буря.”)

Рудт и несколько других африканеров уже обосновались на месте для проверки концепции. Это был город под названием Орания, расположенный на краю Великого Кару, обширного участка неухоженной квазипустыни, доминирующего во внутренних районах Южной Африки. Орания была основана в 1991 году группой африканерских правых, в том числе вдовой премьер-министра Хендрика Фервурда, архитектора апартеида. Поселенцы приобрели заброшенный городок рабочих плотины на излучине Оранжевой реки, надеясь заложить семена независимого африканерского государства, или Volkstaat.

Орания управляется как частная компания, и городской совет жестко контролирует, кто может туда въехать. Каждый потенциальный житель тщательно проверяется — не по расе, утверждает совет, а по признанной преданности африканерской культуре. В любом случае, конечный результат один и тот же: все около 1500 жителей города белые.

Город Орания был основан в 1991 году как рай для африканерской культуры.

«Создается впечатление, что это пугающее, консервативное, жесткое место», — признает Рудт и говорит, что были обвинения в том, что он «ложился спать с кучей расистов».Но он утверждает, что его интерес к Орании носит чисто академический характер: маленький городок — это самое близкое, что экономист может найти к чашке Петри, большой экономике в миниатюре, где можно изучать влияние цифровых денег. Во-первых, у него уже есть собственная бумажная купюра, ora, которую выпускает местный общественный банк. (Каждая ора поддерживается одним рандом.) Что может быть лучше для бета-тестирования будущего цифрового феодализма?

Элисон Мойет рассказывает о своем добровольном изгнании из музыки: «Многое можно сказать, чтобы сказать НЕТ»

Ее задушевный голос сделал ее звездой в одночасье, но давление славы стало слишком большим.Здесь Элисон Мойет говорит о приверженности, отцовстве и агорафобии — и о том, что отдых от музыкальной сцены для спасения рассудка является причиной ее успеха 25 лет на

Soul Queen: Alison Moyet

Элисон Мойет на час отстает от графика для нашего интервью, но когда она подходит, чтобы извиниться, она того стоит. Боже, она хорошо выглядит.

В свои 48 лет медовая блондинка, которая когда-то была оперного размера, теперь выглядит настолько изящно, что она довольно мило задается вопросом, не виновата ли она в том, что слишком много «тлела» во время нашей фотосессии.

«Мои поклонники были бы оскорблены, если бы я позировал провокационным образом — где в этом феминистская позиция? Я не хочу предавать себя », — смеется артистка, ранее известная (во времена панк-стрижки) как Альф.

Трудно поверить, что прошла четверть века с тех пор, как Женевьев Элисон Джейн Мойет стала сольной. Когда-то продавец днем ​​и певец в различных паб-рок- и блюзовых группах по ночам, этот бросивший колледж стал случайной поп-звездой в возрасте 21 года после создания электронного поп-дуэта Yazoo с Винсом Кларком и неожиданно массового успеха. с ее тоскливой интерпретацией его баллады «Only You».

Хотя мгновенный успех испугал ее, он привел к сольной карьере королевы соул с захватывающим голосом контральто, который с возрастом стал более глубоким и созревшим. Элисон сама стала автором песен, добившись таких успехов в десятке лучших, как «All Cried Out», «Love Resurrection» и «Is This Love?», Продано 25 миллионов пластинок по всему миру, выиграла множество британских наград и подтвердила свое место в созвездии поп-музыки. выступление в Live Aid в 1985 году.

Как и все великие певцы соул, она держит свое сердце на рукаве, и она продолжает жить блюзом, который поет, борясь с разорванными отношениями (у нее трое детей от трех разных мужчин) , материнство-одиночка в дороге со своим старшим ребенком, когда он был еще совсем маленьким, и ссора с ее лейблом, из-за которой она не могла записывать какие-либо студийные альбомы в течение восьми лет (после этого она сменила компанию).

Приступы маниакальной депрессии привели к параноидальной агорафобии, превратившей Элисон в полузатворницу, которая избегала вечеринок в шоу-бизнесе и пряталась в шкафах всякий раз, когда посторонний постучал в парадную дверь — до тех пор, пока любовь хорошего человека (мы вернемся к этому позже) помог ей преодолеть свои страхи.

С Винсом Кларком в Yazoo в 80-х; выступление в июле 2008 года

Она триумфально вернулась на публику в 2001 году в роли тюремной надзирателя Мамы Мортон в мюзикле Уэст-Энда в Чикаго, а затем в 2002 году выпустила альбом Hometime с конвертом, который демонстрировал ее квадратную челюсть, глазастую, Красавица в стиле Софи Даль. И она получила одни из лучших отзывов за свою карьеру на свой последний студийный альбом The Turn 2007 года, который подтвердил, что она выжившая и успешно справляется с трудностями.

Неплохо для девушки из муниципального имения Эссекса, которая называет себя «агрессивной французской крестьяниной», младшего ребенка французского печатника из рабочего класса и его жены-англичанки, которые выросли, слушая коллекцию галльских шансонов своего отца. в Базилдоне, из всех мест. Неудивительно, что она не знала, как вписаться.Она единственная из своей семьи, кто стал профессиональным музыкантом: ее брат Клиффорд управляет специализированным бизнесом по импорту пива в Саутенде, а ее сестра Жанна занимается сельскохозяйственным маркетингом.

«Я никогда не сжигал себя и не повредил голос, как это делали многие люди. Мой невроз спас меня »

Было время, когда Элисон потребовалось несколько глотков бренди, чтобы успокоить нервы перед выходом на сцену. Она говорит: «Я готовлю немного меньше коньяка, чем я, потому что теперь я чувствую ожидание, а не абсолютный страх. Я чувствую себя вполне комфортно на сцене, потому что это одно из немногих мест за пределами моего дома, где я знаю, чего от меня ждут ».

Ее фанаты варьируются от 16-летних до 70-летних и от натуралов до геев; она, кажется, обращается ко всем, кто ценит великое, великолепное излияние эмоций, поданное этим жестким, но уязвимым голосом. А сейчас, когда нас ждет возрождение 80-х, кажется, подходящее время для выпуска ретроспективы лучших хитов и турне по Великобритании этой осенью.

Что касается ее удивительного нового внешнего вида, меня заранее предупредили, что она сильно похудела.Она не хочет вдаваться в подробности, потому что ее вес когда-то был навязчивой идеей СМИ среди полицейских, придерживающихся фашистской диеты, но Элисон выглядит настолько расслабленной, что она явно довольна своим нынешним размером.

«Я чувствую себя вполне комфортно на сцене, потому что это одно из немногих мест, где я знаю, чего от меня ждут», — говорит Элисон.

Хотя она и не говорит, мне кажется, что она очень спортивная и здоровая 12 или 14 человек.
Хотя у нее было уменьшение груди (с чашки G до D) еще в 1989 году, она говорит, что вряд ли поддастся дальнейшей косметической операции.Вместо этого она надеется на «невидимость возраста». С возрастом женщины становятся более интересными, потому что они могут рассматривать все в контексте и проявлять большее сострадание ».

Она говорит, что решение сбросить килограммы было не из тщеславия, а из-за подготовки к старости. «Я много-много раз теряла и прибавляла в весе», — признается она. «Но что меня беспокоит, так это идея быть тучной старухой, потому что мне не нравится идея оказаться физически недееспособной в чужих руках.

В свое время я выкурил и съел слишком много мусора, но катализатором, побудившим меня что-то предпринять, было нежелание потерять трудоспособность. Это восходит к моей потребности в уединении ».

У Элисон не было наставника, который помогал бы ей справиться с давлением внезапной славы, за что победители шоу в стиле X Factor теперь получают профессиональную поддержку. Ей приходилось учиться на себе и по пути совершать ошибки. Как и многие люди, прошедшие терапию, она все еще кажется зависимой от нее со склонностью чрезмерно анализировать себя и иногда говорить метафорами.Тем не менее, она также имеет большой смысл, поскольку теперь она достигла баланса между работой и личной жизнью, который ускользал от нее в течение многих лет.

«Я чувствовал себя квадратным колышком в круглой дыре в музыкальной индустрии»

Когда я впервые брал у нее интервью два года назад, она сказала, что стать матерью стало поворотным моментом, который «помешал мне быть центром внимания». моего мира ». За ее сыном Джо, которому сейчас 24 года (от ее короткого первого брака с парикмахером Малкольмом Ли), последовали 21-летние дочери Алекс (после недолгих отношений с тур-менеджером Ким Маккарти, которые закончились до рождения Алекса) и Кейтлин, 13 лет. со своим вторым мужем Дэвидом Баллардом.

«Когда я впервые забеременела, мою звукозаписывающую компанию раздражало: много ругательств продолжалось», — признается она. «Мне было 23 года, и я все еще считаю, что это слишком рано, чтобы иметь детей — Джо выиграл бы больше, если бы у него была мать постарше. Но вы имеете дело с картами, которые вам дают, — добавляет она, философски пожимая плечами.

После рождения Джо в 1985 году она поймала себя на том, что таскает его с мешком игрушек из одного гостиничного номера в другой, но по-прежнему мало его видит. «Я понял, что это верх эгоизма, поэтому перестал гастролировать.Это не детская среда; это не соответствует их потребностям, поэтому я удивляюсь, когда люди говорят, что берут с собой детей повсюду.

«Но с тех пор, как у меня были прочные отношения с Дэвидом, я смог работать гораздо больше. Раньше, как мать-одиночка, у меня была одна няня, которая работала по будням десять лет. Когда она ушла, я не заменил ее, потому что не хотел, чтобы у меня были помощницы по хозяйству и няни ».

Она познакомилась с Дэвидом, 46-летним помощником учителя и бывшим социальным работником для взрослых с особыми потребностями. 20 лет назад в доме своей старшей подруги, одном из немногих мест, где она чувствовала себя в безопасности во время агорафобии.(«Я никогда не общался в индустрии — единственными людьми, которых я видел, были мои школьные друзья или первые друзья по группе, от которых я еще не прославился».)

Еще одним давним доверенным лицом, которое давало ей чувство безопасности, была комедийная актриса Доун Френч. кого Элисон знает с 21 года (и с которым она выступала в пьесе Уэст-Энда «Меньший» в 2006 году). Как она объясняет, «Рассвет — это тот, кто способен наладить дружбу и приложить усилия до такой степени, чтобы мы действительно стали связаны.

«Я всегда была странной девочкой: мне удавалось оттолкнуть множество людей, и мне было трудно найти работу.Так что я почувствовал себя квадратным колышком в круглой дыре в музыкальной индустрии и вызвал у себя множество неврозов. И люди позволили мне еще больше погрузиться в жалость к себе, потакая мне. «Встреча с Дэвидом изменила мою жизнь, потому что он меня совсем не балует, а это значит, что мы живем исключительно нормальной жизнью», — говорит Элисон, которая сейчас живет в полусельской провинции Хартфордшир, и даже держит кур.

Именно Дэвид, наконец, вылечил ее агорафобию, вытащив ее на футбольные матчи (они болеют за Саутенд Юнайтед).«Я нашла их такими радостными — мне просто понравилось сообщество быть лицом в толпе», — сияет она.

«Дэвид — великий и стабильный парень в моей жизни. Это не значит, что у вас прекрасные безупречные отношения, потому что бывают моменты, когда вы хотите выколоть друг другу глаза большой палкой, — добавляет она, смеясь. «Он настоящий фанатик фитнеса и пару лет назад взял меня гулять по холму на нашу десятую годовщину свадьбы, что было головной болью. Но приверженность — это выбор, который вы делаете, а не то, что ниспадает, как манна с небес.И он взял на себя это обязательство ».

Когда у них родилась дочь Кейтлин, Дэвид вызвался взять на себя уход за детьми. «Как следствие, его отношения с нашей дочерью просто фантастические», — говорит Элисон. «Дэвид уверен в своей мужественности; в нем нет ни одного элемента, который выхолостил бы домашнее хозяйство. А Алекс был всего год, когда мы собрались вместе, так что Дэвид тоже во многом ее отец. ‘

‘ Я много-много раз терял и прибавлял в весе ‘

Сделано хорошо: Алекс и Джо, которым было всего четыре года, когда его мать встретила Дэвида, оба поступили в Кембриджский университет, а Джо, склонный к науке, этой осенью получает степень магистра в области естественных вычислений.Между тем, 13-летняя Кейтлин демонстрирует необычайную память на тексты песен, что предполагает, что она может последовать за своей матерью в музыкальный бизнес.

Оглядываясь назад на свои личные проблемы, Элисон считает, что в конце концов все пошло к лучшему. «Агорафобия заставила меня держаться подальше от индустрии, поэтому я никогда не выгорел и не повредил голос, как это делали многие люди, когда они действительно его тростью. Я никогда не задерживался. Чтобы сказать «нет», нужно много чего сказать. Я отказывался делать что-то из-за своего невроза, но это в некотором смысле спасло меня.Теперь я больше в мире с собой. У меня еще есть мучительные времена, но их мало и они редки. Меня больше ничего не пугает, кроме того, что что-то плохо для моих детей ».

Элисон и Винс Кларк снова ненадолго встретились во время реюнион-тура Yazoo в прошлом году, и она также планирует больше электронной поп-работы с другими сотрудниками. как очень грязный блюзовый альбом. Это были мои корни, и я был бы не против еще раз услышать этот тестостероновый голос. Как и Бет Дитто, я могу добавить немного мужского голоса в свой голос — мне это нравится в женщине, — усмехается она.

«Честно говоря, я наслаждалась затишьями в карьере так же, как я наслаждалась взлетами», — добавляет она. «Вы восстанавливаете связь со своей семьей и друзьями, вы живете нормальной жизнью; это обосновывает вас. Слава и лесть преходящи — петь нужно только в том случае, если вы отчаянно хотите петь, потому что это должно вас двигать ».

The Best of Alison Moyet выйдет 19 октября Sony Music. Элисон начинает свой тур по Великобритании 11 ноября; места и билеты можно найти на сайте ticketmaster.